Edith Suss-Toby is thanked for her assistance in the time-lapse microscopy and image analysis. Nofar Rada is thanked for the artistic work.

6週齢の雌C57BL / CJマウス（ハーラン、エルサレム、イスラエル）の四は、実験動物管理仕様の評価と認定のための協会によると、実験に使用しました。全ての実験手順は、施設内動物管理使用委員会と農業の規制の部門に合わせて行われました。 1.収穫脊髄<ol><li> CO 2チャンバーを用いて、マウスを安楽死させます。それが剪断力に起因する神経節根を損傷する可能性がありますように頸椎脱臼を避けてください。ここで上からは、無菌状態下にあるすべての手順を実行します。 </li><li> 70％エタノールで動物を下に浸します。このステップは、殺菌のためと内臓を通じてドラッグから髪を防止するために重要です。 </li><li>エタノールから乾燥するためにマウスを残します。神経毒性に起因する内臓とエタノールの任意の接触を防ぎます。 </li><li>マウスを乾燥させた後、腹臥位でピンを使用して、それを配置（下向き）。各後肢および前肢のピンを配置します。 </li><li>鉗子を使用して、腰椎の後方の首からcraniocaudally伸びる正中切開を行います。次に、ピンセットを用いて、左右の皮膚フラップを上げ、皮下組織を露出させます。 </li><li>頭頸接合部に到達するまで、マウスの頭蓋骨を触診します。重い鉗子を使用して、頭頸接合部（ 第 7頸椎）で子宮頸部筋肉や背骨を切断動物に対して垂直なハサミを使用して。尾側脊椎を解剖し、腰椎レベル（後肢レベル）に到達するまで、重い鉗子で背骨を切り出します。 </li><li>重い鉗子を使用して、腰椎レベル（ 第 5腰椎）での完全な尾切断を実行します。 </li><li> （フェイスアップ）、マウスをロールオーバー。 DRGは、子宮頸部の下側の椎骨レベルから抽出されていないため、切開部をカバーする必要はありません。 </li><li>撤回、腹部に首から正中線で切り倒し皮膚は横方向にしてから腹膜を開くためにカット。 </li><li> 一括腹膜内部の内臓（肝臓、脾臓、膵臓、胃、および腸）を取り外します。次に、後腹膜臓器（ すなわち 、腎臓、膵臓）を削除。頭蓋は、胸壁を開きます。 </li><li>鉗子や外科用メスを使用して、左右対称に離れて脊柱からリブの5ミリメートルを残して、リブをカット。この時点で、脊柱は、身体の残りの部分から分離されています。 </li><li>二回の冷（4°C）新鮮なリン酸緩衝生理食塩水（PBS）で血液から脊柱を洗ってください。 </li></ol> 2.分離後根神経節（DRG） <ol><li> 4Xの倍率で実体顕微鏡を使用してください。 </li><li>非接着性の非吸収プラットフォーム（Telfa /ナイロン）での背骨の位置を決めます。同じ頭尾の向きで脊椎表向きに置きます。 </li><li>任意の脊椎筋肉や結合組織を除去します。彼らのような神経のためのランドマークとしてリブを使用してください背骨を残します。リブはまた、手術器具から神経を保護します。 DRGは、椎骨の頚椎、胸椎、腰椎のサイトに置かれています。 </li><li>次に、はさみを使用すると、正中線で椎体をカットし、椎体の穏やかな横方向の後退により、脊髄およびDRGの根を公開します。 </li><li>肋間空間では、DRGに横リブに沿って内側に末梢神経に従ってください。 </li><li> DRGを識別します。これは、神経の上に横たわる「目玉焼き」の黄身のように見えます。 </li><li>神経節に神経遠位2-3ミリ残しDRGに肋間神経末端をカットし、後退のために使用されます。この「テール」は、収穫後に削除されます。 </li><li>ピンセットを用いて神経をつかみます。 DRG本体自体をつまんすると、神経細胞の損傷を引き起こし、避けるべきです。 </li><li>その前方および後方根を経由して、脊髄への取り付けに沿って近位にDRGに近づきます。 </li><li> EFを引っ張ることによって、DRGに穏やかな後退を適用しますferent神経（肋間神経切り株）は、横方向、およびDRGに近い前方および後方根をカット。 </li><li> 10％ウシ胎児血清（FCS）を補充した新鮮な氷冷DMEM、1％ペニシリン - ストレプトマイシン、1％非必須アミノ酸、1％ピルビン酸ナトリウムを充填した35 mmのペトリ皿にDRGを保ちます。 </li></ol>ペトリ皿に3注入<ol><li> ECMの凝固を防ぐために、予め冷却したピペットチップを使用して、氷の上で次の手順を実行します。 </li><li> 2〜4倍の倍率で実体顕微鏡下では、紙のグリッド上の35ミリメートルのガラスボトムシャーレを置きます。 重要：液体状態にECMを維持するために氷の上で作業してください。グリッドの中心に成長因子枯渇ECMの1ミリメートルの直径のスポット（約20μl）を作成します。 </li><li>直接可視化の下では、皿の底に近いECMスポットの中心にDRGを配置します。 注意：このプロトコルで使用される癌細胞であるマウスの膵臓癌細胞（KPC）establis他の場所で19説明したようにKPCマウスから新たに単離された腫瘍標本からHED。 </li><li>コンフルエント培養物から収穫40,000癌細胞は、PBSで一度洗って、そして氷上で40μlのECMで再懸濁します。 </li><li> DRGから各方向に500μmで実体顕微鏡の尺度を使用して、グリッドの直接可視化の下で。この時点で、ゆっくりと10,000細胞/10μlのECMをシード。行列の行列や剥離を自分の広がりを避け、皿底に近い細胞を注入するために2-10μlの予冷チップを使用してください。 （ 図1）。 </li><li>固化する10〜15分間層流フード内で皿を残します。 ECMの乾燥を避けます。 </li><li>ゆっくりとプレートの側壁に対して、前述したように調製し、DMEMを追加します。 ECM（約2ml）をカバーするのに十分なメディアを追加します。 </li><li>バック37℃のインキュベーターに皿を置きます。 </li><li>次の日に新鮮な培地で培地を交換してください。 </li><li> 2日ごとに培地を交換してください。&lt;/李&gt; </ol> 4.データ収集、タイムラプスビデオ顕微鏡<ol><li>移植後7日目に、タイムラプス顕微鏡用の皿を取ります。特定の細胞が原因で高速に移行する以前の取得を必要とするかもしれないことに注意してください。 </li><li>ライブイメージングの間、37±0.1℃、5％CO 2の平均温度で閉じた環境で皿を置きます。 </li><li>顕微鏡上に配置された電荷結合素子カメラを用いて細胞を記録します。 </li><li> 3〜6個の異なる細胞から細胞移動を追跡するために最大72時間、デジタル画像ごとに10分を取ります。 </li><li> 24時間後に培地を交換してください。 </li><li>顕微鏡ソフトウェアを使用してデータ収集及び単純な分析を行います。 </li></ol> 5.データ解析<ol><li>より高度なアプリケーション（2Dまたは3Dで、すなわち 、細胞トラッキング）について（そのようなIMARIS 4Dなど）特殊なソフトウェアを使用しています。注：このソフトウェアは、セルのxy座標を決定任意のは、運動の原点からの距離、および速度とともに、時間を与えられました。 </li><li> 10分間隔で、その後の位置の間の移動距離を測定することによって、平均速度を計算します。神経突起からの細胞フロントの距離であり、DRGに向かって細胞の一方向の動きを説明するフォワード移行指数（FMI）を計算します。 </li></ol>

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	<li>Carter, R. L., Foster, C. S., Dinsdale, E. A., Pittam, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perineural+spread+by+squamous+carcinomas+of+the+head+and+neck,+a+morphological+study+using+antiaxonal+and+antimyelin+monoclonal+antibodies.">Perineural spread by squamous carcinomas of the head and neck, a morphological study using antiaxonal and antimyelin monoclonal antibodies.</a> J Clin Pathol. 36, 269-275 (1983).</li><li>Beard, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perineural+invasion+is+associated+with+increased+relapse+after+external+beam+radiotherapy+for+men+with+low-risk+prostate+cancer+and+may+be+a+marker+for+occult,+high-grade+cancer.">Perineural invasion is associated with increased relapse after external beam radiotherapy for men with low-risk prostate cancer and may be a marker for occult, high-grade cancer.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 58, 19-24 (2004).</li><li>Maru, N., Ohori, M., Kattan, M. W., Scardino, P. T., Wheeler, T. 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E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer-related+axonogenesis+and+neurogenesis+in+prostate+cancer.">Cancer-related axonogenesis and neurogenesis in prostate cancer.</a> Clin Cancer Res. 14, 7593-7603 (2008).</li><li>Ayala, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+antiapoptotic+paracrine+loop+in+perineural+invasion+of+prostatic+carcinoma.">Stromal antiapoptotic paracrine loop in perineural invasion of prostatic carcinoma.</a> Cancer Res. 66, 5159-5164 (2006).</li><li>Ceyhan, G. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+invasion+in+pancreatic+cancer,+a+mutual+tropism+between+neurons+and+cancer+cells.">Neural invasion in pancreatic cancer, a mutual tropism between neurons and cancer cells.</a> Biochem Biophys Res Commun. 374, 442-447 (2008).</li><li>Bapat, A. A., Hostetter, G., Von Hoff, D. D., Han, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perineural+invasion+and+associated+pain+in+pancreatic+cancer.">Perineural invasion and associated pain in pancreatic cancer.</a> Nat Rev Cancer. 11, 695-707 (2011).</li><li>Ketterer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reverse+transcription-PCR+analysis+of+laser-captured+cells+points+to+potential+paracrine+and+autocrine+actions+of+neurotrophins+in+pancreatic+cancer.">Reverse transcription-PCR analysis of laser-captured cells points to potential paracrine and autocrine actions of neurotrophins in pancreatic cancer.</a> Clin Cancer Res. 9, 5127-5136 (2003).</li><li>Gil, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nerve-sparing+therapy+with+oncolytic+herpes+virus+for+cancers+with+neural+invasion.">Nerve-sparing therapy with oncolytic herpes virus for cancers with neural invasion.</a> Clin Cancer Res. 13, 6479-6485 (2007).</li><li>Gil, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paracrine+regulation+of+pancreatic+cancer+cell+invasion+by+peripheral+nerves.">Paracrine regulation of pancreatic cancer cell invasion by peripheral nerves.</a> J Natl Cancer Inst. 102, 107-118 (2010).</li><li>Weizman, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages+mediate+gemcitabine+resistance+of+pancreatic+adenocarcinoma+by+upregulating+cytidinedeaminase.">Macrophages mediate gemcitabine resistance of pancreatic adenocarcinoma by upregulating cytidinedeaminase.</a> Oncogene. 33, 3812-3819 (2014).</li></ol>

This research was supported by the ICRF Barbara S. Goodman endowed research career development award (2011-601-BGPC) and a grant from the US-Israel Binational Science Foundation. No other financial disclosures from the authors are to be made.

この記事では、神経ニッチ、DRGモデルにおける癌微小環境を再現するin vitroモデルを提示します。ビデオは、マウスにおけるDRG、その抽出、およびECMで最終的に、その培養として、解剖学的ランドマークを認識することから始めて、すべての手順を示しています。共培養癌細胞と一緒にDRGにも提示されています。 in vitroでの神経周囲ニッチ微小環境を研究するためのこのモデル?...

直接浸潤、リンパ節転移、および造血スプレッド：固形腫瘍は、主に次の3通りの方法で広めます。しかし、頻繁に神経に沿って、普及を無視して、がんの広がりの第4の手段があります。癌性神経浸潤（CNI）は、特に頭頸部の癌において、前立腺1 2、3及び膵臓癌の広がりの周知の経路である。4-8 CNIは、先頭、膵臓腺癌を有する個体の80％以上で起こります後腹膜腫瘍を腹腔神経節神経を介して広がります。これらの神経向性癌細胞は、中枢神経系（CNS）に向かって神経に沿って一方向に移行するためのユニークな能力を有する。9この知見は、神経周囲の微小環境は、腫瘍細胞によって利用され得ることを示唆している悪性の増殖を支持する因子を提供します。 CNIの研究のためのいくつかのin vitroモデルの一つは、後根神経節（DRG）/癌細胞モデルです。このモッズELが頻繁に神経間質細胞と癌細胞との間のパラクリン相互作用を研究するために使用される。10-18このモデルでは、マウスまたはヒトの癌細胞株は、新たに解離し、培養DRG調製物に隣接する細胞外マトリックス（ECM）中で増殖させます。 このビデオの記事では、膵管腺癌におけるインビトロCNIのアプリケーションを示しています。

<table><tbody><tr><td>&lt;strong&gt;Equipment:&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Operating microscope</td><td>Leica</td><td>M205</td><td></td></tr><tr><td>Time Lapse System</td><td>Zeiss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Forceps</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F4142&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Surgical blade</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z309036</td><td></td></tr><tr><td>Scissors</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S3271</td><td></td></tr><tr><td>35 mm Petri dishes, glass bottom</td><td>de groot</td><td>60-627860</td><td></td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;Name&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Company&amp;nbsp;&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Catalog Number&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt;Comments&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>&lt;strong&gt;Materials:&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>70% ethanol</td><td>Sigma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cold PBS</td><td>Biological industries</td><td>02-023-1A</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Biological industries</td><td>01-055-1A</td><td></td></tr><tr><td>FCS</td><td>Rhenium</td><td>10108165</td><td></td></tr><tr><td>Penicillin and streptomycin</td><td>Biological industries</td><td>01-031-1B</td><td></td></tr><tr><td>Sodium Pyruvate</td><td>Biological industries</td><td>03-042-1B</td><td></td></tr><tr><td>L-Glutamine</td><td>Biological industries</td><td>03-020-1B</td><td></td></tr><tr><td>Growth factor-depleted matrigel</td><td>Trevigen</td><td>3433-005-01</td><td></td></tr></tbody></table>

in vitro modeling of cancerous neural invasion: the dorsal root ganglion model

One way that solid tumors disseminate is through neural invasion. This route is well-known in cancers of the head and neck, prostate, and pancreas. These neurotropic cancer cells have a unique ability to migrate unidirectionally along nerves towards the central nervous system (CNS). The dorsal root ganglia (DRG)/cancer cell model is a three dimensional (3D) in vitro model frequently used for studying the interaction between neural stroma and cancer cells. In this model, mouse or human cancer cell lines are grown in ECM adjacent to preparations of freshly dissociated cultured DRG. In this article, the DRG isolation protocol from mice, and implantation in petri dishes for co-culturing with pancreatic cancer cells are demonstrated. Five days after implantation, the cancer cells made contact with the DRG neurites. Later, these cells formed bridgeheads to facilitate more extensive polarized, neurotropic migration of cancer cells.

<html>ビデオ顕微鏡画像を使用して、DRGは、癌細胞がDRGに向かってそれらのコロニーから離れて移行中に注入した後、神経突起を5~7日間発芽分かります。移植後7日目では、癌細胞は神経突起（ 図2）と接触します。 プロトコルで使用される膵臓癌細胞の前方移動指数は、他の細胞株（QLL2、B16F）（ <strong...

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In Vitro Modeling of Cancerous Neural Invasion: The Dorsal Root Ganglion Model

This video article shows the use of the dorsal root ganglia (DRG)/cancer cell model in pancreatic ductal adenocarcinoma.

後根神経節モデル：癌性神経浸潤のin vitroモデルでは

One way that solid tumors disseminate is through neural invasion. This route is well-known in cancers of the head and neck, prostate, and pancreas. These ...

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

In Vitro Modeling of Cancerous Neural Invasion: The Dorsal Root Ganglion Model

9.0K ビュー.  Rambam Medical Healthcare Campus. This video article shows the use of the dorsal root ganglia (DRG)/cancer cell model in pancreatic ductal adenocarcinoma.

ビデオ: In Vitro Modeling of Cancerous Neural Invasion: The Dorsal Root Ganglion Model

A Model for Perineural Invasion in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

Perineural invasion (PNI) is found in approximately 40% of head and neck squamous cell carcinomas (HNSCC). Despite multimodal treatment with surgery, radiation, and chemotherapy, locoregional recurrences and distant metastases occur at higher rates, and overall survival is decreased by 40% compared to HNSCC without PNI. In vitro studies of the pathways involved in HNSCC PNI have historically been challenging given the lack of a consistent, reproducible assay. Described here is the adaptation of the dorsal root ganglion (DRG) assay for the examination of PNI in HNSCC. In this model, DRG are harvested from the spinal column of a sacrificed nude mouse and placed within a semisolid matrix. Over the subsequent days, neurites are generated and grow in a radial pattern from the cell bodies of the DRG. HNSCC cell lines are then placed peripherally around the matrix and invade preferentially along the neurites toward the DRG. This method allows for rapid evaluation of multiple treatment conditions, with very high assay success rates and reproducibility.

Perineural invasion (PNI) is a common feature of head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC), conferring lower survival rates. Its mechanisms are poorly understood. Utilizing neurites generated from murine dorsal root ganglia confined to a semisolid matrix, the pathways involved in the PNI of HNSCC cell lines can be investigated.

頭頸部扁平上皮癌における神経周囲の浸潤のためのモデル

Perineural invasion (PNI) is found in approximately 40% of head and neck squamous cell carcinomas (HNSCC). Despite multimodal treatment with surgery, ...

がん研究

An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion

Cancer cells invade nerves through a process termed perineural invasion (PNI), in which cancer cells proliferate and migrate in the nerve microenvironment. This type of invasion is exhibited by a variety of cancer types, and very frequently is found in pancreatic cancer. The microscopic size of nerve fibers within mouse pancreas renders the study of PNI difficult in orthotopic murine models. Here, we describe a heterotopic in vivo model of PNI, where we inject syngeneic pancreatic cancer cell line Panc02-H7 into the murine sciatic nerve. In this model, sciatic nerves of anesthetized mice are exposed and injected with cancer cells. The cancer cells invade in the nerves proximally toward the spinal cord from the point of injection. The invaded sciatic nerves are then extracted and processed with OCT for frozen sectioning. H&amp;E and immunofluorescence staining of these sections allow quantification of both the degree of invasion and changes in protein expression. This model can be applied to a variety of studies on PNI given its versatility. Using mice with different genetic modifications and/or different types of cancer cells allows for investigation of the cellular and molecular mechanisms of PNI and for different cancer types. Furthermore, the effects of therapeutic agents on nerve invasion can be studied by applying treatment to these mice.

An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion

We describe an in vivo murine model of perineural invasion by injecting syngeneic pancreatic cancer cells into the sciatic nerve. The model allows for quantification of the extent of nerve invasion, and supports investigation of the cellular and molecular mechanisms of perineural invasion.

神経周囲浸潤のIn Vivoマウスの坐骨神経モデル

Cancer cells invade nerves through a process termed perineural invasion (PNI), in which cancer cells proliferate and migrate in the nerve ...

Dorsal Root Ganglion Injection and Dorsal Root Crush Injury as a Model for Sensory Axon Regeneration

Achieving axon regeneration after nervous system injury is a challenging task. As different parts of the central nervous system (CNS) differ from each other anatomically, it is important to identify an appropriate model to use for the study of axon regeneration. By using a suitable model, we can formulate a specific treatment based on the severity of injury, the neuronal cell type of interest, and the desired spinal tract for assessing regeneration. Within the sensory pathway, DRG neurons are responsible for relaying sensory information from the periphery to the CNS. We present here a protocol that uses a DRG injection with a viral vector and a concurrent dorsal root crush injury in the lower cervical spinal cord of an adult rat as a model to study sensory axon regeneration. As demonstrated using a control virus, AAV5-GFP, we show the effectiveness of a direct DRG injection in transducing DRG neurons and tracing sensory axons into the spinal cord. We also show the effectiveness of the dorsal root crush injury in denervating the forepaw as an injury model for evaluating axon regeneration. Despite the requirement for specialized training to perform this invasive surgical procedure, the protocol is flexible, and potential users can modify many parts to accommodate their experimental requirements. Importantly, it can serve as a foundation for those in search of a suitable animal model for their studies. We believe that this article will help new users to learn the procedure in a very efficient and effective manner.

This protocol presents the use of a dorsal root ganglion (DRG) injection with a viral vector and a concurrent dorsal root crush injury in an adult rat as a model to study sensory axon regeneration. This model is suitable for investigating the use of gene therapy to promote sensory axon regeneration.

後根神経節インジェクションおよび後根感覚軸索再生のためのモデルとして傷害をつぶします

Achieving axon regeneration after nervous system injury is a challenging task. As different parts of the central nervous system (CNS) differ from each ...

神経科学

The Chick Chorioallantoic Membrane In Vivo Model to Assess Perineural Invasion in Head and Neck Cancer

Perineural invasion is a phenotype in which cancer surrounds or invades the nerves. It is associated with poor clinical outcome for head and neck squamous cell carcinoma and other cancers. Mechanistic studies have shown that the molecular crosstalk between nerves and tumor cells occurs prior to physical interaction. There are only a few in vivo models to study perineural invasion, especially to investigate early progression, before physical nerve-tumor interactions occur. The chick chorioallantoic membrane model has been used to study cancer invasion, because the basement membrane of the chorionic epithelium mimics that of human epithelial tissue. Here we repurposed the chick chorioallantoic membrane model to investigate perineural invasion, grafting rat dorsal root ganglia and human head and neck squamous cell carcinoma cells onto the chorionic epithelium. We have demonstrated how this model can be useful to evaluate the ability of cancer cells to invade neural tissue in vivo.&#160;

The Chick Chorioallantoic Membrane In Vivo Model to Assess Perineural Invasion in Head and Neck Cancer

Perineural invasion is an aggressive phenotype for head and neck squamous cell carcinomas and other tumors. The chick chorioallantoic membrane model has been used for studying angiogenesis, cancer invasion, and metastasis. Here we demonstrate how this model can be utilized to assess perineural invasion in vivo.

頭頸部癌のペリオラル侵食を評価する生体内モデルにおけるひよこチョリオアラントIC膜

Perineural invasion is a phenotype in which cancer surrounds or invades the nerves. It is associated with poor clinical outcome for head and neck squamous ...

医学

DRG培養における神経過敏症の研究のための高度なIn Vitroモデル

Harvesting, Embedding, and Culturing Dorsal Root Ganglia in Multi-compartment Devices to Study Peripheral Neuronal Features

The most common peripheral neuronal feature of pain is a lowered stimulation threshold or hypersensitivity of terminal nerves from the dorsal root ganglia (DRG). One proposed cause of this hypersensitivity is associated with the interaction between immune cells in the peripheral tissue and neurons. In vitro models have provided foundational knowledge in understanding how these mechanisms result in nociceptor hypersensitivity. However, in vitro models face the challenge of translating efficacy to humans. To address this challenge, a physiologically and anatomically relevant in vitro model has been developed for the culture of intact dorsal root ganglia (DRGs) in three isolated compartments in a 48-well plate. Primary DRGs are harvested from adult Sprague Dawley rats after humane euthanasia. Excess nerve roots are trimmed, and the DRG is cut into appropriate sizes for culture. DRGs are then grown in natural hydrogels, enabling robust growth in all compartments. This multi-compartment system offers anatomically relevant isolation of the DRG cell bodies from neurites, physiologically relevant cell types, and mechanical properties to study the interactions between neural and immune cells. Thus, this culture platform provides a valuable tool for investigating treatment isolation strategies, ultimately leading to an improved screening approach for predicting pain.

著者スポットライト:慢性疼痛治療の有効性を高めるためのInvitroおよびInvivoモデル(英語)

This protocol provides a technique to harvest and culture explanted dorsal root ganglion (DRG) from adult Sprague Dawley rats in a multi-compartment (MC) device.

末梢神経細胞の特徴を研究するためのマルチコンパートメントデバイスにおける後根神経節の採取、埋め込み、および培養

The most common peripheral neuronal feature of pain is a lowered stimulation threshold or hypersensitivity of terminal nerves from the dorsal root ganglia ...

生物工学

Establishing a Three-dimensional Co-culture Model of Murine Dorsal Root Ganglia and Cancer Cells: An In Vitro Model to Study Perineural Cancer Cell Invasion

Source: Huyett, P. et al. <a href="https://www.jove.com/video/55043" target="_blank">A Model for Perineural Invasion in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma.</a> J. Vis. Exp. (2017)
In this video, we demonstrate the procedure for developing an in vitro perineural cancer cell invasion model by co-culturing mouse dorsal root ganglion and neurotropic cancer cells. The model can be utilized to conduct cancer assays, producing rapid and reproducible results.

マウス背根神経節とがん細胞の三次元共培養モデルの確立:神経周囲がん細胞の浸潤を研究するためのインビトロモデル

Source: Huyett, P. et al. A Model for Perineural Invasion in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma. J. Vis. Exp. (2017)
In this video, we demonstrate the ...

JoVE Encyclopedia of Experiments

頭頸部がん

アッセイと技術

Murine Perineural Invasion Model: Generating an In Vivo Model to Simulate Perineural Invasion in Mouse Sciatic Nerve

Source: Deborde, S. et al. <a href="https://www.jove.com/video/56857" target="_blank">An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion.</a> J. Vis. Exp. (2018)
In this video, we develop an in vivo mouse model for perineural invasion by injecting pancreatic cancer cells into the sciatic nerve. This model helps quantify the extent of invasion and study the interactions between cancer cells and nerves.

マウス神経周囲浸潤モデル:マウス坐骨神経における神経周囲浸潤をシミュレートするためのIn vivoモデルの生成

Source: Deborde, S. et al. An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion. J. Vis. Exp. (2018)
In this video, we develop an in vivo mouse ...

神経系のがん

体内研究

Modeling Cancerous Neural Invasion In Vitro: A Method to Co-culture Dorsal Root Ganglia and Cancer Cells

Source: Na&#39;ara, S. et al. <a href="https://www.jove.com/video/52990" target="_blank">In Vitro Modeling of Cancerous Neural Invasion: The Dorsal Root Ganglion Model.</a> J. Vis. Exp. (2016)
In this video, we demonstrate an in vitro method for co-culturing DRG and cancer cells to study neurotropism and neural invasion.

In vitroでの癌性神経浸潤のモデリング:背根神経節と癌細胞を共培養する方法

Source: Na&#39;ara, S. et al. In Vitro Modeling of Cancerous Neural Invasion: The Dorsal Root Ganglion Model. J. Vis. Exp. (2016)
In this video, we ...

後根神経節モデル：癌性神経浸潤のin vitroモデルでは

要約

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