비침습적 ACL 부상

1. 적절한 개인 보호 장비를 착용하십시오. 호흡 마스크를 사용할 수 있지만 이 프로토콜에는 필수가 아닙니다.
2. 5% 이소플루란과 1 L/min 산소를 가진 유도 챔버를 사용하여 쥐를 마취시화합니다. 1 - 3 % 이소플루란과 산소의 500 mL / 분코 콘을 통해 사용하여 마취의 흐름을 유지합니다. 장치가 백드래프트 또는 다운드래프트 테이블에 설치되지 않은 경우 탁상 시스템과 숯 필터를 사용하여 폐가스를 청소해야 합니다.
3. 발가락 핀치를 수행하여 충분한 심도의 마취에 도달했는지 확인합니다. 프로토콜이 신속하게 수행되고 (3 분 <) 눈 윤활제를 적용 할 필요가 없으며 각막 건조의 위험이 최소화됩니다.
4. 대퇴골에 비해 경골의 전방 잠복을위한 공간을 제공하면서 도시 플렉션의 30 ° 및 무릎 굴곡의 100 ° 오른쪽 뒷다리를 배치합니다.
5. 상단 무릎 스테이지를 선형 액추에이터에 단단히 장착합니다.
6. 구부러진 무릎을 로드 셀 바로 위에 장착하는 하단 스테이지에 배치합니다.
7. 8mm/s의 속도로 단일 적재량의 티비알 압축을 사용하여 ACL 부상을 유도합니다.
8. ACL 부상은 압축력의 방출에 의해 지적된다. 이 모니터링은 사용자 지정 프로그램을 통해 모니터링됩니다.
9. 부상 후, 동물은 마취의 비행기 아래에 있는 동안, 임상적으로 ACL 파열이 발생했는지 확인하기 위하여 Lachman의 시험을 능력을 발휘합니다. Lachman의 시험은 sagittal 계획 안정성을 평가하여 ACL의 무결성을 평가하는 데 사용되는 임상 테스트입니다. 대퇴골을 안정시키는 동안, 경골을 앞으로 당기고(전방 방향으로) 운동량을 평가합니다. 그대로 ACL은 연구원이 경골을 앞으로 번역 할 수없는 '확고한 최종 느낌'을 생성합니다. 부상당한 ACL은 찢어진 ACL을 나타내는 '부드럽거나 무성한 최종 느낌'을 생성합니다.
10. 대퇴골과 경골을 만지며 뼈 손상을 감지합니다. 금기 사항이 확인되지 않으면 동물을 케이지로 옮기고 복구할 수 있습니다. 이 시간 동안, 그것은 통증의 흔적을 표시 하지 않습니다 확인 하려면 동물을 모니터링, 이동 을 꺼려 등, 발성, 또는 비정상적인 자세.

관절 변성의 μCT 이미징

2-D 이미지는 70kV, 현재 85.5 μA(그림2B)의스캐너 설정을 사용하여 얻을 수 있습니다. 데이터는 완전한 180°를 통해 11.5 μm의 해상도로 0.6° 회전 단계마다 수집됩니다. 단면 이미지는 매끄러운 백 프로젝션 알고리즘과 재구성된 이미지의스택(그림 2C)을사용하여 재구성됩니다. 그 후, 1.53mm 구체가 내측 및 측면 티비알 고원 및 대퇴골의 에피피실 플레이트를 중심으로 하여 궤적 두께(μm), 궤적 분리(μm) 및 궤적 번호(1/mm)를 결정한다. ^5,6

1. 에서 4 주 후 ACL 부상, 유도 챔버에서_CO2에 장기간 노출쥐를 안락사.
2. 사용자 지정 3D 인쇄장치(그림 2A)에서ACL 부상 뒷다리를 확장하고 보호합니다.
3. μCT를 사용하여 이미지를 획득합니다.
4. 공동 공간을 결정하기 위해 전두엽 비행기 방사선 촬영을 가져옵니다. 수축 (대퇴 동변과 경골 고원 사이 [mm로 측정]) 비 부상 사지에 비해.
5. 70kV 및 현재 85.5 μA : 다음 스캐너 설정을 사용하여 2-D 이미지를 가져옵니다.
6. 전체 180°를 통해 11.5 μm의 픽셀 크기로 0.6° 회전 단계마다 데이터를 수집합니다.
7. 재구성된 이미지 스택에서 매끄러운 백 프로젝션 알고리즘을 사용하여 단면 이미지를 재구성합니다.
8. 일관된 관심 영역을 측정하기 위해 내측 및 측면 티브리얼 고원 및 대퇴골의 에피피실 플레이트에 1.53mm 구를 배치하여 궤적 두께(μm), 궤적 분리(μm), 및 궤적 번호(1/mm)를 결정합니다.

그림 2: A) μCT, B) 2D 이미지 및 C) 3-D μCT 동안 뒷다리를 고정하는 사용자 정의 인쇄 장치.