バイオコントロール剤の長期的な研究と使用は、効果的で経済的な飼育技術の利用可能性に依存しており、このプロトコルはこの寄生虫を飼育するのに効率的であることが証明されています。現在、研究や野外放出のためにこの寄生生物を飼育することに大きな関心が寄せられており、このプロトコルは、この有望なバイオコントロール剤の将来の長期的な研究と使用に利益をもたらすでしょう。最初のユーザーは、記事で提供されている関連する参考文献と方法のいくつかの実践を読むことによって、関連する昆虫のいくつかの基本的な生物学を理解する必要があるかもしれません。
宿主食を作製するために、まず、原稿に記載されているように食餌の液体部分を準備する。次に、空の250ミリリットルのフラスコに25〜30グラムのマッシュブルーベリーを加えます。次に、マッシュブルーベリーの上部を覆うだけの液体でフラスコに液体を注ぎます。
次に、宿主のショウジョウバエの鈴木を育てるために、まず吸収性ペーパータオルを切って中央にひねります。次に、ペーパータオルのねじれた中央部分をダイエットフラスコに入れます。水分を保持するために、蒸留水を使用してペーパータオルと食事を濡らします。
次に、性的に成熟した成体のハエを移すには、ハエコロニーフラスコのストッパーを慎重に取り外し、ダイエットフラスコに反転させます。この暴露の1週間後、ハエの出現のためにハエを環境室に3週間保持する。宿主幼虫を寄生生物にさらすには、まずフラスコから成虫のハエとペーパータオルを取り出し、ハエの卵と幼虫を残します。
幼虫の蛹化基質として機能するには、新しい吸収性ペーパータオルを折り畳んでフラスコに挿入します。次に、寄生生物G3 Ganaspis brasiliensisの6つの女性と男性のペアをフラスコに吸引し、泡栓の底に蜂蜜の薄い層を縞模様にします。寄生生物を収集して保存するために、5日後に成虫を除去する。
その後、フラスコを前述の条件下で35日間環境室に保管する。成虫のワタの出現により、週に3回吸引する。ワタを保持するには、まず、2.5×9.5平方センチメートルのショウジョウバエバイアルの底に、湿らせたが蒸留水で飽和していないペーパータオルを置く。
次に、約60匹のワタをバイアルに移し、出現日をマークします。バイアルを環境チャンバーに保管してください。週に2回、バイアルの泡栓の底に蜂蜜の薄い層を縞模様にします。
まず、ショウジョウバエの大規模な飼育を手配し、1,500〜2,000匹の性的に成熟した成体のハエを50:50の性比で大きな編み物で覆われたケージに入れます。次に、水に浸した綿と標準的なショウジョウバエ培地を含む4〜6個のペトリ皿を入れたプレートをケージに入れます。毎週2回、露出したペトリ皿を新鮮なものと交換してください。
蓋のないペトリ皿を800ミリリットルのプラスチックカップに入れ、細かいメッシュでカップを覆います。その後、カップを摂氏23度、相対湿度75%で12〜15日間インキュベートします。孵化後、新たに孵化した成体のショウジョウバエ鈴木を飼育ケージに移す。
次に、ブルーベリーを冷水で1分間すすぎ、5%に希釈した洗面器に果物を3分間浸して、宿主幼虫の準備を開始します。その後、9センチメートルのペトリ皿に洗ったブルーベリーを入れます。午後遅くに、ペトリ皿を飼育ケージに入れ、一晩放置します。
翌朝、ペトリ皿を優しく叩いて果物からハエを取り除き、飼育ケージから果物を取り除きます。その間、寄生性G1 Ganaspis brasiliensisのための寄生ケージとワタ出現ケージを準備します。両方のケージには、1つ以上のフィーダーを吊り下げるための天井の下に細いひもが必要です。
各ケージに、水を入れたショウジョウバエのバイアルを吊り下げ、相対湿度に応じて5〜7日ごとにセルロースアセテートプラグを天井から逆さまにして密封します。ショウジョウバエの鈴木ケージから出没したブルーベリーを取り出した直後に、1,500〜2,000匹のGanaspis brasiliensisワタを2〜3日間寄生ケージに入れます。次に、底に吸収紙が入った800ミリリットルのプラスチックカップに果物を集めます。
開いたカップを出現ケージまたはエクロシオンケージで摂氏21度、相対湿度65%で少なくとも28日間インキュベートします。インキュベーションの第2週目および第3週目の間に、ケージを毎週チェックして、宿主の早期侵食がないか確認する。連続した寄生生物の収集を容易にするために、成虫のハエを除去する。
インキュベーションの第4週の終わりに、ケージにフィーダーと水源を提供する。成虫のワタの約10〜15%を収集し、それらを寄生ケージに移して、古くて非生産的なワタを交換します。エクロシオンケージの残りのワタから、水で満たされた2ミリリットルのチューブを含む800ミリリットルのプラスチックカップで、50:50の性比で最大700人の成人を保管し、カップの底に歯科用コットンロールで密封します。
顕著な出現状態のカップを環境室に最大1ヶ月間保管してください。寄生生物を出荷するには、約200人の成人を50ミリリットルの円錐形チューブに入れます。次に、すべてのチューブをアイスパックと一緒に断熱輸送コンテナに入れます。
このプロトコルは、実験室での農業害虫ショウジョウバエ鈴木に対する寄生剤であるG3 Ganaspis brasiliensisの小規模飼育に成功しました。子孫の生産は、寄生生物密度および曝露時間の違いによって影響を受けなかった。G1 Ganaspis brasiliensisの大規模生成も達成することができ、宿主ショウジョウバエ鈴木への最初の曝露から5週間後に生産が開始された。
8週目から22週目まで、寄生生物の生産は、それらにさらされた果物の量に比例した。適切な飼育温度を維持し、湿度を制御し、常に成虫の昆虫に食物を提供することは非常に重要です。この方法は、宿主および寄生生物の飼育密度を最適化してワタの繁殖を最大化し、この寄生生物を代替宿主で飼育する可能性を探ることによって、さらに改善することができる。
