CRPSの基礎となるメカニズムは、まだ不明です。CRPSを模倣した前臨床動物モデルを確立することは、CRPS Iの基礎となるメカニズムを探求するために非常に重要です。ラットCPIPモデルは、初期段階で後肢浮腫や高血症を含むシミタンスのような多くのCRPS Iを示しています。モデルの確立後、続いて持続的な熱および機械的過敏症。
すべてのラットをフェノバルビタールナトリウムで麻酔させることから始めます。後ろ足や尾を鉗子でつまんで、ラットが適切に麻酔されていることを確認してください。そして、目に獣医の軟膏を置きます。
手順中に37°Cの加熱パッドにラットを保管してください。右後足と足首をグリセロールで潤滑します。次に、ニトリル70デュロメータOリングをスナップキャップを切り取った1ポイント5ミリリットルチューブの大きな側にスライドさせます。
後ろ足が底に達するまで慎重に中空チューブに挿入します。チューブから足首関節付近の右後肢に徐々にOリングをスライドさせます。そして、3時間そこに残します。
虚血を誘発してはならない壊れたOリングを除いて、同じ治療をラットの偽の群に適用する。3時間後、Oリングを切断し、胸骨の不順を維持するのに十分な意識を取り戻すまでラットを監視します。麻酔から完全に回復するまで、ラットを他のラットの会社に入れないでください。
ラットをメッシュ床の透明なプレキシガラスチャンバーに置き、行動検査の前にラットを30分間環境に慣らします。フォン・フレイフィラメントを使用して、ラットの機械的アロディニアをテストします。後足の中央足底面に垂直に塗布することで、中央フィラメントからテストを開始します。
フィラメントを5秒間まで曲げるのに適した力を加えます。足の突然の引き込みは、本能的な行動と考えられています。3日目、2日目、1日、1日おきに13日目まで機械的アロディニア試験を行います。
アップダウンテストメソッドを適用して、しきい値をテストし、50%の足の離脱しきい値を計算するためのディクソンメソッドを適用します。熱過敏症をテストするには、50ワットの電球から後ろ足に放出される光線を直接照らしてハーグリーブス法を使用します。足の離脱遅延を測定し、過度の損傷を避けるためにカットオフしきい値として20秒を設定します。
各後足ごとに5分間隔で各テストを3回繰り返し、平均を足の離脱遅延として取ります。3日目、2日目、1日、1日おきに熱多痛試験を13日目まで実施します。カプサイシン誘発急性抗力挙動をテストするには、DMSOで200ミリモルカプサイシンストック溶液を調製し、さらに注射用のPBSで1〜1,000を希釈する。
カプサイシンは試薬で、皮膚、目、呼吸に対する関節刺激を引き起こす可能性があります。カプサイシン溶液を準備する際にマスクとゴーグルを着用することが重要です。その後、1ミリリットルの注射器に取り付けられた30ゲージの針を使用して、カプサイシンまたは車両の50マイクロリットルを後足に注入します。
注射後10分間、ビデオカメラを使用して、注射された足の舐め、噛み付き、ひるみなどの、性の高い行動を記録します。モデルの設置後15分、24時間、48時間、72時間で足径の増加を測定して、後足浮腫を評価します。足首にOリングを置いた後、イピシアラショナル後足の皮膚はチアノーシスを示し、組織低酸素症の徴候である。
Oリングを切断した後、足は血液で満たされ始め、強い肥血を示し、強烈な高血症を示した。腫脹は徐々に減少し、処置の48時間後に正常に戻った。モデルの成立の翌日、CPIP群のイプシアラショナル後足は、観察期間の13日間持続する明らかな機械的アロディニアを示した。
CPIP群の対側後足はまた、13日間機械的過痛を示した。熱過痛を測定した場合、CPIPラットの両側後足は、偽群ラットと比較して、有害な熱刺激に応答して離脱遅延を有意に減少させた。イピシアテラショナル後足の熱過痛は観察時間枠の終わりまで持続し、対側後足の熱過痛は7日間続いた。
シャムとCPIPグループは、カプサイシン注射との性フェンシフェンシブ行動のためにテストされました.車両が注入されたとき、シャムグループはわずかな興奮応答を示し、CPIPグループは有意に高い応答を示した。さらに重要なことに、CPIPラットは、偽群よりもカプサイシン注射に対して有意に高い応答を示し、これはCPIPラットがこの手順I.By CRPSを有するヒト患者と同様の現象を示すことを示唆し、ラットはモデル確立の前および中に麻酔される。
虚血とヒトCRPSによって確立されたこのプロトコルで記述されたCPIPラットモデルは、シミタンスが好きです。これらのモデルのファミリーは、CRPSに関するより多くのメカニズムを探求することができます。
