非侵襲的微小透析技術 による ラット心臓からの動的連続採血

ラット心臓からの動的連続採血技術は、血液成分を分析する上で非常に重要であり、循環器疾患とその関連疾患の理解に貢献しています。従来のサンプリング方法と比較して、この手法には、in vivo、リアルタイム、動的、非侵襲的であるという利点があり、生物学的微小分子や滴定サンプルの前処理がなく、外国の試験に前処理されません。この技術は、心血管疾患に適用できるだけでなく、高相液体クロマトグラフィーおよび質量分析と組み合わせて血液バイオマーカーを検出することにより、疾患の診断と治療にも役立つはずです。

この方法は、心筋梗塞、無呼吸、アテローム性動脈硬化症などの心血管疾患の調査に使用できます。さらに、心原性肺水腫および肺および脳塞栓症にも適用されます。実験準備を行った後、透析ユニットプローブのインレットをシリンジ針、チューブアダプター、およびFEPチューブに取り付けます。

抗凝固剤クエン酸デキストロース溶液を配管システムに灌流することにより、マイクロ透析配管システムの開存性を確認します。軟部組織と血管周囲筋膜の鈍的解剖によって右頸静脈を露出させる切開を行います。4-0外科用縫合糸を使用して、心臓の遠位端にある右頸静脈に取り外し可能なスリップノットを作り、血流を一時的に遮断します。

次に、心臓近くの右頸静脈を切開します。針状のカテーテルスタイレットをラット心臓の近位端に向かって右頸静脈に挿入します。血液マイクロダイアリシスプローブをカテーテルに挿入し、カテーテルスタイレットの斜め切開に沿って眼科用鉗子を使用してプローブを埋め込みます。

ガイドカテーテルスタイレットを取り外し、プローブの半透膜を右頸静脈に完全に浸します。心臓の遠位端にある取り外し可能なスリップノットを解き、右頸静脈の血流を回復させます。次に、4-0外科用縫合糸を使用して、プローブを右頸静脈と結紮します。

覚醒しているラットを自由に動くタンクに入れ、プローブを微小透析システムに接続します。次いで、抗凝固剤クエン酸デキストロース溶液を毎分2マイクロリットルの速度で1時間灌漑し、プローブ透析膜を平衡化する。微小透析血液サンプルを収集し、摂氏4度のフラクショナルコンテナに一時的に保管します。

プローブが右頸静脈にあることを再確認するには、ラットを解剖します。微小透析プローブを右頸静脈から取り外し、超純水に入れます。プローブをパイプラインに接続し、超純水で一晩すすぎ、パイプとプローブ内の残留塩分を完全に洗い流します。

正常な血液サンプルは真っ赤に見えましたが、低酸素サンプルでは潜在的な血栓が観察されました。血液マイクロダイアリシス技術によって得られたサンプルは、無色透明透明であった。膜の破壊やプローブの滑りや変位を避けるために、プローブをラット頸静脈に配置して浸すときは注意が必要です。

マイクロダイアリシス技術によって得られた血液サンプルは、さまざまな疾患のバイオマーカーや、薬物や希少代謝物の血液分布を分析するために使用できます。