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Identification and Characterization of Protein Glycosylation using Specific Endo- and Exoglycosidases

Glycosylation, the addition of covalently linked sugars, is a major post-translational modification of proteins that can significantly affect processes ...

New England BioLabs

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Glycoanalysis &#x7684;&#x5386;&#x53F2;&#x6982;&#x8FF0;&#x3002;

More than half of all human proteins are glycosylated. Glycosylation defines the adhesive properties of glycoconjugates and it is largely through glycan-protein interactions that cell-cell and cell-pathogen contacts occur. Not surprisingly, considering the central role they play in molecular encounters, glycoprotein and carbohydrate-based drugs and therapeutics represent a greater than $20 billion market. Glycomics, the study of glycan expression in biological systems, relies on effective analytical techniques for correlation of glycan structure with function. This overview summarizes techniques developed historically for glycan characterization as well as recent trends. Derivatization methods key to both traditional and modern approaches for glycoanalysis are described. Monosaccharide compositional analysis is fundamental to any effort to understand glycan structure-function relationships. Chromatographic and electrophoretic separations are key parts of any glycoanalytical workflow. Mass spectrometry and nuclear magnetic resonance are complementary instrumental techniques for glycan analysis. Finally, microarrays are emerging as powerful new tools for dynamic analysis of glycan expression.

Historical overview of glycoanalysis.

Plus de la moiti&eacute; de toutes les prot&eacute;ines humaines sont glycosyl&eacute;s. Glycosylation d&eacute;finit les propri&eacute;t&eacute;s adh&eacute;sives des glycoconjugu&eacute;s et c&#39;est en grande partie gr&acirc;ce &agrave; des interactions prot&eacute;ine-glycane cette cellule-cellule et contacts cellule-pathog&egrave;ne se produisent. Il n&#39;est pas surprenant, compte tenu du r&ocirc;le central qu&#39;elles jouent dans les rencontres mol&eacute;culaires, glycoprot&eacute;ine et de m&eacute;dicaments &agrave; base de glucides et de th&eacute;rapeutique repr&eacute;sentent un plus grand que le march&eacute; de 20 milliards $. Glycomique, l&#39;&eacute;tude de glycane expression dans les syst&egrave;mes biologiques, s&#39;appuie sur des techniques d&#39;analyse efficaces pour la corr&eacute;lation de structure glycane avec fonction. Cet aper&ccedil;u r&eacute;sume les techniques d&eacute;velopp&eacute;es historiquement pour glycan caract&eacute;risation ainsi que les tendances r&eacute;centes. D&eacute;rivatisation m&eacute;thodes approches cl&eacute;s &agrave; la fois traditionnelle et moderne pour Glycoanalyse sont d&eacute;crites. Analyse de composition de monosaccharide est essentielle &agrave; tout effort visant &agrave; comprendre les relations structure-fonction glycane. S&eacute;parations chromatographiques et &eacute;lectrophor&eacute;tiques sont des &eacute;l&eacute;ments cl&eacute;s de tout flux de travail glycoanalytical. R&eacute;sonance magn&eacute;tique nucl&eacute;aire et spectrom&eacute;trie de masse sont compl&eacute;mentaires techniques instrumentales d&#39;analyse glycane. Enfin, microarrays apparaissent comme les nouveaux outils puissants pour l&#39;analyse dynamique d&#39;expression glycane.

Aper&ccedil;u historique du Glycoanalyse.

Mehr als die H&auml;lfte aller menschlichen Proteine sind glykosyliert. Glykosylierung definiert die Klebeeigenschaften des Glykokonjugate und es ist weitgehend durch Glykan-Protein-Interaktionen, Zell-Zell und Zelle-Erreger Kontakte auftreten. Nicht &uuml;berraschend, dass unter Ber&uuml;cksichtigung der zentralen Rolle, die sie im molekularen Begegnungen spielen, Glykoprotein und Kohlenhydrat-basierte Medikamente und Therapien darstellen ein gr&ouml;&szlig;er als $20 Milliarden Markt. Glykomik, das Studium der Glykan-Ausdruck in biologischen Systemen, st&uuml;tzt sich auf effektive Analysemethoden f&uuml;r Korrelation Glykan-Struktur mit Funktion. Diese &Uuml;bersicht fasst f&uuml;r Glykan Charakterisierung sowie aktuelle Trends historisch entwickelte Techniken. Derivatisierung Methoden f&uuml;r sowohl traditionelle als auch moderne Ans&auml;tze zur Glycoanalysis werden beschrieben. Monosaccharid kompositorischen Analyse ist grundlegend f&uuml;r jede Anstrengung, Glykan-Struktur-Funktions-Zusammenh&auml;nge zu verstehen. Chromatografischer und elektrophoretische Trennungen sind wesentliche Teile der jedem Glycoanalytical-Workflow. Massenspektrometrie und Kernspinresonanz sind erg&auml;nzende Instrumentaltechniken Glykan-Analyse. Schlie&szlig;lich entstehen Microarrays als leistungsf&auml;hige neue Tools f&uuml;r die dynamische Analyse von Glykan-Ausdruck.

Geschichtlicher &Uuml;berblick der Glycoanalysis.

Pi&ugrave; della met&agrave; di tutte le proteine umane sono glicosilate. Glicosilazione definisce le propriet&agrave; adesive di glycoconjugates ed &egrave; in gran parte attraverso le interazioni della proteina glycan quella cellula-cellula e contatti cellula-patogeno si verificano. Non sorprende, considerando il ruolo centrale che giocano in incontri molecolari, glicoproteina e farmaci a base di carboidrati e terapie rappresentano una maggiore di $20 miliardi del mercato. Glycomics, lo studio dell&#39;espressione glycan nei sistemi biologici, si basa su efficaci tecniche analitiche per la correlazione di glycan struttura con funzione. Questa panoramica riassume le tecniche sviluppate storicamente per la caratterizzazione glycan cos&igrave; come le tendenze recenti. Vengono descritti gli approcci di chiavi tradizionali e moderni metodi derivatizzazione per glycoanalysis. L&#39;analisi composizionale del monosaccaride &egrave; fondamentale per qualsiasi sforzo di comprendere le relazioni struttura-funzione glycan. Separazioni cromatografiche ed elettroforetiche sono parti essenziali di qualsiasi flusso di lavoro glycoanalytical. Spettrometria di massa e risonanza magnetica nucleare sono complementari tecniche strumentali per glycan analysis. Infine, microarrays stanno emergendo come nuovi potenti strumenti per l&#39;analisi dinamica di glycan espressione.

Cenni storici del glycoanalysis.

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Glycoanalysis &#x306E;&#x6B74;&#x53F2;&#x7684;&#x6982;&#x89B3;&#x3002;

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Glycoanalysis&#xC758; &#xC5ED;&#xC0AC;&#xC801; &#xAC1C;&#xC694;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

M&aacute;s de la mitad de todas las prote&iacute;nas humanas est&aacute;n glicosiladas. Glicosilaci&oacute;n define las propiedades adhesivas de glicoconjugados y es en gran parte a trav&eacute;s de las interacciones prote&iacute;na-glicanos esa c&eacute;lula y c&eacute;lula-pat&oacute;geno contactos se producen. No es de extra&ntilde;ar teniendo en cuenta el papel central que desempe&ntilde;an en encuentros moleculares, glicoprote&iacute;na y drogas basadas en hidratos de carbono y terap&eacute;utica representan un mayor que el mercado de $20 billones. INNAVES, el estudio de expresi&oacute;n de glicanos en sistemas biol&oacute;gicos, se basa en eficaces t&eacute;cnicas anal&iacute;ticas para la correlaci&oacute;n de glicanos estructura con la funci&oacute;n. Este Resumen resume t&eacute;cnicas desarrolladas hist&oacute;ricamente para caracterizaci&oacute;n de glicanos as&iacute; como las &uacute;ltimas tendencias. Se describen enfoques claves tanto tradicionales como modernas de derivatizaci&oacute;n m&eacute;todos para glycoanalysis. An&aacute;lisis compositivo monosac&aacute;rido es fundamental para cualquier intento de entender las relaciones estructura-funci&oacute;n de glicanos. Separaciones cromatogr&aacute;ficas y electrofor&eacute;ticas son parte clave de cualquier flujo de trabajo de glycoanalytical. Espectrometr&iacute;a de masas y resonancia magn&eacute;tica nuclear son complementarias t&eacute;cnicas instrumentales para el an&aacute;lisis de glicanos. Finalmente, microarrays est&aacute;n surgiendo como potentes nuevas herramientas para el an&aacute;lisis din&aacute;mico de expresi&oacute;n glicanos.

Resumen hist&oacute;rico de glycoanalysis.

Glicosaminoglicani (gag) di condroitina/dermatan solfato (CS/DS) sono presenti in livelli elevati nel tessuto connettivo dove giocano ruoli come molecole strutturali e delle interazioni della proteina-associazione. Recenti sviluppi nelle tecniche per l&#39;analisi di CS/DS mediante elettroforesi capillare (CE) hanno consentito progressi nella comprensione dei cambiamenti nella struttura CS/DS che accompagnano le malattie del tessuto connettivo, tra cui l&#39;artrosi. Chiave a questi sviluppi &egrave; la capacit&agrave; di estrarre CS/DS gag da piccole quantit&agrave; di tessuto connettivo. Questo capitolo descrive un metodo per l&#39;estrazione di GAG del tessuto connettivo, derivatizzazione e workup per successiva capillare elettroforetica e/o analisi di spettrometria di massa.

Estrazione di glicosaminoglicani dermatan/Condroitin solfato da tessuto connettivo per l&#39;analisi di spettrometria di massa.

&#x7CD6;&#x80FA;&#x805A;&#x7CD6;&#x786B;&#x9178;&#x8F6F;&#x9AA8;&#x7D20;/&#x76AE;&#x80A4; (CS/DS) (&#x7B11;&#x8BDD;) &#x90FD;&#x5728;&#x90A3;&#x91CC;&#x53D1;&#x6325;&#x89D2;&#x8272;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7ED3;&#x6784;&#x5206;&#x5B50;&#x5728;&#x7ED3;&#x7F14;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x4E8B;&#x6001;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF1A; &#x5728;&#x6280;&#x672F;&#x5206;&#x6790;&#x4E2D;&#x7684; CS/DS &#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x7535;&#x6CF3; (CE) &#x542F;&#x7528;&#x4E86;&#x7406;&#x89E3;&#x7684; CS/DS &#x7ED3;&#x6784;&#x53D8;&#x5316;&#x4F34;&#x968F;&#x7740;&#x7ED3;&#x7F14;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x75BE;&#x75C5;&#x5305;&#x62EC;&#x9AA8;&#x5173;&#x8282;&#x708E;&#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E8B;&#x6001;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x662F;&#x7ED3;&#x7F14;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x4ECE;&#x5C11;&#x91CF;&#x4E2D;&#x63D0;&#x53D6; CS/DS &#x6761;&#x4F8B;&#x8349;&#x6848;&#x4F1A;&#x538B;&#x5236;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7AE0;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7ED3;&#x7F14;&#x7EC4;&#x7EC7; GAG &#x8403;&#x53D6;&#x3001; &#x884D;&#x751F;&#x5316;&#xFF0C;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x7535;&#x6CF3;&#x548C; (&#x6216;) &#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x75C5;&#x75C7;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x63D0;&#x53D6;&#x7684;&#x7CD6;&#x80FA;&#x805A;&#x7CD6;&#x786B;&#x9178;&#x8F6F;&#x9AA8;&#x7D20;/&#x76AE;&#x80A4;&#x7ED3;&#x7F14;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x8FDB;&#x884C;&#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Chondroitin/dermatan sulfate (CS/DS) glycosaminoglycans (GAGs) are present in high levels in connective tissue where they play roles as structural molecules and in protein-binding interactions. Recent developments in the techniques for analysis of CS/DS using capillary electrophoresis (CE) have enabled progress in the understanding of changes in CS/DS structure that accompany connective tissue diseases including osteoarthritis. Key to these developments is the ability to extract CS/DS GAGs from small quantities of connective tissue. This chapter describes a method for connective tissue GAG extraction, derivatization, and workup for subsequent capillary electrophoretic and/or mass spectrometric analysis.

Extraction of chondroitin/dermatan sulfate glycosaminoglycans from connective tissue for mass spectrometric analysis.

Glycosaminoglycanes (GAG) de la chondro&iuml;tine/dermatane sulfate (CS/DS) sont pr&eacute;sents en grande quantit&eacute; dans le tissu conjonctif o&ugrave; ils jouent des r&ocirc;les en tant que mol&eacute;cules structurales et dans les interactions de prot&eacute;ine-contraignante. D&eacute;veloppements r&eacute;cents dans les techniques d&#39;analyse de CS/DS &agrave; l&#39;aide de l&#39;&eacute;lectrophor&egrave;se capillaire (EC) ont permis des progr&egrave;s dans la compr&eacute;hension des changements dans la structure de CS/DS qui accompagnent les maladies du tissu conjonctif, notamment l&#39;arthrose. Cl&eacute; de ces &eacute;volutions est la possibilit&eacute; d&#39;extraire les GAGs CS/DS de petites quantit&eacute;s de tissu conjonctif. Ce chapitre d&eacute;crit une m&eacute;thode pour l&#39;extraction de GAG du tissu conjonctif, d&eacute;rivatisation et bilan pour &eacute;lectrophor&eacute;tique ult&eacute;rieur capillaire et/ou l&#39;analyse par spectrom&eacute;trie de masse.

Extraction de glycosaminoglycanes chondro&iuml;tine/dermatane sulfate de tissu conjonctif pour l&#39;analyse par spectrom&eacute;trie de masse.

Chondroitin/Dermatan Sulfat (CS/DS) Glycosaminoglycans (GAG) sind in hohe Konzentrationen in Bindegewebe, wo sie Rollen als strukturelle Molek&uuml;le spielen, und in Protein-Bindung Wechselwirkungen vorhanden. J&uuml;ngste Entwicklungen in den Techniken f&uuml;r die Analyse von CS/DS mit Kapillarelektrophorese (CE) aktiviert haben Fortschritte im Verst&auml;ndnis der &Auml;nderungen in CS/DS-Struktur, die Kollagenosen einschlie&szlig;lich Arthrose zu begleiten. Schl&uuml;ssel zu diesen Entwicklungen ist die F&auml;higkeit, CS/DS Knebel aus kleinen Mengen des Bindegewebes zu extrahieren. Dieses Kapitel beschreibt eine Methode f&uuml;r Bindegewebe-GAG-Extraktion und Derivatisierung Aufarbeitung f&uuml;r nachfolgende Kapillare elektrophoretische und/oder massenspektrometrischen Analyse.

Extraktion von Chondroitin/Dermatan Sulfat Glycosaminoglycans aus Bindegewebe zur massenspektrometrischen Analyse.

&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C1;&#x30F3;/&#x30C7;&#x30EB;&#x30DE;&#x30BF;&#x30F3;&#x786B;&#x9178; (CS/DS) &#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30CE;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3; (Gag) &#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;CS/DS &#x30AD;&#x30E3;&#x30D4;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5; (CE) &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x306F;&#x5909;&#x5F62;&#x6027;&#x95A2;&#x7BC0;&#x75C7;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x7D50;&#x5408;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x4F34;&#x3046; CS/DS &#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x767A;&#x5C55;&#x306E;&#x9375;&#x306F;&#x3001;CS/DS &#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x304B;&#x3089;&#x5C11;&#x91CF;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x62BD;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7AE0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D50;&#x5408;&#x7D44;&#x7E54;&#x30AE;&#x30E3;&#x30B0;&#x62BD;&#x51FA;&#x3001;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x5316;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D4;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#x3084;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7CBE;&#x5BC6;&#x691C;&#x67FB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x7D44;&#x7E54;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x62BD;&#x51FA;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C1;&#x30F3;/&#x30C7;&#x30EB;&#x30DE;&#x30BF;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30CE;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x306E;&#x3002;

&#xCF58;/dermatan &#xD669;&#xC0B0; (CS/DS) &#xC788;&#xB2E4; (&#xAC1C; &#xADF8;)&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xACB0;&#xD569; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;. CS/ds &#xBAA8; &#xC138;&#xAD00; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xBC95; (CE)&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xC220; &#xCD5C;&#xADFC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAD00;&#xC808;&#xC5FC; &#xB4F1; &#xACB0;&#xD569; &#xC870;&#xC9C1; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC744; &#xB3D9;&#xBC18; &#xD558;&#xB294; CS/DS &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC774;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C4;&#xD589; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC124;&#xC815;&#xD55C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC1C;&#xC804;&#xC758; &#xC5F4;&#xC1E0; &#xC18C;&#xB7C9; &#xACB0;&#xD569; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; CS/DS&#xC758; &#xAC1C; &#xADF8;&#xB97C; &#xCD94;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xD569; &#xC870;&#xC9C1; &#xAC1C; &#xADF8; &#xCD94;&#xCD9C;, derivatization, &#xBC0F; &#xC815;&#xBC00; &#xAC80; &#xC0AC; &#xB2E4; &#xD6C4;&#xC18D; &#xBAA8; &#xC138;&#xAD00; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; / &#xB300;&#xB7C9; spectrometric &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCF58;/dermatan &#xD669;&#xC0B0; &#xC788;&#xB2E4; &#xB300;&#xB7C9; spectrometric &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xACB0;&#xD569; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xCD9C;.

Glicosaminoglicanos (GAGs) de condroitina/dermatan sulfato (CS/DS) est&aacute;n presentes en niveles elevados en el tejido conectivo donde juegan roles como mol&eacute;culas estructurales y en las interacciones de uni&oacute;n a prote&iacute;nas. Novedades en las t&eacute;cnicas de an&aacute;lisis de CS/DS usando electroforesis capilar (CE) han permitido avances en la comprensi&oacute;n de los cambios en la estructura de CS/DS que acompa&ntilde;an a enfermedades del tejido conectivo incluyendo osteoartritis. Clave para estos desarrollos es la habilidad de extraer CS/DS GAGs de peque&ntilde;as cantidades de tejido conectivo. Este cap&iacute;tulo describe un m&eacute;todo para la extracci&oacute;n de tejido conectivo GAG y derivatizaci&oacute;n workup para posterior capilar electrofor&eacute;tico o an&aacute;lisis de espectrometr&iacute;a de masa.

Extracci&oacute;n de glicosaminoglicanos de condroitina/dermat&aacute;n sulfato de tejido conectivo para el an&aacute;lisis de espectrometr&iacute;a de masa.

&#x786B;&#x9178;&#x8F6F;&#x9AA8;&#x7D20;/&#x76AE;&#x80A4; (CS/DS) &#x662F;&#x7CD6;&#x80FA;&#x805A;&#x7CD6; &#xFF08;GAG&#xFF09; &#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x4E2D;&#x4E30;&#x5EA6;&#x627E;&#x5230;&#x3002;&#x5728;&#x7ED3;&#x7F14;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;CS/DS &#x86CB;&#x767D;&#x91A3;&#x53D1;&#x6325;&#x7EF4;&#x6301;&#x5927;&#x91CF;&#x7684; CS/DS &#x94FE;&#x4E0A;&#x7684;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x7684;&#x786B;&#x9178;&#x7EC4;&#x901A;&#x8FC7;&#x7C98;&#x5F39;&#x6027;&#x7ED3;&#x6784;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;CS/DS &#x94FE;&#x4E5F;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5305;&#x62EC;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4E92;&#x52A8;&#xFF0C;CS/DS &#x94FE;&#x53D1;&#x6325;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3001; &#x7ED3;&#x7F14;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7A33;&#x6001;&#x3001; &#x51DD;&#x8840;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x636E;&#x89C2;&#x5BDF; DS &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x63A7;&#x4EF6;&#x7684;&#x764C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x3002;&#x5728;&#x8F83;&#x65E9;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;MS(2) &#x7528;&#x4E8E;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7684; CS/DS &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x672C;&#x751F;&#x7269;&#x6837;&#x54C1;&#x4E2D;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x4EA7;&#x54C1;&#x79BB;&#x5B50;&#x4E30;&#x5EA6;&#x53CD;&#x6620;&#x76EE;&#x524D;&#x7684; CS/DS &#x91CD;&#x590D;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x548C;&#x6570;&#x91CF;&#x4E0A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x5C1A;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x5176;&#x4E2D; CS/DS &#x91CD;&#x590D;&#x4EA7;&#x54C1;&#x79BB;&#x5B50;&#x4E30;&#x5EA6;&#x975E;&#x5E38;&#x654F;&#x611F;&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x63A2;&#x7D22;&#x7684; CS/DS &#x4F4E;&#x805A;&#x7CD6;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x8868;&#x5F81;&#x7684; MS(3) &#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;MS(3) &#x4EA7;&#x54C1;&#x79BB;&#x5B50;&#x4E30;&#x5EA6;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x4F4E;&#x805A;&#x7CD6;&#x94FE;&#x4E0A;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x4E2D;&#x7684; DS &#x6837;&#x91CD;&#x590D;&#x5E8F;&#x5217;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;

&#x591A;&#x7EA7;&#x4E32;&#x8054;&#x8D28;&#x8C31;&#x7684;&#x786B;&#x9178;&#x8F6F;&#x9AA8;&#x7D20;&#x3001; &#x786B;&#x9178;&#x76AE;&#x80A4;&#x3002;

Chondroitin/dermatan sulfate (CS/DS) is a glycosaminoglycan (GAG) found in abundance in extracellular matrices. In connective tissue, CS/DS proteoglycans play structural roles in maintaining viscoelasticity through the large number of immobilized sulfate groups on CS/DS chains. CS/DS chains also bind protein families including growth factors and growth factor receptors. Through such interactions, CS/DS chains play important roles in neurobiochemical processes, connective tissue homeostasis, coagulation, and cell growth regulation. Expression of DS has been observed to increase in cancerous tissue relative to controls. In earlier studies, MS(2) was used to compare the types of CS/DS isomers present in biological samples. The results demonstrated that product ion abundances reflect the types of CS/DS repeats present and can be used quantitatively. It was not clear, however, to which of the CS/DS repeats the product ions abundances were sensitive. The present work explores the utility of MS(3) for structural characterization of CS/DS oligosaccharides. The data show that MS(3) product ion abundances correlate with the presence of DS-like repeats in specific positions on the oligosaccharide chains.

Multistage Tandem Mass Spectrometry of Chondroitin Sulfate and Dermatan Sulfate.

Chondro&iuml;tine/dermatane sulfate (CS/DS) est un glycosaminoglycanes (GAG) pr&eacute;sentes en abondance dans les matrices extracellulaires. Dans le tissu conjonctif, CS/DS prot&eacute;oglycanes jouent un r&ocirc;le structurel dans le maintien de visco&eacute;lasticit&eacute; par le grand nombre de groupes sulfate immobilis&eacute; sur les cha&icirc;nes de CS/DS. Cha&icirc;nes CS/DS &eacute;galement lient des familles de prot&eacute;ines, y compris les facteurs de croissance et de r&eacute;cepteurs de facteur de croissance. Gr&acirc;ce &agrave; ces interactions, cha&icirc;nes CS/DS jouent un r&ocirc;le important dans le processus neurobiochimiques, l&#39;hom&eacute;ostasie du tissu conjonctif, la coagulation et la r&eacute;gulation de la croissance cellulaire. Expression de DS a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e &agrave; augmenter dans les tissus canc&eacute;reux par rapport aux t&eacute;moins. Dans des &eacute;tudes ant&eacute;rieures, MS(2) a &eacute;t&eacute; utilis&eacute; pour comparer les types d&#39;isom&egrave;res CS/DS pr&eacute;sents dans des &eacute;chantillons biologiques. Les r&eacute;sultats ont d&eacute;montr&eacute; que les abondances d&#39;ion produit refl&egrave;tent le genre de r&eacute;p&eacute;titions CS/DS pr&eacute;sents et qu&#39;il peuvent &ecirc;tre utilis&eacute;s quantitativement. Il n&#39;&eacute;tait pas clair, cependant, pour lequel de la CS/DS r&eacute;p&egrave;te que l&#39;abondance des ions de produit ont &eacute;t&eacute; sensibles. Ce travail explore l&#39;utilit&eacute; de MS(3) pour la caract&eacute;risation structurale des oligosaccharides CS/DS. Les donn&eacute;es montrent que l&#39;abondance MS(3) produit ionique sont en corr&eacute;lation avec la pr&eacute;sence de r&eacute;p&eacute;titions DS ressemblant &agrave; des positions sp&eacute;cifiques sur les cha&icirc;nes oligosaccharidiques.

Spectrom&eacute;trie de masse Tandem multimodes de Sulfate de chondro&iuml;tine et dermatane Sulfate.

Chondroitin/Dermatan Sulfat (CS/DS) ist ein Glycosaminoglycan (GAG) in H&uuml;lle und F&uuml;lle im extrazellularen Matrizen gefunden. CS/DS Proteoglykane spielen in Bindegewebe strukturelle Rollen bei der Aufrechterhaltung der Viskoelastizit&auml;t durch die gro&szlig;e Anzahl der immobilisierte Sulfat Gruppen auf CS/DS-Ketten. CS/DS Ketten binden ebenfalls Proteinfamilien einschlie&szlig;lich Wachstumsfaktoren und Wachstumsfaktor-Rezeptoren. Durch solche Interaktionen spielen CS/DS Ketten wichtige Rollen in Neurobiochemical Prozesse, Bindegewebe-Hom&ouml;ostase, Gerinnung und Zelle Wachstum Verordnung. Ausdruck der DS hat beobachtet worden, um in Krebsgewebe relativ zu Steuerelementen zu erh&ouml;hen. In fr&uuml;heren Studien wurde MS(2) verwendet, um die Typen CS/DS-Isomere in biologischen Proben vorhanden zu vergleichen. Die Ergebnisse gezeigt, dass Produkt Ion H&auml;ufigkeiten die Typen CS/DS Wiederholungen anwesend reflektieren und quantitativ eingesetzt werden. Es war nicht klar, aber welche der CS/DS wiederholt, dass die Produkt Ionen H&auml;ufigkeiten empfindlich waren. Die vorliegende Arbeit untersucht die N&uuml;tzlichkeit des MS(3) f&uuml;r strukturelle Charakterisierung von CS/DS-Oligosaccharide. Die Daten zeigen, dass MS(3) Produkt Ion H&auml;ufigkeiten mit der Anwesenheit von DS-wie Wiederholungen in bestimmten Positionen auf die Oligosaccharid-Ketten korrelieren.

Mehrstufige Tandem-Massenspektrometrie von Chondroitinsulfat und Dermatan Sulfat.

Condroitina/dermatan solfato (CS/DS) &egrave; un glicosaminoglicano (GAG) trovato in abbondanza in matrici extracellulari. Nel tessuto connettivo, CS/DS proteoglicani svolgono un ruolo strutturale nel mantenimento della viscoelasticit&agrave; attraverso il grande numero di gruppi solfato immobilizzati su catene CS/DS. CS/DS Catene legano anche le famiglie di proteine tra cui fattori di crescita e recettori del fattore di crescita. Attraverso tali interazioni, catene CS/DS giocano un ruolo importante nei processi di neurobiochemical, l&#39;omeostasi del tessuto connettivo, coagulazione e regolamentazione di crescita delle cellule. Espressione di DS &egrave; stata osservata per aumentare nei tessuti tumorali rispetto a controlli. In studi precedenti, MS(2) &egrave; stato utilizzato per confrontare i tipi di isomeri CS/DS presenti in campioni biologici. I risultati hanno dimostrato che abbondanza di ioni prodotto rifletta i tipi di ripetizioni CS/DS presente e pu&ograve; essere utilizzato quantitativamente. Non era chiaro, tuttavia, per cui il CS/DS ripete che l&#39;abbondanza di ioni prodotto era sensibile. Il presente lavoro esplora l&#39;utilit&agrave; di MS(3) per la caratterizzazione strutturale di oligosaccaridi CS/DS. I dati mostrano che MS(3) abbondanza di ioni prodotto correlazione con la presenza di ripetizioni simil-DS in posizioni specifiche sulle catene di oligosaccaridi.

Multistadio spettrometria di massa Tandem di condroitina solfato e Dermatan solfato.

&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C1;&#x30F3;/&#x30C7;&#x30EB;&#x30DE;&#x30BF;&#x30F3;&#x786B;&#x9178; (CS/DS) &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x304C;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306B;&#x767A;&#x898B;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30CE;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3; (GAG) &#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x5408;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E; CS/DS &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x7C98;&#x5F3E;&#x6027;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x786B;&#x9178;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; CS/DS &#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x6570;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;CS/DS &#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x3082;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066; CS/DS &#x9396;&#x306E; neurobiochemical &#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;, &#x7D50;&#x5408;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3001;&#x51DD;&#x56FA;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x5F0F;&#x306E; DS &#x306F;&#x764C;&#x6027;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x76F8;&#x5BFE;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;MS(2) &#x306F;&#x5404;&#x7A2E;&#x751F;&#x4F53;&#x8A66;&#x6599;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306E; CS/DS &#x7570;&#x6027;&#x4F53;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x88FD;&#x54C1;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5143;&#x7D20;&#x5B58;&#x5728;&#x5EA6; CS/DS &#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x5B58;&#x5728;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;CS/DS &#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5143;&#x7D20;&#x5B58;&#x5728;&#x5EA6;&#x304C;&#x654F;&#x611F;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3059;&#x306B;&#x660E;&#x78BA;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B; MS(3) &#x306E;&#x30E6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3; CS/DS &#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x7CD6;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x63A2;&#x7A76;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF; MS(3) &#x88FD;&#x54C1;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5143;&#x7D20;&#x5B58;&#x5728;&#x5EA6; DS &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306B;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x7CD6;&#x9396;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x591A;&#x6BB5;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C1;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x3068;&#x30C7;&#x30EB;&#x30DE;&#x30BF;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x306E;&#x3002;

&#xCF58;/dermatan &#xD669;&#xC0B0; (CS/DS)&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xD48D;&#xBD80; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xACAC; glycosaminoglycan (&#xAC1C; &#xADF8;). &#xACB0;&#xD569; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; CS/DS proteoglycans CS/DS &#xCCB4;&#xC778;&#xC5D0; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC774;&#xC9C0; &#xD669;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xB2E4; &#xC218;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; viscoelasticity &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. CS/DS &#xCCB4;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC00;&#xC871; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xC640; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; CS/DS &#xCCB4;&#xC778; neurobiochemical &#xACFC;&#xC815;&#xACFC; &#xACB0;&#xD569; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131;, &#xC751;&#xACE0;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. DS&#xC758; &#xC2DD; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC744; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC554; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC99D;&#xAC00;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; MS(2)&#xB294; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xACAC;&#xBCF8;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; CS/DS &#xC131;&#xCCB4;&#xC758; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xC81C;&#xD488; &#xC774;&#xC628; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB294;&#xB370; CS/DS &#xBC18;&#xBCF5; &#xC874;&#xC7AC; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xBC18;&#xC601; &#xD558; &#xACE0; &#xC591;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xD558;&#xB294; CS/DS &#xC81C;&#xD488; &#xC774;&#xC628; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB294;&#xB370; &#xD588;&#xB2E4; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xBC18;&#xBCF5; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC; &#xC791;&#xD488; &#xD0D0;&#xAD6C; CS/DS oligosaccharides&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; MS(3)&#xC758; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;. &#xB370;&#xC774;&#xD130; MS(3) &#xC81C;&#xD488; &#xC774;&#xC628; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB294;&#xB370; &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB2F9; &#xCCB4;&#xC778;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; DS &#xAC19;&#xC740; &#xBC18;&#xBCF5;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCF58;&#xACFC; Dermatan&#xC758; &#xB2E4;&#xB2E8;&#xACC4; &#xD0E0;&#xB364; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;.

Condroitina/dermatan sulfato (CS/DS) es un glicosaminoglicano (GAG) que se encuentra en abundancia en matrices extracelulares. En tejido conectivo, proteoglicanos CS/DS un papel estructural en el mantenimiento de viscoelasticidad a trav&eacute;s de la gran cantidad de grupos sulfato inmovilizados en cadenas de CS/DS. Cadenas de CS/DS tambi&eacute;n obligar a familias de prote&iacute;nas como factores de crecimiento y receptores de factor de crecimiento. A trav&eacute;s de estas interacciones, cadenas de CS/DS juegan papeles importantes en los procesos de neurobiochemical, homeostasis del tejido conectivo, coagulaci&oacute;n y regulaci&oacute;n del crecimiento celular. Expresi&oacute;n de DS se ha observado que el aumento de tejido canceroso en relaci&oacute;n con los controles. En estudios anteriores, el MS(2) fue utilizado para comparar los tipos de is&oacute;meros de CS/DS presentes en muestras biol&oacute;gicas. Los resultados demostraron que producto ion abundancia refleja los tipos de repeticiones de CS/DS presentes y puede ser utilizada cuantitativamente. No estaba claro, sin embargo, para que de la CS/DS repite que la abundancia de los iones del producto era sensible. El presente trabajo explora la utilidad de MS(3) para la caracterizaci&oacute;n estructural de oligosac&aacute;ridos CS/DS. Los datos muestran que la abundancia de iones MS(3) producto se correlaciona con la presencia de repeticiones de DS-como en posiciones espec&iacute;ficas en las cadenas de oligosac&aacute;ridos.

Alicia M. Bielik

New England BioLabs

Identification and Characterization of Protein Glycosylation using Specific Endo- and Exoglycosidases