ラパマイシン制御チロシンホスファターゼの開発と応用

私たちの仕事は、チロシンホスファターゼの活性を調節するツールの開発に焦点を当てています。私たちは、ラパマイシン制御システムをいくつかのホスファターゼに適用し、それが目的のタンパク質に特異的かつ時間的な調節を与えることを示しました。私たちは、SHIP-2ホスファターゼの活性化によって誘発される形態学的変化を決定することを目指してきました。

RapRツールにより、細胞内のホスファターゼ活性化の一過性の影響を判定することができ、細胞の拡散と遊走に関与するホスファターゼの複雑な特異的ダウンストリーム効果を同定することができました。さらに、同じホスファターゼのドメイン駆動型振る舞いを決定しました。このことは、細胞の形態動態や下流のシグナル伝達を制御するホスファターゼのメカニズムの理解に貢献しています。

当社のRapRツールは、目的のホスファターゼを特異的かつ時間的に制御する能力を提供します。ホスファターゼに挿入されると、iFKBPドメインはアロステリックスイッチとして機能し、ラパマイシンに結合すると、ホスファターゼの活性が回復し、オンスイッチとして機能します。また、ラパマイシン制御系を用いてシグナル伝達複合体を再構築することもできます。

RapRツールを使用した私たちの発見は、SHIP-2のインタラクトームが細胞活性を調節する能力に及ぼす影響を決定するための扉を開きました。SH2ドメイン結合におけるSHIP-2sが細胞の収縮に重要であることを見出しました。RapRツールを使用すると、この規制にどのような拘束力を持つパートナーが関与しているのかをさらに調査することができます。