可視化されたプロトコルは防御および真菌の成長のアリに関するより広い研究のための参照のフレームを提供する。このアプローチの主な利点は、研究者が将来の作業のための共通の理解を確保するために重要な防御行動を認識するのに役立つということです。真菌を栽培するアリの研究のための参照は、これらの行動に精通していない若い研究者のために特に有用である可能性が高い.
これらの行動の多くはまれであるため、経験豊富な研究者はそれらを観察したことがないかもしれません。このガイドは、一貫した定義と共に主要な防御行動を示すことによって、研究とアリ種間の比較を容易にします。さらに、制御された条件での行動を理解することは、条件を制御するのが難しい自然の生息地での研究に役立ちます。
まず、エスコボプシス株をアクロミルメックス発シナチオール実験室コロニーから分離し、真菌園の断片を取り除き、数日間湿った綿毛を含むペトリ皿に、エスコノプシスが発芽して胞果するまで分離する。胞子をポテトデキストロース寒天プレートに移し、摂氏約23度で2週間インキュベートする。滅菌針を使用して、プレートから成熟した胞子を取り除きます。
次に、滅菌条件下で新しいプレート上の胞子を接種し、2週間摂氏約23度でインキュベートする。ヒファエがプレート全体を覆い、成熟した茶色の胞子に成長したら、無菌条件下で胞子を新しいプレートに接種する。3つの元のA.エチニオールコロニーを使用して、各親コロニーから12のサブコロニーを有する合計36のサブコロニーを得る。
アリの導入の4時間前に、元のコロニーの真菌園の小さじサイズの部分、いくつかの乱暴な葉、水浸しの綿毛を箱に加えます。感染する亜コロニーについては、エスコボプス胞子で接種ループを埋める。次いで、真菌園の小さな部分を10~20回軽くタップして胞子を接種する。
対照サブコロニーについては、菌園を無菌接種ループで10〜20回タップしてエスコボプシス胞子の適用を模倣する。感染後72時間の観察では、小コロニーの半分をエスコプス病の導入後72時間妨げずに放置する。感染後のゼロ時間の観測では、記録の30分前に、親コロニーから各ボックスに2人のブロード、4人のマイナーワーカー、4人の主要な労働者をすぐに追加します。
次に、記録の30分前に72時間の感染後の観測に同じ作業者の混合物を追加します。サブコロニーごとに4時間のビデオ録画を行います。36のサブコロニーのすべてを記録した後、映像を確認し、各サブコロニーの各個人の関心の挙動をスコア付けします。
次のクリップは、観測中に観察される主な個別の動作の説明を示します。ビデオを見直している間、アリが自己グルーミングを開始するために脚の動きを止めるかどうかに注意してください。アンテナが前脚のアンテナ クリーナーを通過することを確認します。
その後、アリは口の部分で脚とアンテナクリーナーをきれいにする必要があります。また、アリが真菌園の固定点で脚の動きを止める場合にも注意してください。アンテナが静止していて平行で、真菌に向かって指差し、下顎の先端に近いところにほとんど触れ合っているかどうかを観察してください。
その後、グロッサは真菌をなめるために出現するはずです。1つ以上のアリも互いにグルーミングすることができます。この動作の間、アリはすべての動きを止め、物理的な接触を維持して密接に立ちます。
次に、グルーミングアリは、受け取るアリに向かってそのアンテナを向け、受信機を軽くタップする必要があります。グルーミング個人の上下の口の部分は、受信機アリを舐めるために出現するグロッサで開いていることに注意してください。アリが動きを止め、歯肉花のグルーミングを開始するタイミングを観察します。
アリは片側に傾き、前脚の1つに手を伸ばして腺の開口部をこすり、もう一方の前脚をグロッサで舐める必要があります。そして、アリは反対の脚で動作を繰り返します。アリが真菌園の固定点で脚の動きを止めると、アンテナが動かず平行で、真菌園の固定点を指していることに注意してください。
そして、アリは目に見えるエスコプス胞子をつかみ、巣からそれらを運ぶ。アリはまた、真菌の固定点で脚の動きを止め、そのアンテナを真菌の一部に向けてゆるく向け、そのアンテナで真菌片をタップする。この後、アリは真菌の残りの部分から真菌の破片を取り外します。
別の潜在的な行動は、アリが真菌園の固定点で脚の動きを停止したときに観察される可能性があります。アリはガスターを曲げ、お互いに向かって、口の部分に便液の滴を適用します。一度に1つずつ、アリは下顎を通して前足を引っ張り、アンテナはアンテナクリーナーを通して引っ張ります。
この研究の主な目的は、葉を切断するアリの病気防御行動を示す短いクリップのカタログを作成することであった。プロトコルに記載されている動作は、実験的な感染シナリオでスコア付けされました。コントロールコロニーでは、マイナーな労働者は主要な労働者よりも庭の作物を手入れしました。
感染したコロニーでは、対照コロニーに対する真菌のグルーミングの増加に対する有意でない傾向があった。便のグルーミングの有意な増加は感染に関連していたが、マイナーと主要な労働者の間に違いは検出されなかった。胞子除草と真菌除草はいずれも頻度が低く、感染したコロニーとコントロールの間に有意な差は認められなかった。
感染以来、経時増加する菌類の草取の傾向が観察される。初期感染を有する感染したコロニーのうち、4時間の観察期間の後に目に見える胞子が残っていたものはほとんどなかった。興味深いことに、後段階の感染状態では、アリはコロニーのいずれでも胞子を完全に除去することができない。
したがって、この実験の結果は、小さい労働者行動と主要な労働者の行動の平均頻度を計算するために、クリップのコンパイルを行動研究に使用する方法の例示的な例です。我々は、真菌を増殖するアリの防御に寄与する行動を文書化し、これらの行動を体系的に同定し、記述し、捕らえた。我々の結果は、広範な行動と関連する抗微生物化合物に直面したときに病原体がコロニーに感染するのが難しい理由を示唆する分野での研究を強化する。
今後の現場での作業に向けた新しいツールを提供し、行動カタログがコンセンサスの確保と、行動の定義、観察、解釈の合理化に役立つことを願っています。
