麻酔をかけられたラットにブプレノルフィン1ミリリットルあたり0.3ミリグラムを皮下投与することから始めます。.ラットを脳定位固定装置フレームに取り付けます。次に、カミソリを使って頭から毛を剃ります。
滅菌綿棒を使用して、10%ポビドンヨードとアルコールを交互に3回、毎回3〜5秒間異なる方向にこすりながら皮膚を消毒します。乾燥を防ぐために眼軟膏を塗ります。次に、滅菌メスを使用して頭の正中線に沿って2センチメートルの切開を行い、滅菌綿棒と生理食塩水を使用して頭蓋骨を細心の注意を払って洗浄します。
脳定位固定装置に装着された10マイクロリットルのハミルトン注射針を使用してブレグマを識別し、00に設定します。デバイスの前方後方座標と横方向座標を移動します。歯科用ドリルを使用して1ミリのバリ穴を作成します。
4マイクロリットルの放出カクテルを10マイクロリットルのハミルトンシリンジにロードし、鈍いまたは円錐形のエッジで針を慎重に下げて硬膜に接触させます。.針を3.5ミリメートルの希望の深さに挿入します。2マイクロリットルの放出カクテルを1分あたり1マイクロリットルの割合で注入します。.
針をさらに2分間そのままにしておき、ゆっくりと回収して、放出カクテルが浮上するのを防ぎます。5/0ナイロンを使用して切開部を縫合し、縫合された領域を消毒剤で洗浄します。次に、動物を手術後の監視エリアに移します。
3マイクロリットルを超える放出カクテルの注射は、非特異的な機械的損傷を引き起こしました。.2マイクロリットルのカクテルを注射すると、8か月後でも目に見えるダブルコルチン免疫陽性クラスターが出現しました。脳の免疫染色により、上衣層の剥離部位が明らかになり、注射のレベルのみに近づきました。
上衣層の摂動の緩やかな減少は、上衣下帯の後部および前方部で見られた。
