宣言する資金調達はありません。

説明したように骨格筋の手順は、アパラチア州立大学施設内倫理委員会のガイドラインに従っています。 注：チームは、オペレータ（博士または生検技術において訓練されたMD）、及び少なくとも1つからなるが、理想的には、三つ以上の技術者。オペレータが実施し、骨格筋生検処置のあらゆる側面を監督する責任があります。ワン技術者（技術者＃1）は、すぐに筋肉抽出のすべての面でオペレータを支援する責任があります。これは、「非滅菌手」であると、滅菌シリンジで吸引を適用することを含む。第二技術者は（技術者＃2）被験者の不安を最小限にする処置中に被写体とマッサージを被検者の反対の足との会話を行っています。第三の技術者（技術者＃3）は、骨格筋サンプルを処理し、処理するための責任があります。ダウンストリーム分析対策はどのように多くのADDITを指示ional技術は、骨格筋試料を調製/処理するために必要とされる。 1件名の準備<ol><li>収集、準備、および筋生検の手順（ 表1）に指定された材料を整理します。除染とベルイストローム針（外側カニューレと内側トロカール）と、標準的な方法16に従って、プランジャーを殺菌。 </li><li>件名の同意書を確認します。アパラチア州立大学で使用されるフ​​ォームを参加の同意の骨格筋生検部分はオンラインサプリメント1に設けられている。 <ol><li>手順の可能性のあるリスク、皮膚の準備、麻酔剤の適用、典型的な感覚を中心とした筋生検手順の一般的な側面についての主題に相談してください。慎重にフォームを参加の同意を読み、研究デザインや手順が理解されていることを確認するために、それに署名するために対象を指示します。 </li></ol></li><li> sのことを確認してくださいubjectは「___カイン」タイプの薬（ 例えば 、リドカイン）にアレルギーではありません。 </li><li>露出した太ももで埋めテーブルの上に仰向けに位置するように、被写体を指示します。被験者の足の下にプラスチック製のバッキングを持つ2使い捨て吸収性アンダーパッドを配置します。このように短縮された位置に外側広筋を配置し、かかとの下に小さなタオルロール、膝が完全に引き出されていること（上昇〜1センチ）でゆったりと脚を配置します。 </li><li>オペレータは、生検部位を可視化することができるように、瞬間的に露出した大腿筋を収縮させる対象を指示しています。注：広だけ大腿筋膜（illiotibialバンド）、膝蓋骨の上部と大転子7との間の距離の約3分の1に前方れる生検部位をヘイケボタル。 </li><li>ちょうど下のオペレータマーク（〜0.5センチメートル）細かい点油性マジックで切開部位を持っている。 </li><li>オペレータは、PINCによるおおよその皮下脂肪の厚さを決定したことがあります皮下脂肪を興。 </li><li>演算子を持って、技術者は、石鹸とぬるま湯で手を洗い、使い捨て手袋を着用。 </li><li>オペレータは（バリカンを介して）生検部位の周囲の領域から〜15センチメートル×15センチの毛を取り除く必要があります。注：生検部位から髪をクリッピングすると、手順の間に開閉の際に切開部になってから髪を防ぎ、脱毛は（3.4参照）、テープ閉鎖や皮膚との間のより良好な接触を可能にします。 </li><li>オペレータが（ヨウ素/貝類にアレルギー被験者に対するポビドンヨードまたはグルコン酸クロルヘキシジンとして）、局所消毒薬で予備浸漬綿棒で領域を殺菌する必要があります。中央に開始し、クリップされた領域の外側の縁に向かって同心円状に働く。最低でも、新しい予備浸漬綿棒でさらに2回するたびに繰り返します。 </li></ol> 2生検手順<ol><li>オペレータは、使い捨ての手袋を外し、石鹸とぬるま湯で手を洗って、無菌の外科GLを着用したことがあり無菌技術を使用してoves。 </li><li>技術者＃1は、オペレータに、滅菌有窓ドレープを提示しています。無菌技術を使用して、演算子を持って、無菌領域を維持するために生検部位の上ドレープを置く。 </li><li>技術者＃1現在のオペレータ無菌技術を維持しながら、21G針を取り付けた5ミリリットルの注射器を持っている。アルコール綿でリドカインバイアルの上部を清掃してください。 <ol><li>オペレータはすぐにリドカイン5ミリリットルを撤回したことがあり。シリンジから21Gの針を外し、シャープコンテナに針を捨てる。 </li><li>無菌技術を維持しながら、技術者＃1現在1-½インチ25 G針を有するオペレータを持っている。注射器の上にオペレータの代わりに1 - ½インチの針を持って、シリンジから気泡を排出する。 </li></ol></li><li>切開部位での技術者＃1のスプレー塩化エチル（〜を皮膚上に消えないインクマーク0.5cm上）したことがあり、皮膚がに表示されるまで「湯通し」 <ol><li>ハオペレータは、真皮に皮膚にほぼ水平に針を挿入し、針を吸引した後、直径「ブレブ」2〜4ミリメートルを生成するためにリドカインの〜100μlで潜入VEの。 <ol><li>針が血管内に配置されていないことを確認する（わずかシリンジのプランジャーを撤回）オペレータが、針を吸引したことがあり。血液が注射器に表示された場合は、針を撤回シャープコンテナに廃棄して、2.3からやり直します。 </li><li> 、オペレータの事前の皮下組織に針を持っている針を吸引した後、ブレブを形成するために、リドカインの約1 mlの組織に浸潤。ブレブが収まった後、筋膜に表面的な停止、縦に切開部位にリドカイン仕掛け注射器の1½インチの針を挿入します。注：対象は、（ハチ刺されに類似）リドカインの最初の注射の際のわずかな瞬間的な刺すような感覚を感じることがあります。 </li></ol></li><li> operatていることを確認してくださいそれが筋毒性の17〜19であるためか、lidocoineで筋肉に浸透していません。 </li><li>オペレータ吸引の針を持ち、太ももから針を抜き出しながらゆっくりリドカインの残りの4ミリリットルを注入。注射部位の上に滅菌ガーゼを置き、局所麻酔が有効になるときに、被写体がリラックスすることができます。 </li></ol></li><li>無菌技術を維持しながら、2〜3分後、オペレータ用メス技師＃1に存在しています。 <ol><li>オペレータが軽く領域が麻酔されていることを確認するために外科用メスの先端で生検部位をプローブ持つ。必要な場合には、2.4.1.2を参照して、切開部位にリドカインの別の3〜4ミリリットルを注入。 </li></ol></li><li>オペレータは、大腿骨に皮膚や皮下組織（〜インクマーク上記2〜3ミリメートル）平行なストレート1cmの切開を作成してもらってください。 <ol><li>オペレータは筋肉への筋膜を通して切開を作るために、より深いメスを挿入しています。各方向に1回これを行います<html> 。注：対象は、筋肉への手術用メスの刃をカットした場合、より深いカットとズキズキする痛みや圧力を感じることがあります。 </li><li>技術者＃2が会話の中で、被写体を従事し、反対側の足をマッサージしています。 </li></ol></li><li>オペレータの場所に切開生検サイト上の滅菌ガーゼのリベラルな量を持っているし、出血を減らすために切開に直接圧力をかける。 <ol><li>技術者＃1は、使い捨ての60mLシリンジおよび30cmの延長チューブ（ 図1）への3ウェイ金属活栓に接続しています。 </li><li>技術者＃1は延長チューブの自由端へ先細プラスチックチューブコネクタの一端を接続し、しっかりとの〜15〜18ミリメートルと200μlのピペットチップの大端部にテーパー状のプラスチックチューブコネクタのもう一方の端を挿入したことがあり先端を切断。 </li></ol></li></ol>.jpgの &quot;幅=&quot; 500 &quot;/&gt; 図1。ベルイストローム針。 （A）バーグストロム針（5mm以下）は（a）の外側カニューレと、（b）内側のトロカールから構成され、関連する構成要素は、（c）は、プランジャー、（d）は15〜18ミリメートルカットオフ〜200μlのピペットチップを含む、（e）はプラスチックコネクター、（f）は、3ウェイ金属活栓、（g）の30cmの延長チューブ、および（h）の使い捨ての60mLシリンジをテーパ。（B）バーグストロム針（5mm以下）と関連する構成要素が組み立て。（ C）ベルイストローム針の内部トロカール（5mm）を撤回約1cmの外側カニューレのウィンドウが開きます。 <ol start="9"><li>出血がおさまった後、技術者は＃1は滅菌オートクレーブポーチを開いており、無菌技術を維持しながら、オペレータに5mmの生検針と内側トロカール（ 図1）を提示。 <ol><li>オペレータは、アライメントとスライド動作を確認して、針（外側カニューレと内側トロカール）を構築しました。 </li> &lt;/オール&gt; </li><li>オペレータがしっかりと回転し、内側トロカールを防ぐために、両手で針アセンブリ（外側カニューレと内側トロカール）を保持できます。技術者は＃1がしっかりと若干の下向きのねじり運動に生検針の内側トロカール部分の上部にカットピペットチップを挿入したことがあります。その技術者＃1は、オペレータまたは生検針だけピペット先端に接触しないことを確認してください。 </li><li>オペレータは、切開を通して組織内に生検針を導入しました。生検針の先端で筋膜（取得した「感触」）の切開の位置を確認します。針が筋肉内に前進するだけで筋膜を過ぎて針を進め、その後、床に向かって下向きの角度に針を。注：被験者は筋膜を通して切開生検針の先端で配置され、針が筋肉内に前進さのようないくつかの軽度の不快感（ 例えば 、「深い圧」、または軽度のけいれん感覚）を発生することがあります。 <ol> &lt;李&gt;は、技術者＃2オペレータは筋肉に針を進めている間に自分の太ももの筋肉を収縮させる「リラックス」に滞在していないために件名に指示を持っている。 </li></ol></li><li>生検針位置になると、使い捨ての60mL注射器を開くためにオペレータ信号技術＃1を有している。 <ol><li>技術者＃1を持って速やかに生検針内吸引を作成するために40〜50 ccのマークに開放使い捨て60ミリリットルの注射器を引っ張る。 </li><li>オペレータは、筋肉内、外側トロカールの位置を維持しながら、外側カニューレのウィンドウを開くために行わ約1cmの内側套管針を引き出している。オペレータが迅速に（クリップ）をカットし、筋肉のサンプルを収集するために、内側トロカールを閉じています。吸引を解放するために、オペレータ信号技術＃1を持っている。 </li><li>技術者は＃1は、吸引を解放するために部屋に活栓を開いたことがあります。 </li><li>オペレータは、生検針90°回転し、プロセスを繰り返してきた。必要な場合は、オペレーターrepeaを持っている（4クリップの合計）3倍の回転手順をトン。 </li></ol></li><li>太ももから生検針を除去しながら、オペレータは、筋膜や皮膚を挟まないように注意しながら、滅菌ガーゼで切開部位に直接対抗圧力を加えることがあります。かなりの抵抗が感じている場合は、内側トロカールにねじり動作を適用しながら、再カット。 </li><li>太ももから生検針を除去すると、オペレータが視覚的に組織の適切な量を採取した場合に推定するために、外側カニューレの内腔を検査に戻って1cmにインナートロカールを引っ張っている。 <ol><li>オペレータの手に＃1を技術者に生検針を持っている。無菌技術を維持するためには、その技術者＃1が唯一の針ではなく、オペレータに触れるようにします。技術者＃1手の＃3を技術者に生検針を持っている。 </li></ol></li><li>技術者＃3生検針から組織を除去する必要があります。 <ol><li>技術者＃3は、プランジャ（ 図1）と先端の細いピンセットを使用していすべての筋肉組織が内部トロカールおよび外側カニューレから除去されることを確実にする。 </li><li>技術者＃3を迅速に筋組織の十分な量が収集されたことを確認し、氷冷した解剖ブロック上にサンプルを配置するためにサンプルを秤量持つ。 </li></ol></li><li>技術者＃3をお持ち注意深く筋肉サンプルから見える結合組織および脂肪を解剖。技術者は第3位は、下流の分析によれば、ストレージのための筋肉のサンプルを調製しました。例えば、すぐにクリオバイアル内のサンプルを配置し、液体窒素中で凍結スナップ、RNaseインヒビターとクリオバイアルなどで組織学、または場所をマウントし、凍結</li><li>必要に応じて、無菌技術を維持しながら、第二の滅菌生検針を使用して手順を繰り返します。 </li></ol> 3閉鎖<ol><li>オペレータは、滅菌ガーゼ、10〜15分間アイスパックで生検部位に直接圧力をかけたことがあります。 </li><li>止血が達成されると、オペレータは、使用アルコール広報を持っている切開の周囲の領域からの乾燥血液を除去するために、EPパッド。 </li><li>技術者＃1は、オペレータへの局所外科用接着剤及びアプリケータのチューブを提示しています。オペレータがアプリケーターチップやチューブの上部に触れることなく外科用接着剤とアプリの管を組み立てています。 </li><li>オペレータは、もう一方の手で乾燥切開の上に外科用接着剤の単一層を適用しながら切開を片手で閉じている引っ張る。接着剤が硬化（〜90秒）した後、切開したテープclosuresperpendicularを適用します。あるいは、2つの滅菌4-0縫合糸で切開を閉じます。 </li><li>オペレータは、切開部位に3-4 2 &quot;×2&quot;非滅菌ガーゼパッドを配置することによって、直接圧力を適用し、自己接着性接着剤ラップで固定している。 </li><li>オペレータは、以下の1から4日間、適切な創傷ケア、正常と異常反応、および行動指針に被写体口頭や書面での指示を提供したことがあります（オンラインのsuを参照してくださいpplement 2）。 </li></ol>

<ol>
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Determined by neutron activation analysis on needle biopsy specimens.</a> Scand J Clin Lab Invest (England). 14, (1962).</li><li>Bergstrom, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Percutaneous+needle+biopsy+of+skeletal+muscle+in+physiological+and+clinical+research).">Percutaneous needle biopsy of skeletal muscle in physiological and clinical research).</a> Scand J Clin Lab Invest. 35, 609-616 (1975).</li><li>Bergstrom, J., Hultman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+study+of+the+glycogen+metabolism+during+exercise+in+man.">A study of the glycogen metabolism during exercise in man.</a> Scand J Clin Lab Invest. 19, 218-228 (1967).</li><li>Evans, W. J., Phinney, S. D., Young, V. 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L., Schjerling, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Are+exercise-induced+genes+induced+by+exercise.">Are exercise-induced genes induced by exercise.</a> FASEB J. 19, 94-96 (2005).</li><li>Lundby, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+in+human+skeletal+muscle:+alternative+normalization+method+and+effect+of+repeated+biopsies.">Gene expression in human skeletal muscle: alternative normalization method and effect of repeated biopsies.</a> Eur J Appl Physiol. 95, 351-360 (2005).</li><li>Coyle, E. F., Coggan, A. R., Hemmert, M. K., Ivy, J. 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The authors have no conflicts of interest.

このビデオでは、ASUヒューマンパフォーマンス研究所で使用され、骨格筋生検手順のステップバイステップの概要を示します。この手順は、小さな変更を加えて、過去13年の間に約1,600筋肉生​​検を採取するために使用されている。筋生検サンプルは、重要な研究の発見につながる、スポーツ栄養ベースの調査では、重要なデータを提供してきた。 修正されたベルイス?...

経皮もしくは「セミオープン」生検技術は、ヒトの患者および研究対象から骨格筋組織試料を得るために使用される。デュシェンヌ型（1806-1875）は、経皮的生検1を通して生きている被験者からの骨格筋を得るために、トロカールで針を構築することが第一としてクレジットされている。 1960年代、ベルイストロームはデュシェンヌ2-4によって説明したのと同様の経皮的生検針を導入しました。 20年後、Evans ら 5はベルイストローム針の切削トロカールを通して吸引を適用することによって、技術を修正した。この修飾は、5倍6,7に組織3-の収率を高めることができ、臨床および生物医学的研究の設定に用いられる。この技術は持ち、筋疾患の診断と骨格筋の構造と機能の理解を促進していきます。 経皮的筋生検技術はstraightfoです順方向。無菌操作を厳守して、正しく実行すると、関連するリスクは最小限に抑えられています。筋生検手順は、研究プロジェクトのための治験ツールとしてみなされている。いくつかの学術機関が技術を実行するために、ボード認定医師を必要とする筋肉生検などを取得するために、直接医師の監督で、博士で訓練学部の研究者を可能にします。 ASU生検チームが成功し、過去13年間8-15中に1,600以上の筋肉生検を行った。このビデオの目的は、ヒト対象の外側広筋から骨格筋組織試料を得るために変更されたストローム針経皮筋生検技術5を記述することである。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="969">
	<tbody>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:439px;">Name of Material / Equipment</td>
			<td style="width:185px;">Company</td>
			<td style="width:141px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:204px;">Comments /&#160; Description</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Bergstr&#246;m biopsy needle, 5 x 100mm</td>
			<td style="width:185px;">Stille Surgical Inc.</td>
			<td>119-29187-50</td>
			<td>1 ea</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Durasorb blue pad</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>22-031-340</td>
			<td>case of 300</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Prep Razor Disposable</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>89760</td>
			<td>1 ea</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Shave Cream</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>92869</td>
			<td>1 can</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Alcohol Swab</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>98721</td>
			<td>box/200</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Povidone-iodine Swabsticks (3 pack)</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>90691</td>
			<td>pack of 50</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Face masks</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>19-039-690</td>
			<td>case of 50</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Sterile Gloves; sz 6.5</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>68128</td>
			<td>box of 50 pairs</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Sterile Gloves; sz 7.0</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>68129</td>
			<td>box of 50 pairs</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Sterile Gloves; sz 8.5</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>68132</td>
			<td>box of 50 pairs</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Fenestrated Towel Drape</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>92712</td>
			<td>case of 50</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lidocaine (1% HCl, w/o Epi</td>
			<td>Dealmed</td>
			<td>427902</td>
			<td>30cc vial</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Ethyl Chloride spray</td>
			<td>Dealmed</td>
			<td>386020</td>
			<td>3.5 fl. Oz. bottle</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">5 mL syringe w/ 21G needle</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-827-48</td>
			<td>case of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">25G 5/8&#34; needle</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-826AA</td>
			<td>case of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">25G 1 1/2&#34; needle</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-826-49</td>
			<td>case of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Single-Use Scalpels&#160; w/ #11 blade</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>0-8927-5B</td>
			<td>box of 20</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">60 mL Syringe</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>13-689-8</td>
			<td>case of 40</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">~30 inch extension tubing</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-169-7A</td>
			<td>roll of 50ft</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Metal stopcock</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>01-290-38</td>
			<td>each</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Polypropylene tubing connector w/ tapered ends, 3.2 to 5.5 mm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>15-315-28A</td>
			<td>case of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Yellow pipette tips (1-200 &#181;L)</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>02-681-2</td>
			<td>cut off&#160; ~15-18 mm of the tip</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Topical surgical adhesive</td>
			<td>Medline</td>
			<td>MSC091076</td>
			<td>case of 36 tubes</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Topical surgical adhesive</td>
			<td>Medline</td>
			<td>MSC091076Z</td>
			<td>box of 6 tubes</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Butterfly stitches (adhesive strips) 1/2&#34; x 4&#34; (6 per pack)</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>93050</td>
			<td>box/300</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Bandadge, Strip, 3/4 x 3 in.</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>19-027-202</td>
			<td>pack of 100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Adhesive bandage (5m rolls)</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>19-027-768</td>
			<td>case of 36</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">1&#34; paper surgical tape</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>19-027-761</td>
			<td>case of 12</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Sutures (4-0 reverse cutting, FS2)</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>82926</td>
			<td>box of 36</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">4 x 4 sterile gauze pads</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>66949</td>
			<td>pkg/50</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">2 x 2 non-sterile gauze pads</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>37336</td>
			<td>pkg/200</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">3 x 4 Non-Adherent Pads</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>74389</td>
			<td>bx/100</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Autoclave bags 3.5 x 9</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>40390</td>
			<td>box of 200</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Autoclave bags 5.25 x 10</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>40391</td>
			<td>box of 200</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Autoclave indicator tape</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>31608</td>
			<td>box of 250</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lab Coats&#8212;small</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>23-900-520A&#160;</td>
			<td>10/pk</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lab Coats&#8212;medium</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>23-900-520B&#160;</td>
			<td>10/pk</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Lab Coats&#8212;large</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>23-900-520C&#160;</td>
			<td>10/pk</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Germicidal Disposable Cloth Wipes</td>
			<td>Moore Medical</td>
			<td>62879</td>
			<td>Can/160</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

human skeletal muscle biopsy procedures using the modified bergstr&#246;m technique

経皮的生検技術は、骨格筋組織サンプルを収集するために、研究者や臨床医が可能になる。技術は安全で非常に効果的である。このビデオは、ヒト対象の外側広筋から骨格筋組織試料を得るために変更されたストローム針を用いて、経皮的生検技術が記載されている。ベルイストローム針は、先端側の小さな開口部（ &#39;窓&#39;）を有する外側カニューレと遠位端の切断刃を有する内側トロカールで構成されています。局所麻酔および無菌条件下では、針は、皮膚、皮下組織、および筋膜の切開部を通って骨格筋に進められる。次に、吸引力が内トロカールに適用され、外側のトロカールは、骨格筋組織を吸引外側カニューレの窓内に引き込まれ、内部トロカールが急速に閉鎖され、したがって、骨格筋組織試料を切断またはクリッピングされ、引き戻され。針を90°回転さ60;別のカットが行われた。このプロセスを3回以上繰り返してもよい。この複数の切断技術は、一般的に健康な被験者に100〜200 mg以上のサンプルを生成し、中に、運動やその他の介入の試合後に、直前に行うことができます。切開部位の生検後のドレッシング後、被験者は通常、すぐに日常生活の活動を再開し、完全に48〜72時間以内に活発な身体活動に参加することができます。対象は、筋膜の切開部を通って筋肉のヘルニアのリスクを減らすために48時間激しい抵抗運動を避ける必要があります。

筋生検手順上記のように、研究者は、迅速かつ一貫して骨格筋組織サンプルを収集することができる。健康的、思いやりがある被験者での典型的な収量は、3〜4つのクリップが付いているシングルパスで200 mg以上である。手順は、切開の準備のために費やされているそのほとんどが15〜20分を要する。運動系の研究では、筋肉サンプルは、多くの場合、回復中に収集された1つまたは2つのサン?...

Watch this Scientific Journal Video about Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified BergstrÃ¶m Technique at JoVE.com

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&amp;#246;m Technique

The purpose of this video is to present the modified Bergstr&#246;m skeletal muscle biopsy technique on human subjects.

変更されたベルイストローム法を用いたヒト骨格筋生検手順

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

human-skeletal-muscle-biopsy-procedures-using-modified-bergstrm

Research

JoVE Journal

Medicine

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

39.5K ビュー.  Appalacian State University. The purpose of this video is to present the modified Bergström skeletal muscle biopsy technique on human subjects. 

ビデオ: Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

Myo-mechanical Analysis of Isolated Skeletal Muscle

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for the treatment of muscle disease 1,2,3, quantitative methods are needed that measure force generation and fatigability in treated muscle. We describe a detailed approach to evaluating myo-mechanical properties in freshly explanted hindlimb muscle from the mouse. We describe the atraumatic harvest of mouse extensor digitorum longus muscle, mounting the muscle in a muscle strip myograph (Model 820MS; Danish Myo Technology), and the measurement of maximal twitch and tetanic tension, contraction time, and half-relaxation time, using a square pulse stimulator (Model S48; Grass Technologies). Using these measurements, we demonstrate the calculation of specific twitch and tetanic tension normalized to muscle cross-sectional area, the twitch-to-tetanic tension ratio, the force-frequency relationship curve and the low frequency fatigue curve 4. This analysis provides a method for quantitative comparison between therapeutic interventions in mouse models of muscle disease 1,2,3,5, as well as comparison of the effects of genetic modification on muscle function 6,7,8,9.

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for muscle disease, methods are needed to quantitate force generation and fatigability in treated muscle. We detail an approach to evaluating myo-mechanical properties in explanted mouse hindlimb muscle. This analysis provides a robust approach to quantitating the effects of genetic modification on muscle function, as well as comparison of therapies in mouse models of muscle disease.

単離骨格筋のミオ - 機械的分析

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for the treatment of muscle disease 1,2,3, quantitative methods are needed that measure force ...

医学

Skeletal Muscle Gender Dimorphism from Proteomics

Gross contraction in skeletal muscle is primarily determined by a relatively small number of contractile proteins, however this tissue is also remarkably adaptable to environmental factors1 such as hypertrophy by resistance exercise and atrophy by disuse. It thereby exhibits remodeling and adaptations to stressors (heat, ischemia, heavy metals, etc.)2,3. Damage can occur to muscle by a muscle exerting force while lengthening, the so-called eccentric contraction4. The contractile proteins can be damaged in such exertions and need to be repaired, degraded and/or resynthesized; these functions are not part of the contractile proteins, but of other much less abundant proteins in the cell. To determine what subset of proteins is involved in the amelioration of this type of damage, a global proteome must be established prior to exercise5 and then followed subsequent to the exercise to determine the differential protein expression and thereby highlight candidate proteins in the adaptations to damage and its repair. Furthermore, most studies of skeletal muscle have been conducted on the male of the species and hence may not be representative of female muscle. 
In this article we present a method for extracting proteins reproducibly from male and female muscles, and separating them by two-dimensional gel electrophoresis followed by high resolution digital imaging6. This provides a protocol for spots (and subsequently identified proteins) that show a statistically significant (p &lt; 0.05) two-fold increase or decrease, appear or disappear from the control state. These are then excised, digested with trypsin and separated by high-pressure liquid chromatography coupled to a mass spectrometer (LC/MS) for protein identification (LC/MS/MS)5. This methodology (Figure 1) can be used on many tissues with little to no modification (liver, brain, heart etc.).

A straight-forward set of methods to isolate and determine the identity of the most abundant proteins expressed in skeletal muscle. About 800 spots are discerned on a two-dimensional gel from 10 mg muscle; this allows for the determination of gender-specific protein expression. These methods will give equivalent results in most tissues.

プロテオミクスから骨格筋の性別二型

Gross contraction in skeletal muscle is primarily determined by a relatively small number of contractile proteins, however this tissue is also remarkably ...

Skin Punch Biopsy Explant Culture for Derivation of Primary Human Fibroblasts

Tissues and cell lines derived from an individual with disease are ideal sources to study disease-related cellular phenotypes. Patient-derived fibroblasts in this protocol have been successfully used in the derivation of induced pluripotent stem cells to model disease1. Early passages of these fibroblasts can also be used for cell-based functional assays to study specific disease pathways, mechanisms2 and subsequent drug screening approaches. The advantage of the presented protocol over enzymatic procedures are 1) the reproducibility of the technique from small amounts of tissue derived from older patients, e.g. patients affected with Parkinson's disease, 2) the technically simple approach over more challenging methodologies using enzymatic treatments, and 3) the time consideration: this protocol takes 15-20 min and can be performed immediately after biopsy arrival. Enzymatic treatments can take up to 4 hr and have the problems of overdigestion, reduction of cell viability and subsequent attachment of cells when not handled properly. This protocol describes the dissection and preparation of a 4-mm human skin biopsy for derivation of a fibroblast culture and has a very high success rate which is important when dealing with patient-derived tissue samples. In this culture, keratinocytes migrate out of the biopsy tissue within the first week after preparation. Fibroblasts appear 7-10 days after the first outgrowth of keratinocytes. DMEM high glucose media supplemented with 20% FBS favors the growth of fibroblasts over keratinocytes and fibroblasts will overgrow the keratinocytes. After 2 passages keratinocytes have been diluted out resulting in relatively homogenous fibroblast cultures which expresses the fibroblast marker SERPINH1 (HSP-47). Using this approach, 15-20 million fibroblasts can be derived in 4-8 weeks for cell banking. The skin dissection takes about 15-20 min, cells are then monitored once a day under the microscope, and media is changed every 2-3 days after attachment and outgrowth of cells.

The fibroblast explant culture protocol from human skin punch biopsies is a technically robust and simple way to derive skin cells within 4-8 weeks for banking of about 15-20 million cells at a low passage number.

プライマリーヒト線維芽細胞の導出のために皮膚パンチ生検植文化

Tissues and cell lines derived from an individual with disease are ideal sources to study disease-related cellular phenotypes. Patient-derived fibroblasts ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. Although originally developed and used extensively in the rat due to its larger size, the tibial nerve in mice is big enough that it can be easily manipulated with either crush or transection, leaving the peroneal and sural nerve branches of the sciatic nerve intact and thereby preserving their target muscles. Thus, this model offers the advantages of inducing less morbidity and impediment of ambulation than the sciatic nerve transection model and also allows investigators to study the physiologic, cellular and molecular biologic mechanisms regulating the process of muscle atrophy in genetically engineered mice. The tibial nerve supplies the gastrocnemius, soleus and plantaris muscles, so its transection permits the study of denervated skeletal muscle composed of fast twitch type II fibers and/or slow twitch type I fibers. Here we demonstrate the tibial nerve transection model in the C57Black6 mouse. We assess the atrophy of the gastrocnemius muscle, as a representative muscle, at 1, 2, and 4 weeks post-denervation by measuring muscle weights and fiber type specific cross-sectional area on paraffin-embedded histologic sections immunostained for fast twitch myosin.

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of skeletal muscle atrophy. The model surgical protocol is described and demonstrated in C57Black6 mice. &#160;

脛骨神経切断 - マウスにおける脱神経誘発性骨格筋萎縮のために標準化されたモデル

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are available to perform mechanistic in vivo studies. While heart transplantation models using a suture technique were first successfully developed in rats, the translation into an equally widespread used murine equivalent was never achieved due the technical complexity of the microsurgical procedure. In contrast, non-suture cuff techniques, also developed initially in rats, were successfully adapted for use in mice1-3. This technique for revascularization involves two major steps I) everting the recipient vessel over a polyethylene cuff; II) pulling the donor vessel over the formerly everted recipient vessel and holding it in place with a circumferential tie. This ensures a continuity of the endothelial layer, short operating time and very high patency rates4.
Using this technique for vascular anastomosis we performed more than 1,000 cervical heart transplants with an overall success rate of 95%. For arterial inflow the common carotid artery and the proximal aortic arch were anastomosed resulting in a retrograde perfusion of the transplanted heart. For venous drainage the pulmonary artery of the graft was anastomosed with the external jugular vein of the recipient5.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

The murine cervical heart transplantation model is well suited for immunological as well as ischemia reperfusion injury studies. We modified the procedure using a non-suture cuff technique and performed more than 1,000 successful transplants with this approach.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

変更されたカフ法を用いたマウス子宮頸心臓移植モデル

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases in children and adults. These antibodies have been used to guide diagnosis and treatment. Cell-based assays have improved the detection of antibodies in patient serum. They are based on the surface expression of brain antigens on eukaryotic cells, which are then incubated with diluted patient sera followed by fluorochrome-conjugated secondary antibodies. After washing, secondary antibody binding is then analyzed by flow cytometry. Our group has developed a high-throughput flow cytometry live cell-based assay to reliably detect antibodies against specific neurotransmitter receptors. This flow cytometry method is straight forward, quantitative, efficient, and the use of a high-throughput sampler system allows for large patient cohorts to be easily assayed in a short space of time. Additionally, this cell-based assay can be easily adapted to detect antibodies to many different antigenic targets, both from the central nervous system and periphery. Discovering additional novel antibody biomarkers will enable prompt and accurate diagnosis and improve treatment of immune-mediated disorders.

Over the recent years, live cell-based assays have been used successfully to detect antibodies against surface and conformational antigens. Here, we describe a method using high-throughput flow cytometry enabling the analysis of large cohorts of patients. Detection of novel antibodies will improve diagnosis and treatment of immune-mediated disorders.

ハイスループットフローサイトメトリー細胞ベースのアッセイN-メチル-D-アスパラギン酸受容体またはヒト血清中のドーパ​​ミン-2受容体に対する抗体を検出する

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases ...

Preparation and Respirometric Assessment of Mitochondria Isolated from Skeletal Muscle Tissue Obtained by Percutaneous Needle Biopsy

Respirometric profiling of isolated mitochondria is commonly used to investigate electron transport chain function. We describe a method for obtaining samples of human Vastus lateralis, isolating mitochondria from minimal amounts of skeletal muscle tissue, and plate based respirometric profiling using an extracellular flux (XF) analyzer. Comparison of respirometric profiles obtained using 1.0, 2.5 and 5.0 &#956;g of mitochondria indicate that 1.0 &#956;g is sufficient to measure respiration and that 5.0 &#956;g provides most consistent results based on comparison of standard errors. Western blot analysis of isolated mitochondria for mitochondrial marker COX IV and non-mitochondrial tissue marker GAPDH indicate that there is limited non-mitochondrial contamination using this protocol. The ability to study mitochondrial respirometry in as little as 20 mg of muscle tissue allows users to utilize individual biopsies for multiple study endpoints in clinical research projects.

Methods for biopsy of Vastus lateralis, preparation of purified mitochondria, and respirometric profiling are described. The use of small muscle volume makes this technique suitable for clinical research applications.

経皮針生検によって得られた骨格筋組織から単離されたミトコンドリアの調製と呼吸計測評価

Respirometric profiling of isolated mitochondria is commonly used to investigate electron transport chain function. We describe a method for obtaining ...

Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

Percutaneous muscle biopsy using the Weil-Blakesley conchotome is well established in both clinical and research practice. It is a safe, effective and well tolerated technique. The Weil-Blakesley conchotome has a sharp biting tip with a 4 - 6 mm wide hollow. It is inserted through a 5 - 10 mm skin incision and can be maneuvered for controlled tissue penetration. The tip is opened and closed within the tissue and then rotated through 90 -180&#176; to cut the muscle. The amount of muscle obtained following repeated sampling can vary from 20 mg to 290 mg which can be processed for both histology and molecular studies. The wound needs to be kept dry and vigorous physical activity kept to a minimum for approximately 72 hr although normal levels of activity can restart immediately following the procedure. This procedure is safe and effective when close attention is paid to the selection of subjects, full asepsis and post procedure care. &#160;Both right and left vastus lateralis are suitable for biopsy dependent on participant preference.

Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

This video demonstrates the technique of percutaneous muscle biopsy of the human vastus lateralis using the Weil-Blakesley conchotome.

人間<em&gt;外側広筋</emワイル・ブレークスリーConchotomeを使用&gt;骨格筋生検

Percutaneous muscle biopsy using the Weil-Blakesley conchotome is well established in both clinical and research practice. It is a safe, effective and ...

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo and noninvasively in humans via phosphorus-31 magnetic resonance spectroscopy (31PMRS). However, the approach has not been widely adopted in translational and clinical research, with variations in methodology and limited guidance from the literature. Increased optimization, standardization, and dissemination of methods for in vivo 31PMRS would facilitate the development of targeted therapies to improve OXPHOS capacity and could ultimately favorably impact cardiovascular health. 31PMRS produces a noninvasive, in vivo measure of OXPHOS capacity in human skeletal muscle, as opposed to alternative measures obtained from explanted and potentially altered mitochondria via muscle biopsy. It relies upon only modest additional instrumentation beyond what is already in place on magnetic resonance scanners available for clinical and translational research at most institutions. In this work, we outline a method to measure in vivo skeletal muscle OXPHOS. The technique is demonstrated using a 1.5 Tesla whole-body MR scanner equipped with the suitable hardware and software for 31PMRS, and we explain a simple and robust protocol for in-magnet resistive exercise to rapidly fatigue the quadriceps muscle. Reproducibility and feasibility are demonstrated in volunteers as well as subjects over a wide range of functional capacities.

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

This work demonstrates the feasibility of an in vivo phosphorus-31 magnetic resonance spectroscopy (31PMRS) technique to quantify mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity in human skeletal muscle.

リン-31磁気共鳴分光法：測定するためのツール<em&gt;インビボ</emヒト骨格筋における&gt;ミトコンドリア酸化的リン酸化能力

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the availability of the widest range of molecular probes and reagents to perform in vivo as well as in vitro studies. Based on our experience with various murine transplantation models, we developed a heterotopic pancreas transplantation model in mice with the intent to analyze mechanisms underlying severe ischemia reperfusion injury-associated early graft damage. In contrast to previously described techniques using suture techniques, herein we describe a new procedure using a non-suture cuff technique. 
In recent years, we have performed more than 300 pancreas transplantations in mice with an overall success rate of &gt;90%, a success rate never described before in mouse pancreas transplantation. The backbone of this non-suture cuff technique for graft revascularization consists of two major steps: (I) pulling the recipient vessel over a polyethylene/polyamide cuff and fixing it with a circumferential ligature, and (II) placing the donor vessel over the everted recipient vessel and fixing it with a second circumferential ligature. The resultant continuity of the endothelial layer results in less thrombogenic lesions with high patency rates and, finally, high success rates.
In this model, arterial anastomosis is achieved by pulling the abdominal aorta of the donor graft over the everted common carotid artery of the recipient animal. Venous drainage of the graft is achieved by pulling the portal vein of the graft over the everted external jugular vein of the recipient. This manuscript provides details and crucial steps of the organ recovery and organ implantation procedures, which will allow researchers with microsurgical skills to perform the transplantation successfully in their laboratories.

Among abdominal solid organ transplantation, pancreatic grafts are prone to develop severe ischemia reperfusion injury-associated graft damage, leading eventually to early graft loss. This protocol describes a model of murine pancreas transplantation using a non-suture cuff technique, ideally suited for analyzing these early, deleterious damages.