神経膠芽腫の同所性マウスモデルを作製するための外科的処置

まず、手術用のマウスを準備し、脳定位固定装置フレームに配置します。次に、頭蓋骨の皮膚を持ち上げ、ハサミを右目と耳の間に挟んで切開します。切開痕に従って頭蓋骨の左側に向かって切り、結果として生じる丸い皮膚フラップを取り除きます。

メスの刃またはマイクロキュレットで、頭蓋骨の表面をそっと引っ掻いて骨膜を取り除きます。生理食塩水と真空を使用して、手術部位を破片から清潔に保ちます。骨膜を引っ掻いて、シアノアクリレート接着剤と歯科用セメントへの密着性を高めます。

次に、オートクレーブ滅菌した鉛筆を使用して、頭蓋窓の位置に印を付けます。利き手にはドリルを持ち、利き手ではない方には注射器または鉗子を持ちます。軟骨に冷たい生理食塩水を塗布して、過熱を防ぎ、手術ビューを清潔に保ちます。

穴あけ中は、ガラスカバースリップを頭蓋骨の上に配置して、頭蓋窓の内側に正確に収まることを確認します。頭蓋骨フラップを押し下げることができたら、鉗子を使用して術野から破片を慎重に取り除きます。少量の出血が発生した場合は、止血スポンジを使用して、失血を減らすために、光圧で氷冷した生理食塩水を局所塗布します。.

培養したC6神経膠腫細胞を移植用として採取します。1マイクロリットルの細胞懸濁液を気密マイクロリットルシリンジに吸引します。次に、シリンジを定位フレーム内に配置します。

2光子イメージング用の細胞を移植するには、0.5マイクロリットルの細胞懸濁液を0.8ミリメートルの深さで脳の表在領域に注入します。注射後、針を引っ込めて脳組織を出ます。次に、ヘッドバーとガラスカバースリップをアルコールから生理食塩水に移動し、真空チップまたは鉗子を使用して、これらのコンポーネントを手術部位に移動します。

ガラスカバースリップを頭蓋窓の内側に配置し、少量のシアノアクリレート接着剤を塗布します。ガラスカバースリップにこぼれた接着剤は、綿の先端アプリケーターを使用するか、メスでそっと引っ掻いて取り除きます。ガラスカバースリップを頭蓋窓に固定し、ヘッドバーを取り付けます。

歯科用セメントを混合し、ヘッドバーを配置し、周囲にセメントを塗布します。シリンジチップ、メス、またはドリルチップで余分なセメントを洗浄します。頭蓋窓を密閉した後、頭蓋骨が露出していないか確認します。