神経変性疾患は、認知障害、気分機能不全、さらには運動障害などの壊滅的な行動症状でしばしば現れます。この研究により、行動性の型を高い再現性で正確に評価することが可能になります。マウスの挙動解析で繰り返し活用できる総合的な電池を設計します。
このテストは、運動機能、社会的相互作用、感情機能、および認知機能をアセスします。この電池の順番とテストの間隔を整理することで、テスト効率を高め、頻繁な取り扱いによる検査間の干渉とマウスのストレスを軽減しました。まず、テキスト プロトコルで説明されている順序で動作テストを配置します。
透明でない白いプラスチック製のアリーナでオープンフィールドテストを実行します。カメラの記録を開始し、静かに壁に面して、アリーナの壁の真ん中の隣にマウスを置きます。マウスの動作を 10 分間記録し、ホーム ケージに戻します。
次に、アリーナをコンピュータ画面上の4つの正方形に分割します。マウスがアリーナのグリッドラインを横切って運動機能を評価する回数をカウントします。不安を測定するには、マウスがアリーナの中央領域で費やす時間を測定します。
同じ日に上昇プラス迷路テストを実施します。すべてのマウスがオープンフィールドテストを終了したら、開いた腕と閉じた腕の接合部にマウスを置きます。マウスの動作を 5 分間記録してから、ホーム ケージに戻します。
2日間連続したオープンフィールドテストの後、テキストプロトコルに従って新規オブジェクト認識テストを設定します。カメラを起動し、マウスを壁の中央に向かってアリーナに置き、マウスを理解します。マウスの動作を 10 分間記録します。
その後、マウスをホームケージに戻します。慣れ親しんだ24時間後、1つの新規オブジェクトでテストを繰り返します。マウスが新しいオブジェクトと使い慣れたオブジェクトと別々に操作する時間を測定します。
次に、マウスのメモリを新規オブジェクトの優先として計算します。ソーシャルインタラクションテストでは、表面に穴が開いた2つの透明なチャンバーを備えたオープンフィールドアリーナを使用してください。3分間のオブジェクト探査期間のために、被写体マウスをアリーナに置き、マウスをチャンバーに習慣化します。
その後、そのホームケージに被写体マウスを返し、アリーナをきれいにします。部屋の1つに新しいマウスを入れてください。その後、アリーナに被写体マウスを再導入し、3分間記録します。
映像をレビューしながら、被験者マウスが新しいマウスチャンバーまたは空のチャンバーと相互作用して過ごす時間の比率を測定することによって、社会的相互作用を測定する。次に、加速ロタロッド試験を行います。各試行では、機械と反対側の壁に面した静的ロッドにマウスを置きます。
マウスが同様にスケールを学習するように、可能な症状の発症前にナイーブマウスで3日間それを訓練することによってロタロッドにマウスを習慣化します。マウスがドロップしたときにデバイスを停止し、マウスがロッドに費やした時間を記録します。マウスをホームケージに戻す前に、このプロセスをさらに 2 回繰り返します。
次に、行動室の中央に水迷路を置き、水迷路の位置が一定のままであることを確認するために迷路の位置をマークします。迷路を4つの想像上の象限に分けます。各象限の中央に視覚的な手掛かりを掛けます。
次に、プラットフォームを 4 番目の象限の中央に配置し、その位置をマークします。水位がプラットフォームよりも1センチメートル高くなるまで、粉ミルクで白色の水で迷路を埋めます。各トレーニングトライアルの開始時に、ビデオ録画を開始し、マウスを迷路にそっと置きます。
マウスの視界に入りなざり。マウスが 60 秒以内にプラットフォームを見つけられない場合、またはマウスがプラットフォームを 60 秒以内に見つけて 10 秒間続いた場合は、ホーム ケージにマウスを戻します。テストが終了したら、ビデオを停止し、赤外線の下で自宅のケージにマウスを入れます。
最後に、プラットフォームなしで、前述のように水迷路試験のプローブフェーズを実行する。次に、強制泳ぎ試験のために円筒形タンクを準備します。ビデオ録画を開始し、静かにタンクの中央に水にマウスを置きます。
マウスをホームケージに戻す前に、6分間マウスを録音します。強制水泳テストのビデオを確認します。ビデオの最後の5分間の不動時間を測定します。
このプロトコルは、シリカナノ粒子への呼吸暴露後のマウスの行動変化を研究することであった。オープンフィールド試験と加速ロタロッド試験の結果は、シリカナノ粒子がマウスの運動運動や運動機能に影響を与えなかったことを実証した。社会的相互作用活性はシリカナノ粒子への1ヶ月間の暴露の後に影響を受けたが、オープンフィールドテスト、上昇プラス迷路試験、および強制水泳試験は1ヶ月間の暴露後に不安やうつ病を示さなかった。
シリカナノ粒子への2ヶ月間の暴露は、上昇プラス迷路試験の結果によって示されるように、不安をもたらした。認知障害は、暴露の2ヶ月後に水迷路テストでも検出されました。この電池はC57マウス株の神経変性の広範囲な行動分析のために設計されている。
神経毒の毒性や潜在的な危険因子、または薬物開発における神経変性関連の縦断研究に最も適しており、長期投与および繰り返し検査を行うことが多い。
