著者らは、その貢献ICRとの間に実施モニタリングを行った数々のEPAの担当者に感謝可能UCMR3、報告されている他のEPA研究の次のリード研究者：ダニエルDahling、アルフレッドデュフール、アンドレイエゴーロフ、スーザンGlassmeyer、ASJA Korajkic、リチャード·リーバーマン、ロバートSafferman、とティム·ウェイド。批判的にこの原稿をレビューするとシャノングリフィンとマイケル·ウェア。著者は、サンプル収集を実証するため、それらのポンプの家の1つの使用のためにインドのヒル水道に感謝。この作品は、USEPAによって審査と出版が承認されましたが、それは必ずしも公式代理店の方針を反映していない場合があります。商標名や商用製品に関する記述は、使用のために承認または推奨するものではありません。

1.予備手続き<ol><li>補足資料に記載されているように、吸気モジュール、カートリッジハウジングモジュールと、放出モジュールからなる、図1に示すように、標準的なフィルター装置を組み立てる。 </li><li>最初の使用の前にサンプリングに使用流量での流量計/積算を校正。最初の使用後にキャリブレーションをチェックし、その後、使用の1ヶ月後。流量校正がどちら最初の使用後、または使用の最初の月の後に変更された場合は補足資料に記載されているように、キャリブレーションチェックの頻度を決定する。 <ol><li>吸気モジュールに放電モジュールを接続し、タップに吸気モジュールを接続します。流量を読み取るための流量計/積算を設定する。完全にタップをオンにして、その後ブロンズグローブバルブを使用して、10リットル/分の流量を調整。流量は10L /分で安定したら、総体積を読み取るために流量計/積算をリセットする。 </li><li>外を配置4 Lに放電モジュールのみましょうか、大きなメスシリンダーと同時にゼロに積算をリセットします。 4-Lマークにおける積算読み取り及びシリンダーに4 Lマークに到達するのに必要な時間を測定する。率を流れるように戻って設定流量計/積算を変更します。 注：流量が9.95以下にLに低下したか、ステップ1.2.2を完了した後に、複数10.05 Lまで増加した場合には、流量が安定しており、繰り返しステップ1.2.2になるまで待ちます。正しく調整メーターは4.0±0.04 Lの積算読書で24±1秒でメスシリンダーに4 Lマークに到達します</li><li>積算読み取り値が3.96未満または以上4.04 Lである場合に、観察された差を調整するために必要な補正係数を算出する。流量計/積算がメスシリンダー上の4 Lの時点で3.9 Lを読み取る場合、補正係数は1.026（3.9÷4）である。フィールドサンプルの所望の体積が300 Lであった場合にこのように、ボリュームは、rに従って収集流量計/積算上のeadingはあるべき300÷1.026 = 292.4 L. </li></ol></li><li>標準のフィルター装置を殺菌し、サンプル収集の準備をします。 <ol><li>いずれかの完全に溶液中にモジュールを浸漬することにより、またはモジュールは、ポンプを使用しても次亜塩素酸ナトリウムを循環させることにより、各使用前に少なくとも30分間、0.525パーセントの次亜塩素酸ナトリウム摂取量とカートリッジハウジングモジュールを滅菌する。無菌のdH 2 Oでモジュールをすすぎ、次いで5分間滅菌試薬グレード水1リットル当たり1 Mチオ硫酸ナトリウムを50 mlを含む溶液中で脱塩素。装置モジュールが無菌アルミ箔で終わるフィルタのサンプリングをカバーする。 </li><li>カートリッジハウジングモジュール無菌的に電気陽性カートリッジフィルターを追加します。 注：カートリッジフィルターが正しくハウジングに装着されていることを確実にするために注意してください。正しく固定フィルタは漏れないと振とう時フィルタは、ハウジング内に移動しません。 APのガスケットroperly座っフィルタはどこにフィルタの連絡先にそれらを示して見えるくぼみを持つことになります。ガスケットは常にフィルターをハウジングから削除された直後にくぼみをチェックする必要があります。 </li><li>サンプルデータシート上のユニークなサンプル数を記録（例えば補足資料を参照）、次に取るか、またはサンプルに関し必要な指示と一緒に、フィルターサンプリング装置とフィールド試料を採取される個々のサンプルデータシートを出荷コレクション（ 例えば 、サンプル量、サンプル位置など ）。 </li></ol></li></ol>サンプリングサイトで試料の収集2.準備<ol><li>コレクションサイトで到着時に手を洗うとサンプル汚染の可能性を最小限に抑えるために手術用手袋を着用。腸や呼吸器症状を経験した場合のサンプルを収集することはありません。頻繁に手袋を変更し、特に水タップと続き可能性のある他のアイテムに触れた後、アミノ化。 </li><li>サンプルデータシートに追跡情報を記録し、関連するサンプル。関連情報は、サイトやサンプル識別、サンプラーの名、および機器のモデルとシリアル番号が含まれています。 </li><li>行に定住したすべての破片をクリアするために2〜3分間蛇口をオンにします。必要であれば、このステップの間に、ドレインに到達するために庭のホースまたは管を使用。 </li><li>サンプリング装置モジュールが接続されている場合は、それらを切断し、滅菌ホイルでカートリッジハウジングモジュールの開放端を保護する。吸気モジュールに放電モジュールを接続し、水道の蛇口の両方に接続します。放電モジュールの端に庭のホースを接続し、1Lのポリプロピレン製容器に自由端を置く。 </li><li>タップの電源をオンにし、装置を介してサンプリングされる水の少なくとも75のLを渡す。 <ol><li>ポリプロピレン容器 - 塩素残油に流れ込む水の上にフラッシュ期間中の水質パラメータを測定し、記録するUAL、pH、温度、濁度。 </li><li>水道の水を切った後は、吸気モジュールから放出モジュールを外してから、カートリッジハウジングモジュールの出口に吸気モジュールの出口と排出モジュールにカートリッジハウジングモジュールを接続する。ゼロに読んで積算をリセットします。 </li></ol></li></ol> 3.フィールドのサンプル採取<ol><li>日時とともに初期積算読書を記録した後、ゆっくりと水栓を開きます。 <ol><li>カートリッジハウジングが直立位置にあることを、それが完全に水で満たされていることを確認。いくつかのハウジングは、充填プロセス中にハウジングから空気を排出するために押すことができるベントボタンを持っている。 </li><li>完全にタップを開きます。ブロンズグローブバルブを用いて10リットル/分の流量を調整した後、初期流量を記録する。 </li></ol></li><li>使用して装置を通って地下水の1800 Lの表面水または1500の300 Lを渡す積算測定値（調整後、必要に応じて）。必要なボリューム前フィルタの目詰まりに到達し、半分以上のボリュームが収集された場合には、利用可能な場合、残りのサンプルを収集するための第二フィルターハウジングモジュールを使用する。 </li><li>サンプル量がサンプリング期間の終わりに近づくにつれて流量を観察して、サンプルタップの水の流れをオフ。最終流量が、日付、時刻、最終積算読み取り、総サンプル体積を記録する。 </li><li>タップからフィルタサンプリング装置を外します。他のモジュールからのカートリッジハウジングモジュールを外します。 <ol><li>逆さフィルタハウジング（s）をオンにし、過剰な水の両方の入口および出口ポートから排出されますそれ以上の水まで流出することを可能にする。 </li><li>直立ハウジングを回して、無菌アルミ箔で各端にクイックコネクトをカバーしています。一つ以上の密封可能なビニール袋にハウジングを置きます。 </li><li>摂取量とdから水を抜くischargeモジュール。一つ以上の密封可能なビニール袋にモジュールを配置します。 </li></ol></li></ol>フィールドサンプルの4出荷<ol><li>絶縁された貯蔵および輸送クーラーにフィルタサンプリング装置モジュールを置きます。 </li><li>サンプルが輸送中に1-10℃の間に残ることを保証するために貯蔵及び輸送クーラーに凍結したアイスパックまたは二重袋詰め氷を追加します。二つの大きなまたは6-8小さな氷のパックは十分なはずです。 </li><li>アイスパックや氷の袋に接触することなく、場所に絶縁された貯蔵および輸送胸に、温度記録装置を配置します。 注：分析実験室ですぐに到着時にカートリッジハウジングと容器の開口部の温度を測定する視覚的な赤外線温度計を使用する場合は、温度記録装置はオプションである。 </li><li>梱包材にボイドスペースを記入し、その後T ON、密封可能なビニール袋に入れて保護されたサンプルのデータシートを配置オペアンプ。それは水の漏れを防止するための絶縁貯蔵および輸送の胸やテープを閉じる。 </li><li>トランスポートまたは分析実験室にサンプルを出荷する。サンプルは、フィールドサンプル収集（ すなわち 、ステップ3.1で記録された時間）の開始後遅くとも24時間よりも分析実験室に到着しないことを確認してください。 </li></ol>

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Microbiol. 75 (8), 2393-2399 (2009).</li><li>Ko, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+electropositive+filtration+for+recovering+norovirus+in+water.">Evaluation of electropositive filtration for recovering norovirus in water.</a> J Water Health. 9 (1), 27-36 (2011).</li><li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+Evidence+of+Norwalk+Virus+Contamination+Levels+on+the+Hands+of+Infected+Individuals.">Laboratory Evidence of Norwalk Virus Contamination Levels on the Hands of Infected Individuals.</a> Appl. Environ. Microbiol. 79 (24), 7875-7881 (2013).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

環境水からウイルスを濃縮するための異なるフィルタタイプは、年26にわたって使用されてきた。現在の方法は、限外濾過膜27、電気陰性フィルタ13,28,29、ガラスウールフィルター23、及び電気陽性フィルタ30を使用する。電気陰性フィルタは長年広く使用されたが、塩の添加前又はサンプリング中にフィールド内の水のpHを調整するための要件は、その有用性を制限する13。フィールドサンプリングのための最も実用的なフィルタの選択は電気陽性フィルターです。これらのフィルタは、高流量で、水の任意の調節なしに大量の水のサンプリングを可能にする。グラスウールフィルタは最も安価であるが、陽性のフィルタよりも遅い流速を有しており、市販されていない。限外濾過は、水質の広い範囲にわたって最高のウイルス回収率を提供するが、装置はsampliために必要ngは、容易に携帯用フィールドれず、サンプルを収集するのに必要な時間は、27ずっと長い。方法は、最近使用現場での調整の必要性を回避するために、電気陰性のフィルタを予め調整することを開発されてきたが、これらは大量の試料28,29を収集するため適用できないかもしれない。 EPAメソッド1615は、酸化アルミニウムナノ繊維または第四級アミンのいずれかからの正電荷を得る陽性カートリッジフィルターを使用する。後者は前者の上の利点は、安価で効率的に自然なpH値30,31の広い範囲の海域からウイルスを収集することである。しかし、各カートリッジのほか、Borchardtらによって使用されるグラスウールフィルターは水23,31,32（Cashdollar、未発表データ）からのエンテロウイルスとノロウイルスの類似の回復を与える。カートリッジフィルターは、サンプルの収集を簡単にするために設計された単純なサンプリング装置内に配置されるとサンプリング中に汚染を減少させる。 大規模研究が複数の分析ラボを使用して実施された場合の標準的な方法は非常に貴重である。 EPAメソッド1615はサンプル収集中または不十分な消毒装置の構成部品からの汚染に起因するこれらの研究 - 偽陽性の結果、およびコンポーネントによってフィルター孔の目詰まりの間に収集されたデータに影響を与えることができる2つの主要なサンプル収集の問題を最小限に抑えるために、標準的な手順とガイダンスを提供しています水がサンプリングされる。 腸内ウイルスが不十分な衛生状態に人から人への普及することができるのと同様に、ウイルスは、汚染された手袋33で不十分洗浄し、手や手からのサンプルに導入することができる。これは、サンプラーは、汚染の可能性のある経路を理解し、サンプリング中に無菌技術を使用することが不可欠である。サンプラーは、手袋は、主にページへの暴露からサンプラーを保護するために使用されていないことを理解すべきである汚染からの装置をrotect。サンプリングと介護の開始が汚染を手袋に手を防ぐために、手袋の着用時に注意が必要前には手を洗浄する必要があります。彼らは、高いレベルでのエンテロウイルスまたはノロウイルスを流してできたように胃腸炎や呼吸器症状とのサンプラーは、サンプルを収集してはならない。 第二に、注意が前回のサンプリングイベントからウイルスのキャリーオーバーを防ぐために注意する必要があります。汚染のこの潜在的な源を最小にするために、方法1615でのサンプリング装置は、入口とカートリッジハウジングモジュールとの間の圧力調整器及び圧力計を含まないことによってICRのものから変更された。イベントをサンプリング中に観察された圧力は常に最大の住宅評価（5インチカートリッジハウジング用など 、125 PSI）を下回っていたので、彼らは消毒が困難であったため、これらのコンポーネントは削除されました。後者の問題は、STで機器ブランク対照を使用することにより実証されたICR 6,20に続くudies。それはICRデータに影響を与えた程度は不明であるが、可能性が小さかった。つだけ偽陽性陰性の性能評価サンプルが研究中に存在した（データは示さず）。さらに、キャリーオーバー汚染の可能性を低減するために、それはまた、入口モジュールチューブが各サンプリング事象後に交換することが推奨される。これは、装置は、ウイルスを接種した品質または性能制御のために使用された場合、適切な消毒を確実にするために特に重要である。殺菌を実行する前に、遊離塩素の濃度は、貯蔵中の任意の損失を測定すべきである。上述の装置の構成の変化に加えて、定期的な装置のブランクは消毒が有効であることを実証するために実行されることが不可欠である。方法1615機器ブランクウイルスシードの制御に使用された後に消毒された装置を用いて行うことが義務付け、それによって簡素前消毒に装置を通ってウイルスシードソリューションをパスする必要がなくなるので、手続き。この濃度は、機器上の任意の実行可能なウイルスを不活性化し、核酸を分解することの両方を必要とされる消毒剤の濃度は、方法1615のための0.525パーセントの次亜塩素酸に増加した。そのため、機器のブランクは、細胞培養および定量PCRアッセイの両方を使用して分析する必要があります。 電気陽性のフィルタのどちらのタイプは、 表1に報告された研究の間に、目詰まりの対象となった。減少したボリュームの試料の未知の数はそのような積算の誤読または別のを満たすために、サンプリングの意図的な早期の停止として、サンプリングによるエラーのためにあったかもしれない特に20 NTU未満の濁度測定値との水域の締め切り、。目詰まりの度合いは、両方のフィルタタイプ及び水質パラメータに依存している。プレフィルタは、改善のいくつかの尺度を提供するが、使用される場合、処理され、分析されるべきである別途電気陽性フィルタから。 UCMR3ための現在の推奨は、試料は、少なくとも半分のボリュームが最初のフィルターを用いて収集することができる場合、2つの酸化アルミニウムナノ繊維ベースのフィルタを使用して、プレフィルターすることなく収集することができるということである。

人間の腸内ウイルスは、消化管内で複製し、糞口経路を通じて広がっている。これらのウイルスは、多くの場合、高濃度1-3に下水に記載されています。彼らは、下水の排水4,5に固執し、表面6,7、地面8-10で、かつ11水を飲んで治療することができます。存在する場合、米国の環境水中のウイルスの濃度は、典型的には直接測定12,13には低すぎる。これはウイルスが大量の水から濃縮されている必要があります。情報収集ルール（ICR）は、米国環境保護庁（USEPA）14が行ったモニタリング中に、感染単位の19.7最確数に全国の0.009の範囲であった大型のユーティリティのソース水中での陽性検体のウイルス濃度（MPN）/ L.陽性サンプルの中央値と平均濃度は、流れストリームからのソース水用0.01 0.03 0.17 MPN / Lであった湖沼や貯水池からのそれらのための0.07 MPN / L、及び地下11（2000年4月25日付けのICR AUX1 18月のAccessデータベースからデータ）を用いてそれらのための0.04から0.74 MPN / Lである。国の地下水のUSEPA研究から陽性サンプルのウイルス濃度は中央値0.13と0.29感染単位/ L 8の平均濃度で0.009から2.12感染単位/ Lの範囲であった。正の地下水試料中のウイルスの濃度は、流動流中のものよりも高かった。これらの研究における地下水を使用して施設の大半は、カルスト領域に位置する帯水層から水を得た。これらには、石灰石と結晶に所在する（破断岩盤）とともに設定が他の設定8,15,16よりも高いウイルス濃度を有する可能性がある。 USEPAウイルス法は、地表水の200 L 300 Lへ（ICR）（1615年法）と地下水17,18の千L 1500 Lへ（ICR）（1615年法）のサンプリングボリュームを指定。しかし、用いて大量の試料は、ほとんどの表面と地下水試料は、ウイルス8,11,19,20について陰性である。 地表水に存在するウイルスは、飲料水の消費者への潜在的な健康リスクをもたらす。表面水処理ルールは、少なくとも4対数によりウイルス濃度を減少させるために、表面の水を使用して、すべての処理プラントを必要とする。でも、4-logの減少で、0.0044 MPN / Lと小さい源水で感染性ウイルス濃度は、平均曝露と治療条件やロタウイルス11,21の用量応答パラメータを仮定して一日あたり1感染につながる可能性があります。未治療の地下水でウイルスからのリスクとは、治療及びウイルスの発生がないためにさらに大きくなる可能性があります。 Borchardtらは、成人における急性胃腸炎の22％および63％までの小児では5年未満が未処理地下水19を使用して、コミュニティで飲料水中のウイルスが原因である可能性がありと推定している。 USEPA Method 1615はBorchardtの調査結果や同僚19,23にフォローアップの国家として未規制汚染物モニタリング規制の第三の監視サイクル（UCMR3）22時のエンテロウイルスとノロウイルスを検出するために開発されました。 USEPA法は、主に、未処理の地下水を使用して、システム内のウイルスを測定するために設計されたが、他の水の行列タイプが含まれるように、より一般的に書かれた。新しい方法は19,23。ICR 17、Borchardt らの方法に基づいて、分子の手順の追加時に使用される前のウイルス法から多くの成分を保存するハイブリッドで、ノロウイルス24のための追加のプライマーセット。本稿の目的は、サンプリング手順及び収集と出荷中にサンプルの完全性を維持するために必要な手順を記述することである。方法全体の評価はCashdollar ら 25に記載されている。このプロトコルは、単純なフィールドをカバーコレクション5ポンプとプレフィルタが不要であり、調整はpHまたは水中の消毒の存在を必要としない場合の表面と接地水のnがサンプリングされる。より複雑なサンプリング要件はFoutがら、17,18に記載されている。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="711">
	<tbody>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:46px;width:215px;">Name of the reagent/Equipment</td>
			<td style="width:99px;">Company</td>
			<td style="width:129px;">Catalogue number</td>
			<td style="width:271px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">1-L polypropylene bottle</td>
			<td style="width:99px;">Nalgene</td>
			<td style="width:129px;">2104-0032</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Aluminum foil squares</td>
			<td style="width:99px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:129px;">06275-40</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Autoclave</td>
			<td style="width:99px;">Steris</td>
			<td style="width:129px;">Amsco Lab Series</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Bubble wrap</td>
			<td style="width:99px;">U.S. Plastics</td>
			<td style="width:129px;">50776</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Closable bag</td>
			<td style="width:99px;">Uline</td>
			<td style="width:129px;">S-12283</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Closable bag</td>
			<td style="width:99px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:129px;">S31798C</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Commercial ice packs</td>
			<td style="width:99px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:129px;">06345-20</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Cool safe box</td>
			<td style="width:99px;">Diversified Biotech</td>
			<td style="width:129px;">CSF-BOX</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Gauze sponge</td>
			<td style="width:99px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:129px;">22-415-469</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Graduated cylinder</td>
			<td style="width:99px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:129px;">06135-90</td>
			<td style="width:271px;">4-L or larger</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Hype Wipe</td>
			<td style="width:99px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:129px;">14-412-56</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">iButtons temperature data logger</td>
			<td style="width:99px;">Maxim</td>
			<td style="width:129px;">DS1921G</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Insulated storage and transport chest</td>
			<td style="width:99px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:129px;">11-676-12</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Packing tape</td>
			<td style="width:99px;">U.S. Plastics</td>
			<td style="width:129px;">50083</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Portable chlorine colorimeter II test kit</td>
			<td style="width:99px;">Hach</td>
			<td style="width:129px;">5870062</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Portable pH and temperature probe</td>
			<td style="width:99px;">Omega</td>
			<td style="width:129px;">PHH-830</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Portable turbidity meter</td>
			<td style="width:99px;">Omega</td>
			<td style="width:129px;">TRB-2020-E</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">PTFE thread tape</td>
			<td style="width:99px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:129px;">08270-34</td>
			<td style="width:271px;">Use on all threaded connections</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Pump, Centrifugal Magnetic Drive</td>
			<td style="width:99px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:129px;">72010-20</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Reduction nipple</td>
			<td style="width:99px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:129px;">06349-87</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Sodium hypochlorite (NaClO)</td>
			<td style="width:99px;"></td>
			<td style="width:129px;"></td>
			<td style="width:271px;">Use locally available household bleach</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Sodium thiosulfate (Na2S2O3)</td>
			<td style="width:99px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:129px;">217247</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Surgical gloves</td>
			<td style="width:99px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:129px;">19-058-800</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;">Waterproof marker</td>
			<td style="width:99px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:129px;">22-290546</td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:215px;"></td>
			<td style="width:99px;"></td>
			<td style="width:129px;"></td>
			<td style="width:271px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:215px;">Media</td>
			<td style="width:99px;">Composition</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="299">
			<td height="299" style="height:299px;width:215px;">0.525% sodium hypochlorite (NaClO)</td>
			<td style="width:99px;">Prepare a 0.525% NaClO solution by diluting household bleach 1:10 in dH2O.&#160; Store 0.525% NaClO solutions for up to 1 week at room temperature.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="240">
			<td height="240" style="height:240px;width:215px;">1 M sodium thiosulfate (Na2S2O3) pentahydrate</td>
			<td style="width:99px;">Prepare a 1 M solution by dissolving 248.2 g of Na2S2O3 in 1 L of dH2O.&#160; Store sodium thiosulfate for up to 6 months at room temperature.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

epa method 1615. measurement of enterovirus and norovirus occurrence in water by culture and rt-qpcr. i. collection of virus samples

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. The standardized sampling component of the method concentrates viruses that may be present in water by passage of a minimum specified volume of water through an electropositive cartridge filter. The minimum specified volumes for surface and finished/ground water are 300 L and 1,500 L, respectively. A major method limitation is the tendency for the filters to clog before meeting the sample volume requirement. Studies using two different, but equivalent, cartridge filter options showed that filter clogging was a problem with 10% of the samples with one of the filter types compared to 6% with the other filter type. Clogging tends to increase with turbidity, but cannot be predicted based on turbidity measurements only. From a cost standpoint one of the filter options is preferable over the other, but the water quality and experience with the water system to be sampled should be taken into consideration in making filter selections.

フィルタの目詰まりが詰まり、フィルタを通る水の流量を減少させる方法1615で発生することができる主要な潜在的な問題である。場合によっては、これは、より大きな流れを可能にするグローブバルブを開くことによって克服することができる。必要な体積が通過した前に、他の例では、フィルタが完全に目詰まりします。 表1は、フィルタの種類、水の種類、及び濁度の関数として減少する容積を有するサンプルの割合を示す。詰まりが逆地表水試料の場合とながら地下水試料について、第四級アミンベースのフィルタを上回る酸化アルミニウムナノ繊維ベースのフィルタと、地下水及び表面の両方水試料で発生した。酸化アルミニウムナノ繊維ベースのフィルタに収集されたサンプルの10％が目詰まりするのに必要な最小限の指定されたボリュームを満たすことができなかった一方、全体的な、第四級アミンベースのフィルタを使用して収集されたサンプルの6％は、体積が欠損していた。属で詰まりlは、濁度を増加したが、異なる構成要素の数が濁度に寄与し、これらのいくつかは、目詰まりを生じない。例えば、ICRの試験中に発生するすべての詰まり事象の43％が（データは示していない）は、2つの河川系に限られていた。 ICRの間に地表水の最小ターゲット·ボリュームは研究中に収集された平均体積は208 L（2000年4月25日付けのICR AUX1 18月のAccessデータベースからのデータ）の中央値の体積とL 217±32だった200 L.だった。したがって、完全なボリュームは、高濁度と多くの水から採取することができる。 濁度が75 NTUを超えていたときICRは、プレフィルターを使用するためにサンプラーを必要としたが、さらにプレフィルターで、75以上の濁りと海域で採取したサンプルの34％がNTU詰まっ。方法1615は50 NTU以上の海域とのプレフィルターの使用をお勧めします。しかし、この方法1615の出版以来、方法に記載されていることに加えて、いくつかの異なるプレフィルタオプションはされているテストした。これらはいずれも、試料容量（データは示さず）において有意な改善をもたらしていない。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/52067/52067fig1.jpg" /> 図1.標準的なフィルタ装置。標準フィルタ装置は、吸気、フィルターハウジング、及び排出モジュール（各モジュールの説明については、補足資料を参照）で構成されています。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52067/52067fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> 総サンプル A </td><td> 欠損サンプル B の数 </td><td> パーセント欠損サンプル </td><td> 濁度（NTU） </td></tr><tr><td colspan="4" fo:padding-left="200px" style="text-align:center"> NanoCeramを使用した地下水<html>フィルタC </td></tr><tr><td> 113 </td><td> 1 </td><td> 1 </td><td> &lt;20 </td></tr><tr><td colspan="4" fo:padding-left="200px" style="text-align:center">地表水NanoCeramフィルターCを使用して</td></tr><tr><td> 83 </td><td> 12 </td><td> 14 </td><td> &lt;20 D </td></tr><tr><td> 8 </td><td> 4 </td><td> 50 </td><td> 20 - &lt;50 </td></tr><tr><td> 6 </td><td> 5 </td><td> 83 </td><td> ≥50 D </td></tr><tr><td colspan="4" fo:padding-left="230px" style="text-align:center">総NanoCeram C </td></tr><tr><td> 210 </td><td> 22 </td><td> 10 </td><td> ≥0 </td></tr><tr><td colspan="4" fo:padding-left="200px" style="text-align:center"> 1MDSフィルタc を用いて地下水</td></tr><tr><td> 374 </td><td> 75 </td><td> 20 </td><td> &lt;20 </td></tr><tr>1MDSフィルタc を用いてセンター&quot;&gt;表面水：EXT-整列</td></tr><tr><td> 269​​3 </td><td> 27 </td><td> 1 E </td><td> &lt;20 E </td></tr><tr><td> 505 </td><td> 36 </td><td> 7 F </td><td> 20 - &lt;50 F </td></tr><tr><td> 122 </td><td> 19 </td><td> 16 E </td><td> 50 - &lt;75 グラム </td></tr><tr><td> 175 </td><td> 60 </td><td> 34 E、F </td><td> ≥75 E、F、G </td></tr><tr><td colspan="4" fo:padding-left="240px" style="text-align:center">総1MDS C </td></tr><tr><td> 3869 </td><td> 217 </td><td> 6 </td><td> ≥0 </td></tr></tbody></table> 表1.フィルタの容量サンプルは、使用可能なボリュームと濁度データから以下の研究から、次のとおりです。1）USEPAのICRスタディ（4/2付けのICR AUX1 18月のAccessデータベースからのデータ2000分の5）、2）USEPA地下水調査8、3）USEPAローレンスとローウェル、マサチューセッツ州の研究（未発表データ）、4）USEPAミシシッピ川の研究（未発表データ）、5）USEPA飲用水処理プラントの研究（未発表データ）、 6）USEPAメソッド1615評価調査25、および7）は、各研究のために指定された水の最小容量の前に目詰まりしたフィルターが収集されたUCMR3監視の最初の3ヶ月（未発表データ）。Bサンプル。これは地表水と地下水のために1500 L、200 Lだったが、USEPA ICRとUSEPAの地下水研究のための1893 Lの下に地下たソース水200 Lであった。完全な最低限指定されたボリュームを収集する機能が有意に異なるされているCサンプルは、マン·ホイットニー順位和検定を使用してNanoCeramと1MDSフィルタ（P = 0.002）を使用し、地表水と地下水の両方全体的な（P &lt;0.001）との間で、各フィルタタイプ（P &lt;0.001）のために収集。D＆＃8211、同じ上付き値を持つGグループ（P &lt;0.05）順位検定で分散のクラスカル·ワリスOneウェイ分析とダンのペアワイズ多重比較手順に従って著しく異なっている。全ての統計的検定のために、従属変数はなく、1.0の最大値、最小値、指定されたボリュームの割合としてフィルタを通過体積である。

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EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

EPA Method 1615 uses an electropositive filter to concentrate enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. This manuscript describes the procedure for collecting samples for Method 1615 analyses.

エンテロウイルスと文化およびRT-QPCRによる水中のノロウイルス発生のEPAメソッド1615測定。ウイルスサンプルのI.コレクション

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. ...

epa-method-1615-measurement-enterovirus-norovirus-occurrence-water

Research

JoVE Journal

Environment

12.0K ビュー.  U.S Environmental Protection Agency. EPA Method 1615 uses an electropositive filter to concentrate enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. This manuscript describes the procedure for collecting samples for Method 1615 analyses.

ビデオ: EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

A Small Volume Procedure for Viral Concentration from Water

Small-scale concentration of viruses (sample volumes 1-10 L, here simulated with spiked 100 ml water samples) is an efficient, cost-effective way to identify optimal parameters for virus concentration. Viruses can be concentrated from water using filtration (electropositive, electronegative, glass wool or size exclusion), followed by secondary concentration with beef extract to release viruses from filter surfaces, and finally tertiary concentration resulting in a 5-30 ml volume virus concentrate. In order to identify optimal concentration procedures, two different electropositive filters were evaluated (a glass/cellulose filter [1MDS] and a nano-alumina/glass filter [NanoCeram]), as well as different secondary concentration techniques; the celite technique where three different celite particle sizes were evaluated (fine, medium and large) followed by comparing this technique with that of the established organic flocculation method. Various elution additives were also evaluated for their ability to enhance the release of adenovirus (AdV) particles from filter surfaces. Fine particle celite recovered similar levels of AdV40 and 41 to that of the established organic flocculation method when viral spikes were added during secondary concentration. The glass/cellulose filter recovered higher levels of both, AdV40 and 41, compared to that of a nano-alumina/glass fiber filter. Although not statistically significant, the addition of 0.1% sodium polyphosphate amended beef extract eluant recovered 10% more AdV particles compared to unamended beef extract.

An approach was developed for identifying optimal viral concentration conditions for small volume water samples using spikes of human adenovirus. The techniques described here are used to identify concentration parameters for other viral targets, and applied to large-scale viral concentration experimentation.

水からのウイルス濃度のため、小容量の手順

Small-scale concentration of viruses (sample volumes 1-10 L, here simulated with spiked 100 ml water samples) is an efficient, cost-effective way to ...

環境学

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. II. Total Culturable Virus Assay

A standardized method is required when national studies on virus occurrence in environmental and drinking waters utilize multiple analytical laboratories. The U.S Environmental Protection Agency&#8217;s (USEPA) Method 1615 was developed with the goal of providing such a standard for measuring Enterovirus and Norovirus in these waters. Virus is concentrated from water using an electropositive filter, eluted from the filter surface with beef extract, and then concentrated further using organic flocculation. Herein we present the protocol from Method 1615 for filter elution, secondary concentration, and measurement of total culturable viruses. A portion of the concentrated eluate from each sample is inoculated onto ten replicate flasks of Buffalo Green Monkey kidney cells. The number of flasks demonstrating cytopathic effects is used to quantify the most probable number (MPN) of infectious units per liter. The method uses a number of quality controls to increase data quality and to reduce interlaboratory and intralaboratory variation. Laboratories must meet defined performance standards. Method 1615 was evaluated by examining virus recovery from reagent-grade and ground waters seeded with Sabin poliovirus type 3. Mean poliovirus recoveries with the total culturable assay were 111% in reagent grade water and 58% in groundwaters.

Here we present a procedure to measure total culturable viruses using the Buffalo Green Monkey kidney cell line. The procedure provides a standardized tool for measuring the occurrence of infectious viruses in environmental and drinking waters.

エンテロウイルスと文化とRT-qPCRにより水中のノロウイルス発生のEPAメソッド1615計測。 II。総培養可能なウイルスアッセイ

A standardized method is required when national studies on virus occurrence in environmental and drinking waters utilize multiple analytical laboratories. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a standardized method for use in multiple analytical laboratories during monitoring period 3 of the Unregulated Contaminant Monitoring Rule. Herein we present the protocol for extraction of viral ribonucleic acid (RNA) from water sample concentrates and for quantitatively measuring enterovirus and norovirus concentrations using reverse transcription-quantitative PCR (RT-qPCR). Virus concentrations for the molecular assay are calculated in terms of genomic copies of viral RNA per liter based upon a standard curve. The method uses a number of quality controls to increase data quality and to reduce interlaboratory and intralaboratory variation. The method has been evaluated by examining virus recovery from ground and reagent grade waters seeded with poliovirus type 3 and murine norovirus as a surrogate for human noroviruses. Mean poliovirus recoveries were 20% in groundwaters and 44% in reagent grade water. Mean murine norovirus recoveries with the RT-qPCR assay were 30% in groundwaters and 4% in reagent grade water.

Here we present a procedure to quantify enterovirus and norovirus in environmental and drinking waters using reverse transcription-quantitative PCR. Mean virus recovery from groundwater with this standardized procedure from EPA Method 1615 was 20% for poliovirus and 30% for murine norovirus.

エンテロウイルスと文化およびRT-qPCRにより水中のノロウイルス発生のEPAメソッド1615測定。パートIII。 RT-qPCRによりウイルス検出

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

Automated Gel Size Selection to Improve the Quality of Next-generation Sequencing Libraries Prepared from Environmental Water Samples

Next-generation sequencing of environmental samples can be challenging because of the variable DNA quantity and quality in these samples. High quality DNA libraries are needed for optimal results from next-generation sequencing. Environmental samples such as water may have low quality and quantities of DNA as well as contaminants that co-precipitate with DNA. The mechanical and enzymatic processes involved in extraction and library preparation may further damage the DNA. Gel size selection enables purification and recovery of DNA fragments of a defined size for sequencing applications. Nevertheless, this task is one of the most time-consuming steps in the DNA library preparation workflow. The protocol described here enables complete automation of agarose gel loading, electrophoretic analysis, and recovery of targeted DNA fragments. 
In this study, we describe a high-throughput approach to prepare high quality DNA libraries from freshwater samples that can be applied also to other environmental samples. We used an indirect approach to concentrate bacterial cells from environmental freshwater samples; DNA was extracted using a commercially available DNA extraction kit, and DNA libraries were prepared using a commercial transposon-based protocol. DNA fragments of 500 to 800 bp were gel size selected using Ranger Technology, an automated electrophoresis workstation. Sequencing of the size-selected DNA libraries demonstrated significant improvements to read length and quality of the sequencing reads.

This manuscript describes an automated gel size selection approach for purifying DNA fragments for next-generation sequencing. The Ranger Technology provides complete automation of the entire process of agarose gel loading, electrophoretic analysis, and recovery of targeted DNA fragments allowing for high-throughput and high quality next-generation sequencing libraries.

環境水試料から調製した次世代シーケンシングライブラリの品質を向上させるために自動化されたゲルサイズの選択

Next-generation sequencing of environmental samples can be challenging because of the variable DNA quantity and quality in these samples. High quality DNA ...

A Simple Method for Automated Solid Phase Extraction of Water Samples for Immunological Analysis of Small Pollutants

A new method for solid phase extraction (SPE) of environmental water samples is proposed. The developed prototype is cost-efficient and user friendly, and enables to perform rapid, automated and simple SPE. The pre-concentrated solution is compatible with analysis by immunoassay, with a low organic solvent content. A method is described for the extraction and pre-concentration of natural hormone 17&#946;-estradiol in 100 ml water samples. Reverse phase SPE is performed with octadecyl-silica sorbent and elution is done with 200 &#181;l of methanol 50% v/v. Eluent is diluted by adding di-water to lower the amount of methanol. After preparing manually the SPE column, the overall procedure is performed automatically within 1 hr. At the end of the process, estradiol concentration is measured by using a commercial enzyme-linked immune-sorbent assay (ELISA). 100-fold pre-concentration is achieved and the methanol content in only 10% v/v. Full recoveries of the molecule are achieved with 1 ng/L spiked de-ionized and synthetic sea water samples.

A protocol for the extraction and pre-concentration of estradiol from water samples by using an automated and miniaturized system is presented.

小さな汚染物質の免疫学的分析のための水試料の自動固相抽出ための簡単​​な方法

A new method for solid phase extraction (SPE) of environmental water samples is proposed. The developed prototype is cost-efficient and user friendly, and ...

VacuSIP, an Improved InEx Method for In Situ Measurement of Particulate and Dissolved Compounds Processed by Active Suspension Feeders

Benthic suspension feeders play essential roles in the functioning of marine ecosystems. By filtering large volumes of water, removing plankton and detritus, and excreting particulate and dissolved compounds, they serve as important agents for benthic-pelagic coupling. Accurately measuring the compounds removed and excreted by suspension feeders (such as sponges, ascidians, polychaetes, bivalves) is crucial for the study of their physiology, metabolism, and feeding ecology, and is fundamental to determine the ecological relevance of the nutrient fluxes mediated by these organisms. However, the assessment of the rate by which suspension feeders process particulate and dissolved compounds in nature is restricted by the limitations of the currently available methodologies. Our goal was to develop a simple, reliable, and non-intrusive method that would allow clean and controlled water sampling from a specific point, such as the excurrent aperture of benthic suspension feeders, in situ. Our method allows simultaneous sampling of inhaled and exhaled water of the studied organism by using minute tubes installed on a custom-built manipulator device and carefully positioned inside the exhalant orifice of the sampled organism. Piercing a septum on the collecting vessel with a syringe needle attached to the distal end of each tube allows the external pressure to slowly force the sampled water into the vessel through the sampling tube. The slow and controlled sampling rate allows integrating the inherent patchiness in the water while ensuring contamination free sampling. We provide recommendations for the most suitable filtering devices, collection vessel, and storing procedures for the analyses of different particulate and dissolved compounds. The VacuSIP system offers a reliable method for the quantification of undisturbed suspension feeder metabolism in natural conditions that is cheap and easy to learn and apply to assess the physiology and functional role of filter feeders in different ecosystems.

VacuSIP, an Improved InEx Method for In Situ Measurement of Particulate and Dissolved Compounds Processed by Active Suspension Feeders

We introduce the VacuSIP, a simple, non-intrusive, and reliable method for clean and accurate point sampling of water. The system was developed and evaluated for the simultaneous collection of the water inhaled and exhaled by benthic suspension feeders in situ, to cleanly measure removal and excretion of particulate and dissolved compounds.

VacuSIP、のための改良INEX方法<em&gt;その場で</em&gt;微粒子と溶解した化合物の測定は、アクティブサスペンションフィーダによって処理します

Benthic suspension feeders play essential roles in the functioning of marine ecosystems. By filtering large volumes of water, removing plankton and ...

Use of a Filter Cartridge for Filtration of Water Samples and Extraction of Environmental DNA

Recent studies demonstrated the use of environmental DNA (eDNA) from fishes to be appropriate as a non-invasive monitoring tool. Most of these studies employed disk fiber filters to collect eDNA from water samples, although a number of microbial studies in aquatic environments have employed filter cartridges, because the cartridge has the advantage of accommodating large water volumes and of overall ease of use. Here we provide a protocol for filtration of water samples using the filter cartridge and extraction of eDNA from the filter without having to cut open the housing. The main portions of this protocol consists of 1) filtration of water samples (water volumes &#8804;4 L or &gt;4 L); (2) extraction of DNA on the filter using a roller shaker placed in a preheated incubator; and (3) purification of DNA using a commercial kit. With the use of this and previously-used protocols, we perform metabarcoding analysis of eDNA taken from a huge aquarium tank (7,500 m3) with known species composition, and show the number of detected species per library from the two protocols as the representative results. This protocol has been developed for metabarcoding eDNA from fishes, but is also applicable to eDNA from other organisms.

We describe a protocol for filtration of water samples with a filter cartridge and extraction of environmental DNA (eDNA) without having to cut open the housing to remove the filter. This protocol is developed for metabarcoding eDNA from fishes, but is also applicable to eDNA from other organisms.

ろ過水のサンプルおよび環境DNAの抽出のためのフィルターカートリッジの使用

Recent studies demonstrated the use of environmental DNA (eDNA) from fishes to be appropriate as a non-invasive monitoring tool. Most of these studies ...

A Lipid Extraction and Analysis Method for Characterizing Soil Microbes in Experiments with Many Samples

Microbial communities are important drivers and regulators of ecosystem processes. To understand how management of ecosystems may affect microbial communities, a relatively precise but effort-intensive technique to assay microbial community composition is phospholipid fatty acid (PLFA) analysis. PLFA was developed to analyze phospholipid biomarkers, which can be used as indicators of microbial biomass and the composition of broad functional groups of fungi and bacteria. It has commonly been used to compare soils under alternative plant communities, ecology, and management regimes. The PLFA method has been shown to be sensitive to detecting shifts in microbial community composition.
An alternative method, fatty acid methyl ester extraction and analysis (MIDI-FA) was developed for rapid extraction of total lipids, without separation of the phospholipid fraction, from pure cultures as a microbial identification technique. This method is rapid but is less suited for soil samples because it lacks an initial step separating soil particles and begins instead with a saponification reaction that likely produces artifacts from the background organic matter in the soil. 
This article describes a method that increases throughput while balancing effort and accuracy for extraction of lipids from the cell membranes of microorganisms for use in characterizing both total lipids and the relative abundance of indicator lipids to determine soil microbial community structure in studies with many samples. The method combines the accuracy achieved through PLFA profiling by extracting and concentrating soil lipids as a first step, and a reduction in effort by saponifying the organic material extracted and processing with the MIDI-FA method as a second step.

The article describes a method that increases throughput while balancing effort and accuracy for extraction of lipids from the cell membranes of microorganisms for use in characterizing both total lipids and the relative abundance of indicator lipids to determine soil microbial community structure in studies with many samples.

多数の試料を用いた実験における土壌微生物の同定のための脂質抽出と分析法

Microbial communities are important drivers and regulators of ecosystem processes. To understand how management of ecosystems may affect microbial ...

Collection and Extraction of Occupational Air Samples for Analysis of Fungal DNA

Traditional methods of identifying fungal exposures in occupational environments, such as culture and microscopy-based approaches, have several limitations that have resulted in the exclusion of many species. Advances in the field over the last two decades have led occupational health researchers to turn to molecular-based approaches for identifying fungal hazards. These methods have resulted in the detection of many species within indoor and occupational environments that have not been detected using traditional methods. This protocol details an approach for determining fungal diversity within air samples through genomic DNA extraction, amplification, sequencing, and taxonomic identification of fungal internal transcribed spacer (ITS) regions. ITS sequencing results in the detection of many fungal species that are either not detected or difficult to identify to species level using culture or microscopy. While these methods do not provide quantitative measures of fungal burden, they offer a new approach to hazard identification and can be used to determine overall species richness and diversity within an occupational environment.

Determining the fungal diversity within an environment is a method utilized in occupational health studies to identify health hazards. This protocol describes DNA extraction from occupational air samples for amplification and sequencing of fungal ITS regions. This approach detects many fungal species that can be overlooked by traditional assessment methods.

コレクションと真菌 DNA の分析のための産業大気サンプルの抽出

Traditional methods of identifying fungal exposures in occupational environments, such as culture and microscopy-based approaches, have several ...

Optimized Procedure for Determining the Adsorption of Phosphonates onto Granular Ferric Hydroxide using a Miniaturized Phosphorus Determination Method

This paper introduces a procedure to investigate the adsorption of phosphonates onto iron-containing filter materials, particularly granular ferric hydroxide (GFH), with little effort and high reliability. The phosphonate, e.g., nitrilotrimethylphosphonic acid (NTMP), is brought into contact with the GFH in a rotator in a solution buffered by an organic acid (e.g., acetic acid) or Good buffer (e.g., 2-(N-morpholino)ethanesulfonic acid) [MES] and N-cyclohexyl-2-hydroxyl-3-aminopropanesulfonic acid [CAPSO]) in a concentration of 10 mM for a specific time in 50 mL centrifuge tubes. Subsequently, after membrane filtration (0.45 &#181;m pore size), the total phosphorus (total P) concentration is measured using a specifically developed determination method (ISOmini). This method is a modification and simplification of the ISO 6878 method: a 4 mL sample is mixed with H2SO4 and K2S2O8 in a screw cap vial, heated to 148-150 &#176;C for 1 h and then mixed with NaOH, ascorbic acid and acidified molybdate with antimony(III) (final volume of 10 mL) to produce a blue complex. The color intensity, which is linearly proportional to the phosphorus concentration, is measured spectrophotometrically (880 nm). It is demonstrated that the buffer concentration used has no significant effect on the adsorption of phosphonate between pH 4 and 12. The buffers, therefore, do not compete with the phosphonate for adsorption sites. Furthermore, the relatively high concentration of the buffer requires a higher dosage concentration of oxidizing agent (K2S2O8) for digestion than that specified in ISO 6878, which, together with the NaOH dosage, is matched to each buffer. Despite the simplification, the ISOmini method does not lose any of its accuracy compared to the standardized method.

This paper introduces a procedure to investigate the adsorption of phosphonates onto iron-containing filter materials, particularly granular ferric hydroxide, with little effort and high reliability. In a buffered solution, the phosphonate is brought into contact with the adsorbent using a rotator and then analyzed via a miniaturized phosphorus determination method.

最適化された小型リン定量法を用いた粒状水酸化第二鉄に酸の吸着を確認する手順

This paper introduces a procedure to investigate the adsorption of phosphonates onto iron-containing filter materials, particularly granular ferric ...