시작하려면 마이크로파 보조 추출을 위해 희석된 60% 용매를 작업 플랫폼에 놓습니다. 0.67 그램의 커피실버 스킨을 칭량하고 20 밀리리터의 추출용매와 1 대 30의 비율로 반응 용기에 혼합한다. 용기에 마그네틱 교반 막대를 추가하여 시료 내 열과 용매의 균일한 분포를 보장합니다.
특수 도구로 용기를 단단히 닫고 마이크로파 보조 추출 챔버에 넣습니다. 방법을 설정하려면 모니터 상단 표시줄에 있는 도구 상자 아이콘을 클릭하고 액세서리 섹션에서 SK eT 로터를 선택합니다. 그런 다음 교반을 클릭하고 20%를 입력하여 교반 속도를 설정합니다.
도어 잠금 섹터를 클릭하고 섭씨 80도를 초과하는 온도에서 활성화되도록 설정합니다. 그런 다음 상단 표시줄에서 테이블 아이콘을 클릭하고 온도 구배 T1을 추출 시간 10분으로 설정합니다. 마이크로파 전력은 1800와트, 온도는 섭씨 120도입니다.
교반을 활성화하려면 교반 버튼을 클릭하고 녹색 표시등이 나타날 때까지 기다립니다. 송풍기 팬 속도를 레벨 3으로 설정합니다. 추출 시간을 유지하려면 추출 시간을 2분으로, 마이크로파 전력을 1800와트로, 온도를 섭씨 120도로 설정하여 원하는 추출 온도 T120를 선택합니다.
이제 화면 왼쪽 하단의 냉각 버튼을 클릭하고 냉각 시간을 10분으로 선택합니다. 화면 오른쪽 상단에 있는 저장 아이콘을 클릭합니다. 사용된 용기의 수를 선택하여 추출 프로세스를 시작합니다.
추출 후 원심분리기는 9072g에서 섭씨 4도에서 15분 동안 추출합니다. 10밀리리터 유리 피펫으로 상층액을 모아 섭씨 영하 20도에서 보관합니다. 커피은 껍질 추출물을 증류수로 10배 희석하여 96웰 플레이트에 담습니다.
희석된 샘플 10마이크로리터를 희석되지 않은 폴린-시오칼테우 시약 20마이크로리터와 혼합하고 3분 동안 반응시킵니다. 다음으로, 100 웰 플레이트의 각 웰에있는 혼합물에 7.5 % 탄산나트륨 용액을 96 마이크로 리터를 첨가합니다. 증류수로 희석하여 갈산 표준 농도 범위에 대해 다양한 농도를 준비합니다.
20 마이크로리터의 folin-ciocalteu 시약과 혼합하고 3분 동안 반응시킵니다. 다음으로, 100 웰 플레이트의 각 웰에있는 혼합물에 7.5 % 탄산나트륨 용액을 96 마이크로 리터를 첨가합니다. 실온의 어두운 곳에서 30분 동안 반응을 배양합니다.
마이크로플레이트 리더에서 765나노미터에서 반응 혼합물의 흡광도를 측정합니다. 765나노미터에서 표준물질의 농도와 흡광도를 사용하여 표준 검량선을 플로팅합니다. 결과를 샘플 그램당 갤런산 당량의 밀리그램으로 표현합니다.
수성 1, 2 헥산디올 추출은 가장 높은 총 페놀 함량을 수득하였고 물 추출은 가장 낮은 수율을 나타냈다. 수성 1, 2 헥산디올 추출은 가장 높은 총 플라보노이드 함량을 수득하였고 수성 이소펜틸디올 추출은 가장 낮은 수율을 나타냈다. 수성 헥실렌 글리콜 추출이 가장 높은 DPPH 분석 값을 나타냈고 수성 에탄올 추출이 가장 낮았습니다.
수성 펜틸렌 글리콜 추출은 가장 높은 ABTS 분석 값을 나타냈고 물 추출은 가장 낮았습니다. 수성 헥실렌 글리콜 추출이 가장 높은 FRAP 값을 보였고 물 추출이 가장 낮았습니다.