自らケージを変更するラットを教えるためのクリッカー トレーニングと社会の観察を使用してください。

要約

このプロトコルでは、クリッカー トレーニングを介してラット用ケージの変更の方法を紹介します。ラットは、直接訓練だけでなく、観察学習も目的の動作を説明します。この迅速かつ簡単なプロトコルの実装は、幸福と齧歯動物の施設・設備の衛生を改善するために役立つかもしれない。

要約

ケージの清掃が定期的に実行される飼育プロシージャであり、実験用ラットにストレスを誘発することがわかっています。ストレス幸福に否定的な影響を持つことができ、比較可能性と研究結果の再現性に影響を与えることができる、実験動物が経験したストレスの量を最小化および可能な場合避けるべきであります。さらに、ケージの変更中にラットおよび動物の世話人の直接接触は衛生のリスクを負う、したがっておそらくラットと研究の質の幸福に悪影響します。

我々 のプロトコルは、変更の手順実行定期的にケージを改善を目指しています。このため、clicker の訓練およびきれいなケージに自ら変更する観測を介して学習するラットを可能にする実行可能なプロトコルを提案する.物理障害によって引き起こされるストレスを軽減することができますこのトレーニングとケージに関連付けられている処理の変更し同時にトレーニング フェーズが完了した後、動物および動物の世話人との直接接触低減が可能します。

Clicker の訓練ラットの実装は、高速かつ簡単です。ラットは、一般的にトレーニングに興味があるおよびパイプを通じて変化するケージを伴う目的の動作を効率的に学ぶ。観察学習グループの 80% が正常にテストしたときのケージを変更なくてもトレーニング、ラットを観察して目的の動作を実行する学習します。トレーナーと動物の信頼関係を確立する訓練さらに役立ちます。衛生および福利は両方の動物実験で非常に重要なこのプロトコルも質の高い研究を改善するために役立つかもしれない。

概要

ルーチンの手順は、研究所動物^1,2,3,4ストレスを引き起こすことができます。それは、ケージを変更する心血管系パラメーターとラット^4,5,6の活動増加することが示されています。このようなストレス反応は、物理障害とケージ新しい不慣れな環境^2,4ではなく、プロシージャの変更に関連付けられている処理のために部分的にすることができます少なくとも。特に重要な⁷見なされた動物の幸福のストレスの負の効果にあります。さらに、圧力は、動作と自律神経系、神経内分泌システム免疫システムなど、その他の体のパラメーターの変化を誘導します。したがって、ストレスはしばしばと呼ばれ予期せぬ逸脱の可能性のあるソース動物実験で高品質動物研究^7,8では可能な限り避ける必要があります。実験動物のストレスを軽減する 1 つの方法は、トレーニングです。トレーニング動物研究所動物管理のための非常に有用なツールをすることができます一般的に、EU 指令 2010年/63/EU⁹によって要求される、実際には。トレーニングは濃縮と実験用動物を準備するのに役立ちますのフォームとして使用できます。したがって、トレーニングは維持し、研究室の設定^10、11,12の福利の向上に貢献します。可能なトレーニング法は、正の強化トレーニング (PRT) です。PRT はオペラント条件づけのフォーム (例えば褒美の餌)、報酬の望ましい行動¹³のリンクがあります。訓練のこのフォームは、ストレスを軽減し、幸福感を高めるため、ヒト以外の霊長類の実験室環境ではすでに一般的に使用、様々 な他の動物種^10,13,で人気を集めている^14,,1516。随意運動のトレーニングもよく、動物飼育管理^17,18,19を精製に使用されます。動物を操作するとき PRT は協力のみ役に立つツールではありません。それは同様に動物の幸福のため、訓練を受けた現象が直接使用された²⁰かどうかにかかわらず一般的に有益です。肯定的な補強トレーニングのプロトコルはラットのプロシージャに自発的に参加する機会を与えることによって定期的に実行されるケージの変更時にストレスの任意の形式を回避することを目的に紹介します。

動物のため可能な限りのストレスに加えて動物施設における作業プロセス常には、落とし穴衛生状態の維持のため特に実験動物と動物の介護者との間の直接の接触は、衛生のリスクを負います汚染されています。齧歯動物に特化した動物施設、清潔なケージに汚いから動物の転送は定期的かつ高負荷を提供します。このプロシージャは通常動物と人間との間の直接の接触が含まれます、したがって病原体がヒトの皮膚²¹に定住の可能性転送による衛生的なリスク要因を表します。別に他の動物のベクトルから転送、病原性および非病原性生物動物施設人間^22,23を介して最も頻繁に侵入します。減少し、健康に関連付けられている^24,25は回避減少幸福も不顕性感染することができます nonreproducible の実験結果の原因となるし、これは明確にする必要があります。このアカウントにさらに自発的な変化のケージに動物を訓練により、動物および動物の世話人、実行中潜在的な衛生学の危険を減らす間ほとんどすべての直接接触とトレーニング後ケージ変更の伝導実験プロシージャ。

自らケージを変更するネズミを訓練のためのプロトコルにリンクして日常業務のパフォーマンスと認知の濃縮の一形態としてトレーニング実験室ラットの管理のための有用なツールをすることができます。したがって、我々 のプロトコルは、実験動物施設におけるラットの福利を高める動物向け手順です。ケージの変更として動物および動物の飼養者のほとんどすべての直接の接触をトレーニング フェーズを実行することができます後にさらに役立つ高レベルの衛生状態を維持し、そのため動物の研究をさらに向上させます。

プロトコル

動物のケアのためのヨーロッパ、国家、および制度上のガイドラインに従って、ラットおよび実験プロシージャの処理を行った。

1. 馴化と慣れ

注: 場合ラット輸送、順化、慣れの時間を短縮できます。非侵襲的同定のためには、肌に優しいマーカーで尾を色します。

1. 第 1 週: 順化
   注: 2 つのセッション実行してください最初の週、到着の日に 1 つ、2 つ目の中に到着後 2 日。
   1. ラットの到着の日。
      1. 彼らの新しい家のケージを 2 個ペアでラットを転送します。古いと新しい環境に慣れしやすく身近な食品餌のいくつかと同様、素材を寝具の一部を転送します。
      2. 尻尾でラットを持ち上げることを避けます。可能であれば、腹の下や胸の周り、1 つの手と (図 1)²⁶を持ち上げることは、ラットの後脚を支える他の手を置きます。
   2. 到着の日の後 2 日間:
   3. ラットの家のケージを開き、ケージに手を入れてください。ラットの匂いを嗅ぐし、手を探検しなさいラットはケージから取得しようとしている場合、は、そっとケージに戻ってそれらを押すことによってそれらを妨げます。次の 4 分間、この手順を続行します。
   4. ラットは恐れているし、自分の環境を探索を開始しないでください、一日一回ラットを探索を開始するまで手順を繰り返します。この場合、クリッカーに慣れが必要かもしれない。
      注: ラット探検すべての自分の感覚で物事を新しいので、いくつかの後、彼らは精通している同じ実験者が認識されます。ラットは手の口腔の探求が、侵襲的な方法でことがありますそれが起こる可能性があります。手がゆっくりと取られなければならない場合、このような状況が発生すると、手袋が破壊されないようにします。
   5. ホームのケージに意図した食糧報酬の小さな断片を追加します。
      注: 食糧報酬研究所動物栄養の要件に従ってする必要があります。このプロトコルでは (注射器の終わりに開催)、ホワイト チョコレートを使用しますがその他の食品、ドライ フルーツ、新鮮な果物、シリアルなどが可能です。動物施設衛生要件により特殊な条件がある場合、実験動物のための御馳走のさまざまなサプライヤーがあります。健康的なオプションが望ましい、しかし、高脂肪・高砂糖のミックスが動物に参加するモチベーションを与える可能性があります。
2. 2 週目: 科学者と食糧報酬慣れ
   1. 手と前の週に開始食品の報酬に居住を続行します。1 日 2 分の対話時間を制限します。
   2. ラットは非常に心配している場合、クリッカーに慣れが必要かもしれません。
      1. この現象を評価するため、1 日目のセッションの後、5 秒ごとに一度をクリックします。ラットは、不安関連行動と反応し場合、は、クリッカーが慣れる必要があります。
      2. クリッカーに慣れ、ラットは、セッション後、ケージに配置されている報酬を消費する 5 回をクリックしてください。ラット恐怖関連の行為が表示されなくなります、すぐに、クリッカー慣れは完了です。
3. 週 3: 慣れ強烈な処理
   1. 1 〜 3 日持ち上がるか、またはいくつかの秒のラットをなでると起動し、ゆっくり時間 (最大 2 分ラット) を拡張します。ラット凍結を避け、非表示などの嫌悪の兆候を示している場合を停止します。
   2. 日 4 および 5 を終了、くすぐりで処理クルーティエらで説明されているよう(2012 年)。²⁷
      注: 成功した慣れのための指標は、例えば、それは手で提供される食糧報酬を取ってラットまたは手近づいてラット、それを探索したり、またそれに触れます。

2. クリッカー トレーニング

注: のトレーニング セッションの所要時間 4 分の訓練は休憩の 15 秒、30 秒の間隔で構成されています。一時停止中に追加された材を取り除きます。オブザーバー ラットは自由にそれが望んでいる参加して報酬を使用する許可されて、フォーカスはもっぱら他のラット。すべてのラットは 1 日目と 5 日目に大喜びだった。トレーニングの成功の実験者が動物の行動に注意を支払うし、冷静な行動が重要です。訓練はタイミングの実験者の能力、観察力に強く依存します。訓練で、ことばによるフィードバックが発生せず、セッション外動物と口頭でのコミュニケーションが行われます。目的の動作の学習の指標は、動作の繰り返しです。

1. 準備
   1. 報酬、クリッカー/ターゲット棒の組み合わせ、タイマー、きれいなケージ、金属管、その他の特定の訓練素材など、必要な材料を準備します。
   2. ホームのケージを静かな場所に転送します。
   3. ケージからすべての項目を削除します。2 匹のラットのみ (訓練を受けたとオブザーバー) 寝具素材が檻の中に残るべきであると。
2. トレーニング 1 日目: プライマリおよびセカンダリの強化の間に接続を確立します。
   1. ホーム ケージで短いトンネルを配置、できれば 1 つのラットに精通しています。
   2. トンネルのラットが座っているまで待ち、報酬にラットをフィードします。
      注: トレーニング状況の状況下でラットの食物を取らない場合、慣れ相する必要があるまたは調整。
   3. ラットは報酬に興味を示して、報酬をつついてを開始しようとして、できるだけ早くクリックし、ラットの報酬にフィードします。強化する 2 つのペアリングが成功、繰り返しをクリックして、15 秒間やりがいのあります。この最初のトレーニング セッション中に少なくとも 2 回これを行います。
   4. ラットが参加した場合は、プライマリとセカンダリの強化との間の接続の確立の兆候を確認します。この分類のための主要な基準は、スニッフィング、食糧報酬を提示する手で周りを探してまたは報酬 (図 2) を捜すために、後肢に持ち上げてによってラットで示されている食品の報酬の推定です。このような場合は、次の部分を一緒に移動します。それ以外の場合、「研修日 1」を繰り返す
3. トレーニング日 2 に 5: 短いトンネルを通過
   注: トレーニング セッションは 30 秒のトレーニングと休憩の 4 分 15 秒の交互フェーズから構成されます。
   1. ホームのケージで 2 つのケージをリンクしている最初の使用/元トンネルと同じ材料の短いトンネルを配置します。
   2. タイマーを開始、すぐにトレーニングの最初の 30 秒から始まります。
      1. ラット、トンネルに入るの初めてでは、トンネルの終わりに報酬を提示します。ラットがトンネルに入るとすぐにクリックし、報酬を食べるラット。
      2. 褒美の餌を奪う、ラットはトンネルの関心をもう一度示してまで待ちます。ラット トンネルに入るとすぐをクリックし、(図 3) トンネルの終わりに報酬を提示します。
      3. 30 秒間トレーニング、15 秒間の休憩 (削除トンネル) を追加します。
   3. その後 15 秒と 30 秒トレーニングの休憩 4 分の手順を繰り返します。
   4. 場合は、ラットは、分に 4 倍以上、停止をクリックすると、プライマリの強化と正当な報酬目的の動作を示しています。
   5. 4 分後に停止します。
4. トレーニングの週 2: ターゲット棒に触れる
   1. タイマーを開始、すぐにトレーニングの最初の 30 秒から始まります。15 秒ごとに改を追加、トレーニングを進みます。
   2. ラットに近いターゲット棒のグローブを配置します。
   3. ラットは、世界中で関心を示してクリックして、ラットに報酬を与えます。これを数回繰り返します。
   4. ラットは 4 倍以上分世界に関心を示している場合を強化するための次の動作は「に触れる鼻とグローブ」。
   5. ラットは、分に 4 倍以上の動作を繰り返し、プライマリの強化] をクリックしてだけの報酬を停止します。
   6. 4 分後に停止します。
5. 週 3 (5 日間) と 4 (3 日) の週の訓練: トンネルを通ってケージを変更します。
   注: ここでは、補強だけきれいなケージに向かってトンネルを通過します。第 4 週のトレーニングは、トレーニングの 3 日間に短縮されています。今回は、トレーニングの成功のために十分では既に、評価や実験を記録するデータの 1 つの追加日の機会を与えます。
   1. トンネルによって家のケージと新しいきれいなケージとの間の接続を構築するには、ラットには既におなじみのトンネルの長いバージョンを挿入します。
   2. 1 日目、トレーニング、実行せず、だけラット トンネルの検査をしましょう。きっかけになった彼らは転送もそれを自分であります。
   3. 2 日目、トンネルを通って独自にダーティからクリーン側に転送する、ラットに 2 分を与えます。ラットは、トンネルを通って自由に転送、2.5.8 のステップに進みます。
   4. そうでなければ、トレーニング セッション (代替トレーニングの 30 秒と 15 秒間の休憩の間) 4 分の最初の 30 秒を開始します。
   5. クリックし、ラットの報酬を与えるとすぐにトンネルに関心を示しています。
   6. クリックし、トンネルに入口に報酬を与えるに進みます。
   7. ラットはトンネルで深くなる場合クリックして、報酬に進みます。
   8. ラットは、全体のトンネルを介して実行されますまで、同様の方法で続行します。ラット起動ピーク トンネルの終わりにきれいなケージに、すぐにターゲット棒、クリック、および世界に触れるための報酬の世界を提示します。
   9. 最後に、トンネルを残してラットをガイドします。このプロセスは、ターゲット棒のグローブを使用します。トンネルの前にグローブを提示し、それは新しいケージのステップし、世界に触れているとすぐにラットの報酬します。
   10. ラットを「ダーティ」ホーム ケージに転送します。腹の下や胸の周り、1 つの手と持ち上げること (図 1) は、ラットの後脚を支える他の手を置きます。きれいなケージの中央にターゲット棒の世界を紹介します。クリックし、ラットとして報酬トンネルを介して実行される、ターゲット棒 (図 4) に触れています。
   11. ラットは、分に 4 倍以上の動作を繰り返し、プライマリの強化] をクリックしてだけの報酬を停止します。
   12. 4 分後に停止します。

結果

10 女性フード付きのリスター (LD) ラットのコホートで訓練を行った。10 未熟なが優しく処理 LD ラットは対照群として役立った。穏やかな処理は、ラットが自分の体でのみ解除され、尾の基部にリフトされていませんを意味します。観察による学習を評価するには、10 雌 LD ラットを訓練されなかったが、訓練を受けたラットのケージ仲間と訓練を観察することができ?...

ディスカッション

上記で説明したプロトコルは役に立つ実験室マウス¹⁰私たちの前述のクリッカー トレーニングのプロトコルのアプリケーションを拡張です。実装では、7 週間、順化、慣れ clicker の訓練などの合計で一日あたりわずか数分が必要です。可能性、このプロトコルはラットのペアあたり約 10 分のセッションを週に限られました。プロトコルは、大規模なラット コロニーの確立に...

資料

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Target Stick with Clicker	Trixie	2282
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