著者らは、部分的に研究活動をサポートし、FP7 BiophotonicPlusプロジェクト「LITE」が付与されたトスカーナ地方（POR CREO FESR 2007-2013、坂東ユニコR＆S 2012）から資金提供を受けFORTEプロジェクト、EU FP7 ECHORD ++実験LA-ROSESに感謝したいですトスカーナ地域による。

研究は、病院の倫理委員会の承認を得て、将来に向かって行きました。インフォームドコンセントを得ました。研究は、ヘルシンキ宣言の教義を遵守していました。 1.ドナー内皮準備<ol><li>室温でローカルアイバンクにより調製したドナー角膜を使用してください。 </li><li>手術室では、その送達コンテナからドナー角膜を引き出し、角膜の輸送に使用されている組織保存と栄養のためのソリューションを離れて設定します。 </li><li>液体が流れ、可変圧力を作成することができますその中に人工前房、上のドナー角膜 - 強膜リムを配置。組織保持ヘッドで角膜をカバーしています。 </li><li>角膜の保存と栄養の液体で満たされたシリンジに3ウェイコネクタを介して人工前房（AAC）を接続します。 </li><li>所定の位置にしっかり保持器を保持するために圧縮リングを使用してください。 </li><li> SYRを使用してください（1.7参照）を最適圧力に達するまで組織保存溶液で前房を満たす：房内の圧力を維持するために、AACに接続インゲ。コネクタを閉じます。 </li><li>指で前方のチャンバー内の圧力をテストします。 （範囲60〜70 mmHgの中で）右内の圧力に到達するまでの内部の圧力を変更します。 3ウェイコネクタを閉じます。 </li><li>光コヒーレンスThomography（OCT）とドナー角膜の厚さを測定します。機器の光学系の前に固定された位置に、その角膜と前房を維持した後、全厚-OCT取得を取ります。 </li></ol>ドナー内皮の2フェムト秒レーザーの準備<ol><li>フェムト秒レーザ装置の下でドナー角膜の圧平を実行します。後部サイドカット、完全な層状と前サイドカット：3その後のカット​​で、ドナー組織を切断するfemtosecレーザーを使用してください。 3カットのために、以下のパラメータを設定します。<ol><li>フルラメラカット（ラスターパターン、アウトスタート）の場合は、必ず95ミクロンを減算、ドナー角膜（1.8で説明したように10月で測定）の最も薄い点に対応する切り込み深さを設定します。範囲（作業深さに応じて）0.8〜0.9μJにパルスエネルギーを設定します。 8.7ミリメートルに直径を設定します。 2ミクロンの接線スポット分離を設定します。 2μmのラジアルスポット分離を設定します。 </li><li>前方サイドカットについては、前回の完全ラメラカット30μmより深い後部の深さを設定します。 2.10μJにパルスエネルギーを設定します。 8.6ミリメートルの直径。層分離しながら3以上3μm以下にスポット分離、。 </li><li>後部サイドカットのために、後側の前方深さを見つける前方フルラメラカット30μmよりをカット。 900ミクロンの後方の深さを設定します。 2.10μJにパルスエネルギーを設定します。 8.3ミリメートルの直径。 2ミクロンのスポット分離; 2ミクロンの層分離。 </li></ol></lI&gt; </ol> 3.受信者の目の準備<ol><li>手術のために患者を準備します。刃を予め較正4.0ミリメートルと12時1 4.00ミリメートル角膜切開を行います。 2時位置に配置された1.2ミリメートル予め較正刃と1輪部穿刺を作ります。 30°刺すナイフで6時位置に別の輪部穿刺を行います。 </li><li> 2時穿刺を介して、患者の前室に前室のメンテナを挿入します。 </li><li>専用フックで1 8.2ミリメートルの直径の円形descemetorexisを実行します。 </li><li>後部間質からデスメ膜および内皮を除去し、デスメフックで組織を削除します。 </li></ol> 4.発色団の準備<ol><li> 1.5ミリリットルマイクロチューブにインドシアニングリーン粉末1mgを置きます。 </li><li>滅菌水の9 mgの追加（ICG水溶液はw / wの10％です）。 </li><li>手動金属攪拌機を備えたICG粉末と水を混ぜます。 </lI&gt; </ol>ドナー内皮の5染色<ol><li>インジェクタ表面に接触する内側と、ビジネスサービスインジェクタの広い部分にドナー内皮を置きます。 </li><li>スパチュラを使用して、その周辺部に、発色団溶液でドナー内皮の内側を染色します。正しく染色された組織は、均一な緑がかった色をしています。ステップ5.3を起動する前に3分を待ちます。 </li><li>ビジネスサービスインジェクタの前方部分にドナー内皮を引き出し、ロールバックされます。 </li></ol> 6.ドナー内皮の挿入<ol><li>内皮レンチキュラのための非外傷性の同軸鉗子を使用して、折り畳まれたドナー内皮をつかみ、挿入します。 </li><li>前房のメンテナを削除します。 </li><li>ナイロン10.0単一シュティッヒと角膜切開と（ステップ3.1で実行）穿刺を縫合。 </li><li>ドナー組織を展開し、受信者の角膜に対してそれを押すように気泡を注入します。気泡必見カンプletely前房の空間を埋めます。 </li></ol> 7.レーザー溶接<ol><li>フックやヘラで角膜の外側から気泡を移動させると内側から、受信者の角膜の中心にドナーレンチキュラを配置します。 </li><li>開口数（NA）として0.22で、300μmのコア径の滅菌光ファイバを装備した810 nmの発光ダイオードレーザーを使用します。 </li><li>眼球外ファイバ先端を維持し、透明な角膜組織を通して、染色された内皮に向かってレーザ光を実現します。ファイバチップは、非接触構造です。 </li><li>単一スポット発光モード、70〜80ミリ秒のパルス持続時間、パルス当たり35〜40ミリジュール：レーザーは、次の設定を使用します。彼は-Neが上のビームを目指しています。 </li><li>ドナー内皮の染色周囲に単一のレーザスポットを提供します。順次スポットを配信：最終的な側面は、ドナーレンチキュラの周辺のスポットの環です。 2 ADJA間の距離セントスポットセンタースポット径のダブルです。 </li><li> 0.3％トブラマイシンおよび0.1％デキサメタゾン眼科用懸濁液と一緒に、患者の目にコンタクトレンズを適用します。 </li></ol>

<ol>
	<li>Tan, D. T., Dart, J. K., Holland, E. J., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+transplantation.">Corneal transplantation.</a> Lancet. 379 (9827), 1749-1761 (2012).</li><li>El Husseiny, M. A., Manero, F., Gris, O., Elies, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Historical+Review+and+Update+of+Surgical+Treatment+for+Corneal+Endothelial+Diseases.">Historical Review and Update of Surgical Treatment for Corneal Endothelial Diseases.</a> Ophthalmol Ther. , (2014).</li><li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+tissue+welding+in+ophthalmic+surgery.">Laser tissue welding in ophthalmic surgery.</a> J Biophotonics. 1 (4), 331-342 (2008).</li><li>Pini, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combining+femtosecond+laser+ablation+and+diode+laser+welding+in+lamellar+and+endothelial+corneal+transplants.">Combining femtosecond laser ablation and diode laser welding in lamellar and endothelial corneal transplants.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XVIII. 6 (844), 684411-1-684411-7 (2008).</li><li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=All-laser'+endothelial+corneal+transplant+in+human+patients.">All-laser' endothelial corneal transplant in human patients.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XXII. 8209, 82091O-1-82091O-3 (2012).</li><li>Rossi, F., Pini, R., Menabuoni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+and+model+analysis+on+the+temperature+dynamics+during+diode+laser+welding+of+the+cornea.">Experimental and model analysis on the temperature dynamics during diode laser welding of the cornea.</a> J Biomed Opt. 12 (1), 014031-1-014031-7 (2007).</li><li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-assisted+corneal+welding+in+cataract+surgery:+retrospective+study.">Laser-assisted corneal welding in cataract surgery: retrospective study.</a> J Cataract Refract Surg. 33 (9), 1608-1612 (2007).</li><li>Buzzonetti, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+Welding+in+Penetrating+Keratoplasty+and+Cataract+Surgery+in+Pediatric+Patients.+Early+Results.">Laser Welding in Penetrating Keratoplasty and Cataract Surgery in Pediatric Patients. Early Results.</a> J Cataract Refract Surg. 39 (12), 1829-1834 (2013).</li><li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+'anvil'+profile+in+femtosecond+laser-assistedpenetrating+keratoplasty.">The 'anvil' profile in femtosecond laser-assistedpenetrating keratoplasty.</a> Acta Ophthalmol. 91 (6), e494-e495 (2013).</li><li>Canovetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-assisted+penetrating+keratoplasty:+one+year&#8217;s+results+in+patients,+using+a+laser-welded+&#8220;anvil&#8221;-profiled+graft.">Laser-assisted penetrating keratoplasty: one year&#8217;s results in patients, using a laser-welded &#8220;anvil&#8221;-profiled graft.</a> Am J Ophthalmol. 158 (4), 664-670 (2014).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

「すべてのレーザー「内皮移植は低侵襲性角膜移植に独創的なアプローチです。 プロトコル内で説明するすべての手順は、滅菌手袋、ガウン、マスクとキャップの使用などの手術中に一般的な慣行である衛生と消毒の手順を観察し、手術室で行いました。 ICG溶液は、すぐにドナー内皮の染色におけるその適用前に、手術室で調製しました。 ICG粉末、水および染色溶液?...

本研究では、ドナー組織と受信者のベッドの上に溶接する近赤外ダイオードレーザーを製造するためのフェムト秒レーザーの使用に基づいて内皮角膜移植への独創的なアプローチを提示します。ドナー角膜の術中測定が正しくドナー組織の大きさを設計する必要があります。内皮角膜内皮疾患1,2の治療に貫通角膜移植を置き換えるために提案されています。この技術の主な利点は、手術、移植片拒絶のリスクが減少し、目の整合性の保存時に角膜移植、減少麻酔を貫通に対して、より高速視力回復です。主なリスク要因は、手術後のドナーレンチキュラー転位です。標準的な技術は、それが気泡の注入によって維持され、その最終的な位置にドナー内皮を挿入することによって実行されます。何の縫合糸があるため、機械的な生物物理学的および次元キャラの使用されていません内皮のcteristics。また、視力の回復が原因で、移植厚い組織に主な理由は、ドナーとレシピエントの組織との間のミスマッチのために制限することができます。 ここでは、これらの主要な問題を克服することができる内皮角膜移植を行う際の手順を紹介します。ドナー内皮はレーザー溶接技術を用いて、その最終位置に確保することができます。これは、制御され、ローカライズされた光熱過程である：それは、ドナー/レシピエントの界面に誘導することができます。これは、過去10年間に研究し、角膜を貫通および内皮3-5の移植で提案されています。近赤外光（波長810 nm）の低電力ダイオードレーザーによって放射され、創傷部位での生体組織に向かって送出されます。角膜は、この波長に対して透明であり、当然ながら、レーザ光を吸収するために、この組織を作るためには、発色団でそれを染色する必要があります。提案された染料は、無菌飽和でありますインドシアニングリーン（ICG）のd水溶液。我々は、角膜組織が ​​適切にこのICG製剤で染色されている場合、それは810ナノメートル6に吸収ピークを示すことを実証しました。また、ICGは、広く臨床診断で使用され、その安全性は既にヒト被験体において実証されています。染色された角膜は、ダイオードレーザー光のエネルギーを吸収し、得られた主な効果は、溶接部位での制御された温度上昇です。熱的効果は無染色の組織において誘導されていません。温度拡張機能は、冷却時の傷の壁のすぐclosuringで、間質コラーゲンで可逆的熱変性を誘導します。このレーザ溶接効果がまず白内障手術7,8及び角膜移植9,10を貫通するに実証されました。私たちはこの論文で提示されている最適化されたアプローチは、内皮角膜移植に応用するために研究されています。 提案された手術では、単一のレーザスポット（ミリ秒の持続十）AReは、スポット寸法（直径ミクロンの数百）内に局在光熱効果で、その結果、組織に送達：誘導された効果は、ドナー/ホストインターフェイスに閉じ込められたコラーゲンの光凝固からなる、ハードレーザー溶接です。溶接部位でのコラーゲンの変性の結果は、このように標準的な技術（ステッチ）で取得することは不可能である縫合効果を提供する、ドナーとホスト組織との間に強い接着力です。組織は、短いフォローアップ（1ヶ月）に彼の自然な外観を取り戻し、ドナー/宿主組織との間の接着は、治癒期の非常に早い段階で提供溶接することによって改善されます。 厚いドナー組織の移植、すなわち内皮角膜移植の他の主要な危険を回避するために、intrasurgical光コヒーレンストモグラフィー（OCT）を使用する：正しいカットプロファイルで設計することができるように、商用デバイスは、ドナー角膜の厚さを測定しますザfemtosecレーザー。提案された「すべてのレーザー「内皮移植は、このように、この低侵襲手術の臨床結果を改善するように思われます。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Indocyanine Green</td>
			<td>Pulsion Medical Systems, Germany</td>
			<td>ICG-PULSION (http://www.pulsion.com/international-english/perfusion/icg-pulsion/)</td>
			<td>Alternative product: IC-GREEN, Akorn&#160; Inc., Lake Forest, Illinois- US (http://www.icginjection.com/)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Femtosecond Laser&#160;</td>
			<td>Abbott Medical Optics,&#160; Abbott Laboratories Inc. Abbott Park, Illinois, USA</td>
			<td>iFS150 (http://www.abbottmedicaloptics.com/products/refractive/ilasik/ifs-advanced-femtosecond-laser)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical Coherence Tomography (OCT)</td>
			<td>Carl-Zeiss Meditec, Dublin, California- US (http://www.zeiss.com/meditec/en_de/home.html)</td>
			<td>Visante</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diode Laser</td>
			<td>E.l.En. Group s.pa., Calenzano-FI, Italy (http://www.elengroup.com/en/divisions/medical)</td>
			<td>Mod. WELD 800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artificial Anterior Chamber</td>
			<td>CORONET, corneal graft products. Network Medical Products Ltd. Coronet House, Kearsley Road, Ripon, North Yorkshire, HG4 2SG, UK</td>
			<td>&#160;Artificial Anterior Chamber (A.A.C.) with large and small tissue-retaining heads. Code 51-935 (http://www.networkmedical.co.uk/ophthalmic_artificial_anterior_chamber.html)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solution for tissue preservation and nutrition&#160;&#160;</td>
			<td>&#160;AL.CHI.MI.A. Srl, Viale Austria 14, 35020 - Ponte S. Nicol&#242; - PD 
			&#160;ITALY</td>
			<td>Carry-C media for corneal deturgescence and transport at room temperature - 12 x 50 ml (http://www.alchimiasrl.com/en/organ-culture-at-31&#176;-c-eb/carry-c-eb)</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an &#8220;all-laser&#8221; endothelial transplant

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an intended depth, and a near infrared diode laser to weld the corneal tissue. The proposed technique enables to reach the three main goals in endothelial keratoplasty: a precise control in the thickness of the donor tissue; its easy insertion in the recipient bed and a reduced risk of donor lenticule dislocation. The donor cornea thickness is measured in the surgery room with optical coherence tomography (OCT), in order to correctly design the donor tissue dimensions. A femtosecond laser is used to cut the donor cornea. The recipient eye is prepared by manual stripping of the descemetic membrane. The donor endothelium is inserted into a Busin-injector, the peripheral inner side is stained with a proper chromophore (a water solution of Indocyanine Green) and then it is pulled in the anterior chamber. The transplanted tissue is placed in the final and correct location and then diode laser welding is induced from outside the eyeball. The procedure has been performed on more than 15 patients evidencing an improvement in surgery performances, with a good recovery of visual acuity and a reduced donor lenticule dislocation event.

「全てのレーザ」外科手術を低侵襲角膜移植を行うことが提案されています。手順は、（ 図1参照）を実行するのは簡単である：標準内皮移植に関して、角膜の厚さを測定ドナー組織を染色し、レーザー光を送達する唯一のステップが追加されます。達成される利点は、主に、数分の増加の外科時間を補償します。ドナー角膜の厚さとドナーレンチキュラー寸法をカスタマイズ?...

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An &amp;#8220;All-laser&amp;#8221; Endothelial Transplant

An all laser procedure is proposed in the endothelial transplant. The surgical technique is based on the use of a femtosecond laser to prepare the donor tissue. Laser welding technique is then used to secure the donor endothelium in the correct position.

「オールレーザー」内皮移植

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an ...

Research

JoVE Journal

Medicine

An &#8220;All-laser&#8221; Endothelial Transplant

9.3K ビュー.  Italian National Research Council. An all laser procedure is proposed in the endothelial transplant. The surgical technique is based on the use of a femtosecond laser to prepare the donor tissue. Laser welding technique is then used to secure the donor endothelium in the correct position.