マウス脇腹領域における骨肉腫組織移植によるPDXモデルの確立

まず、組織保護液に保存されている新たに切除された骨肉腫組織を取ります。滅菌フード内で、骨肉腫組織を予冷滅菌生理食塩水で2回すすぎます。次に、出血と壊死を伴う骨肉腫組織の領域を切除します。

メスを使用して、予冷滅菌生理食塩水を含む組織培養皿できれいな骨肉腫組織を切断します。ティッシュを氷の上に置いておきます。次に、ヌードマウスを滅菌外科用ドレープの上に置きます。

マウスのつま先をつまんで、マウスが完全に麻酔されていることを確認します。次に、マウスを横方向の褥瘡位置に固定します。マーカーペンで、皮膚の外科的切開部位に印を付けます。

メスを使用して、皮膚から皮下組織まで5ミリメートルの切開を行います。次に、眼科用ピンセットを左手で持ち、切開部の上縁を持ち上げます。同時に、右手でまっすぐなニードルホルダーを使用して、マウスの真皮の下を上向きに鈍的解剖します。

眼科用ピンセットを使用して、切開部の上部の皮膚を保持します。次に、切開縁の5mm上の皮膚の下に骨肉腫組織を移植します。切開部を手術用ラインで縫合し、5mmの切開部を2〜3針縫います。

15歳の患者から大腿骨肉腫組織をP0、P1、P2、およびP3マウスに移植した結果、患者由来の異種移植片の作成に成功しました。