RNA 또는 특정 뇌 영역에서 단백질 추출에 대한 쥐 두뇌의 마이크로 해부

요약

여러 지역에 쥐 두뇌의 미세 절개 다른 neurodegenerative 질병의 연구를 위해 매우 중요합니다. 이 동영상은 네 개의 주요 뇌 영역의 미세 절개는 후각 망울, 전두엽의 피질, striatum 신선한 쥐의 뇌 조직에서 해마를 포함 보여줍니다. RNA와 단백질 조직의 저하를 피하기 위해 해당 지역의 빠른 제거를위한 유용한 팁은 주어집니다.

초록

여러 지역에 쥐 두뇌의 미세 절개 다른 neurodegenerative 질병의 연구를 위해 매우 중요합니다. 이 동영상은 네 개의 주요 뇌 영역의 미세 절개는 후각 망울, 전두엽의 피질, striatum 신선한 쥐의 뇌 조직에서 해마를 포함 보여줍니다. RNA와 단백질 조직의 저하를 피하기 위해 해당 지역의 빠른 제거를위한 유용한 팁은 주어집니다.

프로토콜

1 단계

설립 프로토콜에 따라 쥐를 희생. 두개골의 두뇌를 제거하고 얼음에 씻어 차가운 DEPC는 표면 혈액을 제거하는 밀리 Q 물을 취급.

2 단계

차가운 금속 접시에 놓습니다. 좌우 반구로 두뇌 BI 절반을 잘라.

그림 1. 쥐 반구의 중간보기에서 절단 위치

3 단계

오른쪽 첫 번째 컷 후 후각 망울를 수집합니다. 플래시 -80에서 액체 질소와 저장소의 표본을 동결 ° C.

그림 2. 후각 망울의 해부

4 단계

블레이드와 더몬트 제 5 포셉를 사용하여 두 번째 절단 후 전두엽 피질의 권리를 수집합니다. 플래시 -80에서 액체 질소와 저장소의 표본을 동결 ° C.

그림 3. 전두엽 피질의 절개

5 단계

오른쪽이 더몬트 5 번 집게의 도움으로 세 번째 절단 후 striatum (꼬리가있는 핵)를 수집합니다. 플래시 -80에서 액체 질소와 저장소의 표본을 동결 ° C.

그림 4. Striatum (꼬리가있는 핵) 해부

6 단계

해마를 수집, 최대 두뇌의 복부 측면을 넣고 다음 해마을 폭로 midbrain를 제거합니다. 이 더몬트 5 번 집게를 사용하여 피질의 해마을 해부하다. 플래시 -80에서 액체 질소와 저장소의 표본을 동결 ° C.

그림 5. 해마의 해부

토론

다른 뇌 영역은 다른 neurodegenerative 질병에 함께 연결합니다. 해마는 알츠하이머와 관련된 반면 예를 들어, 전두엽 피질과 striatum는 파킨슨병의 질환과 관련. 뇌 정밀 미세 절개은 우리가보다 정확하게 질병 지역의 mRNA와 단백질 변화를 검색할 수 있습니다.

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
Microscope	Olympus Corporation
Dissection tools			Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use.