2〜1つの断続的な断食レジメンは、断食の1日と2日間の摂食で構成され、カロリー摂取量の影響ではなく、定期的なエネルギー制限を伴う食事介入の影響を研究することを可能にする。代替日断食とは異なり、2〜1回の断続的な断食を与える下で、断食中に起こるエネルギー損失と体重減少を完全に補うのに十分な時間をマウスに提供します。これにより、科学者はカロリー摂取量とは無関係に定期的な断食の影響を調べることができます。
2 対 1 断続的な断食は、肥満と障害グルコース恒常性および脂肪肝疾患を含む関連する代謝機能障害で使用される食事療法に対する利点の数を促進します。.このプロトコルは、5日間の摂食と2日間の断食または摂食制限の2日間で構成される5〜2の食事療法に簡単に調整することができ、食物へのアクセスは1日8時間に制限される。マウスモデルを使用する場合、ハイパーファジアなどの代替給餌行動を示す場合、アドリビタム給餌は適切な制御条件ではない可能性があります。
この場合、断続的な断食の影響を調べて比較するためにペア給餌規則が必要になります。通常の食事やリーンとダイエット誘発肥満マウスモデルのための高脂肪食を準備することによって開始します。スケールとEchomRIを使用して、各7週齢の雄C57BL/6Jマウスのベースライン体重と組成を測定します。
体重と体組成の結果に基づいてランダムに、同様に2つのグループにマウスを分割: ad libitumまたはAL, 断続的な断食またはIFグループ.その後、ケージごとに2つまたは3つのマウスを置き、マウスが飲料水に自由にアクセスできるようにします。マウスがIFレジメンを開始する前に、新しいケージ環境に1週間順応することを許可する。
断食期間を開始する準備ができたら、12:00 p.mに新鮮な寝具できれいなケージにマウスを移動します。加重量の食品をAL群に提供する。IFグループに食べ物はありません。
24時間後、ALケージ内の残った食物と同様に両方の群のマウスを秤量する。12:00 p.mで、加重量の食品をALおよびIFグループの両方に提供する。
一度、供給期間が過ぎていると、マウスおよび残った食物の重量を測定する。研究の期間のサイクルを繰り返します。IFとのカロリーに依存しない比較を確実にするために、実験の期間中にペア給餌またはPF制御グループを設定します。IF グループが消費する食品の量を測定します。
3つの部分に均等に分割し、PF制御に毎日1つの部分を提供します。ハイパーファジアのような食行動が変化した動物を扱う場合、マウスが一度に食べ物を食べるのを防ぐために、ペアフィードコントロールグループに毎日同量の食物を提供することが重要です。マウスの体組成を分析するには、体組成分析装置をオンにし、ウォームアップするために2〜3時間機械をオンのままにします。
使用する前に、システムテストを実行して測定精度を確認してください。そして、必要に応じて、キャノーラオイルでシステムを較正します。各マウスの体重を測定します。
次に、小動物の円筒ホルダーに入れる。測定中にマウスの物理的な動きを制限する区切り文字を挿入します。ホルダーを体組成分析装置に入れます。
スキャン プログラムを実行します( 90 ~ 120 秒かかります)。次に、機器からホルダーを取り外します。マウスをケージに戻します。
グルコース恒常性に対する断続的な断食の影響を調べるために、グルコースとインスリン耐性試験を実施する。一晩または6時間の断食後、各マウスにグルコースまたはインスリンの腹腔内注射を行う。次に、グルコメータを用いて0、5、15、30、60、および120分の注入で血糖値を測定する。
断続的な断食がエネルギー代謝に及ぼす影響を調べるには、IFの単一サイクルにわたって間接熱量測定を行う。マウスがシステムに順応した後、ホッパーとケージの底から食べ物やパン粉を取り除くことによってそれらを断食する。2日間の再摂食期間で24時間後に食べ物を再導入します。IFサイクルの最後に、マウスを元のケージに戻し、プログラムからデータを収集します。
24時間断食したマウスは体重が最大10%減少し、2日間の再摂食後に完全に回収された。1対1と2対1の間のエネルギー摂取量を1対1の間で比較すると、1日の再給餌期間は断食中に発生したカロリー損失を補うのに十分ではないことがわかった。ALと比較して、IF治療は、食物摂取量に大きな違いなしに正常なチャウまたは高脂肪食を与えられた野生型マウスの低体重増加につながった。
体組成分析は、IFが野生型マウスの無駄のない質量を変化させることなく脂肪質量を減少させたことを明らかにした。ペアフィードコントロールの実験では、IFによる体重増加の減少は、野生型マウスのエネルギー摂取量の変化によるものではないことを確認した。しかし、遺伝的肥満では、ob/ob、マウスペア供給対照群は体重および体組成におけるIF群と区別がつかない。
グルコースおよびインスリン耐性試験は、高脂肪食IFマウスが高脂肪食ALおよび高脂肪食ペア与えられたマウスと比較してグルコース恒常性に有意な改善を示したことを示した。ob/obマウスでは、IF群は、インスリン感受性に影響を受けないペア供給対照群と比較して、より小さなグルコースエクスカーションでグルコース処理を有意に改善した。野生型マウスに記載されたIFの別の代謝効果は、特に供給期間中のエネルギー支出を示す酸素消費量が高かった。
マウスの摂食行動は、住宅密度を含む環境要因の影響を受ける可能性があります。したがって、グループ間および研究の過程でケージごとに同じ数のマウスを収容することが重要です。新しいマウス モデルを採用する場合は、断続的な断食実験を行う前に、給餌動作を調べることをお勧めします。
イソカロリック2対1の断続的な断食は、糖尿病、心臓病、アテローム性動脈硬化症、および神経疾患を含む他の疾患モデルに容易に適用することができる。
