A imagem de ultrassom e a análise funcional são técnicas muito poderosas para determinar o crescimento e estabilidade dos aneurismas abdominais, além dos métodos tradicionais de tamanho aórtico e diâmetro. Esta técnica não invasiva mede a velocidade da onda de pulso, a capacidade de distância e a distância da aorta para monitorar mudanças sutis nas funções aórticas, juntamente com o diâmetro aórtico. A rigidez aórtica é um indicador da progressão do aneurisma de aoriedade abdominal e a estabilidade pode ser útil na avaliação dos efeitos dos agentes terapêuticos de interesse em ensaios pré-clínicos.
Além disso, as medidas de velocidade e tensão também podem estar correlacionadas com as alterações vasculares que ocorrem durante o desenvolvimento de diversas doenças cardiovasculares, como hipertensão arterial, diabetes, obesidade e aterosclerose. Demonstrando o procedimento estará o Dr.Sun, um professor assistente de pesquisa da instalação do Núcleo de Imagens. Para preparar o mouse para o procedimento de imagem, após confirmar a falta de resposta ao reflexo do pedal, aplique solução opthalmic aos olhos do camundongo anestesiado e coloque o mouse na posição supina na plataforma de imagem animal inclinada 10 graus para o lado inferior direito.
Aplique gel de eletrodo nas quatro patas e tape as patas nos condutores de eletrocardiograma de cobre na plataforma de imagem. Use cortadores para raspar o cabelo no local da imagem e aplique creme depilatório na pele exposta. Depois de menos de um minuto, use uma toalha de papel úmida para remover o creme e o cabelo, e aplique 37 graus Celsius de gel ultrassônico no local preparado.
Em seguida, use a extremidade de madeira de um cotonete para suavizar o gel e remover quaisquer bolhas. Para a imagem da aorta abdominal, conecte o transdutor ao seu suporte e coloque o transdutor perpendicular à linha média do camundongo. Abaixe o transdutor até tocar o gel e posicione a ponta 0,5 a um centímetro abaixo do diafragma.
Quando o transdutor estiver no lugar, visualize a aorta abdominal na visão de eixo curto. Em seguida, gire suavemente o transdutor 90 graus no sentido horário e ajuste lentamente o botão micro manipulador do eixo X para visualizar a aorta na visão de eixo longo. Use a zona de foco e os alternadores de profundidade de foco para definir a zona de foco e profundidade na região da aorta.
Ajuste manualmente o controle deslizante de compensação de ganho de tempo para escurecer o lúmen da aorta para obter um contraste ideal da parede de aorta. Ajuste o manipulador do eixo Y para visualizar os pontos de ramificação das artérias mesentéricas superiores e as artérias renais direitas. A artéria renal direita pode ser usada como um marco para capturar uma imagem da aorta super renal.
Depois de gravar pelo menos 100 quadros de imagens no modo B na aorta super renal, salve as imagens e selecione o modo final. Role a bola do cursor para levar a linha indicadora amarela para uma seção de aorta normal com uma imagem clara da parede do vaso ou para as seções onde o diâmetro máximo do aneurisma é observado. Clique no alternador do portão SV e ajuste a bola do cursor para garantir que as paredes do vaso estejam incluídas no suporte de medição.
Em seguida, pressione a atualização para gravar as medições do modo M e envie para armazenar para capturar as medidas. Para obter imagens EKV pressione o botão do modo B para voltar à gravação do modo B e pressione o botão Configurações de Physio para permitir a seleção de gating de respiração. Ajuste manualmente o atraso e a janela de gating para registrar os dados somente durante as partes mais lisonjeiras da onda de respiração.
As seções de gravação serão mostradas como blocos coloridos no rastreamento da onda de respiração. Pressione o botão EKV para ativar o modo EKV. No menu apropriado, defina a resolução Tipo de Aquisição para Padrão, a Taxa de Quadros para 3.000 ou mais e clique em Digitalizar para gravar as imagens EKV.
Em seguida, pressione enviar para armazenar para salvar as imagens e use a imagem do modo EKV para obter medições do PPV, distensibilidade e tensão radial. Para medir o leve, abra o programa de ultrassom e digite o nome do estudo e informações descritivas para cada mouse. Abra os dados do ultrassom e a imagem do modo M e pause o batimento cardíaco.
Clique em medições e selecione o Pacote Vascular e a Profundidade a partir das opções de drop-down. Em seguida, desenhe uma linha através do lúmen aórtico estendendo-se da parede interna para a parede. Para análise de PPV abra a imagem EKV e pause o batimento cardíaco.
Clique no ícone para abrir uma nova janela no software de análise e selecione a opção PPV. Uma pequena janela aparecerá com a imagem da aorta. Clique na parede superior do vaso e arraste o ponteiro para cobrir ambas as paredes da aorta super renal com uma caixa de aproximadamente quatro milímetros e clique em Aceitar para salvar os valores do PPV.
Para análise de distensibilidade na imagem EKV aberta, clique no ícone de software e selecione Trace New Region of Interest para desenhar uma caixa retangular em ambas as paredes do navio. O software rastreará automaticamente as paredes superiores e inferiores da nave. Clique nos pontos verdes para ajustar o alinhamento do rastreamento, se necessário, e clique em Aceitar.
O software calculará a distensibilidade dentro da região de interesse selecionada. Para obter a medição da tensão radial selecione a opção de tensão apropriada no menu e clique em Coestar. As imagens para tensão radial e tensão tangencial se abrirão.
Em seguida, mova o cursor para o pico da curva para obter o valor para a tensão radial. Para a reprodutibilidade ideal e detecção de determinados estágios, as imagens devem ser analisadas pela mesma pessoa no mesmo local anatômico para garantir a consistência dentro dos dados. Aqui, imagens representativas do modo M de aortas abdominais de camundongos normais e aneurismas são mostradas.
A aorta abdominal super renal pode ser identificada por sua localização ao lado do ramo direito da artéria renal e da artéria mesentérica superior. Como ilustrado nestas imagens, o leve pode ser calculado usando três batimentos cardíacos diferentes do ciclo cardíaco sistólico em aortas normais e aneurismals. No caso de um aneurisma de aorta, o diâmetro luminal pode ser determinado desenhando uma linha amarela perpendicular entre as duas bordas internas do lúmen na área de dilatação máxima.
Nesta análise representativa, a ultrassonografia transdominais revelou um aumento progressivo da leve e do VPP e diminuição da distensibilidade e da tensão radial em resposta à angiotensina II no dia 28. A infusão de angiotensina II aumentou marginalmente a partir do dia 28 para 56, enquanto o tratamento com um inibidor de entalhe não afetou significativamente levemente em comparação com a angiostatina II. É importante notar que o VPP correlacionou-se fortemente com leve no dia 28, enquanto no dia 56, a correlação foi relativamente fraca.
Histologicamente, a infusão de angiotensina II aumentou a degradação do colágeno e a atividade proteolítica na camada de mídia da aorta. O tratamento inibidor do entalhe, no entanto, minimizou essas alterações na degradação da matriz celular extra. Realmente configurar o animal e a sonda e identificar a aorta abdominal são os passos mais críticos.
Iniciantes eu aconselho a usar o botão micromanipulador para fazer ajustes finos. Usando este método também podemos medir o fluxo de blocos na aorta ou na artéria renal, avaliar a função cardíaca e monitorar doenças vasculares periféricas. Depois de atingir determinado tamanho, os aneurismas abdominais não crescem excessivamente.
Nestas circunstâncias, certas mudanças de estrutura são rapidamente detectadas por essas técnicas em resposta a agentes farmacológicos ou outras manipulações. Durante a administração da anestesia, certifique-se de usar o carvão e solvente para isofluorent, e o desgaste do escapamento. Certifique-se também de que não há vazamento do orifício do nariz.
