Produzione di siero autologo condizionato modificato e valutazione ex vivo del suo potenziale cicatrizzante nell'epitelio corneale murino

Questo processo presenta un innovativo prodotto derivato dal sangue chiamato mACS, che non richiede alcuna complessa elaborazione tecnica. Accelera anche la guarigione delle ferite in misura maggiore rispetto al siero autologo convenzionale. Oltre a fornire un processo di preparazione standardizzato, questa tecnica può anche ridurre il costo dei colliri sierici, migliorando l'accessibilità del paziente a un'opzione di trattamento più economica.

Questa tecnica può essere applicata in campi che richiedono la promozione della rigenerazione, della riparazione e dell'anti-infiammazione della ferita o dei tessuti. Questa tecnica sarà un grande vantaggio per ferite difficili da guarire e malattie infiammatorie croniche come gravi malattie della superficie oculare. Per iniziare, iniettare 10 millilitri di sangue venoso umano precedentemente prelevato in ciascuna delle sei provette vacutainer.

Mettere i tubi in un'incubatrice a 37 gradi Celsius per quattro ore e quindi centrifugare i tubi a 3.500 G per 10 minuti a temperatura ambiente. Decapare i tubi dopo averli posizionati sul rack. Dopo aver indossato guanti sterili, utilizzare una siringa da tre millilitri dotata di un ago da 18 gauge per estrarre il mACS da ciascun tubo.

Estrarre l'ago e collegare un filtro da 0,22 micrometri. Collegare l'ago per la raccolta del sangue da 1,5 pollici con la siringa originale da tre millilitri all'uscita del filtro. Spingere delicatamente l'ago attraverso il filtro nei flaconi sterili di collirio preparati per l'uso immediato, conservare il collirio a quattro gradi Celsius.

Nel modello di guarigione superficiale ex-vivo, i soggetti trattati con collirio mACS hanno mostrato una guarigione corneale superiore rispetto a quelli trattati con gocce di siero autologhe. A 16 ore, le ferite corneali di tutti i gruppi sono guarite più lentamente di quella trattata con 0,5% mACS. La cornea murina dei gruppi DMEM e il siero autologo a 24 ore hanno dimostrato una guarigione comparabile con mACSS a 32 ore, ad eccezione del gruppo salino normale.

Tutti gli altri gruppi hanno mostrato quasi il pieno recupero. Il passo più importante è seguire procedure asettiche durante il processo. I prodotti a base di siero sono ricchi di sostanze nutritive, quindi l'utilizzo di prodotti contaminati sulla cornea può causare gravi ulcere corneali.

Questo prodotto può essere utilizzato per valutare la guarigione delle ferite e il miglioramento dei sintomi della malattia della superficie oculare. L'analisi della componente citochina e la conduzione di studi randomizzati controllati più ampi di mACS sono essenziali per ulteriori ricerche.