Test di efficienza traslazionale utilizzando profili polisomici sotto stress termico

La nostra ricerca indaga la regolazione traslazionale durante lo stress termico nelle piante. Analizzando l'RNA non legato ai polisomi e l'RNA legato ai polisomi, miriamo a studiare come le piante regolano la tolleranza allo stress attraverso il controllo traduzionale. Quindi qui forniamo un profilo dei polisomi e un protocollo di isolamento dell'RNA dei polisomi per studiare le efficienze di traduzione in Arabidopsis sotto stress termico.

In questo protocollo, forniamo metodi completi e standardizzati per calcolare l'efficienza della traduzione utilizzando la normalizzazione spike-in, che è essenziale per un'analisi translatomica più approfondita. Il nostro protocollo offre un metodo più semplice ed efficiente per isolare l'RNA dei polisomi utilizzando un volume minore di tampone organico e ottenendo una maggiore resa dell'RNA.