자발적으로 감 금 소를 변경 하는 쥐 가르치는 식자 교육 및 사회적 관찰을 사용 하 여

요약

이 프로토콜 케이지 변화의 쥐 clicker 훈련을 통해 하는 방법을 소개 합니다. 쥐 직접 훈련에 의해 뿐만 아니라 관찰 학습에 의해 원하는 동작을 배울. 이 빠르고 쉬운 프로토콜의 구현 복지 및 설치류 시설에서 위생을 개선 하기 위해 도움이 될 수도.

초록

케이지 청소는 정기적으로 수행된 축산 절차 및 실험실 쥐에 게 스트레스를 유발 하 알려져 있다. 와 스트레스 웰빙에 부정적인 영향을 미칠 수 있습니다 comparability 및 연구 결과의 재현성에 영향을 미칠 수 있는, 경험된 실험실 동물에 의해 스트레스의 양은 최소화와 가능 하면 피할 수 있어야 합니다. 또한, 케이지 변경 동안 쥐과 동물 관리 인 사이 직접적인 접촉 그리고 위생 위험 곰 따라서 가능 하 게 부정적인 쥐 및 연구의 품질의 영향.

우리의 프로토콜 절차를 변경 정기적으로 수행된 케이지를 개선 하는 것을 목표로. 이러한 이유로, 선물이 쥐 clicker 훈련 및 깨끗 한 케이지 자발적으로 바꾸는지 관찰 통해 배울 수 있도록 가능한 프로토콜. 물리적 장애에 의해 발생 하는 스트레스를 줄이는 데 도움이 됩니다이 훈련 및 케이지와 관련 된 처리 변경 동시에 훈련 단계를 완료 한 후 동물 및 동물 관리 인 사이 직접적인 접촉에 있는 감소를 수 있습니다.

식자 쥐에 훈련의 실시는 신속 하 고 쉽게. 쥐는은 일반적으로 훈련에 관심이 있으며 효율적으로 된 파이프를 통해 변화 연습장 원하는 동작을 배울. 훈련 없이 쥐 배워야 관찰, 원하는 동작을 수행 관찰 학습 그룹의 80%는 성공적으로 테스트 했을 때 감 금 소를 변경. 트레이너와 동물 사이의 신뢰의 관계를 설정 하도록 훈련 더 수 있습니다. 위생 및 복지는 모두 동물 실험에서 매우 중요 한,이 프로토콜도 높은-품질 연구 향상을 도울 수도 있습니다.

서문

일상적인 절차는 실험실 동물^1,2,,34스트레스를 일으킬 수 있습니다. 그것은 그 심장 혈관 매개 변수 및 쥐^4,,56에 일반적인 활동 증가 케이지 변경 표시 되었습니다. 이러한 스트레스 응답 적어도 부분적으로 실제 소요 및 케이지 변경 절차 보다는 오히려 새로운 낯선 환경^2,4와 관련 된 처리 수 있습니다. 특정 중요성의 간주 동물⁷에 스트레스의 부정적인 영향이 이다. 또한, 스트레스 유도 동작 및 자율 신 경계, 면역 체계, 신경 내 분 비 시스템 등 다른 본문 매개 변수를 변경 합니다. 따라서, 스트레스는 라고도 예상치 못한 편차 가능한 소스 동물 실험에서 고 양질의 동물 연구^7,8에서 가능한 만큼 피해 야 한다. 실험실 동물에 스트레스를 줄이기 위해 한 가지 방법은 훈련입니다. 훈련 동물 일반적으로 실험실 동물 관리를 위한 매우 유용한 도구 일 수 있다 EU 지침 2010/63/유럽⁹요구 사실, 하 고 있습니다. 훈련 형태의 한 농축 및 동물 실험;에 대 한 준비 하는 데 도움이 될 수 있습니다. 따라서, 훈련 유지 하 고 실험실 설정^10,,1112복지 향상에 기여 한다. 가능한 교육 방법은 긍정적인 증강 훈련 (PRT)입니다. PRT는 보상 (예, 음식 보상), 동작¹³를 연계 기사 조절의 형태입니다. 훈련의이 형태는 이미 상용 nonhuman 영장류 실험실 설정에서 스트레스를 줄이기 위해 복지를 강화 하 고 및 다양 한 다른 동물 종^10,13, 에서 인기를 얻고 있다 ^14,,1516. 자발적인 운동의 훈련 축산 관리^17,,1819정제에 자주 사용 됩니다. PRT는 하지만 협력을 위한 유용한 도구 동물; 작업할 때 마찬가지로 동물 들의 복지, 훈련된 동작 직접 사용된²⁰인지에 대 한 일반적으로 도움이 됩니다. 긍정적인 증강 훈련 프로토콜 설명 여기 쥐 절차에 자발적으로 참여 하는 기회를 제공 하 여 일상적으로 수행된 케이지 변경 시 어떤 형태의 스트레스를 방지 하는 것을 목표로 합니다.

동물에 대 한 가능한 스트레스 뿐만 아니라 동물 시설에서 작업 프로세스 항상 제공 함정 위생 상태, 유지 관리를 위해 특히 실험 동물 및 동물 관리 사이의 직접 접촉 곰 위생의 위험 오염입니다. 설치류에 전문 동물 시설, 깨끗 한 연습장에 더러운에서 동물의 전송 일정 하 고 높은 작업을 제공 합니다. 이 절차는 일반적으로 동물과 인간 사이의 직접 접촉을 포함 하 고 따라서 인간의 피부²¹에 정착 하는 병원 체의 가능한 전송으로 인해 위생 위험 요소를 나타냅니다. 이외에도 다른 동물 벡터에서 전송, nonpathogenic 병원 성 유기 체 인간^22,23를 통해 가장 자주 동물 시설 방해. 로 감소 건강 관련 된 감소 된 웰빙, 심지어 subclinical 감염 nonreproducible 실험 결과 대 한 원인이 될 수 있습니다 그리고이 명확 하 게 해야 피해^24,25. 이 계정에서 수행 하는 동안 위생에 잠재적인 위험을 줄여, 동물 및 동물 관리 인 사이 직접적인 접촉 거의 모든 훈련 후 케이지 변경의 전도 수 있도록 자발적인 변화 감 금 소 더 동물을 훈련 실험 절차입니다.

그것은 일상적인 작업의 성능 인지 농축의 형태로 교육을 연결 훈련 쥐 감 금 소를 자발적으로 변경에 대 한 우리의 프로토콜 실험실 쥐 관리를 위한 유용한 도구가 될 수 있습니다. 따라서, 우리의 프로토콜은 동물 친화적인 절차 실험실 동물 시설에 쥐의 증가 하는 데 도움이입니다. 케이지 변경 후 훈련 단계 동물 및 동물 관리 인 사이 거의 모든 직접적인 접촉으로 수행할 수 있습니다 그것은 또한 도움이 될 위생 높은 수준에서 유지 하 고 따라서 동물 연구를 더욱 향상.

프로토콜

쥐 및 실험 절차의 처리는 동물 보호에 대 한 유럽, 국가, 및 기관 지침에 따라 실시 했다.

1. 순응 및 습관 들 임

참고: 경우 쥐 했다 하지, 순응과 요법이 니 시간 줄일 수 있습니다. 비 침범 성 식별을 위해 피부 친화적인 표시와 함께 꼬리를 색상.

1. 주 1: 순응
   참고: 두 개의 세션이 수행 되어야 한다 첫 주 당일 도착, 하나는 두 번째 동안 도착 후 2 일.
   1. 쥐의 도착 당일:
      1. 그들의 새로운 가정 케이지를 2의 쌍 쥐를 전송 합니다. 일부 오래 된 중첩 및 침구 물자 뿐만 아니라 새로운 환경에 habituation 촉진 하기 위하여 그들의 익숙한 음식 펠 릿의 일부를 전송 합니다.
      2. 쥐 꼬리에 의해 해제 하지 마십시오. 만약에 가능 하다 면, 한 손으로 배꼽 아래 또는 가슴 주위와 다른 한편으로는 그들에 게 (그림 1)²⁶들어 쥐의 뒷 다리를 지 원하는 넣어.
   2. 2 일 날 도착 후:
   3. 쥐의 집 새 장 열고 장에 손을 넣어. 냄새 고 손을 쥐를 보자. 만약 쥐 려 감 금 소에서 부드럽게 다시는 새 장에 그들을 누르면 그들을 방해. 다음 4 분에 대 한이 절차를 계속 합니다.
   4. 쥐 두려워 그들의 환경 탐험을 시작 하지 않는 경우, 하루에 한 번 쥐를 탐험 하기 시작 때까지 절차를 반복 합니다. 이 경우에 리모콘에 habituation 필요할 수 있습니다.
      참고: 쥐 탐험의 그들의 감각, 모든 새로운 것 들 그래서 몇 시간 후, 그들은 친숙 한 것으로 동일한 실험을 인식 합니다. 그것은 쥐의 손, 구강 탐험 않지만 그것은 침략 적 방식으로 해서는 안 발생할 수 있습니다. 이 상황이 발생 하면, 손을 천천히 촬영 해야 장갑이 파괴 하지는 수 있도록 멀리.
   5. 홈 케이지를 원하는 음식 보상의 작은 조각을 추가 합니다.
      참고: 음식 보상 실험실 동물 영양에 대 한 요구 사항에 따라 해야 합니다. 이 프로토콜에서 (주사기의 끝에서 개최), 화이트 초콜릿을 사용 하지만 다른 음식, 건조 과일, 신선한 과일, 시리얼, 등 가능 합니다. 동물 시설 위생 요구 사항 요구 특별 한 조건, 실험실 동물에 대 한 취급에 대 한 다양 한 공급 업체 있습니다. 건강 한 옵션은 바람직, 하지만 높은 지방과 높은 설탕의 혼합 동물 참여에 큰 동기 부여를 줄 수 있습니다.
2. 주 2: Habituation 과학자와 음식 보상
   1. 계속 손 및 이전 주에 시작 하는 음식 보상에 거주 합니다. 상호 작용 시간 하루 2 분을 제한 합니다.
   2. 쥐 매우 불안 경우에서 리모콘에 habituation 필요할 수 있습니다.
      1. 이 문제를 평가 하려면 하루에 1 세션 후 5 초 마다 한 번을 클릭 합니다. 쥐 공포 관련 행동 반응, 리모콘 익혀 진다 될 해야 합니다.
      2. 리모콘 하 요법이 니, 쥐 세션 후 장에 배치 된 보상을 사용 하는 동안 5 번을 클릭 합니다. 리모콘에 habituation 쥐 더 이상 어떤 공포 관련 동작을 표시 대로 완료 됩니다.
3. 주 3: Habituation 강렬한 처리
   1. 1 ~ 3 일에 해제 또는 몇 초 동안 쥐를 쓰 다듬어 시작 하 고 천천히 시간 (최대 2 분 쥐 당)를 확장 합니다. 중지는 쥐 동결, 피하고 또는 숨기기 같은 모든 혐오 조짐.
   2. 사이에 4 및 5, 끝 간에 처리 Cloutier 외 에 설명 된 대로 (2012)입니다. ²⁷
      참고: 성공적인 습관 들 임에 대 한 지표는, 예를 들어 손으로 if 음식 보상을 복용 하는 쥐 또는 쥐를 밝히 려는 손을 탐험, 또는 그것을 만져.

2. 식자 교육

참고: 교육 세션 4 분 걸리며 훈련 뒤 휴식의 15 초 30 초 간격으로 구성 됩니다. 일시 중지 중 추가 자료를 제거 합니다. 관찰자 쥐 원하는, 할 무료 참여 하 고 보상, 소비를 허용 하지만 초점은 전적으로 다른 쥐에. 모든 쥐가 하루에 하루 5 핸드폰 했다. 교육 성공, 그것은 실험 동물의 행동에 관심을 지불 하 고 진정 방식으로 행동 중요 하다. 훈련은 강하게 타이밍의 실험의 능력과 관찰의 힘에 따라 달라 집니다. 구두 피드백 없음, 훈련에서 발생 하 고 동물 구두 통신 세션 밖에 서 그냥 발생할 수 있습니다. 원하는 행동의 학습에 대 한 표시기 동작의 반복입니다.

1. 준비
   1. 보상, 리모콘/대상 스틱 조합, 타이머, 깨끗 한 케이지, 금속 관 및 다른 특정 교육 자료 등 필요한 자료를 준비 합니다.
   2. 홈 케이지 조용한 곳에 전송.
   3. 감 금에서 모든 항목을 제거 합니다. 만 두 쥐 (훈련 및 관찰자) 침구 물자는 감 금 소에 남아 있어야 하 고.
2. 교육 주 1: 기본 및 보조 reinforcer 간에 연결을 설정
   1. 집 안의 짧은 터널, 선호 하나 쥐 잘 알고 있다.
   2. 쥐 터널에 앉아 때까지 기다려 하 고 보상으로 쥐를 피드.
      참고: 경우 쥐 하지 훈련 상황의 상황에서 수 유, 습관 들 임 단계 해야 수 확장 또는 조정.
   3. 쥐 보상에 관심 하 고 보상에 연못을 시작 하는, 클릭 한 다음 보상에 피드 쥐를 보자. 그 강화 두의 페어링이 성공, 반복을 클릭 하 고 다음 15 초 동안 보람 합니다. 이 첫 번째 훈련 세션 동안 두 번 이상 이렇게.
   4. 쥐 않았다 참여 하는 경우 기본 및 보조 reinforcer 사이 연결의 설립의 표시를 확인 합니다. 이 분류에 대 한 주요 표준은 스니핑, 주위와 손에 음식 보상을 제공 하는 보고 또는 보상 (그림 2)에 대 한 보고 하기 위하여 그것의 뒷 다리 사지에 드는 쥐에 의해 표시 되는 음식 보상의 추정 이다. 이 경우, 이동 다음 부분; 그렇지 않으면, 반복 "교육 주 1"
3. 교육 일 2-5: 짧은 터널을 통해 전달
   참고: 훈련 교육의 30 초, 15 초 휴식의 4 분의 교체 단계 이루어져 있다.
   1. 홈 장에 두 케이지 연결 됩니다 첫 번째 사용/원래 터널의 동일한 물자의 짧은 터널을 배치 합니다.
   2. 타이머를 시작 하 고 즉시 훈련의 처음 30 초 시작.
      1. 쥐가 터널을 입력 하는 처음으로 현재는 터널의 끝에 보상. 최대한 빨리 쥐 터널을 입력 하면, 클릭 하 고 보상을 먹는 쥐를 보자.
      2. 음식 보상 려 고 쥐 터널에 대 한 관심을 한 번 더 표시 될 때까지 기다립니다. 최대한 빨리 쥐 터널을 입력을 클릭 하 고 (그림 3) 터널의 끝에 보상을 제시.
      3. 훈련의 30 초 후 15 초 휴식 (제거 터널)을 추가 합니다.
   3. 반복 훈련의 30 초 이후 15 번째 4 분 동안 휴식 합니다.
   4. 만약 쥐 분에 4 배 이상, 중지를 클릭 하 고 기본 reinforcer 함께 그냥 보상 동작을 보여 줍니다.
   5. 4 분 후 중지 합니다.
4. 교육 주 2: 감동 대상 스틱
   1. 타이머를 시작 하 고 즉시 훈련의 처음 30 초 시작. 매 15 초 휴식을 추가 하 고 훈련가 서.
   2. 쥐 근처 표적 지팡이의 세계를 놓습니다.
   3. 쥐 세계에 관심을 보여줍니다, 최대한 빨리 클릭 하 고 쥐를 보상. 반복이 여러 번.
   4. 쥐 분에 4 회 이상 세계에 관심을 표시 하는 경우 다음 동작을 강화 "감 동적 이다 코와 함께 세계".
   5. 쥐 1 분에 4 번 이상 그 동작을 반복, 기본 reinforcer 함께 클릭 하 고 그냥 보상을 중지.
   6. 4 분 후 중지 합니다.
5. 주 3 (5 일)와 (3 일) 4 주 훈련: 케이지를 터널을 통해 변경
   참고: 여기만 깨끗 한 케이지 쪽으로 터널을 통과 강화 했다. 4 주 훈련 3 훈련 일 단축 이 시간 이미 훈련 성공에 대 한 충분 한 고 추가 하루 평가 또는 추가 실험에 대 한 기록 데이터에 대 한 기회를 제공 합니다.
   1. 쥐에 게 이미 친숙 한 터널의 더 긴 버전을 삽입 하 여 갱도 홈 장과 새로운 깨끗 한 케이지 사이의 연결을 구축.
   2. 첫날에 수행 훈련, 그리고 그냥 터널을 검사 하는 쥐. 그들 자신에 그것에 그들은 심지어 옮길 것 이다 좋은 기회가 있다.
   3. 2 일에 게는 쥐 2 분 깨끗 한 쪽으로 더러운에서 자체에 터널을 통해 전송. 쥐 터널을 통해 자유롭게 전송, 단계 2.5.8 건너뜁니다.
   4. 그렇지 않으면, 세션 (교육의 30 초 및 15 초 휴식 사이 대체) 4 분을 훈련 첫 번째 30 초 시작.
   5. 클릭 하 고 가능한 빨리 그것은 터널에 대 한 관심을 보여준다는 쥐를 보상.
   6. 이동 클릭 하 고 터널으로 입구를 보상 합니다.
   7. 쥐가 깊은 터널에서 클릭 하 여 보상 이동 합니다.
   8. 비슷한 방식으로 계속 쥐 전체 터널을 통해 실행 될 때까지. 최대한 빨리 쥐 시작 엿보기는 터널의 끝에 깨끗 한 케이지로, 대상 스틱, 클릭, 그리고 세계를 감동에 대 한 보상의 세계를 제시.
   9. 마지막으로, 터널을 두고 쥐 가이드. 이 프로세스에 대 한 표적 지팡이의 세계를 사용 합니다. 터널 앞 세계를 제시 하 고 클릭 하 고 새 장에 단계 하 고 세계에 닿아 쥐를 보상.
   10. "더러운" 홈 케이지 다시 쥐를 전송. 한 손으로 배꼽 아래 또는 가슴 주위와 그들 (그림 1)을 들어 쥐의 뒷 다리를 지 원하는 다른 손을 넣어. 깨끗 한 감 금 소의 중앙에 표적 지팡이의 세계를 제시. 클릭 및 쥐로 보상 터널을 통해 실행 하 고 대상 스틱 (그림 4)을 만지고 있다.
   11. 쥐 1 분에 4 번 이상에 대 한 동작을 반복, 기본 reinforcer 함께 클릭 하 고 그냥 보상을 중지.
   12. 4 분 후 중지 합니다.

결과

훈련은 10 여성 리스 터 후드 (LD) 쥐의 코 호트에 실시 되었다. 10 일반인 하지만 부드럽게 처리 여성 LD 쥐 제어 그룹으로 제공 됩니다. 부드러운 처리 쥐만 그들의 몸에 의해 해제 되었고 꼬리의 기지에서 해제 하지 의미 합니다. 관찰 학습을 평가, 우리 10 여성 LD 쥐를 훈련 했다 하지만 훈련 된 쥐의 감 금 소 동료 훈련을 관찰할 수 있었다 1 개의 추가 그룹 추가. 모든 쥐 순?...

토론

위에서 설명한 프로토콜 유용는 실험실 쥐¹⁰에 대 한 우리의 앞에서 설명한 clicker 훈련 프로토콜의 응용 프로그램을 확장 합니다. 구현 순응, 습관 들 임 및 식자 훈련을 포함 하 여 7 주, 총 1만 분을 요구 한다. 타당성,이 프로토콜 주 일 쥐의 쌍 당 약 10 분의 세션으로 제한 했다. 프로토콜 큰 쥐 식민지에서 설정 수를 나타날 수 있지만 동물 장기 실험 또는 종 축으로 지정 되어, ?...

자료

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