JoVE Journal

Medicine

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir.

live

Speed

×

MEDIA_ELEMENT_ERROR: Format error

Modifiye Otolog Şartlandırılmış Serum Üretimi ve Murin Kornea Epitelinde İyileşme Potansiyelinin Ex Vivo Değerlendirilmesi

Transkript

Bu süreç, herhangi bir karmaşık teknik işlem gerektirmeyen mACS adı verilen yenilikçi bir kan türevi ürün sunar. Ayrıca yara iyileşmesini geleneksel otolog serumdan daha büyük ölçüde hızlandırır. Standart bir hazırlık süreci sağlamanın yanı sıra, bu teknik aynı zamanda serum göz damlalarının maliyetini düşürebilir ve hastanın daha uygun fiyatlı bir tedavi seçeneğine erişilebilirliğini artırabilir.

Bu teknik, yara veya doku rejenerasyonu, onarımı ve anti-inflamasyonu teşvik etmeyi gerektiren alanlarda uygulanabilir. Bu teknik, iyileşmesi zor yaralar ve ciddi oküler yüzey hastalıkları gibi kronik enflamatuar hastalıklar için büyük bir avantaj olacaktır. Başlamak için, altı vakumer tüpün her birine daha önce çekilmiş insan venöz kanının 10 mililitresini enjekte edin.

Tüpleri dört saat boyunca 37 santigrat derecede bir inkübatöre yerleştirin ve ardından tüpleri oda sıcaklığında 10 dakika boyunca 3.500 G'de santrifüj edin. Tüpleri rafa yerleştirdikten sonra kapağını açın. Steril eldivenleri giydikten sonra, mACS'yi her tüpten çıkarmak için 18 gauge iğne ile donatılmış üç mililitrelik bir şırınga kullanın.

İğneyi dışarı çekin ve 0.22 mikrometrelik bir filtre takın. 23 gauge, 1,5 inç kan toplama iğnesini orijinal üç mililitrelik şırınga ile filtrenin çıkışına bağlayın. İğneyi filtreden yavaşça derhal kullanım için hazırlanan steril göz damlası şişelerine itin, göz damlalarını dört santigrat derecede saklayın.

Ex-vivo yüzey iyileşme modelinde, mACS göz damlası ile tedavi edilen denekler, otolog serum damlaları ile tedavi edilenlere göre üstün kornea iyileşmesi göstermiştir. 16 saatte, tüm grupların kornea yaraları% 0.5 mACS ile tedavi edilenden daha yavaş iyileşti. DMEM gruplarının murin korneaları ve 24 saatte otolog serum, normal salin grubu hariç, 32 saatte mACSS ile karşılaştırılabilir iyileşme gösterdi.

Diğer tüm gruplar neredeyse tamamen iyileşme gösterdi. En önemli adım, işlem sırasında aseptik prosedürleri takip etmektir. Serum ürünleri besin açısından zengindir, bu nedenle korneada kontamine ürünler kullanmak ciddi kornea ülserlerine neden olabilir.

Bu ürün, yaraların iyileşmesini ve oküler yüzey hastalığı semptomlarının iyileşmesini değerlendirmek için kullanılabilir. Sitokin bileşeninin analiz edilmesi ve mACS'nin daha büyük randomize kontrollü çalışmalarının yürütülmesi, daha ileri araştırmalar için gereklidir.

Bu makalede, süreci basitleştirmek ve otolog şartlandırılmış serum (AKS) hazırlanmasını daha ucuz hale getirmek için bir protokol açıklanmaktadır. Özel şırıngalara veya yüzey kaplamalı cam boncuklara gerek yoktur. Ayrıca, modifiye ACS (mACS), murin gözlerin ex vivo kornea yara iyileşmesinde konvansiyonel otolog seruma göre rekabet avantajına sahiptir.

Bu videodaki bölümler

0:04

Introduction

1:07

Preparation for the Modified Autologous Conditioned Serum (mACS) Drops

2:15

Results: Assessment of Murine Corneal Wound Healing

3:03

Conclusion

İlgili Videolar

Sitemizdeki deneyiminizi iyileştirmek için çerezleri kullanıyoruz

Sitemizi kullanmaya devam ederek ya da "Devam et" butonuna tıklayarak, çerezleri kabul edebilirsiniz.