本ビデオでは、パーキンソン病のMPTPモデルで、シリンダーとオープンフィールドテストを使用して運動機能を狭くする方法を紹介します。主な利点は、行動テストの前にマウスを訓練する必要がなくなることです。また、この方法は効率的であり、機器のコストが低いです。
行動検査を受けたばかりの人は、環境干渉の影響を過小評価する可能性があります。静かに保ち、裏地の変化を避けることは助けになります。ここで、行動検査は、MPTPまたは生理塩水注射の7日間のレジメンの最終注射の24時間後、および動物のサブセットに対するL-DOPAの胃内投与後40分で行われる。
動物が収容されている同じ部屋で行動検査が行われない場合は、検査の前に30〜60分間マウスを新しい部屋に順応させる。まず、透明なガラス円柱をテーブルの中央に配置します。黒い段ボールで3つの側面のシリンダーを囲み、環境照明の影響を減らすためにシリンダーから4〜8センチメートル離れた場所に置きます。
ビデオ録画のために、シリンダーの片側をカメラに向けて残します。円柱から 40 ~ 60 センチメートル以上離れた解像度で 100 万ピクセルの解像度が可能なカメラを取り付けて、円柱全体が視野に収まるようにします。一度に1つのマウスをシリンダーに入れ、一度に撮影を開始します。
このプロセスの間、マウスの動作に影響を与えないように、ノイズや光の変化を避けるようにしてください。足のリフトは、マウスが後肢の後部に上がり、両方の前肢を肩の上に上げ、着陸したときに発生します。3分後に撮影を中止し、マウスをホームケージに戻します。
水でシリンダーをきれいにし、それを消毒し、マウスの香りを取り除くために内壁の上に70%の民族をスプレーします。次のマウスをテストする前に、シリンダーを拭いてください。テストが完了したら、通常の速度の0.5倍の速度でビデオを再生し、各マウスの壁に対する足のリフトの数をカウントします。
マウスが前肢を肩のレベルより上に何度も上げて、着陸せずに連続的に上げた場合、それは一度だけ数えられるべきである。シリンダー・テストと同じセッションでオープン・フィールド・テストを実行します。透明なオープンフィールド反応ボックスを木製のプレートで準備し、マウスの色に応じて対照的な黒または白の布で覆います。
1メートルの高さでフィールドの上にカメラを固定します。カメラを調整して、開いているフィールドの反応ボックスがビデオの中央に正しいことを確認します。1 つのテスト マウスをボックスに入れて、マウスが約 1 分間環境に慣れてみましょう。
コンピュータに接続されているカメラを使用して5分間のビデオを録画します。最後に、オープンフィールド反応ボックス内の任意の便をクリーンアップし、ボックスに70%エタノールをスプレーし、それを拭きます。シリンダ試験では、生理乾燥マウスと比較してMPTPで処置したマウスでは壁に対するリア数の減少が認められた。
テストの日にL-ドーパミンを投与されたMTPT処置マウスでは、生理液を投与されたMPTP処置マウスと比較して、リアの増加が認められた。この画像は、MPTPで処理されない制御マウスにおける代表的な移動トレースと静的時間、歩行時間、および実行時間の分布を示しています。MTPTで治療したマウスは、移動速度の低下、移動距離の短縮、静動時間の短縮、生理処理マウスの実行時間の短縮を示し、MTPTによって誘発された運動障害を示した。
L-ドーパミンを受け取るMPTP治療マウスは、MPTPだけで治療したマウスよりも移動速度が高く、移動距離が長く、静止時間が短く、実行時間が長いことを示し、L-ドーパミンがMPTP誘発運動障害を緩和することを示した。試験中のマウスを変えた場合は、前マウスの香りの効果を排除するために、領域を完全にクリアし、エタノールをスプレーする。この手順に従って、ビーム歩行試験などの他の手段、ポール試験を行うことができる。
これらの方法を通じて、バランス能力とモータ能力に関するデータを得ることができます。MPTPはマウスとヒトの両方にとって神経毒性であるため、暴露を避けるために厳格な予防措置を講じる必要があります。マスクやレスピレーターなどの余分なPPEを着用する必要があります。
