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Robotics and Dynamic Image Analysis for Studies of Gene Expression in Plant Tissues

Gene expression in plant tissues is typically studied by destructive extraction of compounds from plant tissues for in vitro analyses. The methods ...

The Ohio State University

North Carolina State University

&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x8868;&#x793A;&#x4E00;&#x79CD;&#x5927;&#x8C46;&#x690D;&#x9178;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0; &#xFF08;GmPhy&#xFF09;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6539;&#x53D8;&#x5927;&#x8C46;&#x79CD;&#x5B50;&#x690D;&#x9178;&#x542B;&#x91CF;&#x79CD;&#x5B50;&#x5F00;&#x53D1;&#x964D;&#x4F4E;&#x79EF;&#x7D2F;&#x690D;&#x9178; (IP6) &#x671F;&#x95F4;&#x3002;&#x542B; &beta;-&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x80C3;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x79CD;&#x5B50;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x63A7;&#x5236;&#x5927;&#x8C46;&#x690D;&#x9178;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x8F7D;&#x4F53; &#xFF08;alpha&#39;-&#x4E9A;&#x57FA;) &#x7528;&#x6765;&#x6539;&#x53D8;&#x80DA;&#x6027;&#x5927;&#x8C46;&#x6587;&#x5316;&#x3002;&#x4ECE;&#x56DB;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x682A;&#x690D;&#x7269;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E00;&#x4F53;&#x5316;&#x548C;&#x79CD;&#x5B50; IP6 &#x6C34;&#x5E73;&#x8FDB;&#x884C;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x4E2D;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x63A7;&#x5236; 12.6 &#x81F3; 24.8 &#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E0D;&#x7B49; &#39;&#x6770;&#x514B;&#39; &#x5927;&#x8C46;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x79CD;&#x5B50;&#x7684; IP6 &#x6C34;&#x5E73;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x4F4E;&#x62F7;&#x8D1D;&#x8F6C;&#x5316;&#x5B50;&#x88AB;&#x4F20;&#x64AD;&#x5230; T4 &#x4EE3;&#x548C;&#x79CD;&#x5B50;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x690D;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x68C0;&#x67E5;&#x3002;&#x690D;&#x9178;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x690D;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0;&#x79CD;&#x5B50;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408;&#x80DA;&#x80CE;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x5F02;&#x4F4D;&#x690D;&#x9178;&#x9176;&#x5728;&#x79CD;&#x5B50;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x964D;&#x4F4E;&#x5927;&#x8C46;&#x79CD;&#x5B50;&#x690D;&#x9178;&#x542B;&#x91CF;&#x7684;&#x6709;&#x6548;&#x6218;&#x7565;&#x3002;

&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x6700;&#x5927;&#x7684;&#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x4EE5;&#x63D0;&#x9AD8;&#x78F7;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x7684;&#x79CD;&#x5B50;&#x5927;&#x8C46;&#x690D;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x5F02;&#x4F4D;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

A transgenic approach was used to alter soybean seed phytate content by expressing a soybean phytase gene (GmPhy) during seed development to degrade accumulating phytic acid (IP6). An expression vector containing the soybean phytase cDNA controlled by the seed-specific beta-conglycinin promoter (alpha'-subunit) was used to transform embryogenic soybean cultures. Plants from four independent transgenic lines were analyzed for transgene integration and seed IP6 levels. The reduction in IP6 levels in transgenic seeds compared to control 'Jack' soybeans ranged from 12.6 to 24.8 as determined by HPLC. A low copy transformant was propagated to the T4 generation and examined in more detail for phytase expression and enzyme activity during seed development. Expression of phytase mRNA and phytase activity increased during seed development, consistent with the use of an embryo-specific promoter. Ectopic phytase expression during seed development offers potential as an effective strategy for reducing phytate content in soybean seed.

Ectopic expression of a soybean phytase in developing seeds of Glycine max to improve phosphorus availability.

Une d&#xE9;marche transg&#xE9;nique a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;e pour modifier le contenu de phytate de graine de soja en exprimant un g&#xE8;ne de phytase de soja (GmPhy) au cours du d&#xE9;veloppement des graines de d&#xE9;grader l&#x26;#39;acide phytique accumulation (IP6). Un vecteur d&#x26;#39;expression contenant la phytase de soja ADNc contr&#xF4;l&#xE9;e par le sp&#xE9;cifique de la graine de b&#xEA;ta-conglycinine promoteur (alpha&#x26;#39; sous-unit&#xE9;) a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; pour transformer les cultures de soja embryog&#xE8;nes. Les plantes issues de quatre lign&#xE9;es transg&#xE9;niques ind&#xE9;pendantes ont &#xE9;t&#xE9; analys&#xE9;s pour l&#x26;#39;int&#xE9;gration du transg&#xE8;ne et de semences IP6 niveaux. La r&#xE9;duction de la IP6 niveaux dans les semences transg&#xE9;niques par rapport aux graines de soja &#x26;#39;Jack&#x26;#39; de contr&#xF4;le variait de 12,6 &#xE0; 24,8 tel que d&#xE9;termin&#xE9; par HPLC. Un faible nombre de copies transformant a &#xE9;t&#xE9; propag&#xE9;e &#xE0; la g&#xE9;n&#xE9;ration T4 et examin&#xE9; plus en d&#xE9;tail &#xE0; l&#x26;#39;expression et l&#x26;#39;activit&#xE9; enzymatique de phytase au cours du d&#xE9;veloppement des semences. Expression de l&#x26;#39;ARNm phytase et une activit&#xE9; de phytase augment&#xE9; au cours du d&#xE9;veloppement des graines, compatible avec l&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;un promoteur sp&#xE9;cifique d&#x26;#39;embryon-. L&#x26;#39;expression ectopique de phytase au cours du d&#xE9;veloppement des semences offre un potentiel comme une strat&#xE9;gie efficace pour r&#xE9;duire la teneur en phytates de la graine de soja.

L&#x26;#39;expression ectopique d&#x26;#39;une phytase de soja dans l&#x26;#39;&#xE9;laboration graines de Glycine max pour am&#xE9;liorer la disponibilit&#xE9; du phosphore

Ektopische Expression einer Phytase bei der Entwicklung von Sojabohnen-Samen von Glycine max an Phosphor Verf&#xFC;gbarkeit zu verbessern.

Un approccio transgenico &egrave; stato utilizzato per modificare il contenuto di soia semi fitato esprimendo un gene di fitasi di soia (GmPhy) durante lo sviluppo del seme a degradare ad accumula l&#39;acido fitico (IP6). Un vettore di espressione contenente il cDNA di fitasi soia controllato dal promotore seme specifico beta-conglycinin (alfa &#39;-subunit&agrave;) &egrave; stato utilizzato per trasformare le culture embryogenic soia. Piante da quattro linee transgeniche indipendenti sono stati analizzati per l&#39;integrazione del transgene e livelli IP6 seme. La riduzione dei livelli di IP6 in semi transgenici rispetto al controllo &#39;Jack&#39; soia variava da 12,6 a 24,8 come determinato mediante HPLC. Una copia basso transformant fu propagata per la generazione di T4 ed esaminati pi&ugrave; in dettaglio per fitasi espressione ed attivit&agrave; enzimatica durante lo sviluppo del seme. L&#39;espressione di fitasi mRNA e fitasi attivit&agrave; aumenta durante lo sviluppo di semi, coerenza con l&#39;uso di un promotore specifico dell&#39;embrione. Espressione ectopica fitasi durante lo sviluppo del seme offre un potenziale come una strategia efficace per ridurre il contenuto di fitato nel seme di soia.

Espressione ectopica di un fitasi di soia nello sviluppo di semi di Glycine max per migliorare la disponibilit&agrave; di fosforo.

&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C1;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;IP6&#xFF09;&#x3092;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3057;&#x3066;&#x5206;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x7A2E;&#x5B50;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x5927;&#x8C46;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF08;GmPhy&#xFF09;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x5927;&#x8C46;&#x7A2E;&#x5B50;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C1;&#x30F3;&#x9178;&#x542B;&#x6709;&#x91CF;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7A2E;&#x5B50;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x3B2;-&#x30B3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF08;alpha&#x26;#39;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x308B;cDNA&#x306E;&#x5927;&#x8C46;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x767A;&#x73FE;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x5927;&#x8C46;&#x57F9;&#x990A;&#x7269;&#x3092;&#x5909;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 4&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x690D;&#x7269;&#x304C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x3068;&#x7A2E;&#x5B50;IP6&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002; HPLC&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#xB7;&#x30B8;&#x30E3;&#x30C3;&#x30AF; &#x26;quot;&#x306E;&#x5927;&#x8C46;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x307F;&#x63DB;&#x3048;&#x7A2E;&#x5B50;&#x306E;IP6&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x306F;12.6&#x304B;&#x3089;24.8&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4F4E;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x306E;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;T4&#x4E16;&#x4EE3;&#x306B;&#x4F1D;&#x64AD;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x7A2E;&#x5B50;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8A73;&#x7D30;&#x306B;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;mRNA&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x80DA;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3001;&#x7A2E;&#x5B50;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7A2E;&#x5B50;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x6642;&#x306B;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x8C46;&#x7A2E;&#x5B50;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C1;&#x30F3;&#x9178;&#x542B;&#x6709;&#x91CF;&#x3092;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30EA;&#x30F3;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x7A2E;&#x5B50;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x5927;&#x8C46;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC811;&#xADFC; &#xCD95;&#xC801; phytic &#xC0B0; (IP6) &#xC800;&#xD558; &#xC885;&#xC790; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xCF69; phytase &#xC720;&#xC804;&#xC790; (GmPhy)&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xC5EC; &#xCF69; &#xC528;&#xC557; phytate &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC528;&#xC557; &#xAD00;&#xB828; &#xBCA0;&#xD0C0; conglycinin &#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xCF69; phytase Cdna&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD; &#xBCA1;&#xD130; (&#xC54C;&#xD30C; &#39;-&#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;) embryogenic &#xCF69; &#xBB38;&#xD654;&#xB97C; &#xBCC0;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD;&#xBB3C; transgene &#xD1B5;&#xD569;&#xACFC; &#xC528;&#xC557; IP6 &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC885;&#xC790; &#39;&#xC7AD;&#39; &#xCF69; 24.8 HPLC&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB41C; &#xB300;&#xB85C; 12.6&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6D0;&#xAC70;&#xB9AC; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; IP6 &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB0AE;&#xC740; &#xBCF5;&#xC0AC; transformant T4 &#xC138;&#xB300;&#xC5D0; &#xC804;&#xD30C; &#xD558; &#xACE0; &#xC885;&#xC790; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; phytase &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC880; &#xB354; &#xC790;&#xC138;&#xD558;&#xAC8C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. Phytase Mrna&#xC640; phytase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC2DD; &#xC885;&#xC790; &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xBC30;&#xC544; &#xD2B9;&#xC815; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xACFC; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC99D;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC885;&#xC790; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC18C;&#xC131; phytase &#xC2DD; &#xCF69; &#xC528;&#xC557;&#xC758; phytate &#xCF58;&#xD150;&#xCE20;&#xB97C; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xC804;&#xB7B5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0; &#xC778; &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xB300;&#xC758; &#xC528;&#xC557;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xCF69; phytase&#xC758; &#xC18C;&#xC131; &#xC2DD;.

Un enfoque transg&#xE9;nico se utiliza para modificar la semilla de soja contenido en fitato expresando un gen de la fitasa de soja (GmPhy) durante el desarrollo de la semilla para degradar la acumulaci&#xF3;n de &#xE1;cido f&#xED;tico (IP6). Un vector de expresi&#xF3;n que contiene la fitasa de soja ADNc controlada por la semilla espec&#xED;fica beta-conglicinina promotor (alfa&#x26;#39;-subunidad) se utiliz&#xF3; para transformar cultivos embriog&#xE9;nicos de soja. Las plantas de cuatro l&#xED;neas transg&#xE9;nicas independientes se analizaron para la integraci&#xF3;n del transg&#xE9;n y la semilla IP6 niveles. La reducci&#xF3;n en los niveles en IP6 semillas transg&#xE9;nicas en comparaci&#xF3;n con la soja &#x26;quot;Jack control vari&#xF3; desde 12,6 hasta 24,8, determinado por HPLC. Una copia de baja transformante se propag&#xF3; a la generaci&#xF3;n de T4 y se examina con m&#xE1;s detalle para la expresi&#xF3;n de la fitasa y la actividad enzim&#xE1;tica durante el desarrollo de la semilla. La expresi&#xF3;n de mRNA y la actividad fitasa fitasa aument&#xF3; durante el desarrollo de semillas, de acuerdo con el uso de un promotor espec&#xED;fico del embri&#xF3;n. Expresi&#xF3;n de fitasa ect&#xF3;pico durante el desarrollo de semillas ofrece potencial como una estrategia efectiva para reducir el contenido de fitatos en las semillas de soja.

La expresi&#xF3;n ect&#xF3;pica de una fitasa de soja en el desarrollo de semillas de Glycine max para mejorar la disponibilidad de f&#xF3;sforo

&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x81EA;&#x52A8;&#x5316;&#x56FE;&#x50CF;&#x91C7;&#x96C6;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7528;&#x6765;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4E24;&#x4E2A;&#x65B0;&#x5927;&#x8C46;&#x5BA3;&#x4F20;&#x5458;&#x4E0E;&#x82B1;&#x6930;&#x83DC;&#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2; 35S (CaMV35S) &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5B83;&#x88AB;&#x7528;&#x4F5C;&#x6807;&#x51C6;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002; (&#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x6700;&#x5927; (L.) &#x53D8;&#x5F02;&#x3002;&#xFF09;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6BD4;&#x8F83;&#xFF0C;&#x5404;&#x79CD;&#x6392;&#x5217;&#x7EC4;&#x5408;&#x5927;&#x8C46;&#x904D; (Gmubi) &#x542F;&#x52A8;&#x5B50; &mdash; &mdash; &#x5927;&#x8C46;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 90 &#x6837; (GmHSP90L) &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x548C; CaMV35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x88AB;&#x7F6E;&#x4E8E;&#x4E00;&#x79CD;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (gfp) &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x4E0A;&#x6E38;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x7C92;&#x5B50;&#x8F70;&#x51FB;&#x5230;&#x79BB;&#x4F53;&#x5B50;&#x53F6;&#x840C;&#x52A8;&#x5229;&#x9A6C;&#x8C46; &#xFF08;&#x83DC;&#x8C46;&#x8C46; L.&#xFF09; &#x79CD;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5B89;&#x6392;&#x4E86;&#x5728;&#x57F9;&#x517B;&#x76BF;&#x4E2D;&#x81EA;&#x52A8;&#x5316;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x91C7;&#x96C6;&#x548C;&#x56FE;&#x50CF;&#x5206;&#x6790;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86; DNA &#x6784;&#x9020;&#x3002;&#x81EA;&#x52A8;&#x5316;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5141;&#x8BB8;&#x76D1;&#x6D4B;&#x548C;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x968F;&#x7740;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x63A8;&#x79FB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5728;&#x540C;&#x4E00;&#x7247;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;Gmubi &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E0D;&#x53D8;&#xFF0C;&#x5176;&#x5185;&#x542B;&#x5B50;&#x533A;&#x57DF;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x662F;&#x6BD4; CaMV35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x4E94;&#x500D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x7684;&#x6700;&#x9AD8;&#x8868;&#x73B0;&#x3002;&#x5185;&#x542B;&#x5B50;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x65F6;&#x5019; Gmubi &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x4E2D;&#x5220;&#x9664;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x51CF;&#x5C11;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4ECD;&#x8D85;&#x8FC7;&#x4E24;&#x500D;&#x5927;&#x4E8E; CaMV35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x3002;&#x5168;&#x957F;&#x5927;&#x8C46; GmHSP90L &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x662F;&#x6BD4; CaMV35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x56DB;&#x500D;&#x3002;GmHSP90L &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x622A;&#x65AD;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51FA;&#x73B0;&#x4EE5;&#x79FB;&#x9664;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5143;&#x7D20;&#x6240;&#x5BF9;&#x5E94;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x5B9E;&#x529B;&#xFF0C;&#x9010;&#x6B65;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x81EA;&#x52A8;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x6355;&#x83B7;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x5141;&#x8BB8;&#x5FEB;&#x901F;&#x9AD8;&#x6548;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B0;&#x7684;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8005;&#x3002;

&#x53CC;&#x9AD8;&#x6D3B;&#x6027;&#x5927;&#x8C46; (&#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x6700;&#x5927; (L.) &#x53D8;&#x5F02;.&#xFF09; &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x81EA;&#x52A8;&#x5316;&#x56FE;&#x50CF;&#x91C7;&#x96C6;&#x4E0E;&#x5206;&#x6790;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;

A novel automated image collection and analysis system was used to compare two new soybean (Glycine max (L.) Merr.) promoters with the cauliflower mosaic virus 35S (CaMV35S) promoter, which was used as an expression standard. For expression comparisons, various permutations of a soybean polyubiquitin (Gmubi) promoter, a soybean heat shock protein 90-like (GmHSP90L) promoter and the CaMV35S promoter were placed upstream of a green fluorescent protein (gfp) gene. DNA constructs were introduced via particle bombardment into excised cotyledons of germinating lima bean (Phaseolus lunatus L.) seeds, which were arranged in Petri dishes for automated image capture and image analysis. The automated system allowed monitoring and quantification of gfp gene expression in the same piece of tissue over time. The Gmubi promoter, with its intronic region intact, showed the highest expression that was over five times stronger than the CaMV35S promoter. When an intronic region was removed from the Gmubi promoter, GFP expression was reduced, but was still over two times greater than with the CaMV35S promoter. The full-length soybean GmHSP90L promoter was four times stronger than the CaMV35S promoter. Truncation of the GmHSP90L promoter resulted in stepwise decreases in promoter strength, which appear to correspond to removal of regulatory elements. Automated image capture and analysis allowed the rapid and efficient evaluation of these new promoters.

Isolation of two highly active soybean (Glycine max (L.) Merr.) promoters and their characterization using a new automated image collection and analysis system.

Une collection nouvelle image automatis&#xE9; et un syst&#xE8;me d&#x26;#39;analyse a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; pour comparer deux de soja nouvelle (Glycine max (L.) Merr.) Promoteurs avec le virus de la mosa&#xEF;que du chou-fleur 35S (CaMV35S) promoteur, qui a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; comme un standard d&#x26;#39;expression. Pour des comparaisons d&#x26;#39;expression, de diverses permutations du soja polyubiquitine (Gmubi) promoteur, une prot&#xE9;ine de choc thermique de soja 90 en forme de (GmHSP90L) promoteur et le promoteur CaMV35S ont &#xE9;t&#xE9; plac&#xE9;s en amont d&#x26;#39;une prot&#xE9;ine verte (GFP) fluorescente g&#xE8;ne. Des constructions d&#x26;#39;ADN ont &#xE9;t&#xE9; introduits par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire d&#x26;#39;un bombardement de particules dans les cotyl&#xE9;dons excis&#xE9;s de germination haricot de Lima (Phaseolus lunatus L.) graines, qui ont &#xE9;t&#xE9; dispos&#xE9;s dans des bo&#xEE;tes de P&#xE9;tri pour la capture d&#x26;#39;image automatis&#xE9; et analyse d&#x26;#39;image. Syst&#xE8;me automatis&#xE9; de surveillance autoris&#xE9; et la quantification de l&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne GFP dans la m&#xEA;me pi&#xE8;ce de tissu au cours du temps. Le promoteur Gmubi, avec son intronique r&#xE9;gion intacte, a montr&#xE9; la plus haute expression qui &#xE9;tait cinq fois plus fort que le promoteur CaMV35S. Lorsque une r&#xE9;gion intronique a &#xE9;t&#xE9; retir&#xE9; du promoteur Gmubi, expression de la GFP a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;duite, mais elle &#xE9;tait encore plus de deux fois sup&#xE9;rieure &#xE0; celle avec le promoteur CaMV35S. Le promoteur de pleine longueur de soja GmHSP90L &#xE9;tait quatre fois plus fort que le promoteur CaMV35S. Troncature du promoteur GmHSP90L a entra&#xEE;n&#xE9; des baisses progressives dans la force du promoteur, qui semblent correspondre &#xE0; l&#x26;#39;enl&#xE8;vement des &#xE9;l&#xE9;ments de r&#xE9;gulation. Capture d&#x26;#39;image automatis&#xE9;e et l&#x26;#39;analyse a permis l&#x26;#39;&#xE9;valuation rapide et efficace de ces nouveaux promoteurs.

Isolement de deux de soja hautement actif (Glycine max (L.) Merr.) Promoteurs et leur caract&#xE9;risation &#xE0; l&#x26;#39;aide d&#x26;#39;une collection nouvelle image automatis&#xE9; et d&#x26;#39;analyse

Ein Roman automatisiert Bildersammlung und Analyse-System wurde verwendet, um zwei neue Sojabohnen (Glycine max (L.) Merr.) Projekttr&auml;ger mit dem Blumenkohl-Mosaik-Virus 35S (CaMV35S) vergleichen Projekttr&auml;ger, die als Norm Ausdruck verwendet wurde. F&uuml;r Ausdruck Vergleiche, verschiedenen Permutationen der Sojabohne Polyubiquitin (Gmubi) F&ouml;rderer, ein Soja heat Shock Protein 90-wie (GmHSP90L) Projekttr&auml;ger und der CaMV35S-Projekttr&auml;ger waren upstream eines Gens gr&uuml;n fluoreszierendes Protein (Gfp) platziert. DNA-Konstrukte wurden eingef&uuml;hrt, durch Teilchen-Bombardement in excised Keimbl&auml;tter von Keimen Limabohne (Phaseolus Lunatus L.)-Samen, die in Petrischalen f&uuml;r automatisierte Bilderfassung und Bildanalyse angeordnet waren. Das automatisierte System erlaubt die &Uuml;berwachung und die Quantifizierung der Gfp-Genexpression in dem gleichen St&uuml;ck Gewebe im Laufe der Zeit. Die Gmubi-Veranstalter, mit seinen verband intronic Region intakt, zeigte den h&ouml;chsten Ausdruck, der mehr als f&uuml;nf Mal als der CaMV35S-Promoter st&auml;rker. Wenn eine verband intronic Region war entfernt vom Projekttr&auml;ger Gmubi, GFP-Expression wurde reduziert, aber war noch mehr als zwei Mal gr&ouml;&szlig;er als mit dem CaMV35S-Projekttr&auml;ger. In Sojabohnen GmHSP90L Initiator war vier Mal st&auml;rker als der CaMV35S-Promoter. Abschneiden des Projekttr&auml;gers GmHSP90L f&uuml;hrten schrittweise R&uuml;ckgang Projekttr&auml;ger St&auml;rke, die angezeigt werden, um Abbau von regulatorischen Elementen entsprechen. Automatisierte Erfassung und Analyse erlaubt die schnelle und effiziente Bewertung der diese neue F&ouml;rderer.

Isolierung von zwei hochaktive Sojabohnen (Glycine max (L.) Merr.)-Veranstalter und ihre Charakterisierung mit einem neues automatisierten Bild Sammlung und Analyse-System.

Un romanzo automatizzato insieme immagine e sistema di analisi &egrave; stato utilizzato per confrontare due nuovi promotori di soia (Glycine max (L.) Merr.) con il cavolfiore mosaic virus 35S promotore (CaMV35S), che &egrave; stato usato come un&#39;espressione standard. Per i confronti di espressione, varie permutazioni di un promotore di polyubiquitin (Gmubi) di soia, una soia calore promotore di shock protein 90-come (GmHSP90L) e il promotore CaMV35S furono posti a monte del gene della proteina fluorescente verde (gfp). Costrutti di DNA sono stati introdotti tramite bombardamento di particelle in escisse cotiledoni di germinazione dei semi di fagiolo di lima (Phaseolus lunatus L.), che sono stati organizzati in piastre di Petri per la cattura automatica di immagini e analisi delle immagini. Il sistema automatizzato ha permesso il monitoraggio e la quantificazione dell&#39;espressione del gene gfp nello stesso pezzo di tessuto nel corso del tempo. Il promotore di Gmubi, con la sua regione intronic intatto, ha mostrato la massima espressione che era oltre cinque volte pi&ugrave; resistente del promotore CaMV35S. Quando una regione intronic &egrave; stato rimosso dal promotore Gmubi, espressione di GFP &egrave; stato ridotto, ma era ancora pi&ugrave; di due volte maggiore con il promotore CaMV35S. Il promotore di GmHSP90L soia integrale era quattro volte pi&ugrave; resistente del promotore CaMV35S. Troncamento del promotore GmHSP90L provocato diminuzioni stepwise in forza del promotore, che sembrano corrispondere alla rimozione degli elementi normativi. Acquisizione immagine automatizzato e l&#39;analisi ha permesso la valutazione rapida ed efficace di questi nuovi promotori.

Isolamento dei due promotori altamente attiva di soia (Glycine max (L.) Merr.) e loro caratterizzazione mediante un nuovo sistema di raccolta e analisi di immagine automatizzato.

&#x5C0F;&#x8AAC;&#x81EA;&#x52D5;&#x753B;&#x50CF;&#x53CE;&#x96C6;&#x3068;&#x5206;&#x6790;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BA;&#xFF08;Glycine max&#xFF08;L.&#xFF09;MERR&#xFF09;&#x30AB;&#x30EA;&#x30D5;&#x30E9;&#x30EF;&#x30FC;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;35S&#xFF08;CaMV35S&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF09;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x3001;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F0F;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3001;&#x5927;&#x8C46;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#xFF08;Gmub&#x200B;&#x200B;i&#xFF09;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x8C46;&#x306E;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;90&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#xFF08;GmHSP90L&#xFF09;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;CaMV35S&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;GFP&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306B;&#x914D;&#x7F6E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; DNA&#x69CB;&#x7BC9;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x81EA;&#x52D5;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x753B;&#x50CF;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3068;&#x753B;&#x50CF;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DA;&#x30C8;&#x30EA;&#x76BF;&#x306B;&#x914D;&#x7F6E;&#x3057;&#x305F;&#x30EA;&#x30DE;&#x30DE;&#x30E1;&#xFF08;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B2;&#x30F3;&#x30DE;&#x30E1;lunatus L.&#xFF09;&#x7A2E;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x82BD;&#x5B50;&#x8449;&#x3092;&#x5207;&#x308A;&#x51FA;&#x3057;&#x306B;&#x7C92;&#x5B50;&#x885D;&#x7A81;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x81EA;&#x52D5;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x7D4C;&#x904E;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x540C;&#x3058;&#x90E8;&#x5206;&#x306B;GFP&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x9818;&#x57DF;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3067;Gmubi&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;CaMV35S&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3088;&#x308A;&#x3082;5&#x500D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x5F37;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x6700;&#x3082;&#x9AD8;&#x3044;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x9818;&#x57DF;&#x304C;Gmubi&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;GFP&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3067;&#x3082;&#x3001;CaMV35S&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x4E0A;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x500D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x306E;&#x5927;&#x8C46;GmHSP90L&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;CaMV35S&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3088;&#x308A;&#x3082;4&#x500D;&#x5F37;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; GmHSP90L&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x898F;&#x5236;&#x5143;&#x7D20;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3092;&#x6BB5;&#x968E;&#x7684;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x81EA;&#x52D5;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x753B;&#x50CF;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x3068;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

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&#xC18C;&#xC124; &#xC790;&#xB3D9; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xC218;&#xC9D1; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xB450; &#xBA85;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCF69; (&#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0; &#xCD5C;&#xB300; (L.) Merr.) &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; 35S &#xCF5C;&#xB9AC;&#xD50C;&#xB77C;&#xC6CC; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (CaMV35S)&#xC744; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC2DD;&#xC744; &#xD45C;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCF69; polyubiquitin (Gmubi) &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; permutations &#xC2DD; &#xBE44;&#xAD50;&#xB294; &#xCF69; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 90 &#xD615; (GmHSP90L) &#xBAA8;&#xD130;&#xC640; CaMV35S &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (gfp) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xBC30;&#xCE58; &#xD588;&#xB2E4;. DNA &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; &#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xB41C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xCEA1;&#xCCD0; &#xBC0F; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xD398; &#xD2B8;&#xB9AC; &#xC811;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xBC30;&#xC5F4; &#xB9AC;&#xB9C8; &#xCF69; (Phaseolus lunatus L.) &#xC528;&#xB97C; &#xCD9C; &#xC544;&#xC758; &#xC0AD;&#xC81C; cotyledons&#xB85C; &#xC785;&#xC790; &#xD3ED;&#xACA9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB3C4;&#xC785; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xB41C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC9C1;&#xBB3C;&#xC758; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC870;&#xAC01;&#xC5D0; gfp &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC815;&#xB7C9;&#xD654;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9;. Gmubi &#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xC190;&#xC0C1;, intronic &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC73C;&#xB85C; 5 &#xBC30; &#xC774;&#xC0C1; &#xAC15;&#xD55C; CaMV35S &#xBAA8;&#xD130; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xCD5C;&#xACE0; &#xC2DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. Intronic &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC774; &#xC5C8;&#xC744; &#xB54C; &#xC81C;&#xAC70; Gmubi &#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; GFP &#xC2DD; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xB450; &#xBC88; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD070; CaMV35S &#xBAA8;&#xD130;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;. &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xCF69; GmHSP90L &#xBAA8;&#xD130;&#xB294; CaMV35S &#xBAA8;&#xD130; &#xBCF4;&#xB2E4; 4 &#xBC30; &#xB354; &#xAC15;&#xD55C;. GmHSP90L &#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xC798;&#xB9BC; &#xD574;&#xB2F9; &#xADDC;&#xC815; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558; &#xAC8C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xB294; stepwise &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xAC15;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xB41C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xCEA1;&#xCC98; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xD3C9;&#xAC00;.

&#xB450; &#xB192;&#xC740; &#xD65C;&#xC131; &#xCF69; (&#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0; &#xCD5C;&#xB300; (L.) Merr.) &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xBC0F; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xB41C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xC218;&#xC9D1; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC758; &#xACA9;&#xB9AC;.

Una colecci&#xF3;n de im&#xE1;genes automatizado y novedoso sistema de an&#xE1;lisis se utiliza para comparar dos soja nueva (Glycine max (L.) Merr.) Promotores con el virus del mosaico de la coliflor 35S (CaMV35S) promotor, que se us&#xF3; como un est&#xE1;ndar expresi&#xF3;n. Para las comparaciones de expresi&#xF3;n, varias permutaciones de una soja poliubiquitina (Gmubi), el promotor, un calor de soja prote&#xED;nas de choque de 90 como (GmHSP90L) y el promotor CaMV35S se colocaron arriba de una prote&#xED;na verde fluorescente (GFP) de genes. Construcciones de ADN fueron introducidas a trav&#xE9;s de bombardeo de part&#xED;culas en los cotiledones extirpados de la germinaci&#xF3;n de plantas de frijol (Phaseolus lunatus L.), que fueron colocados en placas de Petri para la captura autom&#xE1;tica de im&#xE1;genes y an&#xE1;lisis de im&#xE1;genes. El sistema automatizado permite el seguimiento y la cuantificaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n del gen GFP en la misma pieza de tejido en el tiempo. El promotor Gmubi, con su regi&#xF3;n intr&#xF3;nica intacta, mostr&#xF3; la mayor expresi&#xF3;n que era m&#xE1;s de cinco veces m&#xE1;s fuerte que el promotor CaMV35S. Cuando una regi&#xF3;n intr&#xF3;nica se elimin&#xF3; a partir del promotor Gmubi, la expresi&#xF3;n de GFP se redujo, pero era todav&#xED;a m&#xE1;s de dos veces mayor que con el promotor CaMV35S. El promotor de soja de longitud completa GmHSP90L era cuatro veces m&#xE1;s fuerte que el promotor CaMV35S. El truncamiento del promotor GmHSP90L tradujo en una reducci&#xF3;n gradual en la fuerza promotora, que parecen corresponder a la eliminaci&#xF3;n de elementos reguladores. Captura de im&#xE1;genes y an&#xE1;lisis automatizado permite la evaluaci&#xF3;n r&#xE1;pida y eficiente de estos nuevos promotores.

El aislamiento de dos cultivares de soya de alta potencia (Glycine max (L.) Merr.) Los promotores y su caracterizaci&#xF3;n mediante una nueva colecci&#xF3;n de im&#xE1;genes autom&#xE1;tico y sistema de an&#xE1;lisis

&#x542B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) &#x62A5;&#x544A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684; DNA &#x8868;&#x8FBE;&#x8F7D;&#x4F53;&#x4F7F;&#x7528;&#x7C92;&#x5B50;&#x8F70;&#x51FB;&#xFF0C;&#x88AB;&#x5F15;&#x5165;&#x5230;&#x690D;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x77AC;&#x65F6;&#x7684; &#xFF1B;&#x804C;&#x4F4D;&#x7B80;&#x4ECB;&#x548C;&#x5FEB;&#x901F;&#x6B64;&#x540E;&#x4E0B;&#x964D;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5CF0;&#x503C;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7EA6; 24 h&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8FD9;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#x4E0B;&#x964D;&#x4EE5;&#x524D;&#x88AB;&#x5F52;&#x4E8E; pre-integrative DNA &#x4E8B;&#x4EF6;&#x6D89;&#x53CA;&#x5F15;&#x8FDB;&#x7684; DNA &#x6216;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x8F6C;&#x5F55;&#x540E;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8; &#xFF08;&#x8F6C;&#x5F55;&#x540E;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;) &#x4E5F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4E86;&#x3002;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x8F7D;&#x4F53;&#x4EC5;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x5BFC;&#x81F4; 30 &#x5C0F;&#x65F6;&#x540E;&#x7684;&#x77AC;&#x65F6;&#x8868;&#x8FBE;&#x5FEB;&#x901F;&#x4E0B;&#x964D;&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x5982;&#x679C;&#x6709;&#x4EBA; GFP RNA &#x6C89;&#x9ED8;&#x6291;&#x5236;&#x86CB;&#x767D; HCPro &#x5E73;&#x79FB;&#x878D;&#x5408;&#x5728;&#x4ECE;&#x70DF;&#x8349;&#x8680;&#x7EB9;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6269;&#x5C55;&#x5230;&#x8D85;&#x8FC7; 100 h.&#x7A81;&#x53D8;&#x5206;&#x6790;&#x7684; HCPro &#x663E;&#x793A;&#x529F;&#x80FD;&#x7684; HCPro &#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6269;&#x5C55;&#x540D;&#x7684;&#x77AC;&#x65F6;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x5404;&#x79CD;&#x5220;&#x9664;&#x548C;&#x5E73;&#x79FB;&#x878D;&#x5408;&#x5206;&#x6790;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x6D3B;&#x6027;&#x86CB;&#x767D; C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x533A;&#x662F;&#x6574;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x4F18;&#x5316;&#x5236;&#x6B62;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x3002;&#x77AC;&#x6001;&#x7C92;&#x5B50;&#x8F70;&#x51FB;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4ECE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8F6C;&#x5F55;&#x540E;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53EF;&#x4EE5;&#x51CF;&#x8F7B;&#x6291;&#x764C;&#x7684;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684; RNA &#x6C89;&#x9ED8;&#x6291;&#x5236;&#x86CB;&#x767D;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F7F;&#x7C92;&#x5B50;&#x57FA;&#x56E0;&#x67AA;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x77AC;&#x65F6;&#x8868;&#x8FBE;&#x68C0;&#x6D4B;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x56E0;&#x7D20;&#x66F4;&#x6709;&#x7528;&#xFF0C;&#x5F71;&#x54CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x91CF;&#x5316;&#x548C;&#x77AC;&#x53D8;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5668;&#x7684; co-introduction &#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x6269;&#x5C55;&#x3002;

Using particle bombardment, a DNA expression vector containing the green fluorescent protein (GFP) reporter gene was introduced into plant cells. Expression of the GFP gene was transient; resulting in peak GFP Expression about 24 h post introduction and a rapid decline thereafter. This well known decline in gene expression has previously been attributed to pre-integrative DNA events that involved the loss of introduced DNA or cell death. Here, we show that post-transcriptional gene silencing (PTGS) is also involved. Introduction of a GFP expression vector alone resulted in a rapid decline in transient expression after 30 h. However, if GFP was expressed as a translational fusion to the RNA silencing suppressor protein HCPro from tobacco etch potyvirus, transgene expression was extended to well over 100 h. Mutant analyses of HCPro showed that a functional HCPro protein was required for this extension of transient expression. Various deletion and translational fusion analyses confirmed that the C-terminal region of the protein was important for suppressor activity and the entire protein was required for optimal suppression of host silencing. The transient nature of gene expression during particle bombardment appears to result from induction of PTGS, which can be mitigated by the presence of a suppressor of silencing. The use of RNA silencing suppressor proteins may make particle bombardment-mediated transient expression assays more useful for evaluating factors that effect gene expression.

Quantification and extension of transient GFP expression by the co-introduction of a suppressor of silencing.

En utilisant un bombardement de particules, un vecteur d&#x26;#39;expression d&#x26;#39;ADN contenant le g&#xE8;ne fluorescent vert prot&#xE9;ine rapporteur (GFP) a &#xE9;t&#xE9; introduit dans des cellules v&#xE9;g&#xE9;tales. L&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne GFP a &#xE9;t&#xE9; transitoire; entra&#xEE;nant expression de la GFP de pointe d&#x26;#39;environ 24 h apr&#xE8;s la mise en place et une baisse rapide par la suite. Cette baisse bien connue dans l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes a d&#xE9;j&#xE0; &#xE9;t&#xE9; attribu&#xE9; &#xE0; des &#xE9;v&#xE9;nements d&#x26;#39;ADN pr&#xE9;-int&#xE9;gration qui participent &#xE0; la perte de l&#x26;#39;ADN introduit ou la mort cellulaire. Ici, nous montrons que le silen&#xE7;age g&#xE9;nique post-transcriptionnelle (PTGS) est &#xE9;galement impliqu&#xE9;e. Introduction d&#x26;#39;un vecteur d&#x26;#39;expression GFP seule a entra&#xEE;n&#xE9; une baisse rapide de l&#x26;#39;expression transitoire apr&#xE8;s 30 h. Toutefois, si la GFP a &#xE9;t&#xE9; exprim&#xE9;e en fusion traductionnelle &#xE0; l&#x26;#39;HCPro RNA silencing prot&#xE9;ine suppresseur de potyvirus etch du tabac, l&#x26;#39;expression du transg&#xE8;ne a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tendu &#xE0; plus de 100 h. Analyses Mutant de HCPro a montr&#xE9; qu&#x26;#39;une prot&#xE9;ine fonctionnelle HCPro a &#xE9;t&#xE9; n&#xE9;cessaire pour cette extension d&#x26;#39;expression transitoire. Suppression diff&#xE9;rents et analyses fusion traductionnelle confirm&#xE9; que la r&#xE9;gion C-terminale de la prot&#xE9;ine est important pour l&#x26;#39;activit&#xE9; et la prot&#xE9;ine suppresseur ensemble a &#xE9;t&#xE9; n&#xE9;cessaire pour la suppression optimale de mise sous silence d&#x26;#39;accueil. La nature transitoire de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique pendant le bombardement de particules semble r&#xE9;sulter de l&#x26;#39;induction du PTGS, qui peut &#xEA;tre att&#xE9;nu&#xE9; par la pr&#xE9;sence d&#x26;#39;un suppresseur de silencing. L&#x26;#39;utilisation de RNA silencing prot&#xE9;ines suppresseurs de particules peut faire bombardement m&#xE9;diation essais d&#x26;#39;expression transitoire plus utile pour &#xE9;valuer les facteurs qui l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes effet.

Quantification et de la vulgarisation de l&#x26;#39;expression transitoire GFP par les co-introduction d&#x26;#39;un suppresseur de r&#xE9;duire au silence

Mit Teilchen-Bombardement, wurde ein DNA-Ausdruck-Vektor, der das gr&uuml;n fluoreszierende Protein (GFP) Reporter-gen in Pflanzenzellen eingef&uuml;hrt. Expression des Gens GFP war vor&uuml;bergehend; was zu Spitze GFP-Expression etwa 24 h Abstieg Post-Einf&uuml;hrung und eine rasche danach. Diese bekannten R&uuml;ckgang der Genexpression hat zuvor pre-integrative DNA-Ereignisse zugeschrieben, die den Verlust der eingef&uuml;hrten DNA oder Zelle Tod beteiligt. Hier zeigen wir, dass Posttranskriptionale gen silencing (PTGS) auch beteiligt ist. Einf&uuml;hrung der GFP Ausdruck Vektor allein f&uuml;hrte zu eine schnelle Abnahme in vor&uuml;bergehender Ausdruck nach 30 h. Jedoch wenn GFP zum Ausdruck kam, wie eine translatorische Fusion zu den RNA-silencing-Tumorsuppressor-Protein HCPro aus Tabak etch Potyvirus Transgenexpression verl&auml;ngerte, die weit &uuml;ber 100 h. Mutant Analysen der HCPro zeigte, dass eine funktionale HCPro Protein f&uuml;r diese Erweiterung der transienten Ausdruck erforderlich war. Verschiedene L&ouml;schung und translational Verschmelzung Analysen best&auml;tigt, dass die C-terminalen Region des Proteins f&uuml;r Schutzbeschaltung Aktivit&auml;t wichtig sei das gesamte Protein f&uuml;r optimale Unterdr&uuml;ckung von Host Unterdr&uuml;ckender erforderlich war. Die vor&uuml;bergehende Natur der Genexpression w&auml;hrend Teilchen-Bombardement erscheint das Ergebnis Induktion von PTGS, die durch das Vorhandensein von einem Schalld&auml;mpfer des Unterdr&uuml;ckender begrenzt werden k&ouml;nnen. Die RNA silencing Tumorsuppressor-Proteine kann Teilchens Bombardierung-vermittelte transient Ausdruck Proben n&uuml;tzlicher f&uuml;r die Bewertung von Faktoren dieser Wirkung-Genexpression nutzen.

Quantifizierung und Erweiterung der transienten GFP-Expression durch die Co-introduction von einem Schalld&auml;mpfer des zum Schweigen.

Tramite il bombardamento di particelle, un vettore di espressione di DNA contenente il gene reporter proteina fluorescente verde (GFP) &egrave; stato introdotto nelle cellule vegetali. Espressione del gene GFP &egrave; stato transitorio; con conseguente picco GFP Expression circa 24 h post introduzione e un rapido declino in seguito. Questo declino ben noto nell&#39;espressione del gene &egrave; stato attribuito in precedenza a pre-integrative eventi di DNA che ha coinvolto la perdita introdotta DNA o cellule morte. Qui, ci mostra che genico che silenziamento (Trascrizionale) &egrave; anche coinvolto. Introduzione di un vettore di espressione di GFP da solo ha portato a un rapido declino nell&#39;espressione transitoria dopo 30 h. Tuttavia, se la GFP &egrave; stato espresso come una fusione traslazionale per la proteina soppressore silenziamento RNA HCPro da tabacco etch potyvirus, espressione del transgene &egrave; stata estesa a oltre 100 analisi di mutanti h. di HCPro ha dimostrato che una proteina funzionale di HCPro &egrave; stato richiesta di questa estensione di espressione transitoria. Vari soppressione e fusione traslazionale analisi ha confermato che la regione C-terminale della proteina &egrave; stata importante per l&#39;attivit&agrave; di soppressore e l&#39;intera proteina era necessaria per soppressione ottimale dell&#39;host silenziamento. La natura transitoria dell&#39;espressione genica durante il bombardamento di particelle sembra derivare da induzione di Trascrizionale, che pu&ograve; essere mitigata dalla presenza di un soppressore del silenzio. L&#39;uso di RNA silencing proteine del soppressore pu&ograve; rendere dosaggi espressione transitoria mediata dal bombardamento delle particelle pi&ugrave; utili per valutare i fattori che espressione di gene di effetto.

Quantificazione ed estensione dell&#39;espressione di GFP transitoria dalla co-introduction di un soppressore del silenzio.

&#x30D1;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30EB;&#x30DC;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;GFP&#xFF09;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x542B;&#x3080;DNA&#x767A;&#x73FE;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x690D;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x3057;&#x305F;&#x3002; GFP&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;24&#x6642;&#x9593;&#x5F8C;&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#x3068;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;GFP&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x304F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x3057;&#x305F;DNA&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x30D7;&#x30EC;&#x7D71;&#x5408;DNA&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF08;PTGS&#xFF09;&#x3082;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5358;&#x72EC;&#x3067;&#x306E;GFP&#x767A;&#x73FE;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#x306F;&#x3001;30&#x6642;&#x9593;&#x5F8C;&#x306B;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x6025;&#x6FC0;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; GFP&#x306F;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x30A8;&#x30C3;&#x30C1;&#x30DD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;RNA&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;HCPro&#x306B;&#x7FFB;&#x8A33;&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x8D85;&#x3048;&#x308B;100&#x6642;&#x9593;&#x306B;&#x5EF6;&#x9577;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; HCPro&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;HCPro&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x6B20;&#x5931;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7FFB;&#x8A33;&#x878D;&#x5408;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;C&#x672B;&#x7AEF;&#x9818;&#x57DF;&#x306F;&#x6291;&#x5236;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5168;&#x4F53;&#x304C;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7C92;&#x5B50;&#x885D;&#x7A81;&#x6642;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8EFD;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;PTGS&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;RNA&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x304C;&#x8981;&#x56E0;&#x305D;&#x306E;&#x65E8;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7C92;&#x5B50;&#x7832;&#x6483;&#x4ECB;&#x5728;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x3082;&#x306E;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x5171;&#x540C;&#x5C0E;&#x5165;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A;GFP&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3068;&#x62E1;&#x5F35;

&#xC785;&#xC790; &#xD3ED;&#xACA9;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP) &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790; DNA &#xC2DD; &#xBCA1;&#xD130; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC785; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. GFP &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC774; &#xD588;&#xB2E4; &#xACFC;&#xB3C4;; &#xD53C;&#xD06C; GFP &#xC2DD; &#xC57D; 24 h&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB530;&#xB978; &#xAC8C;&#xC2DC;&#xBB3C; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xBE60;&#xB978; &#xAC10;&#xC18C; &#xC774;&#xD6C4;. &#xC774; &#xC798; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xAC10;&#xC18C; &#xB3C4;&#xC785;&#xB41C; &#xB41C; DNA &#xB098; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; pre-integrative DNA &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xADF8; post-transcriptional &#xC720;&#xC804;&#xC790; silencing (PTGS)&#xB3C4; &#xCC38;&#xC5EC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD63C;&#xC790; GFP &#xC2DD; &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; &#xB3C4;&#xC785; 30 h &#xD6C4; &#xACFC;&#xB3C4; &#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xD558;&#xB77D; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB2F4;&#xBC30;&#xC5D0;&#xC11C; RNA silencing &#xC5B5;&#xC555; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; HCPro &#xBCC0;&#xD658; &#xD4E8;&#xC804; &#xC5E3;&#xC9C0; potyvirus GFP &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;, transgene &#xC2DD; &#xC798; 100 &#xD5E4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBD84;&#xC11D; &#xAE30;&#xB2A5; HCPro &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xACFC;&#xB3C4; &#xC2DD;&#xC774; &#xD655;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xD588;&#xB2E4; Hcpro&#xC758; &#xD655;&#xC7A5; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0AD;&#xC81C; &#xBC0F; &#xBCC0;&#xD658; &#xC735;&#xD569; &#xBD84;&#xC11D; &#xD655;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC5B5;&#xC555; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC774;&#xC5C8;&#xACE0; &#xC804;&#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC785;&#xC744; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC785;&#xC790; &#xD3ED;&#xACA9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xACFC;&#xB3C4; &#xD2B9;&#xC131; &#xCE68;&#xBB35;&#xC758; &#xC5B5;&#xC555;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC644;&#xD654; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4; PTGS&#xC758; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC778;&#xB2E4;. &#xC785;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; RNA &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC218; &#xC785;&#xC790; &#xACFC;&#xB3C4; &#xC2DD; &#xD3ED;&#xACA9; &#xC911;&#xC7AC; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xB354; &#xC720;&#xC6A9; &#xD558; &#xAC8C; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xADF8; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;.

&#xC815;&#xB7C9;&#xD654; &#xBC0F; &#xCE68;&#xBB35;&#xC758; &#xC5B5;&#xC555;&#xC758; co-introduction&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; GFP &#xC2DD;&#xC758; &#xD655;&#xC7A5;.

Uso de bombardeo de part&#xED;culas, un vector de expresi&#xF3;n de ADN que contiene la prote&#xED;na verde fluorescente (GFP) de genes reportero se introdujo en las c&#xE9;lulas vegetales. La expresi&#xF3;n del gen GFP fue transitoria, dando como resultado la expresi&#xF3;n de GFP pico de alrededor de 24 horas despu&#xE9;s de la introducci&#xF3;n y una r&#xE1;pida disminuci&#xF3;n a partir de entonces. Esta disminuci&#xF3;n bien conocidos en la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica ha sido previamente atribuidos a los eventos de ADN de pre-integradores que participan la p&#xE9;rdida de ADN introducido o la muerte celular. Aqu&#xED;, mostramos que el silenciamiento post-transcripcional de genes (PTGS) tambi&#xE9;n est&#xE1; involucrado. La introducci&#xF3;n de un vector de expresi&#xF3;n de GFP sola result&#xF3; en un r&#xE1;pido descenso en la expresi&#xF3;n transitoria despu&#xE9;s de 30 horas. Sin embargo, si las buenas pr&#xE1;cticas agrarias se expres&#xF3; como una fusi&#xF3;n de traducci&#xF3;n a la HCPro silenciamiento de ARN prote&#xED;na supresora del potyvirus del grabado del tabaco, expresi&#xF3;n de los transgenes se extendi&#xF3; a m&#xE1;s de 100 h. Los an&#xE1;lisis de mutantes HCPro mostr&#xF3; que una prote&#xED;na funcional HCPro se requiere para esta extensi&#xF3;n de la expresi&#xF3;n transitoria. Varios supresi&#xF3;n y an&#xE1;lisis de traslaci&#xF3;n de fusi&#xF3;n confirm&#xF3; que la regi&#xF3;n C-terminal de la prote&#xED;na era importante para la actividad supresora y la prote&#xED;na entera fue requerido para supresi&#xF3;n &#xF3;ptima de silenciamiento hu&#xE9;sped. La naturaleza transitoria de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica durante el bombardeo de part&#xED;culas parece resultar de la inducci&#xF3;n de PTGS, que puede ser mitigado por la presencia de un supresor de silenciamiento. El uso de silenciamiento de ARN prote&#xED;nas supresoras puede hacer de part&#xED;culas mediada por bombardeo-ensayos de expresi&#xF3;n transitoria m&#xE1;s &#xFA;til para evaluar los factores que la expresi&#xF3;n de genes efecto.

La cuantificaci&#xF3;n y la extensi&#xF3;n de buenas pr&#xE1;cticas agrarias expresi&#xF3;n transitoria por la Co-creaci&#xF3;n de un supresor de silenciamiento

&#x516D;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x690D;&#x7269;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6291;&#x5236;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x4F7F;&#x7528;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8FDE;&#x7EED;&#x76D1;&#x63A7;&#x81EA;&#x52A8;&#x5316;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x6536;&#x96C6;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;3&#39;-GFP &#x5E73;&#x79FB;&#x878D;&#x5408;&#x6216;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E0E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BF9;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x8D28;&#x7C92; co-introductions&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x5668;&#x88AB;&#x5F15;&#x5165;&#x5229;&#x9A6C;&#x8C46;&#x5B50;&#x53F6;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x7531;&#x6B64;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x77AC;&#x65F6;&#x8868;&#x8FBE;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x4E3A;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x6291;&#x764C;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x662F;&#x5426;&#x6291;&#x5236;&#x5668;&#x662F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x878D;&#x5408;&#x5F15;&#x5165;&#x6216; co-introduced &#x4E0A;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x8D28;&#x7C92;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A; co-introductions&#xFF0C;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5668; HCPro (&#x4ECE;&#x70DF;&#x8349;&#x8680;&#x7EB9;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF09;&#xFF0C;p19 &#xFF08;&#x4ECE;&#x756A;&#x8304;&#x4E1B;&#x77EE;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF09;&#x3001; gammab &#xFF08;&#x4ECE;&#x5927;&#x9EA6;&#x6761;&#x7EB9;&#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF09; &#x548C; &#xFF08;&#x4ECE;&#x751C;&#x83DC;&#x9EC4;&#x5316;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF09; p21 &#x5BFC;&#x81F4;&#x521D;&#x59CB;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x968F;&#x540E;&#x8FC5;&#x901F;&#x4E0B;&#x964D;&#x589E;&#x52A0;&#x4E24;&#x500D;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;HCPro&#x3001; p19&#x3001; &#x548C; gammab &#x5230; 3&#39; &#x7AEF;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x878D;&#x5408;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7A0D;&#x4F4E;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8F83;&#x957F;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x4E0E; co-introductions &#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x6240;&#x6709; GFP::Suppressor &#x5E73;&#x79FB;&#x878D;&#x5408;&#x90FD;&#x4E86;&#x964D;&#x4F4E;&#x7684; GFP &#x8367;&#x5149;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E; GFP &#x8367;&#x5149;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x4F19;&#x4F34;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x3002;&#x65E0;&#x8BBA;&#x914D;&#x7F6E;&#xFF0C;&#x6C89;&#x9ED8;&#x6291;&#x5236; AL2 (&#x4ECE;&#x756A;&#x8304;&#x91D1;&#x8272;&#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF09; &#x548C; 126 kDa &#x86CB;&#x767D; (&#x4ECE;&#x70DF;&#x8349;&#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF09; &#x4ECB;&#x7ECD;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5F88;&#x4F4E;&#x7684; GFP &#x8367;&#x5149;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x8FDB;&#x884C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x6C89;&#x9ED8;&#x5BF9;&#x4F7F;&#x7528;&#x5E73;&#x79FB;&#x878D;&#x5408;&#x548C; co-introductions &#x7684;&#x77AC;&#x6001;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x62A5;&#x544A;&#x3002;

&#x6C89;&#x9ED8;&#x4F7F;&#x7528;&#x77AC;&#x6001;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x56FE;&#x50CF;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x516D;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;

The effects of six different plant viral suppressors of gene silencing were compared using an automated image collection and analysis system developed for continual monitoring of GFP expression. Suppressors were introduced into lima bean cotyledonary tissues either as 3'-GFP translational fusions or as co-introductions with the GFP gene on a separate plasmid. The resultant transient expression profiles for each suppressor depended on whether the suppressor was introduced as a fusion or co-introduced on separate plasmids. As co-introductions, the silencing suppressors HCPro (from Tobacco etch virus), p19 (from Tomato bushy stunt virus), gammab (from Barley stripe mosaic virus) and p21 (from Beet yellows virus) led to an almost twofold increase in initial GFP expression levels, followed by a rapid decline. In contrast, fusions of HCPro, p19, and gammab to the 3'-end of GFP resulted in slightly lower but more prolonged GFP expression. Compared with the co-introductions, all GFP::Suppressor translational fusions gave reduced GFP fluorescence levels, suggesting interference of the fusion partner with GFP fluorescence. Regardless of the configuration, introductions of the silencing suppressors AL2 (from Tomato golden mosaic virus) and 126-kDa protein (from Tobacco mosaic virus) resulted in very low GFP fluorescence. This is the first report that directly compares the effects of a large number of viral suppressors of silencing on transient transgene expression using both translational fusions and co-introductions.

Quantitative evaluation of six different viral suppressors of silencing using image analysis of transient GFP expression.

Les effets de six suppresseurs de plantes diff&#xE9;rentes virales de silen&#xE7;age g&#xE9;nique ont &#xE9;t&#xE9; compar&#xE9;es en utilisant une collection d&#x26;#39;images automatis&#xE9; et un syst&#xE8;me d&#x26;#39;analyse d&#xE9;velopp&#xE9; pour la surveillance continue des expression de la GFP. Suppresseurs ont &#xE9;t&#xE9; introduits dans les tissus haricots de Lima cotyl&#xE9;donaires soit en tant que 3&#x26;#39;-GFP fusions traductionnelles ou comme co-introductions avec le g&#xE8;ne de la GFP sur un plasmide s&#xE9;par&#xE9;. Les profils d&#x26;#39;expression transitoire qui en r&#xE9;sultent pour chaque suppresseur d&#xE9;pendait si le suppresseur a &#xE9;t&#xE9; pr&#xE9;sent&#xE9; comme une fusion ou de co-introduite sur des plasmides s&#xE9;par&#xE9;s. En tant que co-introductions, le r&#xE9;duire au silence suppresseurs HCPro (&#xE0; partir du virus etch du tabac), p19 (&#xE0; partir de virus rabougrissement de la tomate), gammab (&#xE0; partir de virus de la mosa&#xEF;que stri&#xE9;e de l&#x26;#39;orge) et p21 (&#xE0; partir de betterave virus de la jaunisse) conduit &#xE0; un quasi-doublement en GFP initiale les niveaux d&#x26;#39;expression, suivie par un d&#xE9;clin rapide. En revanche, des fusions de HCPro, p19, et gammab &#xE0; l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; 3 &#x26;#39;de la GFP conduit &#xE0; une expression GFP l&#xE9;g&#xE8;rement inf&#xE9;rieur mais plus prolong&#xE9;e. Compar&#xE9; avec les co-introductions, tous les GFP :: Suppressor fusions traductionnelles a r&#xE9;duit les niveaux de fluorescence de la GFP, ce qui sugg&#xE8;re l&#x26;#39;interf&#xE9;rence du partenaire de fusion avec fluorescence de la GFP. Ind&#xE9;pendamment de la configuration, les introductions des suppresseurs de silencing AL2 (&#xE0; partir de virus de la mosa&#xEF;que de tomates or) et 126-kDa (&#xE0; partir de virus de la mosa&#xEF;que du tabac) ont abouti &#xE0; fluorescence de la GFP tr&#xE8;s faible. Ce rapport est le premier qui compare directement les effets d&#x26;#39;un grand nombre de suppresseurs viraux de faire taire l&#x26;#39;expression transitoire de transg&#xE8;nes en utilisant les deux fusions traductionnelles et co-introductions.

Evaluation quantitative de six diff&#xE9;rentes Suppresseurs virales de Silencing par analyse d&#x26;#39;image d&#x26;#39;expression transitoire GFP

Die Auswirkungen von sechs verschiedenen Pflanzen virale D&auml;mpfer der Gen-silencing wurden verglichen mit einem automatisierten Bild Sammlung und Analyse-System, die f&uuml;r die kontinuierliche &Uuml;berwachung der GFP-Expression entwickelt. Entst&ouml;rer in Lima Bean cotyledonary Gewebe 3&#39;-GFP translationale Fusionen oder als Co-introductions mit der GFP-gen auf einem separaten Plasmid eingef&uuml;hrt. Die resultierende vor&uuml;bergehende Ausdruck-Profile f&uuml;r jedes Suppressor hing davon ab, ob die Suppressor eingef&uuml;hrt als eine Fusion oder co-introduced auf separaten Plasmide wurden. Als Co-introductions, die silencing Entst&ouml;rer HCPro (aus Tabak etch Virus) auf p19 (aus Tomaten buschigen Stunt Virus), Gammab (aus Gerste Streifen-Mosaik-Virus) und p21 (aus Zuckerr&uuml;ben Gelbt&ouml;ne Virus) f&uuml;hrte zu einem fast doppelten Anstieg GFP Ausdruck Ausgangsniveaus, gefolgt von einem raschen R&uuml;ckgang. Im Gegensatz dazu f&uuml;hrte zu Verschmelzungen von HCPro, p19 und Gammab am 3&#39;-Ende der GFP etwas niedriger, aber l&auml;ngeren GFP-Expression. Verglichen mit den Co-introductions, gab alle GFP::Suppressor translationale Fusionen reduzierte GFP-Fluoreszenz-Ebenen, vorschlagen Einmischung des Partners Verschmelzung mit GFP-Fluoreszenz. Unabh&auml;ngig von der Konfiguration f&uuml;hrte Einf&uuml;hrungen der silencing Entst&ouml;rer AL2 (aus Tomaten golden Mosaic Virus) und 126-kDa-Protein (aus Tabak-Mosaik-Virus) sehr geringe GFP-Fluoreszenz. Dies ist der erste Bericht, der die Auswirkungen einer gro&szlig;en Anzahl von viralen D&auml;mpfer der zum Schweigen auf Transienten Transgenexpression mit translationale Fusionen und Co-introductions direkt vergleicht.

Quantitative Bewertung von sechs verschiedenen viralen D&auml;mpfer der zum Schweigen mit Bildauswertung von Transienten GFP-Expression.

Gli effetti di sei soppressori virali differenti della pianta di silenziamento genico sono stati confrontati con un sistema di raccolta e analisi di immagine automatizzato sviluppato per il monitoraggio continuo dell&#39;espressione di GFP. Soppressori sono stati introdotti nei tessuti Cotiledonaria fagiolo di lima o come 3&#39;-fusioni traslazionale GFP o come co-introductions con il gene GFP su un plasmide separato. I profili di espressione transitoria risultante per ogni soppressore dipendevano se il soppressore &egrave; stato introdotto come una fusione o co-introduced su plasmidi separati. Come co-introductions, i silenziamento soppressori HCPro (da Tobacco etch virus), p19 (da virus bushy stunt di pomodoro), gammab (da Barley stripe mosaic virus) e p21 (da barbabietola gialli virus) port&ograve; ad un incremento quasi duplice nei livelli di espressione di GFP iniziali, seguita da un rapido declino. In contrasto, fusioni di HCPro, p19 e gammab per il 3&#39;-fine della GFP ha portato nell&#39;espressione di GFP leggermente inferiore ma pi&ugrave; prolungata. Confrontato con il co-introductions, tutti GFP::Suppressor traslazionale fusioni ha dato a ridotti livelli di fluorescenza GFP, suggerendo l&#39;interferenza del partner fusion con fluorescenza GFP. Indipendentemente dalla configurazione, introduzioni del silenziamento soppressori AL2 (da Tomato golden mosaic virus) e 126-kDa proteina (da virus del mosaico del tabacco) ha portato molto bassa fluorescenza della GFP. Questa &egrave; la prima relazione che confronta direttamente gli effetti di un gran numero di soppressori virale del silenzio sull&#39;espressione del transgene transitoria utilizzando sia traslazionale fusioni e co-introductions.

Valutazione quantitativa di sei differenti virale soppressori di silenziamento mediante analisi di immagine di espressione transitoria di GFP.

&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;6&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x690D;&#x7269;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;GFP&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x76E3;&#x8996;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x81EA;&#x52D5;&#x753B;&#x50CF;&#x53CE;&#x96C6;&#x3068;&#x5206;&#x6790;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x306F;&#x3001;3&#x26;#39;-GFP&#x7FFB;&#x8A33;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5225;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x4E0A;&#x306B;GFP&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x306E;&#x5171;&#x5C0E;&#x5165;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x30EA;&#x30DE;&#x30DE;&#x30E1;&#x5B50;&#x8449;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6291;&#x5236;&#x304C;&#x878D;&#x5408;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x304B;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x4E0A;&#x306B;&#x5171;&#x540C;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x5171;&#x540C;&#x5C0E;&#x5165;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x200B;&#x200B;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;HCPro&#xFF08;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x30A8;&#x30C3;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#xFF09;&#x3001;P19&#xFF08;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x3075;&#x3055;&#x3075;&#x3055;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C8;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#xFF09;&#x3001;gammab&#xFF08;&#x30AA;&#x30AA;&#x30E0;&#x30AE;&#x6591;&#x8449;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#xFF09;&#x3068;p21&#x306F;&#xFF08;&#x30D3;&#x30FC;&#x30C8;&#x840E;&#x9EC4;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#xFF09;&#x6700;&#x521D;&#x306E;GFP&#x306E;&#x307B;&#x307C;&#x4E8C;&#x91CD;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x6025;&#x6FC0;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304C;&#x7D9A;&#x3044;&#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3001;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;HCPro&#x3001;P19&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;GFP&#x306E;3 &#x26;#39;&#x672B;&#x7AEF;&#x306B;gammab&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306F;&#x82E5;&#x5E72;&#x4F4E;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x9577;&#x6642;&#x9593;&#x306E;GFP&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5171;&#x540C;&#x5C0E;&#x5165;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;GFP ::&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x7FFB;&#x8A33;&#x878D;&#x5408;&#x306F;&#x3001;GFP&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x878D;&#x5408;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x3068;&#x306E;&#x5E72;&#x6E09;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;GFP&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x305F;&#x3002;&#x69CB;&#x6210;&#x306B;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;AL2&#xFF08;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B4;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30F3;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF09;&#x304A;&#x3088;&#x3073;126-kDa&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF09;&#x306E;&#x7D39;&#x4ECB;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x4F4E;&#x3044;GFP&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x7FFB;&#x8A33;&#x878D;&#x5408;&#x3068;&#x5171;&#x540C;&#x5C0E;&#x5165;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

&#x4E00;&#x6642;&#x7684;GFP&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x753B;&#x50CF;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x306E;6&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x8A55;&#x4FA1;

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30;&#xC758; 6 &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC9C4;&#xC555; &#xD6A8;&#xACFC; GFP &#xC2DD;&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB41C; &#xC790;&#xB3D9;&#xB41C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xC218;&#xC9D1; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBE44;&#xAD50; &#xD588;&#xB2E4;. 3&#39;-GFP &#xBCC0;&#xD658; fusions &#xB610;&#xB294; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC5D0; GFP &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xAC00;&#xC9C4; co-introductions&#xB85C; &#xC9C4;&#xC555; &#xB9AC;&#xB9C8; &#xCF69; cotyledonary &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC785; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAC01; &#xC5B5;&#xC555;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xACFC;&#xB3C4; &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C; &#xC5B5;&#xC555; &#xC735;&#xD569;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3C4;&#xC785; &#xB610;&#xB294; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC5D0; co-introduced &#xC5EC;&#xBD80;&#xC5D0; &#xB2EC;&#xB824; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. Co-introductions, HCPro silencing &#xC9C4;&#xC555;&#xC73C;&#xB85C; (&#xB2F4;&#xBC30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC5E3;&#xC9C0;), p19 (&#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; &#xB365; &#xC218; &#xB8E9; &#xD55C; &#xC2A4;&#xD134; &#xD2B8; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;)&#xC5D0;&#xC11C; (&#xBCF4; &#xB9AC; &#xC904;&#xBB34;&#xB2AC; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;)&#xC5D0;&#xC11C; gammab&#xC640; p21 (&#xBB34; &#xC6B0; &#xB178;&#xB791; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE09;&#xACA9; &#xD55C; &#xD558;&#xB77D; &#xB4A4; &#xCD08;&#xAE30; GFP &#xC2DD; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xAC70;&#xC758; 2 &#xC911; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, HCPro, p19, GFP&#xC758; 3&#39;-&#xB05D;&#xC5D0; gammab&#xC758; fusions &#xC57D;&#xAC04; &#xB0AE;&#xC740; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB354; &#xC7A5;&#xAE30;&#xAC04; GFP &#xC2DD; &#xACB0;&#xACFC;. Co-introductions&#xC640; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558;&#xBA74;, &#xBAA8;&#xB4E0; GFP::Suppressor &#xBCC0;&#xD658; fusions GFP &#xD615;&#xAD11;&#xACFC; &#xC735;&#xD569; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xC758; &#xAC04;&#xC12D; &#xC81C;&#xC548; GFP &#xD615;&#xAD11; &#xC218;&#xC900; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAD6C;&#xC131;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; (&#xB2F4;&#xBC30; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;)&#xC5D0;&#xC11C; silencing &#xC9C4;&#xC555; AL2 (&#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; &#xD669;&#xAE08; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;)&#xC5D0;&#xC11C; 126 kDa &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC18C;&#xAC1C;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB0AE;&#xC740; GFP &#xD615;&#xAD11; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC9C1;&#xC811; &#xBCC0;&#xD658; fusions&#xC640; co-introductions&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; transgene &#xC2DD;&#xC5D0; &#xC785;&#xC744;&#xC758; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC9C4;&#xC555;&#xC758; &#xB2E4; &#xC218;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC5EC; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; GFP &#xC2DD;&#xC758; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCE68;&#xBB35;&#xC758; 6 &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC9C4;&#xC555;&#xC758; &#xC815;&#xB7C9;&#xC801; &#xC778; &#xD3C9;&#xAC00;.

Los efectos supresores de seis plantas diferentes virales de silenciamiento de los genes se compararon mediante una colecci&#xF3;n de im&#xE1;genes autom&#xE1;tico y sistema de an&#xE1;lisis desarrollado para la vigilancia continua de la expresi&#xF3;n de GFP. Supresores se introdujeron en lima tejidos de frijol cotiledonares ya sea como 3&#x26;#39;-GFP fusiones traduccionales o como co-introducciones con el gen GFP en un pl&#xE1;smido separado. Los perfiles resultantes de expresi&#xF3;n transitoria para cada supresor depend&#xED;a de si el supresor se introdujo como una fusi&#xF3;n o co-introducido en pl&#xE1;smidos separados. Como co-introducciones, el silenciamiento de los supresores de HCPro (a partir de virus del grabado del tabaco), p19 (del virus del enanismo arbustivo del tomate), gammab (del virus del mosaico de cebada de banda) y p21 (a partir de remolacha virus amarillos) condujo a un aumento de casi el doble en las buenas pr&#xE1;cticas agrarias inicial los niveles de expresi&#xF3;n, seguido por una r&#xE1;pida disminuci&#xF3;n. En contraste, fusiones de HCPro, p19, y gammab al extremo 3 &#x26;#39;de GFP como resultado la expresi&#xF3;n de GFP ligeramente menor, pero m&#xE1;s prolongado. En comparaci&#xF3;n con los compa&#xF1;eros de las presentaciones, todas las buenas pr&#xE1;cticas agrarias :: supresor de fusiones traduccionales dio redujo los niveles de fluorescencia de GFP, lo que sugiere la interferencia de la pareja de fusi&#xF3;n con la fluorescencia de GFP. Independientemente de la configuraci&#xF3;n, la introducci&#xF3;n de los supresores de silenciamiento AL2 (del virus del mosaico dorado del tomate) y 126-kDa (a partir de virus del mosaico del tabaco) como resultado de la fluorescencia de GFP muy bajo. Este es el primer informe que compara directamente los efectos de un gran n&#xFA;mero de supresores virales de silenciar en la expresi&#xF3;n del transg&#xE9;n transitoria utilizando ambas fusiones traduccionales y co introducciones.

Evaluaci&#xF3;n cuantitativa de los seis diferentes supresores virales de silenciamiento mediante an&#xE1;lisis de im&#xE1;genes de la expresi&#xF3;n transitoria de GFP

Joseph M. Chiera

Department of Horticulture and Crop Science

The Ohio State University

Robotics and Dynamic Image Analysis for Studies of Gene Expression in Plant Tissues

Joseph M. Chiera

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Horticulture and Crop Science

The Ohio State University

Robotics and Dynamic Image Analysis for Studies of Gene Expression in Plant Tissues

Department of Horticulture and Crop Science