細菌群集におけるグルコース代謝を調査するためのOPTIR-FISHのサンプル調製

まず、標準化されたフッ化カルシウムスライドを取ります。それらを70%エタノールに15分間浸し、脱イオン水で2回すすいでください。クリーンスライドを0.1%ポリLリジン溶液に移し、摂氏4度で一晩インキュベートします。

次に、スライドを脱イオン水ですすぎ、乾かします。次に、調製した細胞サンプルを光から保護しながら室温で解凍します。サンプル乾燥中にPBSから過剰な塩分結晶が付着するのを防ぐため、解凍した細胞を脱イオン水で2回洗浄します。

14, 000 Gで10分間遠心分離し、上清を取り除きます。元の量の脱イオン水を細胞に再導入し、細胞を穏やかにボルテックスします。洗浄後、14, 000 Gで細胞を10分間遠心分離し、細菌細胞サンプルを濃縮し、上清を除去します。

残りの溶液を約30秒間穏やかにボルテックスし、この溶液の1〜2マイクロリットルを調製したフッ化カルシウムスライドに塗布します。