The authors have no acknowledgements.

これらのプロトコルは、当院の人間研究倫理委員会のガイドラインに従ってください。 1.従来の角膜コラーゲンCXL（C-CXL） 患者の調製<ol><li>手術前の5日は、ピロカルピンは、処置した眼で一日二回低下1％を置きます。 </li><li>手術室では、無菌条件下で、彼/彼女の背中に患者を横になります。 </li><li>このようなオキシブプロカイン0.4％などの局所麻酔を管理します。 </li><li>目と二回消毒ヨウ素と目の周りの皮膚をきれいにしてください。 </li><li>開いている目を保つために蓋鏡を使用してください。 </li></ol> 2.上皮の除去<ol><li>マーク・サークル角膜マーカーで角膜の中央9.0ミリメートル。 </li><li>鈍いスパチュラを使用して機械的デブリドマンによって角膜上皮の中央7.0〜9.0ミリメートルを削除します。 </li></ol> 3.リボフラビンアプリケーション<ol><li>目に20％デキストランでリボフラビン0.1％を適用します<html> Eの角膜20分間毎分。 </li></ol> 4. UVA照射<ol><li> 3ミリワット/ cm 2の（5.4 J / cm 2の表面線量）の照度で30分間5cmの作動距離で370 nmの波長のUVA光を角膜に照射。 </li></ol><img alt="図1" src="/files/ftp_upload/53119/53119fig1.jpg" /> 図1：C-CXL中でUVA照射角膜は、3ミリワット/ cm 2の（5.4 J / cm 2の表面線量）の照度で30分間、5 cmの作動距離で370 nmの波長のUVA光を照射します。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53119/53119fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <ol start="2"><li>照射中、角膜に5分ごとリボフラビンの滴を適用します。 </li><li>照射中、局所麻酔（オキシブプロカイン0.4％）は必要に応じて追加します。 </li></ol>外科 &quot;&gt; 5。終了<ol><li>入れ抗生物質滴（トブラマイシン0.3％）、運営の目に人工涙液（ヒアルロン酸0.18％低下）。 </li><li>再上皮が完了するまで、手術の終了時に、ソフト包帯コンタクトレンズを配置します。再上皮化は、通常は3日かかります。 </li><li>そのようなパラセタモール（500 mg）を加えたコデイン（30 mg）を、6丸薬日と鎮痛剤を処方します。 </li><li>角膜上皮再形成した後、ステロイドと局所療法（局所デキサメタゾン1 mg / mlの）を開始し、3〜4週間継続します。さらに、1月の人工涙液を1日4回を使用しています。 </li></ol> 2.加速角膜コラーゲンCXL（ - CXL） 患者の調製<ol><li>手術前の5日は、ピロカルピンは、処置した眼で一日二回低下1％を置きます。 </li><li>手術室では、無菌条件下で、彼/彼女の背中に患者を横になります。 </li><li>このようなオキシブプロカイン0.4％などの局所麻酔を管理します。 </li><li>電子メールをきれいにあなたがた二回消毒ヨウ素と目の周りの皮膚。 </li><li>開いている目を保つために蓋鏡を使用してください。 </li></ol> 2.上皮の除去<ol><li>マーク・サークル角膜マーカーで角膜の中央9.0ミリメートル</li><li>鈍いスパチュラを使用して機械的デブリドマンによって角膜上皮の中央7.0〜9.0ミリメートルを削除します。 </li></ol> 3.リボフラビンアプリケーション<ol><li> 10分毎に2分角膜上デキストランなしリボフラビン0.1％を適用します。 </li></ol> 4. UVA照射<ol><li> 30 mWの/ cm 2の（5.4 J / cm 2の表面線量）の照度で3分間5cmの作動距離で370 nmの波長のUVA光を角膜に照射。 </li><li> （oxybuproca＆＃239; 0.4％NE）照射中、局所麻酔を追加し、必要に応じて。 </li></ol>外科5.終了<ol><li>抗生物質滴（0.3％トブラマイシン）と人工涙液を配置（ヒアルロン酸が0をドロップ<html>操作の目に0.18パーセント）。 </li><li>再上皮が完了するまで、手術の終了時に、ソフト包帯コンタクトレンズを配置します。再上皮化は、通常は3日かかります。 </li><li>そのようなパラセタモール（500 mg）を加えたコデイン（30 mg）を、6丸薬日と鎮痛剤を処方します。 </li><li>角膜上皮再形成した後、ステロイドと局所療法（局所デキサメタゾン1 mg / mlの）を開始し、3〜4週間継続します。さらに、1月の人工涙液を1日4回を使用しています。 </li></ol> 3.イオントフォレーシス（I-CXL） 患者の調製<ol><li>手術前の5日は、ピロカルピンは、処置した眼で一日二回低下1％を置きます。 </li><li>手術室では、無菌条件下で、彼/彼女の背中に患者を横になります。 </li><li>このようなオキシブプロカイン0.4％などの局所麻酔を管理します。 </li><li>目と二回消毒ヨウ素と目の周りの皮膚をきれいにしてください。 </li><li>開いている目を保つために蓋鏡を使用してください。 </li></ol><html> _step &quot;&gt; 2。イオントフォレーシス装置を配置します。 <ol><li>術野の下で額に粘着性のパッシブ電極を適用します。 </li><li>開いた目に、活性電極、吸引リングを適用します。吸引をリリースする前に、角膜の周囲に吸引リングを中央に配置します。 </li></ol><img alt="図2" src="/files/ftp_upload/53119/53119fig2.jpg" /> 図2.イオントフォレーシス装置。受動電極は、術野の下で額と活性電極、吸引リング、開いた目に適用されるに適用されます。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53119/53119fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> 3.リボフラビンアプリケーション<ol><li>デキストランのない低浸透圧0.1％のリボフラビンと吸引リングを入力します。 </li></ol><html> JPG &quot;/&gt; I-CXL図3.リボフラビンアプリケーション 。吸引リングは、デキストランずに低浸透圧0.1％のリボフラビンが充填されている。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53119/53119fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <ol start="2"><li> 0.2ミリアンペアでの電流をスタートし、徐々に5分（ 図4）の総イオン導入時間を1.0ミリアンペアに増加します。 </li></ol><img alt="図4" src="/files/ftp_upload/53119/53119fig4.jpg" /> 浸透リボフラビン図4.イオントフォレーシス装置。電流は、最初は0.2ミリアンペアで、徐々に1.0ミリアンペアに増加しました。総イオン導入時間は5分である。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53119/53119fig4large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> EP &quot;&gt; 4。UVA照射<ol><li> 10ミリワット/ cm 2の（5.4 J / cm 2の表面線量）と9分間5cmの作動距離での放射照度で370 nmの波長のUVA光で角膜を照射。 </li><li> （oxybuproca＆＃239; 0.4％NE）照射中、局所麻酔を追加し、必要に応じて。 </li></ol>外科5.終了<ol><li>抗生物質滴（トブラマイシン0.3％）、運営の目に人工涙液を（ヒアルロン酸0.18％低下）を配置します。 </li><li>そのようなパラセタモール（500 mg）を加えたコデイン（30 mg）を、6丸薬日と鎮痛剤を処方します。 </li><li>手術後、ステロイドと局所療法（局所デキサメタゾン1mgの/ ml）を開始し、3〜4週間継続します。さらに、1月の人工涙液を1日4回を使用しています。 </li></ol>

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	<li>Rabinowitz, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Keratoconus.">Keratoconus.</a> Surv Ophthalmol. 42 (4), 297-319 (1998).</li><li>Tuori, A. 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D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+the+corneal+collagen+cross-linking+demarcation+line+using+confocal+microscopy+and+anterior+segment+optical+coherence+tomography+in+keratoconic+patients.">Correlation of the corneal collagen cross-linking demarcation line using confocal microscopy and anterior segment optical coherence tomography in keratoconic patients.</a> Am J Ophthalmol. 157 (1), 110-115 (2014).</li><li>Yam, J. C., Chan, C. W., Cheng, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+collagen+cross-linking+demarcation+line+depth+assessed+by+Visante+OCT+After+CXL+for+keratoconus+and+corneal+ectasia.">Corneal collagen cross-linking demarcation line depth assessed by Visante OCT After CXL for keratoconus and corneal ectasia.</a> J Refract Surg. 28 (7), 475-481 (2012).</li><li>Jordan, C., Patel, D. V., Abeysekera, N., McGhee, C. .. N. .. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+confocal+microscopy+analyses+of+corneal+microstructural+changes+in+a+prospective+study+of+collagen+cross-linking+in+keratoconus.">In vivo confocal microscopy analyses of corneal microstructural changes in a prospective study of collagen cross-linking in keratoconus.</a> Ophthalmology. 121 (2), 469-474 (2014).</li><li>Touboul, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+confocal+microscopy+following+conventional,+transepithelial,+and+accelerated+corneal+collagen+cross-linking+procedures+for+keratoconus.">Corneal confocal microscopy following conventional, transepithelial, and accelerated corneal collagen cross-linking procedures for keratoconus.</a> J Refract Surg. 28 (11), 769-776 (2012).</li><li>Bouheraoua, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+and+confocal+microscopy+following+three+different+protocols+of+corneal+collagen-crosslinking+in+keratoconus.">Optical coherence tomography and confocal microscopy following three different protocols of corneal collagen-crosslinking in keratoconus.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 55 (11), 7601-7609 (2014).</li><li>Hafezi, F., Mrochen, M., Iseli, H. P., Seiler, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collagen+crosslinking+with+ultraviolet-A+and+hypoosmolar+riboflavin+solution+in+thin+corneas.">Collagen crosslinking with ultraviolet-A and hypoosmolar riboflavin solution in thin corneas.</a> J Cataract Refract Surg. 35 (4), 621-624 (2009).</li><li>C&#305;nar, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+accelerated+and+conventional+corneal+collagen+cross-linking+for+progressive+keratoconus.">Comparison of accelerated and conventional corneal collagen cross-linking for progressive keratoconus.</a> Cutan Ocul Toxicol. 33 (3), 218-222 (2013).</li><li>Cing&#252;, A. 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P., Godefrooij, D. A., Imhof, S. M., Tahzib, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transepithelial+versus+epithelium-off+corneal+cross-linking+for+the+treatment+of+progressive+keratoconus:+a+randomized+controlled+trial.">Transepithelial versus epithelium-off corneal cross-linking for the treatment of progressive keratoconus: a randomized controlled trial.</a> Am J Ophthalmol. 159 (5), 821-828 (2015).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

UVA照射及びリボフラビンを用いCXLは、円錐角膜の進行を阻止するための標準的な治療です。リボフラビンは、UVA 3を照射したときの化学共有結合（架橋）を誘導光増感剤です。角膜では、この現象は、角膜の剛性を高めるコラーゲン原線維間の架橋を生成します。この現象はよく記載されているが、今まで角膜内架橋の直接的な証拠はなかったです。それにもかかわらず、いくつかの研究は、このように、C-CXL 3-8の有効性を実証する手順の後のKmaxの安定化を報告しています。この効果は、クロスリンクまたは角膜実質内の他の微細構造の変化によるものであるかどうかの問題は未解決のままです。 CXLの有効性の間接的な臨床転帰の一つは、10月とIVCM CXL後1ヶ月ASで検出角膜境界線です。最近、Kymionisら。ことを示したhyperreflectanceエヴァ10月は、無細胞と共焦点顕微鏡20に見られる細胞のゾーン間の遷移領域に対応するので、使用してluated。このように、10月ASに見られる角膜境界線は、無細胞間質の下で、通常の1を超えるアクティブに角膜実質とfibroblastesのゾーンに対応している必要があります。それにもかかわらず、山芋や仲間21は、6ヶ月、C-CXL後視力の、最大K値の変化にCXL境界線の深さとの相関関係を示すことができませんでした。 CXLより多くの量は、視力や角膜曲率の大きな減少が大きく強化をもたらすことができるかどうかの問題は、長い術後のフォローアップと研究の対象のまま。また、IVCMの平均前部間質角膜実質密度数については、有意な減少は、C-CXLとA-CXLと12ヶ月の時点で、私-CXL 22-24と6ヶ月で正常化して、最初の6ヶ月の間に観察されました。その結果、微細構造の角膜を変化させます変更が使用されるコラーゲン架橋プロトコルの種類に依存して表示されます。この結果と、角膜境界線は、A-CXLまたはI-CXLは、これら3つのプロトコルの表示と有効性を議論するために私達を許可した後に、よりC-CXL後に有意に深く現れたという事実。 従来のプロトコルはすでに6年3-8の最大のフォローアップで、その有効性と安全性を証明しています。 C-CXLは、内皮細胞25を保護するために 、少なくとも400ミクロンの角膜厚度計が必要です。その主な欠点は、持続時間（1時間）および上皮を除去するために必要に関連しています。確かに、これは、患者の不快感や痛みを引き起こし、そのような感染性角膜炎や間質曇り9のようないくつかの合併症を引き起こす可能性があります。それにもかかわらず、今のところ、このプロトコルは、まだ進化が攻撃的である場合は特に、プログレッシブ円錐角膜の治療のために推奨されます。 C-CXLの主な欠点の一つは目だったことを考えます手順Eの期間は、加速されたプロトコルは、最初に角膜26に高い放射照度を提供することにより、操作時間の短縮を目的としました。しかし、10分の浸漬時間を低減することが観察され、したがって、表在角膜境界線につながる、角膜へのリボフラビンのイントラ間質の浸透を制限することができます。さえ、それが報告されていない場合には光子の同じ数がフィブリルに触れているという事実にもかかわらず、それは、CXL中で10倍の放射照度は、内皮傷害27のリスク、28を拡張することが可能である。この文脈では、それは-CXLに使用リボフラビンにおけるデキストランの欠如は高い放射照度にもかかわらず、内皮損傷がないことを説明するかもしれないことを指摘すべき重要。実際、デキストランは手順中に角膜の菲薄化をもたらし、したがって、潜在的な内皮の損傷29の浸透圧効果を有することが知られています。その結果、加速CXLは安全CXLモダリティであるように思われます。さらに、A-CXLプロトコルのEEMS有効であること。実際に最大K値は、6ヵ月フォローアップ時に安定なままでした。それにもかかわらず、C-CXL用として、その主要な制限は、痛みや、ヘイズ、角膜感染症9などの潜在的な合併症につながるdesepithelializationです。 Touboul らは 、CXL 23で治療された患者の共焦点顕微鏡を用いて定性的な研究を行いました。 C-CXL、UVA-リボフラビンの補強効果と比較した場合、実際には、より大きな角膜実質細胞のアポトーシスと増加した間質反射率を有する角膜の前150-200ミクロンで最も顕著であるように思われました。この知見は、薄い角膜（350〜400ミクロンの最小厚さ）を有する患者が加速CXLから利益を得ることができることを示唆しています。このとき、C-CXL前に薄い角膜の腫れにつながるハイポ浸透圧リボフラビンは、このプロトコルは、まだ内皮障害25を防止するために 、少なくとも400ミクロンの角膜厚度計を必要とするために使用されます。それにもかかわらず、CXLを好むことも加速entially薄い角膜のための円錐角膜を安定化するために、より速く、より少ない浸透処理として、将来的に使用されます。しかし、長期的な研究が決定的角膜生体力学に及ぼす影響との境界線の深さを相関させるために必要とされています。 イオン導入CXLは最近、上皮デブリドマン12、電流力の30。応用角膜実質に浸透するハイポ浸透圧リボフラビンを回避するために開発された1経上皮プロトコルです。 Vinciguerraや同僚は前向き研究では、イオントフォレーシスCXLを受けた20の目を検討しました。彼らは、Kmaxとは処置後1年間安定であることが示されました。しかし、境界線は、フォローアップの31時の10月ASと明らかに測定可能ではなかったです。同様に、我々の研究では、角膜の境界線は、10月はほとんどの患者（46.5パーセント）の半分以下で214ミクロンの平均深さで見られなかったASと評価しました。さらに、共焦点顕微鏡は、はるかに少ない角膜実質APを明らかにしました2他のプロトコル後より、I-CXL後optosisと増加した間質反射率。実際に、共焦点顕微鏡および変性リボフラビン（Ricrolin TE）を用いて、Caporossiら。経上皮架橋の別のプロトコルを調査しました。イオントフォレーシス用として、彼らは間質角膜実質のアポトーシスは表面的だった（140ミクロンの深さを意味する）と不均一前部間質11に見られることがわかります。加えて、彼らはこのエピオンプロトコルは、多くの場合、病気32のより積極的な形態に苦しむ小児患者への応用に注意書きを追加し、フォローアップの24ヶ月後に、円錐角膜の進化をもたらしたことを確認しました。実際、他の経上皮のプロトコルについては、イオントフォレーシスは、小児患者33内の地形指標の改善を保証していないようです。有効性のこの欠如は、 その場 11,34-36 で上皮に限定されたリボフラビンおよびUVAの浸透によって説明することができます。確かに、上皮はphysiですリボフラビンおよびUVAの浸透の両方のCAL障壁、アポトーシスの深さを制限するため、角膜の生体力学的効果11。また、同時にUV暴露28の間に光増感剤、紫外線遮断剤として機能リボフラビン。したがって、それは他の経上皮のプロトコルのように、イオントフォレーシス中不十分リボフラビン浸透が処置の有効性を制限するだけでなく、内皮細胞の損傷の危険性を増加させるだけではなく、考えられます。それにもかかわらず、何の内皮細胞の損失は、まだイオン導入後として認められませんでした。最後に、私たちの研究では、同様にVinciguerra らに。31、最高のK値が安定した6ヶ月のI-CXL後に現れました。しかし、この新たな手順が信頼できるかどうかのまま長いフォローアップから見られることを残ります。このように、他のエピオンプロトコルと同様に、注意がイオントフォレーシスを使用する場合に必要です。それにもかかわらず、経上皮CXLへの熱意は、ポテンシャルの減少を考慮すると、理解しやすいですCXL合併症。エピオフCXLで、合併症は、本質的に一時曇り9に起因する症例の約1％で発生します。残念ながら、このヘイズは時折、角膜の傷を残します。そのため、私たちは現在、イオントフォレーシスCXLは、小児患者には慎重に使用する必要があることを信じて、私たちは主に薄い角膜、ゆっくりと進行して円錐角膜の患者さんに、このプロトコルを提案します。 結論として、浸透に関しては、従来のCXLプロトコルはプログレッシブ円錐角膜を治療するための標準的なオプションのまま。加速CXLは特に薄い角膜を治療するために、迅速、効果的かつ安全な代替手段であるように思われます。イオントフォレーシスは、前の角膜実質細胞のダメージが少ないと見えにくく境界線に関連付けられているので、大きな慎重に検討する必要があります。

円錐角膜は通常、角膜形状の変更の結果、一般集団1に2000で1に報告二国間及びプログレッシブ角膜拡張であるため、ビジョン2を減少させました 。円錐角膜は通常、早期思春期に存在し、進行は、患者の生涯にわたって可変とすることができるが、この疾患は、通常、安定化する傾向があるとき、人生の第四十年に第三まで進行します。円錐角膜の進行を停止させることにより、架橋は、延期または角膜移植を回避することを目的としています。 現在まで、臨床試験で証明された進歩的な円錐角膜の唯一の効率的かつ安全な治療は、剛性を高めるので、円錐角膜の進行3-8を停止することを目指し、従来の角膜コラーゲン架橋（C-CXL）プロトコルです。動作時間などの感染性角膜炎または間質ヘイズ9と C-CXLの他の可能な危険因子を減らすために、いくつかの改良されたプロトコルを持っています記載されて。まず、加速CXL（A-CXL）は、UVAのより高い放射照度は減少し、時間10にわたって角膜に送達されます。第二に、上皮の創面切除の必要性を回避するために、経上皮のアプローチが採用されています。従来のプロトコル11と比較した場合、残念ながら、それらは成功が限られています。 CXL中角膜リボフラビン送達のための最新の方法は、経上皮イオントフォレーシス（I-CXL）であるが、この治療法の厳密な評価はまだ12に行われていません。イオントフォレーシスは、小電流が組織を通ってイオン化された薬物の浸透を改善するために適用された非侵襲的技術です。イオントフォレーシスによりCXLでは、リボフラビンは上皮を介して角膜を貫通するようにイオン化されます。 生体内では、共焦点顕微鏡（IVCM）は、円錐角膜13のような疾患における異常な角膜の細胞の変化を強調することができ、角膜を画像化する方法です。実際、IVCMサブ基底神経叢および間質角膜実質13〜15の密度の特定の減少と円錐角膜で角膜のすべての層に変化を実証してきました。さらに、IVCMは、C-CXL 16後の角膜の微細構造解析のために非常に便利であることが証明されました。 角膜境界線は300ミクロン17,18の深さで、C-CXL後1ヶ月（10月AS）前眼部光干渉断層撮影で見hyperreflectiveラインとして記載されています。 IVCM次のC-CXLは、300ミクロンの深さに角膜実質細胞の不在を含む角膜の構造変化に関する情報を提供します。この無細胞ゾーンの深さだけでなく、角膜実質内の境界線の深さは、10月1日としてCXL処理19、及び角膜境界線の深さの測定の有効深さに関連すると思われる10月AS上で明らかにしましたCXLは、効率的な臨床として提案された後月CXL効果18の評価のための方法。 本研究では、10月、共焦点顕微鏡ASによって角膜実質境界線の測定を使用して、3つの異なる（従来、加速され、イオン導入）角膜コラーゲン架橋のプロトコルの効率を調査します。我々は、さらに定量的に3治療後の角膜の微細構造の変化を分析するためにIVCMを使用していました。

<table><tbody><tr><td></td><td></td><td>Riboflavin&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp; Product number</td><td></td></tr><tr><td>C-CXL</td><td>Sooft SPA, Montegiorgio, Italy</td><td>Ricrolin&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp; 468465-6</td><td></td></tr><tr><td>A-CXL</td><td>Avedro Inc, Waltham, Massachusetts</td><td>VibeX&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp; 520-01863-006</td><td></td></tr><tr><td>I-CXL</td><td>Sooft SPA, Montegiorgio, Italy</td><td>Ricrolin+&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp; 975481-6</td><td>Passive electrode: PROTENS ELITE 4848LE/ Active electrode: IONTOFOR CXL</td></tr><tr><td></td><td></td><td>UVA Machine</td><td></td></tr><tr><td>X-Vega</td><td></td><td></td><td>UVA: 3 mW/cm&lt;sup&gt;2&lt;/sup&gt; 30 min</td></tr><tr><td>KXL System</td><td></td><td></td><td>UVA: 30 mW/cm&lt;sup&gt;2&lt;/sup&gt; 10 min</td></tr><tr><td>X-Vega</td><td></td><td></td><td>UVA: 10 mW/cm&lt;sup&gt;2&lt;/sup&gt; 9 min</td></tr></tbody></table>

three different protocols of corneal collagen crosslinking in keratoconus: conventional, accelerated and iontophoresis

円錐角膜は、二国間及び進歩的な角膜拡張症です。その進行を遅くするために、角膜コラーゲン架橋（CXL）は最近、効率的な治療オプションとして導入されました。生物学的および化学的科学では、架橋は、反応性分子との間に形成された新たな化学結合を指します。したがって、角膜コラーゲンCXLの目的は、合成角膜基質中のコラーゲン原線維間の架橋の形成を増加させることです。従来のCXL（C-CXL）プロトコルの効率は、既にいくつかの臨床研究で示されているという事実にもかかわらず、それは、プロシージャと角膜上皮の除去の持続時間の改善から利益を得るかもしれません。したがって、二つの新しい及び最適化されたCXLプロトコルのコヒーレントな評価を提供するために、我々三CXL治療の受けていた円錐角膜の患者検討：イオン導入（I-CXL）を、CXL（-CXL）を加速し、そして従来のCXL（ C-CXL）。 -CXLは6時間より早くCXL手順Uです10時間、より高いUVA放射照度を歌うが、それでも上皮の除去を含みます。イオントフォレーシスは、小電流が角膜を通じてリボフラビン浸透を改善するために適用された上皮の非侵襲的技術です。 （OCT）およびインビボ共焦点顕微鏡（IVCM） に前部光コヒーレンストモグラフィを用いて、治療の浸透の深さについては、従来のCXLプロトコルはプログレッシブ円錐角膜を治療するための標準的なままであることを結論付けています。加速CXLは薄い角膜を治療するために、迅速、効果的かつ安全な代替手段であると思われます。イオントフォレーシスの使用はまだ調査されている、より大きな慎重に検討する必要があります。

<html>角膜境界線は301.6ミクロン（SD、73.6）の平均深さで例92％で10月ASに見えました<img alt="図5" src="/files/ftp_upload/53119/53119fig5.jpg" /> 358ミクロン（白矢印）の平均深さで角膜実質境界線を可視化（10月AS） のC-CXL。高解像度角膜前眼部光干渉断層撮影スキャン後の図5.境界線 、従来の角膜コラーゲンクロス後1ヶ月リンク（C-CXL）。スケールバーは250μm。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53119/53119fig5large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> 1ヶ月のC-CXL後、-CXL後、それは183.1ミクロン（SD、39.6）の平均深さで例85.5パーセントで見られたのに対し。 ロード/ 53119 / 53119fig6.jpg &quot;/&gt; 176ミクロン（白矢印）の平均深さで角膜実質境界線を可視化（10月AS） のA-CXL。高解像度角膜前眼部光干渉断層撮影スキャン後の図6.境界線 、加速角膜コラーゲンクロス後1ヶ月リンク（A-CXL）。スケールバー：250μmで<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53119/53119fig6large.jpg" target="_blank">、この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> 最後に、I-CXL後、角膜境界線のみ214ミクロン（SD、37.5）の平均深さで例46.5パーセントで見られました。 C-CXL、-CXLまたはI-CXL次のいずれかの角膜境界線の深さの差は（P &lt;0.001およびp = 0.01）、統計的に有意でした。境界線は、C-CXLとI-CXLた（p = 0.005）後より、CXL後に有意により頻繁に存在していました。 <img alt="図7" src="/files/ftp_upload/53119/53119fig7.jpg" /> 238.5ミクロン（白矢印）の平均深さで角膜実質境界線を可視化（10月AS）I-CXL。高解像度角膜前眼部光干渉断層撮影スキャン後の図7.境界線 、イオン導入後1ヶ月（I-CXL ）。スケールバー：250μmで<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53119/53119fig7large.jpg" target="_blank">、この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> いいえ内または術後合併症は、内皮細胞計数に有意差を含まない3つのプロトコルのいずれかを適用した後の6ヶ月以内に患者のフォローアップでは検出されませんでした。また、最大のK値（Kmaxの）は6ヶ月のフォローアップ後のプロトコルの各々について安定したままでした。 <img alt="表1" src="/files/ftp_upload/53119/53119tab1.jpg" /></p&gt; 表1.有効性およびCXLの各プロトコルの安全性。従来の（C-CXL）以下の最大K値の進化（度数、D）および内皮密度は、（ - CXL）を加速し、イオントフォレーシス（I-CXL）架橋。 プロトコルの各々について、1〜3月術後期間において、細胞外小腔および断片化角膜実質細胞の核を有する前方の間質浮腫は、IVCMで観察されました。 6ヵ月の時点で、角膜実質の核を有する前部間質の再増殖が見られた他の2つのプロトコルの後よりも、I-CXL後大きかったです。架橋および非連動角膜実質の間の境界は、角膜実質は細長い大型ハイパー反射間質バンドに囲まなった領域として見られました。 <img alt="図8" src="/files/ftp_upload/53119/53119fig8.jpg" /> 図8：CC後の微細構造の角膜の変化XL従来のコラーゲンの架橋（C-CXL）1ヶ月後に得られた角膜実質のインビボ共焦点顕微鏡のスキャン（IVCM）：ハイパー反射質（白矢印）および細胞外窩（アスタリスク）と前部間質浮腫が観察されます。スケールバー：50μmです。

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Three Different Protocols of Corneal Collagen Crosslinking in Keratoconus: Conventional, Accelerated and Iontophoresis

Corneal collagen cross-linking (CXL) is the only conservative treatment currently available to halt keratoconus progression by improving the biomechanical rigidity of the corneal stroma. The aim of this manuscript is to highlight the methods of three different protocols of CXL: conventional CXL (C-CXL), accelerated CXL (A-CXL), and iontophoresis CXL (I-CXL).

円錐角膜で角膜コラーゲン架橋の三つの異なるプロトコル：従来は、加速してイオントフォレーシス

Keratoconus is a bilateral and progressive corneal ectasia. In order to slow down its progression, corneal collagen cross-linking (CXL) has recently been ...

three-different-protocols-corneal-collagen-crosslinking-keratoconus

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

19.8K ビュー.  Quinze-Vingts National Ophthalmology Hospital. Corneal collagen cross-linking (CXL) is the only conservative treatment currently available to halt keratoconus progression by improving the biomechanical rigidity of the corneal stroma. The aim of this manuscript is to highlight the methods of three different protocols of CXL: conventional CXL (C-CXL), accelerated CXL (A-CXL), and iontophoresis CXL (I-CXL).

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Adenoviral Gene Therapy for Diabetic Keratopathy: Effects on Wound Healing and Stem Cell Marker Expression in Human Organ-cultured Corneas and Limbal Epithelial Cells

The goal of this protocol is to describe molecular alterations in human diabetic corneas and demonstrate how they can be alleviated by adenoviral gene therapy in organ-cultured corneas. The diabetic corneal disease is a complication of diabetes with frequent abnormalities of corneal nerves and epithelial wound healing. We have also documented significantly altered expression of several putative epithelial stem cell markers in human diabetic corneas. To alleviate these changes, adenoviral gene therapy was successfully implemented using the upregulation of c-met proto-oncogene expression and/or the downregulation of proteinases matrix metalloproteinase-10 (MMP-10) and cathepsin F. This therapy accelerated wound healing in diabetic corneas even when only the limbal stem cell compartment was transduced. The best results were obtained with combined treatment. For possible patient transplantation of normalized stem cells, an example is also presented of the optimization of gene transduction in stem cell-enriched cultures using polycationic enhancers. This approach may be useful not only for the selected genes but also for the other mediators of corneal epithelial wound healing and stem cell function.

An example of adenoviral gene therapy in the human diabetic organ-cultured corneas is presented towards the normalization of delayed wound healing and markedly reduced epithelial stem cell marker expression in these corneas. It also describes the optimization of this process in stem cell-enriched limbal epithelial cultures.

糖尿病性角膜症のためのアデノウイルス遺伝子治療：ヒト臓器培養角膜と​​輪部上皮細胞における創傷治癒に及ぼす影響と細胞マーカーの発現を幹

The goal of this protocol is to describe molecular alterations in human diabetic corneas and demonstrate how they can be alleviated by adenoviral gene ...

発生生物学

Corneal Donor Tissue Preparation for Endothelial Keratoplasty

Over the past ten years, corneal transplantation surgical techniques have undergone revolutionary changes1,2. Since its inception, traditional full thickness corneal transplantation has been the treatment to restore sight in those limited by corneal disease. Some disadvantages to this approach include a high degree of post-operative astigmatism, lack of predictable refractive outcome, and disturbance to the ocular surface. The development of Descemet's stripping endothelial keratoplasty (DSEK), transplanting only the posterior corneal stroma, Descemet's membrane, and endothelium, has dramatically changed treatment of corneal endothelial disease. DSEK is performed through a smaller incision; this technique avoids 'open sky' surgery with its risk of hemorrhage or expulsion, decreases the incidence of postoperative wound dehiscence, reduces unpredictable refractive outcomes, and may decrease the rate of transplant rejection3-6.
Initially, cornea donor posterior lamellar dissection for DSEK was performed manually1 resulting in variable graft thickness and damage to the delicate corneal endothelial tissue during tissue processing. Automated lamellar dissection (Descemet's stripping automated endothelial keratoplasty, DSAEK) was developed to address these issues. Automated dissection utilizes the same technology as LASIK corneal flap creation with a mechanical microkeratome blade that helps to create uniform and thin tissue grafts for DSAEK surgery with minimal corneal endothelial cell loss in tissue processing.
Eye banks have been providing full thickness corneas for surgical transplantation for many years. In 2006, eye banks began to develop methodologies for supplying precut corneal tissue for endothelial keratoplasty. With the input of corneal surgeons, eye banks have developed thorough protocols to safely and effectively prepare posterior lamellar tissue for DSAEK surgery. This can be performed preoperatively at the eye bank. Research shows no significant difference in terms of the quality of the tissue7 or patient outcomes8,9 using eye bank precut tissue versus surgeon-prepared tissue for DSAEK surgery. For most corneal surgeons, the availability of precut DSAEK corneal tissue saves time and money10, and reduces the stress of performing the donor corneal dissection in the operating room. In part because of the ability of the eye banks to provide high quality posterior lamellar corneal in a timely manner, DSAEK has become the standard of care for surgical management of corneal endothelial disease.
The procedure that we are describing is the preparation of the posterior lamellar cornea at the eye bank for transplantation in DSAEK surgery (Figure 1).

Endothelial corneal transplantation is a surgical technique for treatment of posterior corneal diseases. Mechanical microkeratome dissection to prepare tissue results in thinner, more symmetric grafts with less endothelial cell loss and improved outcomes. Dissections can be performed at the eye bank prior to corneal transplantation surgery.

内皮角膜移植のために角膜ドナー組織の準備

Over the past ten years, corneal transplantation surgical techniques have undergone revolutionary changes1,2. Since its inception, traditional full ...

医学

Combination of Microstereolithography and Electrospinning to Produce Membranes Equipped with Niches for Corneal Regeneration

Corneal problems affect millions of people worldwide reducing their quality of life significantly. Corneal disease can be caused by illnesses such as Aniridia or Steven Johnson Syndrome as well as by external factors such as chemical burns or radiation. Current treatments are (i) the use of corneal grafts and (ii) the use of stem cell expanded in the laboratory and delivered on carriers (e.g., amniotic membrane); these treatments are relatively successful but unfortunately they can fail after 3-5 years. There is a need to design and manufacture new corneal biomaterial devices able to mimic in detail the physiological environment where stem cells reside in the cornea. Limbal stem cells are located in the limbus (circular area between cornea and sclera) in specific niches known as the Palisades of Vogt. In this work we have developed a new platform technology which combines two cutting-edge manufacturing techniques (microstereolithography and electrospinning) for the fabrication of corneal membranes that mimic to a certain extent the limbus. Our membranes contain artificial micropockets which aim to provide cells with protection as the Palisades of Vogt do in the eye.

We report a technique for the fabrication of micropockets within electrospun membranes in which to study cell behavior. Specifically, we describe a combination of microstereolithography and electrospinning for the production of PLGA (Poly(lactide-co-glycolide)) corneal biomaterial devices equipped with microfeatures.

角膜再生のためのニッチを装備膜を製造するためのマイクロ光とエレクトロスピニングの組み合わせ

Corneal problems affect millions of people worldwide reducing their quality of life significantly. Corneal disease can be caused by illnesses such as ...

生物工学

An &#8220;All-laser&#8221; Endothelial Transplant

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an intended depth, and a near infrared diode laser to weld the corneal tissue. The proposed technique enables to reach the three main goals in endothelial keratoplasty: a precise control in the thickness of the donor tissue; its easy insertion in the recipient bed and a reduced risk of donor lenticule dislocation. The donor cornea thickness is measured in the surgery room with optical coherence tomography (OCT), in order to correctly design the donor tissue dimensions. A femtosecond laser is used to cut the donor cornea. The recipient eye is prepared by manual stripping of the descemetic membrane. The donor endothelium is inserted into a Busin-injector, the peripheral inner side is stained with a proper chromophore (a water solution of Indocyanine Green) and then it is pulled in the anterior chamber. The transplanted tissue is placed in the final and correct location and then diode laser welding is induced from outside the eyeball. The procedure has been performed on more than 15 patients evidencing an improvement in surgery performances, with a good recovery of visual acuity and a reduced donor lenticule dislocation event.

An all laser procedure is proposed in the endothelial transplant. The surgical technique is based on the use of a femtosecond laser to prepare the donor tissue. Laser welding technique is then used to secure the donor endothelium in the correct position.

「オールレーザー」内皮移植

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an ...

Scleral Cross-linking Using Riboflavin and Ultraviolet-A Radiation for Prevention of Axial Myopia in a Rabbit Model

Myopic individuals, especially those with severe myopia, are at higher-than-normal risk of cataract, glaucoma, retinal detachment and chorioretinal abnormalities. In addition, pathological myopia is a common irreversible cause of visual impairment and blindness1-3. Our study demonstrates the effect of scleral crosslinking using riboflavin and ultraviolet-A radiation on the development of axial myopia in a rabbit model. The axial length of the eyeball was measured by A-scan ultrasound in New Zealand white rabbits aged 13 days (male and female). The eye then underwent 360&#176; conjunctival peritomy with scleral crosslinking, followed by tarsorrhaphy. Axial elongation was induced in 13 day-old New Zealand rabbits by suturing their right eye eyelids (tarsorrhaphy). The eyes were divided into quadrants, and every quadrant had two scleral irradiation zones, each with an area of 0.2 cm&#178; and a radius of 4 mm. Crosslinking was performed by dropping 0.1% dextran-free riboflavin-5-phosphate onto the irradiation zones 20 sec before ultraviolet-A irradiation and every 20 sec during the 200 sec irradiation time. UVA radiation (370 nm) was applied perpendicular to the sclera at 57 mW/cm&#178; (total UVA light dose, 57 J/cm&#178;). Tarsorrhaphies were removed on day 55, followed by repeated axial length measurements. This study demonstrates that scleral crosslinking with riboflavin and ultraviolet-A radiation effectively prevents occlusion-induced axial elongation in a rabbit model.

We demonstrate the effect of scleral crosslinking with riboflavin and UVA on an axial elongation rabbit eye. Axial elongation was induced in 13 day-old New Zealand rabbits (male and female) by suturing their right eye eyelids (tarsorrhaphy).

強膜ウサギモデルで軸性近視の予防のためのリボフラビンおよび紫外線A放射線を用いて架橋

Myopic individuals, especially those with severe myopia, are at higher-than-normal risk of cataract, glaucoma, retinal detachment and chorioretinal ...

Second Harmonic Generation Signals in Rabbit Sclera As a Tool for Evaluation of Therapeutic Tissue Cross-linking (TXL) for Myopia

Methods to strengthen tissue by introducing chemical bonds (non-enzymatic cross-linking) into structural proteins (fibrillar collagens) for therapy include photochemical cross-linking and tissue cross-linking (TXL) methods. Such methods for inducing mechanical tissue property changes are being employed to the cornea in corneal thinning (mechanically weakened) disorders such as keratoconus as well as the sclera in progressive myopia, where thinning and weakening of the posterior sclera occurs and likely contributes to axial elongation. The primary target proteins for such tissue strengthening are fibrillar collagens which constitute the great majority of dry weight proteins in the cornea and sclera. Fortuitously, fibrillar collagens are the main source of second harmonic generation signals in the tissue extracellular space. Therefore, modifications of the collagen proteins, such as those induced through cross-linking therapies, could potentially be detected and quantitated through the use of second harmonic generation microscopy (SHGM). Monitoring SHGM signals through the use of a laser scanning microscopy system coupled with an infrared excitation light source is an exciting modern imaging method that is enjoying widespread usage in the biomedical sciences. Thus, the present study was undertaken in order to evaluate the use of SHGM microscopy as a means to measure induced cross-linking effects in ex vivo rabbit sclera, following an injection of a chemical cross-linking agent into the sub-Tenon&#39;s space (sT), an injection approach that is standard practice for causing ocular anesthesia during ophthalmologic clinical procedures. The chemical cross-linking agent, sodium hydroxymethylglycinate (SMG), is from a class of cosmetic preservatives known as formaldehyde releasing agents (FARs). Scleral changes following reaction with SMG resulted in increases in SHG signals and correlated with shifts in thermal denaturation temperature, a standard method for evaluating induced tissue cross-linking effects.

Second Harmonic Generation Signals in Rabbit Sclera As a Tool for Evaluation of Therapeutic Tissue Cross-linking TXL for Myopia

This protocol describes techniques for evaluating chemical cross-linking of the rabbit sclera using&#160;second harmonic generation imaging and differential scanning calorimetry.

架橋 (TXL) 近視治療の組織の評価ツールとしてウサギの強膜の第 2 高調波発生信号

Methods to strengthen tissue by introducing chemical bonds (non-enzymatic cross-linking) into structural proteins (fibrillar collagens) for therapy ...

Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies

The cornea has been used extensively as a model system to study wound healing. The ability to generate and utilize primary mammalian cells in two dimensional (2D) and three dimensional (3D) culture has generated a wealth of information not only about corneal biology but also about wound healing, myofibroblast biology, and scarring in general. The goal of the protocol is an assay system for quantifying myofibroblast development, which characterizes scarring. We demonstrate a corneal organ culture ex vivo model using pig eyes. In this anterior keratectomy wound, corneas still in the globe are wounded with a circular blade called a trephine. A plug of approximately 1/3 of the anterior cornea is removed including the epithelium, the basement membrane, and the anterior part of the stroma. After wounding, corneas are cut from the globe, mounted on a collagen/agar base, and cultured for two weeks in supplemented-serum free medium with stabilized vitamin C to augment cell proliferation and extracellular matrix secretion by resident fibroblasts. Activation of myofibroblasts in the anterior stroma is evident in the healed cornea. This model can be used to assay wound closure, the development of myofibroblasts and fibrotic markers, and for toxicology studies. In addition, the effects of small molecule inhibitors as well as lipid-mediated siRNA transfection for gene knockdown can be tested in this system.

A protocol for an ex vivo corneal organ culture model useful for wound healing studies is described. This model system can be used to assess the effects of agents to promote regenerative healing or drug toxicity in an organized 3D multicellular environment.

前のヴィヴォ角膜器官培養モデルの創傷治癒の研究

The cornea has been used extensively as a model system to study wound healing. The ability to generate and utilize primary mammalian cells in two ...

Full-Field Optical Coherence Microscopy for Histology-Like Analysis of Stromal Features in Corneal Grafts

The quality of donor corneal stroma, which makes up about 90% of total corneal thickness, is likely to be one of the main, if not the major, limiting factor(s) for success of deep anterior lamellar and penetrating keratoplasty. These are surgical procedures that involve replacing part or all of the diseased corneal layers, respectively, by donated tissue, the graft, taken from a recently deceased individual. However, means to evaluate stromal quality of corneal grafts in eye banks are limited and lack the capability of high-resolution quantitative assessment of disease indicators. Full-field optical coherence microscopy (FF-OCM), permitting high-resolution 3D imaging of fresh or fixed ex vivo biological tissue samples, is a non-invasive technique well suited for donor cornea assessment. Here we describe a method for the qualitative and quantitative analysis of corneal stroma using FF-OCM. The protocol has been successfully applied to normal donor corneas and pathological corneal buttons, and can be used to identify healthy and pathologic features on both the macroscopic and microscopic level, thereby facilitating the detection of stromal disorders that could compromise the outcome of keratoplasty. By improving the graft quality control, this protocol has the potential to result in better selection (and rejection) of donor tissues and hence decreased graft failure.

We describe use of full-field optical coherence microscopy as a method for high quality assessment of corneal donor stroma. This protocol can be used to identify features indicative of health or disease, and is aimed at improving the screening and selection of donor tissues, and hence the results of keratoplasty.

角膜移植片の間質特徴の組織学的様解析のための全視野光コヒーレンス顕微鏡

The quality of donor corneal stroma, which makes up about 90% of total corneal thickness, is likely to be one of the main, if not the major, limiting ...

免疫・感染学

A Human Corneal Organ Culture Model of Descemet's Stripping Only with Accelerated Healing Stimulated by Engineered Fibroblast Growth Factor 1

Fuchs Endothelial Corneal Dystrophy (FECD) results from dysfunctional corneal endothelial cells (CECs) and is currently treated by transplantation of the whole cornea or Descemet's membrane. Recent developments in ocular surgery have established Descemet's Stripping Only (DSO), a surgical technique in which a central circle of guttae-dense Descemet's membrane is removed to allow for the migration of CECs onto the smooth stroma, restoring function and vision to the cornea. While this potential treatment option is of high interest in the field of ophthalmic research, no successful ex vivo models of DSO have been established and clinical data is limited. This work presents a novel wound-healing model simulating DSO in human donor corneas. Using this approach to evaluate the efficacy of the human engineered FGF1 (NM141), we found that treatment accelerated healing via stimulation of migration and proliferation of CECs. This finding was confirmed in 11 pairs of human corneas with signs of dystrophy reported by the eye banks in order to verify that these results can be replicated in patients with Fuchs' Dystrophy, as the target population of the DSO procedure.

Descemet's Stripping Only is an experimental procedure wherein patients with central corneal guttae resulting from Fuchs Endothelial Corneal Dystrophy have Descemet's membrane stripped for peripheral cells to regenerate the endothelial layer. We present novel methodology simulating DSO in dystrophic human corneas ex vivo with accelerated healing stimulated by eFGF1 (NM141).

操作された線維芽細胞増殖因子によって刺激された加速治癒を伴うデスメのストリッピングのみのヒト角膜器官培養モデル1

Fuchs Endothelial Corneal Dystrophy (FECD) results from dysfunctional corneal endothelial cells (CECs) and is currently treated by transplantation of the ...

軸索再生研究のための角膜感覚線維損傷プロトコル

Three Strategies to Induce Neurotrophic Keratitis and Nerve Regeneration in Murine Cornea

The cornea is a transparent tissue that covers the eye and is crucial for clear vision. It is the most innervated tissue in the body. This innervation provides sensation and trophic function to the eye and contributes to preserving corneal integrity. The pathological disruption of this innervation is termed neurotrophic keratitis. This can be triggered by injury to the eye, surgery, or disease. In this study, we propose three different protocols for inflicting damage on the innervation in ways that recapitulate the three types of cases generally encountered in the clinic.
The first method consists in making an abrasion of the epithelium with an ophthalmic burr. This involves the removal of the epithelial layer, the free nerve endings, and the subbasal plexus in a manner similar to the photorefractive keratectomy surgery performed in the clinic. The second method&#160;only targets the innervation by sectioning it at the periphery with a biopsy punch, maintaining the integrity of the epithelium. This method is similar to the first steps of lamellar keratoplasty and leads to a degeneration of the innervation followed by regrowth of the axons in the central cornea. The last method damages the innervation of a transgenic mouse model using a multiphoton microscope, which specifically localizes the site of cauterization of the fluorescent nerve fibers. This method inflicts the same damage as photokeratitis, an overexposure to UV light.
This study describes different options for investigating the physiopathology of corneal innervation, particularly the degeneration and regeneration of the axons. Promoting regeneration is crucial for avoiding such complications as epithelium defects or even perforation of the cornea. The proposed models can help test new pharmacological molecules or gene therapy that enhance nerve regeneration and limit disease progression.

著者スポットライト:革新的なモデルによる角膜神経支配研究の進歩 

Here, we propose three different methods of damaging the sensory fibres innervating the cornea. These methods facilitate the study of axon regeneration in mice. These three methods, which are adaptable to other animal models, are ideal for the study of corneal innervation physiology and regeneration.

マウス角膜の神経栄養性角膜炎と神経再生を誘導する3つの戦略

The cornea is a transparent tissue that covers the eye and is crucial for clear vision. It is the most innervated tissue in the body. This innervation ...

円錐角膜で角膜コラーゲン架橋の三つの異なるプロトコル：従来は、加速してイオントフォレーシス

要約

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糖尿病性角膜症のためのアデノウイルス遺伝子治療：ヒト臓器培養角膜と輪部上皮細胞における創傷治癒に及ぼす影響と細胞マーカーの発現を幹

内皮角膜移植のために角膜ドナー組織の準備

角膜再生のためのニッチを装備膜を製造するためのマイクロ光とエレクトロスピニングの組み合わせ

「オールレーザー」内皮移植

強膜ウサギモデルで軸性近視の予防のためのリボフラビンおよび紫外線A放射線を用いて架橋

架橋 (TXL) 近視治療の組織の評価ツールとしてウサギの強膜の第 2 高調波発生信号

前のヴィヴォ角膜器官培養モデルの創傷治癒の研究

角膜移植片の間質特徴の組織学的様解析のための全視野光コヒーレンス顕微鏡

操作された線維芽細胞増殖因子によって刺激された加速治癒を伴うデスメのストリッピングのみのヒト角膜器官培養モデル1

マウス角膜の神経栄養性角膜炎と神経再生を誘導する3つの戦略

円錐角膜で角膜コラーゲン架橋の三つの異なるプロトコル：従来は、加速してイオントフォレーシス

要約

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糖尿病性角膜症のためのアデノウイルス遺伝子治療：ヒト臓器培養角膜と​​輪部上皮細胞における創傷治癒に及ぼす影響と細胞マーカーの発現を幹

内皮角膜移植のために角膜ドナー組織の準備

角膜再生のためのニッチを装備膜を製造するためのマイクロ光とエレクトロスピニングの組み合わせ

「オールレーザー」内皮移植

強膜ウサギモデルで軸性近視の予防のためのリボフラビンおよび紫外線A放射線を用いて架橋

架橋 (TXL) 近視治療の組織の評価ツールとしてウサギの強膜の第 2 高調波発生信号

前のヴィヴォ角膜器官培養モデルの創傷治癒の研究

角膜移植片の間質特徴の組織学的様解析のための全視野光コヒーレンス顕微鏡

操作された線維芽細胞増殖因子によって刺激された加速治癒を伴うデスメのストリッピングのみのヒト角膜器官培養モデル1

マウス角膜の神経栄養性角膜炎と神経再生を誘導する3つの戦略

糖尿病性角膜症のためのアデノウイルス遺伝子治療：ヒト臓器培養角膜と輪部上皮細胞における創傷治癒に及ぼす影響と細胞マーカーの発現を幹