신경 퇴행성 질환은 종종 인지 장애, 기분 장애 또는 심지어 운동 기능 장애와 같은 치명적인 행동 증상으로 나타납니다. 이 연구는 행동 표현형을 높은 수준의 반복성으로 정확하게 평가할 수 있게 합니다. 마우스의 행동 분석에 반복적으로 활용할 수 있는 포괄적인 배터리를 설계합니다.
이 테스트는 운동 기능, 사회적 상호 작용, 정서적 기능 및 인지 기능을 asses. 이 배터리의 순서와 테스트 간격을 구성함으로써 테스트 효율을 높이고 빈번한 취급에서 마우스에 대한 테스트 및 스트레스 사이의 간섭을 감소시다. 먼저 텍스트 프로토콜에 설명된 순서대로 행동 테스트를 정렬합니다.
투명하지 않은 흰색, 플라스틱 경기장에서 열린 필드 테스트를 수행합니다. 카메라 녹화를 시작하고, 부드럽게 벽을 향하고, 경기장의 벽의 중간 옆에 마우스를 넣어. 마우스의 동작을 10분 동안 기록하고 홈 케이지로 반환합니다.
다음으로, 경기장을 컴퓨터 화면에서 4개의 사각형으로 나눕니다. 마우스가 경기장에서 그리드라인을 가로지르는 횟수를 계산하여 운동 기능을 평가합니다. 불안을 측정하려면 마우스가 경기장의 중앙 영역에서 보내는 시간을 측정합니다.
같은 날에 높은 플러스 미로 테스트를 수행합니다. 모든 마우스가 열린 필드 테스트를 완료하면 마우스를 두는 팔의 접합에 놓습니다. 마우스를 홈 케이지로 되돌리기 전에 마우스의 동작을 5분 동안 기록합니다.
2일 연속 공개 필드 테스트를 마친 후 텍스트 프로토콜에 따라 새 개체 인식 테스트를 설정합니다. 카메라를 시작하고 마우스를 익숙해지기 위해 마우스를 벽 의 중간을 향하고 있는 경기장에 마우스를 놓습니다. 마우스의 동작을 10분 동안 기록합니다.
그런 다음 마우스를 홈 케이지로 반환합니다. 친숙한 후 24시간 동안 하나의 새 개체로 테스트를 반복합니다. 마우스가 새 개체와 친숙한 개체와 상호 작용하는 시간을 별도로 측정합니다.
그런 다음 마우스의 메모리를 새 개체에 대한 기본 설정으로 계산합니다. 사회적 상호 작용 테스트를 위해 표면에 구멍이 있는 두 개의 투명한 챔버가 있는 개방형 필드 필드를 사용하십시오. 피사체 마우스를 3분 동안 경기장에 배치하여 마우스를 챔버에 습관화합니다.
그런 다음 피사체 마우스를 홈 케이지로 반환하고 경기장을 청소하십시오. 새로운 마우스를 챔버 중 하나에 넣습니다. 그런 다음 피사체 마우스를 경기장에 다시 소개하고 3분 동안 기록합니다.
비디오를 검토하는 동안, 피사체 마우스가 새로운 마우스 챔버 또는 빈 챔버와 상호 작용하는 데 소요되는 시간의 비율을 측정하여 사회적 상호 작용을 측정합니다. 다음으로 가속 로타로드 테스트를 수행합니다. 각 평가판에서 마우스를 기계 반대쪽 벽을 향하는 정적 막대에 놓습니다.
마우스가 가능한 증상이 시작되기 전에 순진한 마우스에서 3 일 동안 훈련하여 로타로드에 마우스를 습관화하여 마우스가 균등하게 배율을 배울 수 있도록합니다. 마우스가 떨어질 때 장치를 중지하고 마우스가 막대에 소요된 시간을 기록합니다. 마우스를 홈 케이지로 되돌리기 전에 이 과정을 두 번 더 반복합니다.
다음으로 물 미로를 행동실 중앙에 놓고 미로의 위치를 표시하여 미로의 위치가 일정하게 유지되도록 합니다. 미로를 네 개의 가상 사분면으로 나눕니다. 각 사분면의 중앙에 시각적 신호를 걸어 놓습니다.
그런 다음 플랫폼을 네 번째 사분면 중앙에 놓고 위치를 표시합니다. 수위가 플랫폼보다 1센티미터 높을 때까지 미로를 우유 분말로 흰색으로 칠한 물로 채웁니다. 각 교육 시험의 시작 부분에서 비디오 녹화를 시작하고 마우스를 미로에 부드럽게 넣습니다.
마우스의 보이지 않는 곳에 두십시오. 마우스가 60초 이내에 플랫폼을 찾을 수 없거나 마우스가 60초 이내에 플랫폼을 찾고 10초 동안 유지되는 경우 마우스를 홈 케이지로 반환합니다. 테스트가 끝나면 비디오를 중지하고 적외선 아래 홈 케이지에 마우스를 넣습니다.
마지막으로 플랫폼없이 이전에 설명한 바와 같이 수로 테스트의 프로브 단계를 수행합니다. 다음 강제 수영 테스트를 위한 원통형 탱크를 준비합니다. 비디오 녹화를 시작하고 마우스를 탱크 중앙에 부드럽게 물에 넣습니다.
마우스를 홈 케이지에 다시 넣기 전에 6 분 동안 마우스를 기록합니다. 강제 수영 테스트의 비디오를 검토합니다. 동영상의 마지막 5분 동안 부동 시간을 측정합니다.
이 프로토콜은 실리카 나노 입자에 호흡 노출 후 마우스의 행동 변화를 연구하는 것이었습니다. 오픈 필드 테스트 및 가속 로타로드 테스트의 결과는 실리카 나노 입자가 마우스의 운동 또는 모터 기능에 영향을 미치지 않는다는 것을 입증했다. 사회적 상호 작용 활동은 실리카 나노 입자에 1 개월 노출 후에 영향을 받았습니다, 그러나 오픈 필드 시험, 상승플러스 미로 시험, 및 강제 수영 시험은 노출의 1 달 후에 어떤 불안 또는 불경기를 표시하지 않았습니다.
실리카 나노 입자에 2 개월 노출은 높은 플러스 미로 테스트의 결과에 의해 입증 된 바와 같이, 불안을 초래했다. 인지 장애는 또한 노출의 2 달 후에 물 미로 시험에서 검출되었습니다. 이 배터리는 C57 마우스 스트레인의 신경 변성에서의 포괄적인 행동 분석을 위해 설계되었습니다.
그것은 신경 독 소 또는 잠재적인 위험 요소의 독성에 신경 변성 관련 세로 연구에 가장 적합, 또는 약물 개발, 종종 장기 관리 및 반복 테스트 기능.
