神经退行性疾病通常表现为破坏性行为症状,如认知障碍、情绪功能障碍,甚至运动功能障碍。这项研究允许对行为表型进行精确评估,具有高水平的可重复性。我们设计了一种全面的电池,可以反复用于小鼠的行为分析。
本测试评估运动功能、社会互动、情感功能和认知功能。通过组织该电池的测试顺序和间隔,提高了测试效率,减少了测试之间的干扰和频繁操作对小鼠的压力。首先,按照文本协议中描述的顺序排列行为测试。
在不透明、白色、塑料的竞技场中执行开放现场测试。开始摄像机录制,轻轻地将鼠标放在竞技场的墙中间,朝墙。记录鼠标的行为 10 分钟,然后返回到其主笼。
接下来,在计算机屏幕上将竞技场分成四个四个方块。计算鼠标穿过竞技场中网格线以评估运动功能次数。要测量焦虑,测量鼠标在竞技场中心区域花费的时间量。
在同一天进行高架加迷宫测试。一旦所有小鼠完成开放场测试,将鼠标放在张开和闭合臂的交界处。将鼠标的行为记录五分钟,然后再将鼠标返回到其家庭笼子。
经过连续两天的开放现场测试,根据文本协议设置了新颖的对象识别测试。启动相机,将鼠标放在竞技场上,朝向墙的中间,熟悉鼠标。将鼠标的行为记录 10 分钟。
然后把鼠标还到它的笼子里。熟悉后24小时,用一个新颖的物体重复测试。分别测量鼠标与新对象和熟悉对象交互的时间。
然后计算鼠标的内存作为对新颖对象的首选项。对于社交互动测试,请使用具有两个透明室的开放式场地,表面有孔。将主题鼠标放在竞技场中,进行三分钟的物体探索,使鼠标进入房间。
然后将主题鼠标返回到其家庭笼子并清洁竞技场。把一只新老鼠放进其中一个房间里。然后将主题鼠标重新引入竞技场并录制三分钟。
在查看视频时,通过测量受攻击对象鼠标与新型鼠标室或空室交互的时间比例来测量社交互动。接下来执行加速旋转测试。在每次试验中,将鼠标放在面向机器对面的墙上的静态杆上。
在出现可能的症状之前,在天真的小鼠中训练三天,使小鼠习惯到轮盘,使小鼠同样了解量表。当鼠标掉落时停止设备,并记录鼠标在杆上花费的时间。重复此过程两次,然后再将鼠标返回到其主笼。
接下来,将水迷宫放在行为室的中心,并标记迷宫的位置,以确保水迷宫的位置保持不变。将迷宫划分为四个假想的象限。在每个象限的中心挂起视觉提示。
然后在第四个象限的中心放置一个平台并标记其位置。用水填满迷宫,用奶粉染成白色,直到水位比平台高一厘米。每次训练试验开始时,开始录像,轻轻地把鼠标放在迷宫里。
远离鼠标的视线。当鼠标在 60 秒内无法定位平台,或者鼠标在 60 秒内定位平台并在其上停留 10 秒时,将鼠标返回到其主笼。测试结束之后,停止视频,将鼠标放在其家庭笼中,在红外光下。
最后执行如前所述的水迷宫测试的探针阶段,无需平台。接下来为强制游泳测试准备圆柱形坦克。开始录像,轻轻地将鼠标放在水箱中央的水中。
将鼠标记录六分钟,然后将鼠标放回其家庭笼子。查看强制游泳测试的视频。测量视频最后五分钟的固定时间。
该协议是研究小鼠在呼吸接触二氧化硅纳米粒子后的行为变化。公开场试验和加速轮盘试验结果表明,二氧化硅纳米粒子对小鼠的动车或运动功能没有影响。社会互动活动在接触二氧化硅纳米粒子一个月后受到影响,然而,开放场测试、高架加迷宫测试以及强迫游泳测试在暴露一个月后未显示任何焦虑或抑郁。
两个月的二氧化硅纳米粒子接触确实会导致焦虑,升高加迷宫测试的结果就证明了这一点。在两个月的暴露后,在水迷宫测试中也检测到认知障碍。该电池设计用于C57小鼠应变神经退化的综合行为分析。
它最适合神经退化相关的纵向研究,在神经毒素毒性或潜在的危险因素,或药物开发,往往具有长期的去药和反复测试。