7 機能的磁気共鳴分光ウィスカ アクティベーション中にラットのバレル皮質の T

この方法は、神経遺伝学の分野で重要な質問に答え、休息状態と活性化状態の間で起こる代謝変化を解読するのに役立ちます。この技術の主な利点は、非侵襲的な方法でリアルタイムで生体内でこの変動に従う。特にこの技術は、例えばニューロンとリヨセルとの代謝相互作用における特定のタンパク質の役割を決定するために、病理学的または遺伝子組み換え動物に適用することができる。まず、マグネットベッドに呼吸センサーを置き、イオブルランマスクの鼻を持ちやすく、リブケージとマグネットベッドの間に位置する呼吸センサーで、ラットを磁石ベッドに移します。右のヒゲがフリーであることを確認し、テープでラットを固定します。テープを使用して、右のヒゲをトラップし、チューブから出る部分が垂直で、販売から約1.5センチメートルになるように、ラットMRIベッドに沿ってエアパフシステムの柔軟な出口パイプを整列させる販売を行います。その後、より多くのテープでパイプを位置に固定します。次に、フレキシブルな入口パイプを圧縮空気源からソレノイド制御バルブ入力に接続し、出口パイプをソレノイド制御バルブ出力に接続し、ソレノイド制御バルブが磁石室の外に残るように注意します。トランジスタトランジスタロジックポートを使用して、パルス化装置をソレノイドバルブと磁石に差し込み、パルス周波数が8ヘルツ、パルス時間が20秒、静止時間が10秒になるようにデバイスを設定します。ウィスカー刺激のために、脳を直立した位置にラットを置き、耳の棒で動物を固定します。ボリュームアレイコイルをヘッドの上に置き、アレイをテープで固定します。エアパフシステムをオンにして、回転や摩擦のない後部の方向にセールが動くことを確認します。次に、エアパフシステムをオフにして、ベッドエンドコイルを磁石の中央に配置します。血中酸素濃度依存性機能的共鳴画像の場合、販売の動きをもう一度確認し、ラットが十分に配置されていることを確認するためにローカリゼーションシーケンスを使用します。ローカライザーシーケンスタブを命令名にドラッグし、「続行」をクリックします。位置が問題がある場合は、T2スターFID EPIシーケンスタブを命令名にドラッグし、脳の中央に視野を中央に配置し、調整プラットフォームをクリックして編集されたスキャン指示を開きます。次に、B0 マップを記録し、T2 スター FID EPI シーケンスを開始します。ちょうど最初の1と比較し、ラットがT2スターFID EPIシーケンス中に移動したかどうかを確認するために実証したように別のローカリゼーションシーケンスを取得します。その後、ベッドを初期位置に戻し、ボリュームアレイコイルを取り外します。画像を処理するには、T2スターFID EPIファイルを開き、画像ディスプレイでT2スターFID EPI画像を読み取ります。機能コントローラの起動ウィンドウを開き、処理タブで機能イメージングウィンドウを選択します。刺激プロトコルを定義し、プロトコルウィンドウを選択し、オン期間を40に、オフ期間を20に設定します。前処理ウィンドウでは、前処理用の中央値フィルタと後処理用の中央値フィルタ2D 3Dをプレーンに設定します。次に、[実行] をクリックします。カーソルをドラッグしてオーバーレイルックアップテーブルを調整し、アクティブな脳領域を視覚化します。陽子磁気共鳴分光法またはMRSの表面コイルを正しく位置付けるには、ヘッドを時計回りに約30度回転させ、表面コイルを左バレル皮質のすぐ上に水平位置に配置し、磁石の内側の磁石中心に配置できるようにします。表面コイルを差し込み、テープで所定の位置に固定します。エアパフシステムがオンになっているときに、販売がまだ正しく動くことができることを確認してください。その後、磁石にベッドを配置し、再び販売の動きを確認します。示されているように、ローカリゼーションシーケンスで動物の正しい位置を確認し、T2-TurboRAREシーケンスタブを指示名ウィンドウにドラッグします。続けるをクリックしてスキャンプログラムを実行し、体性感覚バレル野原野内のボクセルの正しい局在を可能にします。スキャンの最後に、レーザーシーケンスタブを命令名ウィンドウにドラッグし、ボクセルを体性感覚バレル野外領域の中心に置きます。調整プラットフォームをクリックして編集したスキャン命令を開き、ウォブルをクリックして、調整のために受信機コイルのインピーダンスをわずかに変更します。チューニングが完了したら、[適用] をクリックして命令エディタを閉じ、編集した命令に変更を適用します。B0マップを記録し、休息期間中にプロディエムMRSの取得を開始します。別の局在化シーケンスを取得して最初の配列と比較し、レーザー獲得中にラットが動かなかったことを確認します。次に、エアパフシステムをオンにし、レーザーシーケンスを使用して2番目の陽子MRSを実行します。最終的なローカリゼーションシーケンスを実行して、ラットがベッドを初期位置に戻す前に移動したかどうかを確認します。その後、表面コイルを取り外し、完全に回復するまで監視してベンチにラットを戻します。MRS画像を処理するには、モデルスペクトルまたはLCモデルソフトウェアの線形組み合わせを開き、適切なデータタイプとファイルを選択します。[大丈夫]をクリックし、タイトルセクションでタイトルを手動で入力し、ミリリットルの範囲ごとに適切なパーツを定義します。次に、[LC モデルの実行] をクリックして LC モデルの定量化を開始します。右ウィスカーが自家製エアパフシステムを使用して刺激されると、正のBOLD信号が左バレル皮質(体性感覚バレルフィールドとも呼ばれる)で検出される。解剖学的磁気共鳴画像とラット脳アトラススキームを使用して、BOLD機能MRIによって視覚化された活性化脳領域を使用すると、ウィスカ刺激中に活性化される体性感覚バレルフィールド領域にボクセルを配置することができます。ヒゲ刺激のパラダイムが乳酸含有量の増加をオンにすると、左体性感覚バレルフィールドで観察される。静止期と活性化期間の間の代謝変動をよりよく可視化するために、スペクトル減算を行うことができる。この減算スペクトルから、脳活性化を伴う乳酸塩含有量の増加は、はるかに容易に視覚化することができる。例えばこのラットではN-アセチラスパルテ信号はわずかに低下した。乳酸塩のピークは、安静時にこの生体内のデコンボリューションスペクトルでほとんど検出されないが、LCモデルは良好な精度とクラムでピークを定量化することができた