먼저 두 개의 리텐션 홀더를 준비합니다. 가벼운 와이어 플라이어와 0.014인치 호주 와이어를 사용하여 나선형 루프를 만듭니다. 그런 다음 맞춤형 스테인리스 스틸 스프링을 준비하고 스프링을 적절한 길이로 자릅니다.
또한 길이가 7mm인 직선 호주 철사 또는 직선 강선 1개를 준비하고 장벽으로 사용할 직경 2mm의 종이 두 장을 자릅니다. 그런 다음 마취된 쥐를 수술대에 놓고 제모 크림이나 면도기로 머리 위의 털을 조심스럽게 제거합니다. 그런 다음 요오드포름과 75% 알코올을 번갈아 가며 사용하여 쥐의 두피를 소독합니다.
마우스의 머리가 위쪽에 오도록 놓고 수술용 테이프를 사용하여 팔다리를 수술대에 고정합니다. 이제 수술용 가위를 사용하여 쥐의 목 근처 두피를 따라 아치형 플랩을 수행하여 시상 봉합사와 주변 두개골을 완전히 노출시킵니다. 그런 다음 수술대에 6-0 봉합사로 두피 플랩을 고정합니다.
두개골을 말리고 37% 인산으로 20초 동안 에칭합니다. 그런 다음 생리 식염수를 사용하여 산성 에칭을 청소하십시오. 두 개의 홀더를 시상 봉합사에서 3mm 떨어진 정수리 뼈의 양쪽에 놓고 광 경화 접착제로 붙입니다.
그런 다음 두피 플랩을 다시 끼웁니다. 홀더의 위치에 라벨을 붙이고 해당 위치에서 두피에 두 개의 작은 구멍을 뚫습니다. 피부 표면을 노출시키기 위해 구멍을 통해 작은 고리를 동시에 통과시켜 플랩 두피를 재설정합니다.
스프링과 가이드 와이어를 설치하려면 스프링을 두 홀더 사이의 거리보다 1mm 더 길게 자릅니다. 압력 스프링을 압축하여 양쪽의 작은 코일 사이에 놓습니다. 스테인리스강을 작은 코일과 스프링에 통과시키고 스프링을 풀어 약 30G의 시작 추력을 얻습니다.
그런 다음 스프링과 홀더 사이에 두 개의 종이 조각을 놓고 광경화 접착제로 접착하여 스프링의 양쪽 끝에 장벽을 설정합니다. 확장 후 마이크로 CT를 사용하여 두개골 봉합사의 변화를 시각화했습니다. 대조군과 비교했을 때, 두개골 봉합사는 하루 동안 힘을 가한 후 점차적으로 크게 확장되었고, 5일째 이후에는 뼈 가장자리에 솜털 같은 뼈 돌출부가 나타났다.
또한, 이중 표지 방법을 이용한 광물화의 시각화는 하중 부하가 골형성을 유의하게 활성화시키는 것을 보여주었습니다. 7일 후 새로 광물화된 뼈가 관찰되었는데, 이는 봉합사 확장 후 뼈 리모델링 과정을 나타냅니다.
