2 대 1 간헐적 단식 처방은 금식의 하루 로 구성되며 2 일 간의 먹이 공급으로 칼로리 섭취의 효과보다는 주기적인 에너지 제한과 관련된 식이 개입의 효과를 연구 할 수 있게합니다. 대체 일 금식과는 달리, 이는 완전히 단식 하는 동안 발생하는 에너지 손실및 체중 감소를 보상하기에 충분한 시간을 마우스를 제공 2 - 1 간헐적 단식에서 발생. 이를 통해 과학자들은 칼로리 섭취량과 는 별개로 주기적인 금식의 효과를 조사할 수 있습니다.
간헐적 단식은 비만과 손상된 포도당 항상성 및 지방 간 질환을 포함한 관련 대사 기능 장애에 사용되는 식단에 대한 여러 가지 혜택을 촉진합니다. 이 프로토콜은 5일 간의 수유와 2일간의 금식 또는 시간 제한 수식으로 구성된 5~2개의 식이 요법으로 쉽게 조절할 수 있으며, 식품에 대한 접근이 하루 8시간으로 제한됩니다. 하나는 마우스 모델을 사용하는 경우, 그 대파지아와 같은 대체 공급 행동을 보여줍니다, 광고 리비툼 공급은 적절한 제어 조건이 아닐 수 있습니다.
이 경우 간헐적 단식의 효과를 검사하고 비교하려면 쌍 먹이 규칙이 필요합니다. 마른 및 다이어트 유도 비만 마우스 모델에 대 한 정상적인 다이어트 또는 높은 지방 다이어트를 준비 하 여 시작. 각각 스케일 및 에코름리를 사용하여 7주 된 남성 C57BL/6J 마우스의 기준선 체중 및 조성물을 측정한다.
체중 및 신체 조성 결과에 기초하여 마우스를 임의로 동등하게 두 그룹으로 나눕니다: 광고 리비툼 또는 AL, 간헐적인 금식 또는 IF 그룹. 그런 다음, 마우스가 식수에 무료로 접근할 수 있도록 케이지 당 2~3마리의 마우스를 배치한다. 마우스가 IF 요법을 시작하기 전에 새로운 케이지 환경에 1주일 적응하도록 허용합니다.
금식 기간을 시작할 준비가 되면 마우스를 12:00 p.m에 신선한 침구로 깨끗한 케이지로 이동하십시오. AL 그룹에 가중 된 양의 음식을 제공합니다. IF 그룹에 대한 음식이 없습니다.
24 시간 후에, AL 케이지에 있는 남은 음식뿐만 아니라 두 단에 있는 마우스를 무게. 12:00 p.m에서 AL 및 IF 그룹 모두에 가중 된 양의 음식을 제공합니다.
일단 먹이 주기가 마우스와 남은 음식의 무게를 측정합니다. 연구 기간 동안 주기를 반복합니다. IF에 대한 칼로리 독립적 인 비교를 보장하기 위해 실험 기간 동안 쌍 공급 또는 PF 제어 그룹을 설정합니다. IF 그룹에서 소비하는 음식의 양을 측정합니다.
균등하게 세 부분으로 나누어 PF 컨트롤에 매일 한 부분을 제공합니다. hyperphagia와 같은 변경된 먹는 행동을 가진 동물과 함께 일할 때, 마우스가 한 번에 음식을 먹는 것을 방지하기 위하여 쌍 먹이 대조군에 매일 동등한 양의 음식을 제공하는 것이 중요합니다. 마우스의 체성분을 분석하기 위해 체성분 분석기를 켜고, 기계를 2~3시간 동안 방치하여 워밍업한다.
이를 사용하기 전에 시스템 테스트를 실행하여 측정 정확도를 확인합니다. 그리고 필요한 경우 카놀라 오일로 시스템을 교정하십시오. 각 마우스의 체중을 측정합니다.
그런 다음, 작은 동물 실린드릭 홀더에 놓습니다. 측정 중에 마우스의 물리적 움직임을 제한하기 위해 디리미터를 삽입합니다. 홀더를 신체 구성 분석기에 넣습니다.
90~120초가 소요되는 스캐닝 프로그램을 실행합니다. 그런 다음 장비에서 홀더를 제거합니다. 마우스를 케이지에 다시 배치합니다.
포도 당 및 인슐린 허용 오차 테스트를 수행 하는 포도 당 항상성에 간헐적 공복의 효과 검사. 하룻밤 또는 6 시간 금식 후, 각 마우스에 포도당 또는 인슐린의 복막 주사를 수행. 이어서, 글루코프터를 사용하여 0, 5, 15, 30, 60 및 120분 후 주사에서 혈당을 측정한다.
에너지 대사에 간헐적 단식의 영향을 조사하려면 IF의 단일 주기에 걸쳐 간접 열량 측정을 수행하십시오. 마우스가 시스템에 적응한 후 호퍼와 케이지 바닥에서 음식과 부스러기를 제거하여 빠르게 하십시오. 2일 환수 기간 동안 24시간 후에 음식을 다시 소개합니다. IF 주기가 끝나면 마우스를 원래 케이지로 다시 가져와 프로그램에서 데이터를 수집합니다.
24 시간 동안 금식 한 마우스는 체중이 최대 10 % 감소했으며, 이는 2 일 간의 재수유 후에 완전히 회복되었습니다. 1~2대 1간 간헐적 단식 사이의 에너지 섭취량을 비교할 때, 1일 의 재수식 기간이 금식 하는 동안 발생한 칼로리 손실을 보상하기에 충분하지 않은 것으로 나타났습니다. AL에 비해, IF 치료는 음식 섭취량에 상당한 차이없이 정상적인 차우 또는 고지방 식단으로 공급 야생 형 마우스의 낮은 체중 증가를 주도.
신체 구성 분석은 야생 형 마우스에서 마른 질량을 변경하지 않고 지방 질량을 감소시키는 경우 밝혀. 쌍 공급 제어를 가진 실험은 IF에 의한 감소된 체중 증가가 야생 형 마우스의 변화된 에너지 섭취 때문이 아니라는 것을 확인했습니다. 그러나, 유전적으로 비만, ob/ob, 마우스 쌍-먹이 대조군은 체중 및 체중 및 체중 조성에서 IF 그룹과 구별할 수 없었다.
포도당과 인슐린 허용 오차 테스트는 높은 지방 다이어트 경우 높은 지방 다이어트 AL 및 고지방 다이어트 쌍 먹이 쥐에 비해 포도 당 항상성에 상당한 개선을 전시 하는 경우 높은 지방 다이어트 를 보여 주었다. ob/ob 마우스에서, IF 단은 영향을 받지 않는 인슐린 감도를 가진 쌍 공급 대조군에 비해 더 작은 포도당 소풍을 가진 현저하게 향상한 포도당 취급을 전시했습니다. 야생형 마우스에서 지적된 IF의 또 다른 대사 효과는 특히 수유 기간 동안 에너지 지출을 나타내는 산소 소비량이 높았다.
마우스의 먹이 행동은 주거 밀도를 포함한 환경 요인에 의해 영향을 받을 수 있습니다. 따라서, 연구 과정 사이 케이지 당 수용 된 마우스의 동일한 수를 유지하는 것이 중요하다. 새 마우스 모델을 사용할 때 간헐적인 단식 실험을 수행하기 전에 먹이 동작을 검사하는 것이 좋습니다.
당뇨병, 심장 질환, 죽상 동맥 경화증 및 신경 질환을 포함한 다른 질병 모델에 쉽게 적용 할 수 있습니다.
