IgANマウスモデルから単離されたパイエル板の免疫組織化学的解析

免疫グロブリンAまたはIgAニューロパチーモデルマウスから単離されたパイエルパッチの以前に調製したパラフィン切片の脱ロウを開始するには、各切片をキシレンおよびエタノール勾配に5分間順次浸します。.次に、切片を蒸留水ですすいでください。抗原賦活化のために、クエン酸ナトリウム溶液をオートクレーブで2分間加熱します。

次に、ティッシュスライスを溶液に入れ、高温で5分間加熱します。冷やしたら、切片を3%過酸化水素溶液で室温で15分間インキュベートします。次に、10%ヤギ血清を組織切片に均一に塗布し、室温で30分間インキュベートして切片をブロックします。

ブロッキング溶液を振り落とした後、調製した一次抗体を各切片に適量塗布します。切片を濡れた箱に平らに置いて、摂氏4度で一晩インキュベートします。翌日、HRP標識二次抗体を一滴垂らして組織を覆い、室温で50分間インキュベートします。

次に、新たに調製したDAB発色溶液を各セクションに塗布し、発色するまで待ちます。切片をヘマトキシリンで約1分間再染色します。その後、切片が青色に戻るまで水道水で10分間すすぎます。

脱水のために、各セクションをエタノールとキシレンの勾配にそれぞれ5分間連続的に置きます。.すべてのセクションがわずかに乾いたら、各セクションを中性ガムで密封します。免疫組織化学的結果から、B細胞マーカーCD20およびCXCR5の発現は、対照群と比較して、IgAニューロパチーモデル群で有意に高かったことが示されました。

しかし、ジオシンは分子マーカーの発現を阻害する可能性があります。