私たちの研究室での研究活動は現在オーストラリア研究会議 (ARC、DP170100008、DP180100144)、米国空軍科学研究局 (AFOSR、FA9550-15-1-0188) Stiftelsen オルレ Engkvist Byggmästare によって資金を供給 (2016/348)。我々 は過去のハナアブ株、Cederholms Lantbruk と C M & T L グリーン、牛糞やハナアブの農場へのアクセスのための息子の開発に貢献している研究室のメンバーに感謝、アデレードとコレクションのウプサラ植物園などにより、継続的なサポート。

1. 捕虜を確立するE. テナックスコロニー
<ol><li>成熟した幼虫 (ステップ 1.2) のコレクションを介してコロニーを確立または自由飛行ハナアブ (ステップ 1.3) のコレクション。</li>
	<li>
成熟した幼虫のコレクション
	<ol>
<li>2 番目を収集し、第三齢幼虫牛農場で肥料ピットから。 注: 成熟した幼虫は、蛹になる暗い乾燥した環境を積極的に求めていると、渡り鳥の段階の開始時に検索する最も簡単です。これは湿った糞尿が、ピットは大量のわらを含む乾燥地域に近い肥料の境界線の近くになりがち。スウェーデンのウプサラ近郊の農場で牛からアクセス許可の下を集めました。</li>
		<li>ステップ 3.2 のとおり牛の糞尿で成熟した幼虫をリア.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
野生のハナアブのコレクション
	<ol>
<li>植物園や公園から通常のフィールドに網で野生ハナアブを収集開花植物の豊かさがあります。 注: [アクセス許可のいずれか 3 つのアデレード植物園などの様々 な植物園とウプサラ、スウェーデン各地の公園、マイゴンガ、南オーストラリア州で酪農を含むいくつかの場所から集めました。</li>
		<li>ハウス フィールドは、ステップ 2 で説明したようにハナアブを収集しました。</li>
	</ol>
</li>
</ol>2 ハナアブの住宅と長期のメンテナンス
<ol><li>グループ 20 以下のビニール袋を 30 cm × 45 cm のケージ飼育昆虫ハナアブの家 (25 cm × 25 cm × 25 cm) より大きいグループのため。</li>
	<li>広告自由、いくつかの湿った脱脂綿の上に置かれた蜂花粉と 2-3 mL 蜂蜜の 10-20 粒の形でを水し、食糧を提供します。 注: ビニール袋に住宅、重要だ、綿球湿ったが、過度に飽和ではなく、袋の中の水のすべての蓄積は生存率に悪影響することができます。逆に、昆虫飼育ケージ内に住宅、メッシュ面は、重要な蒸発が発生します。コットン ボールしたがって浅いコンテナーに配置する必要があり、完全に飽和状態になります。<ol>
<li>室温で 6 時間を供給するハナアブを残します。</li>
		<li>8-10 ° C で冷蔵庫の中に、自分の住宅に食料と水とハナアブを置き、完全な暗闇の中で保持します。 注: 暗闇の中で 8-10 ° C でハナアブを格納するハナアブ活性と代謝率の減少と、休止状態の状態を入力するが発生します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>ごとに 3-4 日間は、冷蔵庫、したがって人工冬眠を壊すと、両方の栄養とする手入れをすることを許可からハナアブを削除します。<ol>
<li>新しいビニール袋または生鮮食品および水ときれいな虫かごにハナアブを転送します。この転送は小さい数のハエ、または多数の走光性を利用しても、手動で実行できます。</li>
		<li>走光性を利用して、きれいな虫かごを古いものに参加、エスケープせず 2 つの間を自由に移動する、ハナアブの開口部があることを確認します。不透明な生地で古い虫かごをカバーします。ハナアブは光に向かって、きれいな虫かごに移動します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>フィードし、6 時間室温で新郎にハナアブを許可します。</li>
	<li>ハナアブ、食料や完全な暗闇の中で 8-10 ° C で冷蔵庫の中に、自分の住宅に水を返します。これは別段、ハナアブの人工冬眠です。</li>
	<li>捕らわれの身の間健康とハナアブの長寿を保証するごとに 3-4 日間、休止状態の周期的な破壊を続けます。</li>
</ol>3 E. テナックスの研究所飼育
<ol><li>後部の成熟した幼虫は牛農場 (ステップ 3.2) から収集または妊娠野生つかまえられた女性 (ステップ 3.3) の卵をまたリアします。</li>
	<li>
牛の農場から成熟した幼虫の飼育研究所
	<ol>
<li>牛の糞尿で 30 L バケツの畜産農家から採取した幼虫を配置します。</li>
		<li>大きな箱や袋 (50-60 L の最小ボリューム) 内の成熟した幼虫を含む、バケツを置き、20-30 リットル バケツの縁の高さまで木の削りくずを配置します。 注: これは 3rd令幼虫は木の削りくずをクロールし、蛹にことができます。</li>
		<li>幼虫も、新興のハナアブが脱出できるようにボックスや袋、上にドレープすることができます天井から二重層状蚊帳をハングします。 注: セットアップを囲む任意のエスケープの幼虫は、はまりこのテープに蛹と念のため、両面粘着テープを使用できます。彼らが行う場合は、羽化前に蛹を削除します。</li>
		<li>幼虫と蛹室内温度 (21.5 ± 2.5 ° C) で、営業時間中に間接太陽光と室内灯のいずれかへの露出または暗い光: 12 h の 12 h: 明暗サイクルで維持します。 注: 24 h ライトへの露出は生存率に悪影響することができます。仔牛農場蛹化時から収集されたコレクションの時に自分の成熟度に応じてコレクション後 1-20 日から変わります。</li>
		<li>食べ物や水の掛かる蚊内予想羽化日の前に、(ステップ 2.2 で準備) エンクロージャを net し、2-3 日毎に交換を提供します。羽化蛹化後 7-10 日が発生します。</li>
		<li>新興住宅のステップ 2 で説明したようにそれらを配置する前に室温で 6 時間を供給するハナアブを許可します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
妊娠野生キャッチ女性から生まれた卵の所飼育
	<ol>
<li>卵、ハナアブ住宅住宅 (ステップ 2) を変更する前と冷蔵庫へそれらを戻す前に確認してください。妊娠女性が野生のつかまえ産卵は、両方の 8-10 ° c と室温でに発生します。<ol>
<li>100 mm × 20 mm シャーレ水道水 70 mL を含む卵を置き、孵化が発生すると、通常は産卵後 2-3 日まで室温で維持します。</li>
		</ol>
</li>
		<li>場所には、新鮮なウサギの糞 1 L と 1 L の水道水を含む 2.3 L バケツで幼虫が孵化しました。<ol>
<li>2-3 日毎のスラリーを確認し、3rdの幼虫が出てくる前にスラリーがに乾燥しませんように、必要に応じて追加の水道水を追加します。</li>
		</ol>
</li>
		<li>兎糞便スラリー、大きいボックス (最小容積 30 L) 内で幼虫を含む、バケットの位置 20 L の木の削りくずを含みます。木の削りくずは、バケツの縁の高さを確認します。 注: これは 3rd令幼虫は木の削りくずをクロールし、蛹にことができます。<ol>
<li>幼虫も、新興のハナアブが脱出できるようにボックスに二重層状蚊帳を置きます。</li>
		</ol>
</li>
		<li>幼虫と蛹室内温度 (21.5 ± 2.5 ° C) で、営業時間中に間接太陽光と室内灯のいずれかへの露出または暗い光: 12 h の 12 h: 明暗サイクルで維持します。 注: 24 h ライトへの露出は生存率に悪影響することができます。</li>
		<li>15-20 日後に蛹化を期待してください。蛹を収集し、虫かご、eclose そこにハナアブを可能にします。</li>
		<li>羽化予定日の前に (手順 2.2 で準備)、食料や水を提供 - 羽化、蛹化の後の 6-10 日が発生して 2-3 日毎を置き換えます。</li>
		<li>ステップ 2 で説明している住宅にそれらを配置する前に室温で 6 時間を供給するハナアブを新興を許可します。 注: 両方の幼虫の蛹化と蛹の羽化を延期できる記憶域で 8-10 ° c. で暗闇の中でこの目的のためには、兎糞便液および木の削りくずで蛹に幼虫を格納します。</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
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Genetic Variation in the dronefly Eristalis tenax.</a> Heredity. 42 (2), 223-236 (1979).</li><li>Ireland, S., Turner, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+larval+crowding+and+food+type+on+the+size+and+development+of+the+blowfly,+Calliphora+vomitoria.">The effects of larval crowding and food type on the size and development of the blowfly, Calliphora vomitoria.</a> Forensic Science International. 159, 175-181 (2006).</li><li>Dolley, W. L., Golden, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+sex+and+age+on+the+temperature+at+which+reversal+in+reaction+to+light+in+Eristalis+tenax+occurs.">The effect of sex and age on the temperature at which reversal in reaction to light in Eristalis tenax occurs.</a> Biology Bulletin. 92 (3), 178-186 (1947).</li></ol>

著者が明らかに何もありません。

当社の技術 (図 1) を使用してハナアブ研究室で 1 年以上の期間保持され正常に捕われの身の39の 7 ヶ月後行動実験に使用します。確かに、だが直感的より自然な環境で、ハナアブを維持する場合でも 12 h ライト: 12 下 h 暗い条件で、部屋の温度、大幅に減少余命 2-3 カ月。E. テナックス年間の我々 の人工冬眠のサイクルでは以前よりも大幅に長く維持する (77 日33、4 ヶ月9、18 週間30) 別のプロトコルを使用して試行します。この増加の寿命に影響を与える主な要因は 8-10 ° c. で人工冬眠の使用である可能性が高い休止状態を壊す周期、すべての 3-4 日 (ステップ 2、図 1)、我々 によりハナアブ フィードし、自己を育てる、栄養状態と健康、ハナアブの重量 (観察された増加によって証明されるよう維持の両方に図4)、(図 3とを参照してください39) 捕われの身で長期間後も自発運動に変化なし。確かに、人工冬眠で不成功な試みの文学のレポートは金型9の存在と死亡率の増加につながる、休止状態のサイクルを壊さない。
さらに、食糧源として花粉の規定として文学の中でいくつかの論争があります。いくつかの論文は、蜂の花粉は十分で、産卵のために特別ではなく、乾燥や確かに新鮮な花粉の規定のみが適切な9,29状態します。我々 の調査結果を示す、水と蜂蜜の蜂の花粉を補完する、わかります長寿と捕われの身、男女 (図 4) や産卵で起こっているに見られる体重増加での長い期間の後にも、産卵捕われの身の39の 5 ヶ月以上後の女性。この長寿の増加によりすべてのライフ ステージでハナアブの挙動を調べることができます。
フィールドに、女性ハナアブは季節休止状態前に受精、生殖休眠、精子の保存場所および低開発、卵母細胞をまで春28のまま。典型的な女性は、60 日間293000 産卵できるこれらの卵の飼育はそのための私たちの捕虜の人口増加に迅速かつ効率的な方法。ただし、休止状態の期間の後の卵の開発につながる要因の私達の現在の理解は限られています。温度、湿度、光量、栄養状態はすべて生殖休眠28,40の制御の役割をプレーするように提案されています。などの実験操作は、産卵のタイミングと速度の大きい統治をもたらすかもしれない。
同様に、我々 が正常に遅延幼虫の開発だけでなく、蛹、羽化 8-10 ° C で 2 週間、暗闇の中で記憶域によって生存率が大幅に長くなる可能性があります。確かに、蛹の温度が 10 ° C に 25 ° C から落とされたとき 37 日間の蛹期間増加したと報告ヒール30捕虜の人口の人口統計の大きい操作のこれらの戦略を採用し、卵の生産および/または蛹の開発を遅らせることになります。
大規模降伏よりも私たちの要件の多くの大きい重要性の供給の時間的一貫性ですが、これは温室で受粉など、他の用途により重要かもしれません。兎糞便で私たちの技術を使用するとき私たちから得たこと 163 ± 34 このハナアブ卵 (N = 3) の各クラッチがわかった。我々 はこれらが大幅9 幼虫の生育に影響を与えるとして関与している、いずれかの減少の過密と食品の競争によってまたは、温度を調整することによってこの収量を増やすことができるかもしれないことを考えると典型的な女性は産むまで 200 卵40、 ,31,40,41。ただし、表示メディアの基礎が大きく収量32に影響を及ぼすことはありません。さらに、他の脊椎動物の29,の30,31,の42からの排泄物にではなく兎糞便は比較的臭気無料で、通常の実験室の条件の下に保持するコロニー追加の換気をしなくて。だけでなく、酵母などのサプリメントはメディアで幼虫の密度を減少または栄養の追加、利回り31,32,を完全に最適化するためにおそらく十分です 20-25 ° C の一定した温度を維持します。40。
自由に飛んでハナアブ、または遺伝的に多様な捕虜の人口を維持の十分な数を収集するための実用性は両方の実用的で、小規模な研究プロジェクトのための制限時間します。したがって、野生の交配雌の仔を飼育し、収穫成熟幼虫7供給を補完は、研究の場で大腸菌テナックスの通年利用の最も実用的なオプションをできます。これらのメソッドは両方大人ハナアブの寿命を確保するため必要があるし、によって置かれたすべての卵を飼育でコレクションが発生することができます季節によって限られる、妊娠女性を捕獲しました。

ハナアブなどの飛行挙動1、モーション ビジョン2、受粉効率3,4,のメカニズムの科学的な質問の範囲を調査するための有用なモデルとして浮上しています。5,6と微生物免疫7。しかし、ショウジョウバエ8などいくつかの他の双翅目モデルではなくラボは科学研究に使用するハナアブの飼育のための標準化されたプロトコルがないです。確かに、現在の文献では、 Eristalis テナックスハナアブを繁殖させるための方法について説明します、たとえこれらの多くは作物の受粉、生分解性の有機性廃棄物、または解剖学的研究のハナアブの大量培養の開発9,10,11します。 したがって、人口の遺伝的フィットネスを維持しながら健康的な堅牢なハナアブの一貫した供給を提供する容易なプロトコルの必要性に対処しません。
ミツバチとマルハナバチ、ハナアブ、最も重要な野生、ジェネラ リスト送グループ12,13の 1 つであります。約 6000 ハナアブ種世界14,15、スウェーデン16 75 属よりも 300 種とインド17,18,1969 属の 300 以上の種があります。たとえば、農学上重要なマーマレード ハナアブEpisyrphus balteatusとドローンのハエは、我々 はここに焦点を当てるEristalis テナックスにあるヨーロッパ、アメリカ、アジアの6,16、 17,18,19,20,21,22,23,24,25。ハナアブは年間を通しても 1 日を通して均等にアクティブではありません。確かに、季節や日も光強度の変動の時間だけでなく、温度、湿度、風速、影響ハナアブ26,27の活動パターン。フィールドに、地中海気候11年の任意の時間でEristalisを見つけることができますが、冬のアクティブなハナアブの数字が低く。逆に冷たい温帯気候でEristalisは冬の間休止状態し、フィールドを 10 月頃から 3 月28で積極的に動作しているが見つからない。
ハナアブを自由に飛んでは、フィールドに網で収集できます。確かに、温帯気候で、彼らは最大の豊かさでに発見されます、半ば、昼前に穏やかな秋26,27中夏の終わりで、晴れの日。また、第二にE. テナックス幼虫を成熟または 3 齢を識別しヒープ肥料などの有機物を腐敗または有機的汚染された小川10,11から収穫することができます。確かに、公開のラボは、 E. テナックスの飼育技術はすべてに基づいて有機的に汚染された水、植生や糞便問題9,10,29,のいくつかのフォームを介していずれかの幼虫を上げる30,31,32,33。 しかし、幼虫コレクション シーズンによって制限されます、秋11のスタートを春の終わりからツールでのみ実行可能なコレクションです。さらに、幼虫の豊かさは、周囲温度の変化は産卵と幼虫の発育率9,28回数に影響を与えるローカル気象パターンに影響されます。
したがって、季節や地元の天気予報イベントに関係なく実験を年間に行うことができるように飼育幼虫や卵室のハナアブの健全な株式を維持するために戦略が必要です。重要なは、ここで説明する手法は、野生交配雌のみからハナアブを繁殖させます。これはフランクスキらによる研究として重要です。10 、ことがわかった研究所の遺伝的多様性ハナアブの人口を飼育、もともと 120 成熟した幼虫から設立が急速に失われました。彼らは商業作物受粉目的に使用されるコロニーの補充、または完全に再確立、野外採集個体それぞれの春10これらの必要性の遺伝的多様性を維持するためにことを示唆します。
ビジョン、または求愛や交尾で使用される他の感覚で作業する場合、再植民地を確立することによって、または野外採集個体、植民地を定期的に補充することで遺伝的多様性を維持することをこうしてお勧めします。これは性選択に影響を与える人口の遺伝的浮動は重要です。確かに、野生では、男性のハナアブの識別し適切な仲間を傍受し同様に34彼らの領土を防御することによって権利を交配するため他の男性と競う必要があります。このプロセスにより、最高のビジョンと空間的注意と男性の交配で最も成功する可能性が高い、したがってこれらの特徴が次世代に伝わる。これらの継続的なプロセスの結果の効果を一部、ハナアブ35,36の視覚経路で性的二の存在によって発揮します。捕われの身で、男性はフィールドのように交尾する同じ障害を持っていない: まず、女性はすぐに利用できる、小型で限られたエンクロージャが他の交尾のアクセスを阻止するために行動する領土行動の効果を否定する第二に競争力のある男性。ショウジョウバエ、性選択の実験的除去が全体的なボディサイズ、精巣サイズと精子生産37, 男性の削減率の減少と捕獲下人口の有意な効果が示されています。求愛行動38。したがって、捕虜の繁殖プログラム、性選択の考慮せずその後実施された視覚的および動作試験の両方に大きな影響があります。
我々 はここで健全なハナアブの一貫した供給を提供するシンプルでコスト効果の高いソリューションをについて説明します。プロトコルは柔軟な再スタートおよび/または高級、研究の要求に応じて簡単です。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:903px;" width="902">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Bee Pollen</td>
			<td style="width:211px;">Forest Super Foods</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:357px;">any brand of bee pollen is suitable</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Honey</td>
			<td style="width:211px;">Bramwells</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>any brand of liquid honey is suitable</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Rabbit Faeces</td>
			<td style="width:211px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>can be substituted with cow or pig manure made into a slurry</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">BugDome</td>
			<td style="width:211px;">Australia Entomological Supplies</td>
			<td style="width:119px;">EM42222</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Plastic Bags</td>
			<td style="width:211px;">Woolworths Homebrand</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Mosquito netting</td>
			<td style="width:211px;">Clas Ohlson</td>
			<td>34-1113</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cotton Balls</td>
			<td style="width:211px;">Woolworths Select</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Fridge</td>
			<td>Hisense</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>fridge needs to maintain a stable 8-10&#176;C&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Buckets (2-3L)</td>
			<td style="width:211px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Large plastic tubs (30L)</td>
			<td style="width:211px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Wood shavings</td>
			<td style="width:211px;">Pollards Sawdust Supplies</td>
			<td>MaxiFlake (75)&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bag clips</td>
			<td style="width:211px;">IKEA</td>
			<td style="width:119px;">Bevara 303.391.70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Petri Dish (100mm x 20mm)</td>
			<td style="width:211px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">430167</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rearing and long-term maintenance of eristalis tenax hoverflies for research studies

世界的な推定 6000 種、ハナアブが飼いならされたミツバチに授粉を代替として生態学的重要です。しかし、彼らはまた管理されたラボ設定でモーション ビジョンと飛行力学を研究する有用な科学的なモデルです。幼虫は、有機的に汚染された水の開発、微生物免疫における投資を調査するための有用なモデルです。大規模商業繁殖農業のため既に行われている間、科学的研究のため捕虜の集団を維持するための標準プロトコルはありません。これは、期間が、一貫性のある、安定した、他の研究目的のために必要ですので、年間を通じて、堅牢な人口を提供するために失敗するピーク受粉中出力質量に焦点を当てて商業繁殖プログラムとして重要です。したがって、確立、維持および飼育下研究人口を更新する方法が必要です。ここでは、栄養と住宅の要件に加えての人工冬眠サイクル、 Eristalis テナックスの長期的維持のための利用について述べる。これらのメソッドを使用して、我々 は健康とE. テナックス以前のレポートと比較しての飼育個体の寿命を増加している大幅。我々 はさらに小規模な飼育方法と利回りを最適化および人口統計を操作するためのオプションについて説明します。

(図 1にまとめた) 視覚と行動の研究のための健全な人口を維持する 3 ウェイ戦略を開発しました。私たちのメソッドは、野生 (手順 1、図 1) からハナアブのコレクションを開始します。私たちの研究室でハナアブを収容昆虫ケージまたはビニール袋、人工冬眠サイクル (ステップ 2、図 1) の下で大幅に延長彼らの寿命。増加数の子孫は野生交配雌 (図 1の手順 3) から飼育することができます。
我々 は、時間の集中的な努力は、野生のハナアブの膨大な数を引く、たとえ環境の条件は有利なを発見しました。対照的に、私たちの 0.03 m3で最大 700 幼虫採集と農場ソース (ステップ 1、図 1) 野生のハナアブの多数にはるかに効率的な方法は、牛の糞尿ピットから収穫成熟した幼虫の飼育成功肥料。さらに、キャプチャされた妊娠女性の後部卵に私たちの技術が成功 (ステップ 3、図 1) ことが分かった。女性は秋の間に地中海性気候 (アデレード) でキャプチャされ、冬を施した 24 クラスター 19 女性から 20 週間の期間で、卵のいくつかのバッチ。これらの卵のバッチの 10 はすべての肥沃なされ、幼虫の孵化をもたらした水の中に置かれました。幼虫の 3 つのグループがこのポイントを超えて撮影し、兎糞便スラリーに配置、34 163 ± の結果でハナアブ、観測されたジェンダー バイアスなし (図 2) に登場 (平均 ± SD、N = 3)。
これらの飼育研究室ハナアブの健康は、キャプチャ フィールド個人に比べて女性のハナアブの自発運動と重量の比較によって決定されました。一般的な運動は、39を前述のように運動の活動の監視システム (LAMS) を使用して評価されました。重量 (図 3A) またはアクティビティ (図 3B) に有意差は認められなかった飼育実習と野生のつかまえられたハナアブの私たちの人工冬眠下で飼育下で 4 ヶ月サイクルの後.E. テナックスは人工冬眠のサイクルを使用せず実験室で維持されたとき、2.5-3 か月 (73 ± 5 女性のため 7 日間) と 79 ± 11 男性のため 4 日間の寿命と寿命が大幅に低下を見た。ハナアブが人工冬眠で保たれたとき彼らは 12 ヶ月以上住むことができます。
さらに、長期維持、説明した手法の効果はさらに飼育ラボ ハナアブの男女ともに時間をかけて重量の比較によって評価されました。一貫して重量を量る女性よりも男性の同等 (二元, N = 12,図 4p < 0.0001) で、男女の 4 ヶ月の期間にわたって体重の大幅な増加を見ました。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57711/57711fig1.jpg"> 図1:フロー図のアウトラインの健全な捕虜の人口の維持のための方法E. テナックス.(1) ここに記載されている手順から始まりますか成熟した幼虫牛糞 (ステップ 1.2) からまたは自由に飛行ハナアブ (ステップ 1.3) のコレクション。(2)、ハナアブに入って昆虫ケージまたはビニール袋、番号に依存します。8-10 ° C は壊れていてすべての 3-4 日で人工冬眠サイクルで保持されます。(3) 収集の幼虫は、その牛糞 (ステップ 3.2) に保持されます。演習中に産んだ卵は、兎糞便スラリー (ステップ 3.3) に配置されます。成熟に達すると、3rdの幼虫はさなぎになるところ周囲の鋸の塵にクロールします。羽化が 6-10 日後に発生する、このハナアブが住宅 (ステップ 2) に配置されます。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57711/57711fig1large.jpg">このファイルをダウンロードするここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57711/57711fig2v3.jpg"> 図2:  数と性比の E. テナックス正常に個々 の卵から飼育。E. テナックス蛹から、この数は、卵の 3 つのバッチから開発データを当研究室のレイアウト。卵は、野生で捕獲された女性によって築かれました。データは、ハエのセックスに色分けされています。率に有意差はありません。
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57711/57711fig3v3.jpg"> 図3:  研究室の人口健康の評価の飼育し、フィールドが長期飼育後女性ハナアブを収集します。(A)飼育実験室とフィールドの間の重量の比較が人工冬眠 (N = 12) 下で飼育下で 4 ヶ月後女性ハナアブをキャプチャします。育てられたの(B)活動レベルとフィールド、人工冬眠で捕われの身で 4 ヵ月後女性ハナアブをキャプチャしました。ハナアブの自発運動は、運動中に赤外線ビームを壊すそれらによって自発活動システムで測定しました。以前は、我々 は 6.7 時間自発活動モニター システム39完全 2 日目、一日の中で活動を平均として (Nフィールド キャッチNラボ飼育9 = = 12)。各箱型図の中央のマークは、中央を示していますボックス 75th百分位数に 25thのデータ、およびひげの端はデータの最大値を最小値から拡張します。
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57711/57711fig4v3.jpg"> 図4:  ラボの重量に及ぼす長期的メンテナンスの比較飼育どちらの性別のハナアブ。データは、人工冬眠で捕われの身で保持時間の関数としてハナアブ重量を表示します。すべてハナアブが私たちのラボ (各データ ポイントで N = 12) と t 中に産んだ卵から飼育した = 0 は蛹の孵化の時間、捕われの身で時間は動物の年齢と同じです。各箱型図の中央のマークは、中央を示していますボックス 75th百分位数に 25thのデータ、およびひげの端はデータの最大値を最小値から拡張します。

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Rearing and Long-Term Maintenance of Eristalis tenax Hoverflies for Research Studies

子育てと研究のEristalis テナックスハナアブの長期メンテナンス

手順の全体的な目標は、確立、維持および研究の設定でEristalis テナックスの捕虜の人口を更新することです。

With an estimated 6000 species worldwide, hoverflies are ecologically important as alternative pollinators to domesticated honeybees. However, they are ...

rearing-long-term-maintenance-eristalis-tenax-hoverflies-for-research

Research

JoVE Journal

Environment

Rearing and Long-Term Maintenance of Eristalis tenax Hoverflies for Research Studies

13.3K ビュー.  Flinders University. 手順の全体的な目標は、確立、維持および研究の設定でEristalis テナックスの捕虜の人口を更新することです。

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Waste Water Derived Electroactive Microbial Biofilms: Growth, Maintenance, and Basic Characterization

The growth of anodic electroactive microbial biofilms from waste water inocula in a fed-batch reactor is demonstrated using a three-electrode setup controlled by a potentiostat. Thereby the use of potentiostats allows an exact adjustment of the electrode potential and ensures reproducible microbial culturing conditions. During growth the current production is monitored using chronoamperometry (CA). Based on these data the maximum current density (jmax) and the coulombic efficiency (CE) are discussed as measures for characterization of the bioelectrocatalytic performance. Cyclic voltammetry (CV), a nondestructive, i.e. noninvasive, method, is used to study the extracellular electron transfer (EET) of electroactive bacteria. CV measurements are performed on anodic biofilm electrodes in the presence of the microbial substrate, i.e. turnover conditions, and in the absence of the substrate, i.e. nonturnover conditions, using different scan rates. Subsequently, data analysis is exemplified and fundamental thermodynamic parameters of the microbial EET are derived and explained: peak potential (Ep), peak current density (jp), formal potential (Ef) and peak separation (&#916;Ep). Additionally the limits of the method and the state-of the art data analysis are addressed. Thereby this video-article shall provide a guide for the basic experimental steps and the fundamental data analysis.

Chronoamperometric growth of anodic electroactive microbial biofilms in a fed-batch reactor using a three-electrode setup, controlled by a potentiostat, is demonstrated. The extracellular electron transfer is characterized using cyclic voltammetry in the presence of the electron donor and in the absence of the electron donor. Fundamental data analysis is demonstrated.

The growth of anodic electroactive microbial biofilms from waste water inocula in a fed-batch reactor is demonstrated using a three-electrode setup ...

環境学

Design and Construction of an Urban Runoff Research Facility

As the urban population increases, so does the area of irrigated urban landscape. Summer water use in urban areas can be 2-3x winter base line water use due to increased demand for landscape irrigation. Improper irrigation practices and large rainfall events can result in runoff from urban landscapes which has potential to carry nutrients and sediments into local streams and lakes where they may contribute to eutrophication. A 1,000 m2 facility was constructed which consists of 24 individual 33.6 m2 field plots, each equipped for measuring total runoff volumes with time and collection of runoff subsamples at selected intervals for quantification of chemical constituents in the runoff water from simulated urban landscapes. Runoff volumes from the first and second trials had coefficient of variability (CV) values of 38.2 and 28.7%, respectively. CV values for runoff pH, EC, and Na concentration for both trials were all under 10%. Concentrations of DOC, TDN, DON, PO4-P, K+, Mg2+, and Ca2+ had CV values less than 50% in both trials. Overall, the results of testing performed after sod installation at the facility indicated good uniformity between plots for runoff volumes and chemical constituents. The large plot size is sufficient to include much of the natural variability and therefore provides better simulation of urban landscape ecosystems.

This paper describes the design, construction, and function of a 1,000 m2 facility containing 24 individual 33.6 m2 field plots equipped for measuring total runoff volumes with time and collection of runoff subsamples at selected intervals for quantification of chemical constituents in the runoff water from simulated home lawns.

アーバン流出研究施設の設計と建設

As the urban population increases, so does the area of irrigated urban landscape. Summer water use in urban areas can be 2-3x winter base line water use ...

Physical, Chemical and Biological Characterization of Six Biochars Produced for the Remediation of Contaminated Sites

The physical and chemical properties of biochar vary based on feedstock sources and production conditions, making it possible to engineer biochars with specific functions (e.g. carbon sequestration, soil quality improvements, or contaminant sorption). In 2013, the International Biochar Initiative (IBI) made publically available their Standardized Product Definition and Product Testing Guidelines (Version 1.1) which set standards for physical and chemical characteristics for biochar. Six biochars made from three different feedstocks and at two temperatures were analyzed for characteristics related to their use as a soil amendment. The protocol describes analyses of the feedstocks and biochars and includes: cation exchange capacity (CEC), specific surface area (SSA), organic carbon (OC) and moisture percentage, pH, particle size distribution, and proximate and ultimate analysis. Also described in the protocol are the analyses of the feedstocks and biochars for contaminants including polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs), polychlorinated biphenyls (PCBs), metals and mercury as well as nutrients (phosphorous, nitrite and nitrate and ammonium as nitrogen). The protocol also includes the biological testing procedures, earthworm avoidance and germination assays. Based on the quality assurance / quality control (QA/QC) results of blanks, duplicates, standards and reference materials, all methods were determined adequate for use with biochar and feedstock materials. All biochars and feedstocks were well within the criterion set by the IBI and there were little differences among biochars, except in the case of the biochar produced from construction waste materials. This biochar (referred to as Old biochar) was determined to have elevated levels of arsenic, chromium, copper, and lead, and failed the earthworm avoidance and germination assays. Based on these results, Old biochar would not be appropriate for use as a soil amendment for carbon sequestration, substrate quality improvements or remediation.

Biochar is a carbon-rich material used as a soil amendment with the ability to sustainably sequester carbon, improve substrate quality and sorb contaminants. This protocol describes the 17 analytical methods used for the characterization of biochar, which is required prior to large scale implementation of these amendments in the environment.

汚染サイトの修復のために製造シックスBiocharsの物理的、化学的および生物学的特性評価

The physical and chemical properties of biochar vary based on feedstock sources and production conditions, making it possible to engineer biochars with ...

Administering and Detecting Protein Marks on Arthropods for Dispersal Research

Monitoring arthropod movement is often required to better understand associated population dynamics, dispersal patterns, host plant preferences, and other ecological interactions. Arthropods are usually tracked in nature by tagging them with a unique mark and then re-collecting them over time and space to determine their dispersal capabilities. In addition to actual physical tags, such as colored dust or paint, various types of proteins have proven very effective for marking arthropods for ecological research. Proteins can be administered internally and/or externally. The proteins can then be detected on recaptured arthropods with a protein-specific enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Here we describe protocols for externally and internally tagging arthropods with protein. Two simple experimental examples are demonstrated: (1) an internal protein mark introduced to an insect by providing a protein-enriched diet and (2) an external protein mark topically applied to an insect using a medical nebulizer. We then relate a step-by-step guide of the sandwich and indirect ELISA methods used to detect protein marks on the insects. In this demonstration, various aspects of the acquisition and detection of protein markers on arthropods for mark-release-recapture, mark-capture, and self-mark-capture types of research are discussed, along with the various ways that the immunomarking procedure has been adapted to suit a wide variety of research objectives.

Proteins are often used to mark arthropods for dispersal research. Methods for administering internal and external protein marks on arthropods are demonstrated. Protein mark detection techniques, either through indirect or sandwich enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs), are also illustrated.

管理と分散研究のための節足動物にプロテインマークを検出

Monitoring arthropod movement is often required to better understand associated population dynamics, dispersal patterns, host plant preferences, and other ...

Clean Sampling and Analysis of River and Estuarine Waters for Trace Metal Studies

Most of the trace metal concentrations in ambient waters obtained a few decades ago have been considered unreliable owing to the lack of contamination control. Developments of some techniques aiming to reduce trace metal contamination in the last couple of decades have resulted in concentrations reported now being orders of magnitude lower than those in the past. These low concentrations often necessitate preconcentration of water samples prior to instrumental analysis of samples. Since contamination can appear in all phases of trace metal analyses, including sample collection (and during preparation of sampling containers), storage and handling, pretreatments, and instrumental analysis, specific care needs to be taken in order to reduce contamination levels at all steps. The effort to develop and utilize "clean techniques" in trace metal studies allows scientists to investigate trace metal distributions and chemical and biological behavior in greater details. This advancement also provides the required accuracy and precision of trace metal data allowing for environmental conditions to be related to trace metal concentrations in aquatic environments.
This protocol that is presented here details needed materials for sample preparation, sample collection, sample pretreatment including preconcentration, and instrumental analysis. By reducing contamination throughout all phases mentioned above for trace metal analysis, much lower detection limits and thus accuracy can be achieved. The effectiveness of "clean techniques" is further demonstrated using low field blanks and good recoveries for standard reference material. The data quality that can be obtained thus enables the assessment of trace metal distributions and their relationships to environmental parameters.

Special care using "clean techniques" is required to properly collect and process water samples for trace metal studies in aquatic environments. A protocol for sampling, processing, and analytical procedures with the aim of obtaining reliable environmental monitoring data and results with high sensitivity for detailed trace metal studies is presented.

きれいなサンプリングと微量金属の研究のために川や河口ウォーターズの分析

Most of the trace metal concentrations in ambient waters obtained a few decades ago have been considered unreliable owing to the lack of contamination ...

Use of a Filter Cartridge for Filtration of Water Samples and Extraction of Environmental DNA

Recent studies demonstrated the use of environmental DNA (eDNA) from fishes to be appropriate as a non-invasive monitoring tool. Most of these studies employed disk fiber filters to collect eDNA from water samples, although a number of microbial studies in aquatic environments have employed filter cartridges, because the cartridge has the advantage of accommodating large water volumes and of overall ease of use. Here we provide a protocol for filtration of water samples using the filter cartridge and extraction of eDNA from the filter without having to cut open the housing. The main portions of this protocol consists of 1) filtration of water samples (water volumes &#8804;4 L or &gt;4 L); (2) extraction of DNA on the filter using a roller shaker placed in a preheated incubator; and (3) purification of DNA using a commercial kit. With the use of this and previously-used protocols, we perform metabarcoding analysis of eDNA taken from a huge aquarium tank (7,500 m3) with known species composition, and show the number of detected species per library from the two protocols as the representative results. This protocol has been developed for metabarcoding eDNA from fishes, but is also applicable to eDNA from other organisms.

We describe a protocol for filtration of water samples with a filter cartridge and extraction of environmental DNA (eDNA) without having to cut open the housing to remove the filter. This protocol is developed for metabarcoding eDNA from fishes, but is also applicable to eDNA from other organisms.

ろ過水のサンプルおよび環境DNAの抽出のためのフィルターカートリッジの使用

Recent studies demonstrated the use of environmental DNA (eDNA) from fishes to be appropriate as a non-invasive monitoring tool. Most of these studies ...

RGB and Spectral Root Imaging for Plant Phenotyping and Physiological Research: Experimental Setup and Imaging Protocols

Better understanding of plant root dynamics is essential to improve resource use efficiency of agricultural systems and increase the resistance of crop cultivars against environmental stresses. An experimental protocol is presented for RGB and hyperspectral imaging of root systems. The approach uses rhizoboxes where plants grow in natural soil over a longer time to observe fully developed root systems. Experimental settings are exemplified for assessing rhizobox plants under water stress and studying the role of roots. An RGB imaging setup is described for cheap and quick quantification of root development over time. Hyperspectral imaging improves root segmentation from the soil background compared to RGB color based thresholding. The particular strength of hyperspectral imaging is the acquisition of chemometric information on the root-soil system for functional understanding. This is demonstrated with high resolution water content mapping. Spectral imaging however is more complex in image acquisition, processing and analysis compared to the RGB approach. A combination of both methods can optimize a comprehensive assessment of the root system. Application examples integrating root and aboveground traits are given for the context of plant phenotyping and plant physiological research. Further improvement of root imaging can be obtained by optimizing RGB image quality with better illumination using different light sources and by extension of image analysis methods to infer on root zone properties from spectral data.

An experimental protocol is presented for assessment of soil grown plant root systems with RGB and hyperspectral imaging. Combination of RGB image time series with chemometric information from hyperspectral scans optimizes insights into plant root dynamics.

RGB とスペクトルのルート画像植物表現型解析および生理学的研究: 実験概要およびイメージ投射プロトコル

Better understanding of plant root dynamics is essential to improve resource use efficiency of agricultural systems and increase the resistance of crop ...

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

Although solitary bees provide crucial pollination services for wild and managed crops, this species-rich group has been largely overlooked in pesticide regulation studies. The risk of exposure to fungicide residues is likely to be especially high if the spray occurs on, or near host plants while the bees are collecting pollen to provision their nests. For species of Osmia that consume pollen from a select group of plants (oligolecty), the inability to use pollen from non-host plants can increase their risk factor for fungicide-related toxicity. This manuscript describes protocols used to successfully rear oligolectic mason bees, Osmia ribifloris sensu lato, from egg to prepupal stage within cell culture plates under standardized laboratory conditions. The in vitro-reared bees are subsequently used to investigate the effects of fungicide exposure and pollen source on bee fitness. Based on a 2 &#215; 2 fully crossed factorial design, the experiment examines the main and interactive effects of fungicide exposure and pollen source on larval fitness, quantified by prepupal biomass, larval developmental time, and survivorship. A major advantage of this technique is that using in vitro-reared bees reduces natural background variability and allows the simultaneous manipulation of multiple experimental parameters. The described protocol presents a versatile tool for hypotheses testing involving the suite of factors affecting bee health. For conservation efforts to be met with significant, lasting success, such insights into the complex interplay of physiological and environmental factors driving bee declines will prove to be critical.

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

Fungicide sprays on flowering plants may expose solitary bees to high concentrations of pollen-borne fungicide residues. Using laboratory-based experiments involving in vitro-reared bee larvae, this study investigates the interactive effects of consuming fungicide-treated pollen derived from host and non-host plants.

体外孤独な蜂の飼育: 幼虫の危険因子を評価するためのツール

Although solitary bees provide crucial pollination services for wild and managed crops, this species-rich group has been largely overlooked in pesticide ...

Experimental Protocol for Examining Behavioral Response Profiles in Larval Fish: Application to the Neuro-stimulant Caffeine

Fish models and behaviors are increasingly used in the biomedical sciences; however, fish have long been the subject of ecological, physiological and toxicological studies. Using automated digital tracking platforms, recent efforts in neuropharmacology are leveraging larval fish locomotor behaviors to identify potential therapeutic targets for novel small molecules. Similar to these efforts, research in the environmental sciences and comparative pharmacology and toxicology is examining various behaviors of fish models as diagnostic tools in tiered evaluation of contaminants and real-time monitoring of surface waters for contaminant threats. Whereas the zebrafish is a popular larval fish model in the biomedical sciences, the fathead minnow is a common larval fish model in ecotoxicology. Unfortunately, fathead minnow larvae have received considerably less attention in behavioral studies. Here, we develop and demonstrate a behavioral profile protocol using caffeine as a model neurostimulant. Though photomotor responses of fathead minnows were occasionally affected by caffeine, zebrafish&#160;were markedly more sensitive for photomotor and locomotor endpoints, which responded at environmentally relevant levels. Future studies are needed to understand comparative behavioral sensitivity differences among fish with age and time of day, and to determine whether similar behavioral effects would occur in nature and be indicative of adverse outcomes at the individual or population levels of biological organization.

Here, we present a protocol to examine larval zebrafish and fathead minnow locomotor activities and photomotor responses (PMR) using an automated tracking software. When incorporated in common toxicology bioassays, analyses of these behaviors provide a diagnostic tool to examine chemical bioactivity. This protocol is described using caffeine, a model neurostimulant.

稚魚の行動応答プロファイルを調べるための実験プロトコル: 神経興奮剤カフェインへの応用

Fish models and behaviors are increasingly used in the biomedical sciences; however, fish have long been the subject of ecological, physiological and ...

Long-term Video Tracking of Cohoused Aquatic Animals: A Case Study of the Daily Locomotor Activity of the Norway Lobster (Nephrops norvegicus)

We present a protocol related to a video-tracking technique based on the background subtraction and image thresholding that makes it possible to individually track cohoused animals. We tested the tracking routine with four cohoused Norway lobsters (Nephrops norvegicus) under light-darkness conditions for 5 days. The lobsters had been individually tagged. The experimental setup and the tracking techniques used are entirely based on the open source software. The comparison of the tracking output with a manual detection indicates that the lobsters were correctly detected 69% of the times. Among the correctly detected lobsters, their individual tags were correctly identified 89.5% of the times. Considering the frame rate used in the protocol and the movement rate of lobsters, the performance of the video tracking has a good quality, and the representative results support the validity of the protocol in producing valuable data for research needs (individual space occupancy or locomotor activity patterns). The protocol presented here can be easily customized and is, hence, transferable to other species where the individual tracking of specimens in a group can be valuable for answering research questions.

Long-term Video Tracking of Cohoused Aquatic Animals: A Case Study of the Daily Locomotor Activity of the Norway Lobster Nephrops norvegicus

Here we present a protocol to individually track animals over a long period of time. It uses computer vision methods to identify a set of manually constructed tags by using a group of lobsters as case study, simultaneously providing information on how to house, manipulate, and mark the lobsters.