L'imaging ad ultrasuoni e l'analisi funzionale sono tecniche molto potenti per determinare la crescita e la stabilità degli aneurismi aortici addominali, oltre i metodi tradizionali di dimensioni e diametro aortici. Questa tecnica non invasiva misura la velocità dell'onda d'impulso, la capacità di distanza e in lontananza dell'aorta per monitorare sottili cambiamenti nelle funzioni aortiche insieme al diametro aortico. La rigidità aortica è un indicatore della progressione dell'aneurisma aortico addominale e la stabilità può essere utile per valutare gli effetti degli agenti terapeutici di interesse negli studi preclinici.
Inoltre, le misurazioni della velocità e dello sforzo possono anche essere correlate ai cambiamenti vascolari che si verificano durante lo sviluppo di varie malattie cardiovascolari, come ipertensione, diabete, obesità e aterosclerosi. A dimostrare la procedura sarà il Dr.Sun, un assistente di ricerca professore della struttura Imaging Core. Per preparare il mouse per la procedura di imaging, dopo aver confermato una mancanza di risposta al riflesso del pedale, applicare la soluzione optalmica agli occhi del mouse anestetizzato e posizionare il mouse nella posizione supina sulla piattaforma di imaging animale inclinata di 10 gradi in basso a destra.
Applicare il gel dell'elettrodo su tutte e quattro le zampe e rastrelere le zampe sui cavi dell'elettrocardiogramma di rame sulla piattaforma di imaging. Utilizzare le tosaerba per radere i capelli nel sito di imaging e applicare la crema depilatoria sulla pelle esposta. Dopo meno di un minuto, utilizzare un tovagliolo di carta umido per rimuovere la crema e i capelli e applicare 37 gradi Celsius gel ad ultrasuoni sul sito preparato.
Quindi utilizzare l'estremità in legno di un batuffolo di cotone per levigare il gel e rimuovere eventuali bolle. Per l'imaging aorta addominale, attaccare il trasduttore al suo supporto e posizionare il trasduttore perpendicolare alla linea mediana del mouse. Abbassare il trasduttore fino a tocchi il gel e posizionare la punta da 0,5 a un centimetro sotto il diaframma.
Quando il trasduttore è in posizione, visualizzare l'aorta addominale nella vista a corto asse. Quindi, ruotare delicatamente il trasduttore di 90 gradi in senso orario e regolare lentamente la manopola del micro manipolatore dell'asse X per visualizzare l'aorta nella vista ad asse lungo. Usate la zona di messa a fuoco e gli interruttori di profondità dello stato attivo per impostare la zona di messa a fuoco e la profondità nella regione dell'aorta.
Regolare manualmente il cursore di compensazione del guadagno di tempo per scurire il lume dell'aorta per ottenere un contrasto ottimale della parete di aorta. Regolate il manipolatore dell'asse Y per visualizzare i punti di ramificazione delle arterie mesenteriche superiori e renali destro. L'arteria renale destra può essere utilizzata come punto di riferimento per catturare un'immagine dell'aorta super renale.
Dopo aver registrato almeno 100 fotogrammi di immagini in modalità B sull'aorta super renale, salvare le immagini e selezionare la modalità finale. Rotolare la sfera del cursore per portare la linea dell'indicatore giallo in una normale sezione di aorta con un'immagine chiara della parete del vaso o nelle sezioni in cui si osserva il diametro massimo dell'aneurisma. Fare clic sull'interruttore del cancello SV e regolare la sfera del cursore per assicurarsi che le pareti del contenitore siano incluse nella staffa di misura.
Quindi premere aggiorna per registrare le misurazioni in modalità M e inviarle in archivio per acquisire le misurazioni. Per ottenere immagini EKV premere il tasto B-mode per tornare alla registrazione in modalità B e premere il tasto Impostazioni Physio per consentire la selezione della respirazione. Regolare manualmente il ritardo di gating e la finestra per registrare i dati solo durante le parti più piatte dell'onda di respirazione.
Le sezioni di registrazione verranno mostrate come blocchi colorati sul tracciamento dell'onda di respirazione. Premere il tasto EKV per attivare la modalità EKV. Nel menu appropriato impostare il tipo di acquisizione su Risoluzione standard, la frequenza fotogrammi su 3.000 o superiore e fare clic su Digitalizza per registrare le immagini EKV.
Quindi premere invia per memorizzare per salvare le immagini e utilizzare l'immagine in modalità EKV per ottenere misurazioni del PPV, della distensibilità e della deformazione radiale. Per misurare il lieve, aprire il programma ad ultrasuoni e inserire il nome dello studio e le informazioni descrittive per ogni mouse. Aprire i dati ad ultrasuoni e l'immagine in modalità M e mettere in pausa il battito cardiaco.
Fate clic su misure (Measurements) e selezionate pacchetto vascolare (Vascolar Package and Depth) dalle opzioni a discesa. Quindi disegna una linea attraverso il lume aortico che si estende da parete interna a parete. Per l'analisi PPV aprite l'immagine EKV e mettete in pausa il battito cardiaco.
Fare clic sull'icona per aprire una nuova finestra sul software di analisi e selezionare l'opzione PPV. Una piccola finestra apparirà con l'immagine dell'aorta. Fare clic sulla parete superiore del recipiente e trascinare il puntatore per coprire entrambe le pareti dell'aorta super renale con una casella di circa quattro millimetri, quindi fare clic su Accetta per salvare i valori PPV.
Per l'analisi di distensibilità nell'immagine EKV aperta, fare clic sull'icona del software e selezionare Traccia nuova regione di interesse per disegnare una scatola rettangolare su entrambe le pareti della nave. Il software traccerà automaticamente le pareti superiore e inferiore della nave. Fare clic sui punti verdi per regolare l'allineamento della traccia, se necessario, e fare clic su Accetta.
Il software calcolerà la distensibilità all'interno della regione di interesse selezionata. Per ottenere la misurazione della deformazione radiale, selezionate l'opzione di deformazione appropriata dal menu e fate clic su Deformazione (Strain). Si apriranno le immagini per deformazione radiale e deformazione tangenziale.
Quindi spostare il cursore sul picco della curva per ottenere il valore per la deformazione radiale. Per una riproducibilità ottimale e il rilevamento di determinate fasi le immagini devono essere analizzate dalla stessa persona nella stessa posizione anatomica per garantire coerenza all'interno dei dati. Qui vengono mostrate immagini rappresentative in modalità M di aorta addominali del mouse normale e aneurismatico.
L'aorta addominale super renale può essere identificata dalla sua posizione vicino al ramo destro dell'arteria renale e all'arteria mesenterica superiore. Come illustrato in queste immagini, mild può essere calcolato usando tre diversi battiti cardiaci del ciclo cardiaco sistolico sia nell'aorta normale che in quello aneurismatico. Nel caso di un aneurisma aortico, il diametro luminare può essere determinato disegnando una linea gialla perpendicolare tra i due bordi interni del lume nell'area di massima dilatazione.
In questa analisi rappresentativa, l'imaging ecografico trans-addominale ha rivelato un progressivo aumento del PPV e del lieve e una diminuzione della distensibilità e del ceppo radiale in risposta all'angiotensina II al giorno 28. L'infusione di angiotensina II è aumentata marginalmente lieve dal giorno 28 al 56, mentre il trattamento con un inibitore della tacca non ha influenzato in modo significativo lieve rispetto alla sola angiostatina II. È importante notare che il PPV era fortemente correlato con lieve al giorno 28, mentre al giorno 56, la correlazione era relativamente debole.
Istologicamente, l'infusione di angiotensina II ha aumentato la degradazione del collagene e l'attività proteolitica nello strato mediale dell'aorta. Il trattamento inibitore della tacca, tuttavia, ha minimizzato questi cambiamenti nella degradazione extra della matrice cellulare. Impostare davvero l'animale e la sonda e identificare l'aorta addominale sono i passaggi più critici.
Principianti consiglio di utilizzare la manopola del micromanipolatore per effettuare regolazioni sottili. Usando questo metodo possiamo anche misurare il flusso di blocco nell'aorta o nell'arteria renale, valutare la funzione cardiaca e monitorare la malattia vascolare periferica. Dopo aver raggiunto determinate dimensioni, gli aneurismi aortici addominali non crescono eccessivamente.
In queste circostanze, alcune modifiche della struttura sono rapidamente rilevate da queste tecniche in risposta ad agenti farmacologici o ad altre manipolazioni. Durante la somministrazione dell'anestesia assicurarsi di utilizzare il carbone e il solvente per l'isofluoro e l'usura dei gas di scarico. Assicurati anche che non ci siano perdite dal buco del naso.
