공막 래빗 모델에 축 방향 근시의 예방 리보플라빈 및 자외선-A 방사선을 사용하여 교차 결합

요약

우리는 축 신장 토끼 눈에 리보플라빈과 UVA와 공막 가교의 효과를 보여줍니다. 축 방향 신장은 오른쪽 눈의 눈꺼풀 (안검 봉합을) 봉합하여 (남성과 여성) 십삼일 된 뉴질랜드 토끼 유도 하였다.

초록

근시 개인, 심한 근시 특히 사람들은, 백내장, 녹내장, 망막 박리와 맥락 망막 이상 높은 정상보다 위험이 있습니다. 또한, 병적 근시는 시각 장애인 ^1-3의 일반적인 원인은 비가 역적이다. 본 연구는 토끼 모델에서 축 근시의 개발 리보플라빈 및 자외선 방사선을 사용하여 가교 공막의 효과를 보여준다. 안구 축 길이는 십삼일 (암수) 세 뉴질랜드 흰 토끼에 주사 초음파에 의해 측정 하였다. 눈은 안검 봉합을 다음 공막 가교와 360 ° 결막 절개를을 시행 하였다. 축 방향 신장은 자신의 오른쪽 눈의 눈꺼풀 (안검 봉합을) 봉합에 의해 십삼일 된 뉴질랜드 토끼 유도 하였다. 눈은 사분면으로 분할하고, 사분면마다 0.2 cm²의 면적 4 mm의 반경이 공막 조사 영역 각각 있었다. 가교는 0.1 %를 놓는 방법으로 수행 하였다덱스 트란없는-A 자외선 조사 전, 조사 영역이 20 초 및 200 초의 조사 시간 동안 매 20 초 상 리보플라빈 -5- 인산염. UVA 방사선 (370 나노 미터)은 57 mW의 / cm² (총 UVA 광 용량, 57 J / cm²)에서 공막에 수직으로 적용되었다. Tarsorrhaphies 반복 축 길이를 측정 한 후, 하루 55에 제거 하였다. 이 연구는 리보플라빈 자외선-A 방사선 공막 가교 효과적으로 토끼 모델에서 폐색에 의한 축 방향 신장을 방지 함을 보여줍니다.

서문

근시는 굴절 장애의 가장 보편적이다. 미국과 유럽에서 근시의 유병률은 약 30 %로보고하고, 아시아 국가에서 일반 인구의 ^{1, 2의} 60 %까지 영향을줍니다. 근시 진행은 보통 2 년 간격으로 ³ 위에 약 -0.5 디옵터의 속도로, 근시의 최대 50 %에서 발생합니다. 근시에 의해 부과 된 건강 비용은 안경에 대한 비용, 콘택트 렌즈 및 굴절 수술과 녹내장, 백내장, 망막 박리 및 시각 장애 ^{4 ~ 6의} 증가 된 건강 위험과 관련된 비용을 포함, 상당한 수 있습니다.

근시의 동물 연구에서 시력 감소는 눈과 각막 문신 ^(11)에서 짧은 거리에서 눈꺼풀 봉합 ^7-10, occluder에의 배치에 의해 유도된다. 인공 근시는 이들 연구에서 발생하도록하지만, 폐색 처리가없는 시력 상실 실험 카 같이 매우 어린 동물에서 수행되어야성인 표본에 밖으로 폭발물 공격이 성​​공 증명했다.

심한 근시의 중요한 기능 중 하나는 Ehlers- 같이 인해 공막의 일부 대사 장애로 인해 시각적 박탈 ¹² 후 emmetropization의 방해 피드백 메커니즘에 아마 공막의 진보적 인 숱과 공막의 병리학 적 변화 Danlos 증후군 ^13. 궁극적으로, 두 메커니즘으로 인해 이러한 fibrillogenesis ^(16)의 감소 콜라겐 섬유 직경 ^{14, 15} 및 장애와 근시 공막의 구조적 이상에 스트레칭과 공막, 망막 및 맥락막의 숱로 이어집니다.

몇몇 연구는 손상된 콜라겐 가교 근시 공막 ^17-18 약화 과정에서 중요한 요소가 있음을 보여 주었다. WOLLENSAK 외. ^19-21 리보플라빈 및 자외선 A (UVA) 조사에 감광제를 도포하여 콜라겐 가교를 유도 (370 ㎚)체외 ^(19)의 돼지와 인간의 공막의 강성을 크게, 157 % 증가 및 생체 내에서 토끼 공막 강성의 465% 증가 (탄성 계수) ^(20)를 언급했다. 강성 4 개월 3 일 후, 320.4 %, 277.6 %로 증가, 8 개월 (영률) 후 ²² 5백2퍼센트 : 가교 결합은 생체 내 토끼 공막의 장기적 효과가 있었다.

근시 진행을 체포 ​​치료 시도가 ^23-26 발표되었다 그러나이 방법의 성공은 논쟁의 여지가있다. 진행성 근시 방지의 어떠한 효과적인 수단은 지금까지 발견되지 않았다.

근시의 원인은 아직 논란, 그 처리는 도전을 포즈. 이러한 발견에 기초하여, 그 공막 가교 근시 진행 공막 기반 치료를위한 수단으로서 역할을 할 수 있다고 가정한다. 이 연구의 목적은 공막 콜라겐 crosslinki 검사하는시각적 축 폐색에 의해 유도 축 근시의 개발에 영향을 ng를.

프로토콜

동물 연구에서 동물들의 사용에 ARVO 해상도에 따라 처리 하였다. 연구 프로토콜은 실험 동물 연구를위한 제도적위원회 (.; 021211 승인없이 022-4598-2)에 의해 승인되었다.

수술 # 1 1. 준비

1. 무게와 케타민 염산염 100 ㎎ / ㎖ (100 ㎎ / ㎏)과 자일 라진 하이드로 클로라이드 25 ㎎ / ㎖ (12.5 ㎎ / ㎏)의 근육 내 주사로 13 일 된 뉴질랜드 흰 토끼를 마취. 이러한 투여 량으로 인해 수술의 길이로 사용된다. 고통 반사의 부족에 의해 마취의 적절한 수준을 보장.
2. 멸균 면봉을 사용하여,이 건조 각막을 방지하기 위해 비 작동 눈 안연고 소량을 적용한다. 건조에서 각막을 방지하기 위해 작업 중에 생리 식염수가 운영하는 눈의 각막에 떨어 0.9 %를 적용합니다.
3. oxybuprocain (국소 마취 후 각각의 눈에 세 개의 축 방향 길이 측정을 수행다음 예 염산염 0.4 %), 초음파 A-스캐너를 사용하고 측정을 평균. 중앙 각막에 수직으로 프로브를 적용합니다.

2. 수술 # 1 - 사전 가교 단계

1. 안과 운영 현미경 수술 안과 집게와 가위를 사용하여, 수술 안과 집게와 가위로 360 ° 결막 절개를합니다.
2. 각진 집게 또는 근육 후크 네 개의 안구 직근 근육을 확인하고 2-0 꼰 실크 비 바늘로 봉합으로 그들을 분리를 사용하여.
   주 : 실크 봉합사가 원하는 방향으로 세계를 움직이는 데 도움이됩니다. 안구는 네 개의 직근 근육 (사 사분면) 사이의 사분면으로 나누어 져 있습니다.
   1. 피부 마커 각 사분면에서 두 영역, 적도 공막 하나와 후방 공막 하나와 마크. 이러한 조사 영역이다.
3. 0.1 % 덱스 트란없는 리보플라빈 -5- phosphat을 함유하는 5 ㎖ 주사기로 3 ㎖를 준비이자형. 26 G 눈물 정맥 또는 25 G 테이퍼 hydrodelineator에 주사기를 연결합니다.
4. 하향 경사 주문품 광섬유에 연결된 UV A (370 ㎚) 광원을 포함하는 조사 장치를 준비한다. 에너지 전력 및 교정의 측정에 따라 (아래 참고 참조), 57 mW의 / cm²에 장치를 설정합니다.
   주 : 교정 제조업체에서 상업적으로 실시 하였다. 이 방법은 57 J / cm²의 총 UVA 광 용량을 제공합니다. (0.2 cm ^(2)에 57 mW의 / cm ² 2.2 J 0.2 cm 당 ² 스폿의 누적로드 200 초 동안 11.4 mW의 / 0.2 cm ^(2)를 사용하여 11.4 mW의 / 0.2 cm ^2이다)

3. 수술 # 1 - 가교

1. 선택한 사분면의 반대 방향으로 실크 봉합사를 당겨 안구를 움직여 처리 수 (하부 시간 사분면을 처리 할 때 예를 위로 당기고 코). 2-0 꼰 실크 비 니들 봉합사를 사용하여 안구 운동을 수행하는 전각 직근을 solates.
2. 조사가 시작되기 전에 조사 영역 20 초에 0.1 % 덱스 트란없는 리보플라빈 -5- 인산을 포함하는 감광제 솔루션을 적용합니다.
3. 200 초 조사 기간 동안 하향 경사 주문품 광섬유를 사용하는 조사 영역을 조사한다. 4mm의 반경 0.2 cm² 각 영역의 면적을 측정한다.
4. 200 초 조사 기간 동안 조사 영역에 20 초마다 0.1 % 덱스 트란없는 리보플라빈 -5- 인산염을 함유하는 감광제 용액을 적용한다.
   주 : 조사 및이 외과 의사에 의해 동시에 리보플라빈의 낙하를 수행합니다.
5. 반복 네 개의 안구 사분면의 각 3.1-3.4 단계를 반복합니다.

4. 수술 # 1 - 포스트 크로스 연결 단계

1. 눈 주위의 털을 면도. 외과 안과 가위를 사용하여 뚜껑 마진을 손질하고 부드럽게 상부와 4-0 꼰 실크 아이보리 색상을 사용하여 아래 눈꺼풀 봉합 - 3/8 원 재절 커팅 - 13mm 길이 C-3 바늘 (안검 봉합). 절차 (클로람페니콜 5 %)의 단부에 뚜껑 가장자리에 안연고 소량을 적용한다.

5. 수술 # 1 - 포스트 수술 케어

1. 복구하는 동안 가열 램프 아래에있는 동물을 유지합니다. 이 흉골 드러 누움을 유지하기 위해 충분한 의식을 회복 할 때까지 무인 동물을 두지 마십시오.
2. 완전히 복구 될 때까지 새로운 침대와 깨끗한 새장에 동물을 배치합니다. 복구 후, 동물은 동물의 방으로 돌아갑니다. 경우에만 깨어 자신의 어머니에게 동물을 돌려줍니다.
3. 처음 48 시간 동안 일반 조건 및 질병이나 감염의 징후에 관한 동물을 검사합니다. 토끼의 행동에 변화가 관찰되는 경우 필요에 따라 섹션 1. 관리]의 진통에 따라 진통제를 관리 할 수​​ 있습니다. (설피 린은 50 ㎎ / kg마다 6 시간 방울).

6. 수술 # 2

1. 오십 오일의 후urgery # 1, 무게와 케타민 히드로 클로라이드 100 ㎎ / ㎖ (100 ㎎ / ㎏)와 자일 라진 하이드로 클로라이드 25 ㎎ / ㎖ (12.5 밀리그램 / kg)을 근육 주사하여 마취 된 토끼.
2. 안과 운영 현미경 수술 안과 가위를 사용하여 안검 봉합을 제거합니다. 국소 마취 (oxybuprocaine 염산염 0.4 %), 초음파 A-스캐너를 사용한 후 각각의 눈에 세 축 방향 길이 측정을 수행하고 측정 값을 평균. 중앙 각막에 수직으로 프로브를 적용합니다.
3. 복강 페노바비탈 나트륨 하였다 (200 mg / 15 kg 체중)로 토끼를 안락사.

결과

도 1 및도 2에 그래픽으로 두 ​​군의 축 길이 측정 값을 보여준다. 왼쪽 눈은 (그림 1)에서 운영하지 않는 동안 그룹 1 토끼는 오른쪽 눈에 공막 가교 및 안검 봉합을 시행 하였다. 왼쪽 눈은 (그림 2)에서 운영하지 않는 동안 2 군 토끼는 오른쪽 눈에만 절개를하고 안검 봉합을 시행 하였다.

토론

우리는 리보플라빈 및 UVA 조사로 가교 결합 기술을 사용하여 토끼 모델에서 축 근시 예방 생체 내 연구에서 최초로 제시한다. 다른 실험 동물 연구는 이러한 유형에 사용될 수 있지만, 우리는 주로 인해 눈의 크기와 공막 표면 상에 가교 결합을 수행 할 필요로 토끼를 선택 하였다.

우리는 토끼 공막을 노출하고 윗 눈꺼풀과 아랫 눈꺼풀을 봉합하는 까다로운 절차로 것...

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
2-0 braided silk non-needled sutures	ETHICON	W193
4-0 braided silk ivory color	ETHICON	W816
0.1% dextran-free riboflavin-5-phosphate 1 mg:1 ml	Concept for Pharmacy Ltd	D2-5025
UV A (370 nm) light source	O/E LAND Inc	NCSU033B
Beveled down custom made fiber optic	Prizmatix Ltd
26 G lacrimal cannula	Beaver-visitec International Ltd.	REF581276
25 G tapered hydrodelineator [Blumenthal]	Beaver-visitec International Ltd.	REF585107
13 days old rabbits	Harlan	1NZWR40
Ultrasonic biometer	Allergan-Humphrey	820-519
Skin marker	Devon	4237101664X