Temporomandibular Joint Pain Measurement by Bite Force and Von Frey Filament Assays in Mice

関節障害とTMDは、関節の筋肉や周囲の組織に影響を与える約30の人間の病気のグループであり、痛みはTMD患者がこれまで病院に行く主な理由です。顎関節症の痛みは、痛みのメカニズムが十分に理解されていないため、効果的な治療法はありません。疼痛メカニズムを調査するために、疼痛性TMDのマウスモデルを開発し、続いて疼痛行動分析を行いました。

人工疼痛研究における疼痛評価は、行動分析の本質的なばらつきにより、非常に困難です。また、実験室での使用、痛みを評価するためのプロトコルが異なるため、異なる研究間での相互参照が困難になります。このJOEの記事では、主要な人工疼痛に対する1つの炎、フィラメント、およびバックフォースアッセイの視覚化バージョンについて説明しました。

これらのプロトコルは、直接実装するための詳細な方法を提供し、顎関節症の痛みを包括的に評価するためのアプローチに組み合わせます。これらは、自律性疼痛、顎関節症ペン、マッスルペン、ニューロパスペンなど、さまざまな口腔痛状態における疼痛行動の評価に適用できます。麻酔をかけたマウスを手術台に配置するためには、側頭下顎関節にCFAを注入するための滅菌インスリン注射器または31ゲージの針を準備します。

ポリエチレンチューブ製のシースで針を覆い、針先が2mmだけ突き出るようにして、深い挿入を防ぎます。次に、頬骨弓を触診して、側頭下顎関節または顎関節注射部位を特定します。次に、頬骨弓の後端の下にある注射部位に針を挿入します。

10マイクロリットルのCFAをTMJカプセルにゆっくりと注入し、少なくとも5秒待ってから徐々に針を引き抜きます。まず、CFAの関節内注射により、炎症性顎関節痛マウスモデルを確立します。マウスが完全に回復したら、マウスを試験環境に順応させるために、試験前に、拘束チューブをマウスケージの行動室に少なくとも1時間置いてください。

次に、互換性のあるソフトウェアをオンにして力で測定し、N-B-I-T-R-S-DV 2.6 0.3プログラムを開きます。次に、適切な通信オプションを選択します。有人モードのUDPを選択し、正しいローカルIPを選択し、[検索]をクリックしてデバイスのIPとポートを検索します。

ターゲット IP とターゲット ポートが表示されたら、[開く] をクリックします。範囲Yの10をクリックしてY軸を設定し、次に[セット]をクリックします。最後に、acquisitionをクリックします。

次に、青いグラフのチャンネル1のみを選択し、デバイスに接続されていない他のチャンネルをオフにします。再生をクリックして、噛み合わせ力の記録を開始します。次に、マウスを緩く拘束するように改造された50ミリリットルのプラスチックチューブにマウスを入れ、バイトプレートをマウスの口に向かって動かします。

セッションごとに2分間、自発的な噛みつきを記録します。次に、[一時停止]をクリックして録音を停止し、[保存]をクリックします。次に、Excelファイルの2列目のデータを最大から最小にランク付けし、咬合力の振幅の上位5つの値を選択してさらに分析します。

プログラムからチャンネル1の値を記録し、それを咬合力の振幅の上位5つの値に減算または加算します。このアッセイから咬合力の相対値を取得するには、これら5つの値の平均を取り、1匹のマウスの平均相対咬合力を決定します。CFAで処理したマウスは、PBSグループと比較して、注射後1日目の相対的な咬合力の大幅な減少を示し、時間の経過とともに徐々に回復し、CFAで処理したマウスでは1日目に咬合力の変化率が大幅に減少し、12日目までに回復する傾向を示しました。

まず、マウスケージに金網ケージを入れ、テスト手順の少なくとも1時間前にマウスを行動室に慣れさせます。次に、電子フォンフレイテストマシンの電源を入れます。ヘッドの引き出し閾値を測定するには、最大を押して、ユニットをマシンによって設定される任意の単位である500グラムに設定します。

値を 0 に設定すると、今すぐ録音が開始されます。マウスを金網ケージに入れます。フォンフレイフィラメントを顎関節領域に垂直に塗布します。

フィラメントから加えられた力の値、または反応を引き起こす刺激強度をグラム単位で記録します。次に、画面上の力の値をゼロに設定し、マウスがケージ内に留まっている間10秒間待ちます。フィラメントの塗布を再度開始し、値を記録します CFAで処理されたマウスでは、ベースラインと比較して初日にヘッド離脱閾値が有意に低かった その後、部分的な回復が続きました。

時間の経過とともに、CFAで治療したマウスでは、1日目に頭部離脱閾値の変化率が著しく減少し、12日目まで改善が観察されました。