우리는 동물 치료 동물 자원 직원의에 모리 대학 본부 감사드립니다. 자금 출처는 다음과 같습니다 ALS 협회, 국방부, 그리고 Neuralstem, 주식회사

1. 동물 사용 여기 증명 절차에 모리 대학 기관 동물 케어 및 사용위원회 (IACUC)에 의해 승인되었습니다. 약 15~20킬로그램 무게 여성 괴팅겐의 minipigs이 사용됩니다. 2. 마취 동물 수술하기 전에 약 12​​ 시간을 금식하고 있습니다. 동물 진정 작용과 마취 유도는 근육 케타민 (35 MG / kg), Acepromazine (1.1 밀리그램 / kg) 및 아트로핀 (0.04 밀리그램 / kg)의 칵테일로 구성되어 있습니다. 동물 그런 다음 intubated와 산소와 1-3% isoflurane 전신 마취에 유지됩니다. 이 시점에서, 다시 각 동물의 머리는 면도 있습니다. 마취 심도는 수의학 직원에 의해 모니터링된다. , interdigital 각막과 palpebral 반사뿐만 아니라, 심장, 호흡, 펄스 oximetry, 간접 / 직접 혈압, 최종 갯벌 탄소 이산화탄소 측정 및 근육 톤 / 유해 자극에 대한 반응의 부재는 깊이를 모니터링하는 데 사용됩니다<html> 마취의. 3. 위치 동물은 수술실로 이동하고 잭슨 척추 수술 테이블에 환자 위치를 모방하기위한 프레임 사용자 정의에 발생하기 쉬운 위치로 배치됩니다. 프레임은 복부와 가슴 못하여 경막 외 정맥 출혈 (그림 1)에 압력을 최소화 따라서, 복부 무료 교수형 할 수 있으며, 동물의 가슴과 골반 아래 위치하게된다 조절 slings을 활용합니다. 프레임은 또한 절차 1 척추의 외부 고정을 제공합니다. 또한, 동물 몸의 온도와 유체 관리 및 수술 중에 필요한 약물 전달을위한 catheterized 한계 귀 정맥을 유지하기 위해 온수 다시 순환 패드에 게재됩니다. 마지막으로, 수술 필드가 알코올 및 Chlorhexadine 또는 Betadine 솔루션을 준비하고 있으며, 수술 커튼은 수술 현장에 배치되어 있습니다. 르 &quot;&gt; 4. Laminectomy 약 10-15센티미터 피부 절개가 수행되고 paraspinal의 근육은 양자 척추를 해부하고 있습니다. 다음 등쪽의 다중 레벨 laminectomy이 수행됩니다. 세 척추 놓인 C3-C5 또는 L2-L4 세그먼트의 얇은 판과 spinous 프로세스 rongeurs과 수술 드릴을 사용하여 제거됩니다. 5. 척수 데릭의 위치 우리는 척수 데릭 척수 2-5로 (유전자 및 세포) 요법의 전달을위한 장치 전화하십시오. 이 장치의 설계 및 진화에 대한 자세한 논의는 라일리 외., 2011에서 찾을 수 있습니다. 4 환자에 장치를 확보하려면, percutaneous 게시물은 기본 절개 위 아래 1cm 피부 절개를 통해 위치와 주요 절개 위 아래의 얇은 판에 장착되어 있습니다. 다음 두 개의 통합 견인기는 강한에 부착된다절개 사이트 위 아래 UR percutaneous는 게시물 laminectomy를 마쳤습니다 척추의 영역을 표시합니다. 6. 경질 막 개관 우드 슨 치과 도구의 도움과 11 블레이드로 2.5 cm의 절개는 척수를 노출 경질을 통해 이루어집니다. 경질은 4-0 Nurolon의 봉합을 사용하여 pial 층에서 떨어져 반영하고 깊은 paraspinal 근육에 고정된다. 수술 패티는 개방의 뱃 부리 장식이있는과 꼬리 극단에 배치됩니다. 이러한 뇌척수 흐름에 일부 장벽을 제공하고 또한 코드를 손상시키지 않고 스폰지를 삽입 할 수있는 의사의 안전한 대상을 제공합니다. 인간에서 수술 현미경 배율 아래에있는 pial 표면은이 시점에서 해부하고 있습니다. 기술적 인 제한으로 인해이 절차가 필요이나 동물에 적합하지 않을 수 있습니다. 7. 척추 주사 및 추가 주입을위한 척수 데릭의 측면 변위에스 주사 직전에, Methylprednisolone (125 MG, IV)의 bolus이 붓기 척수를 방지하기 위해 제공됩니다. 이 시점에서, 플랫폼 레일 시스템은 장착되어 있으며 측면 레일은 적절한 길이에 맞게 조정됩니다. 곤돌라는 2 개의 바에 최고​​로드와 Z 드라이브는 보편적 공동에 장착되어 있습니다. 다음로드의 캐뉼라는 microdrive에 배치됩니다. microinjection 플랫폼에서 범용 공동을 사용하여 코로나와 화살 각도는 척추 주사의 캐뉼라의 위치를​​ 따라 표면에 대해 수직 궤적을 보장하기 위해 조정됩니다. 바늘은 등쪽 루트 항목 영역 (DREZ)에 따라 중간 위치입니다. DREZ는 3.5X 수술 루페 배율에서 확인하고 지점 코드 표면에 수직 궤적 &lt;medially 1mm에 침투하고 있습니다. 인간에 ​​미리 수술 MRI는 기본 평가 O를 제공합니다수술 계획을위한 F 척추 크기. 또한, 척추의 두께는 복부 뿔의 대상 깊이를 결정하기 위해 측정됩니다. 정지는 pial 접촉에서 4 mm의 깊이에 주입합니다. ultem 플라스틱으로 만든 플랜지 원하는보다 훨씬 발전에서 바늘을 방지하기 위해 피아 표면에 스토퍼 역할을합니다. 바늘 끝이 목표 지점에 위치하고되면 단단한 금속 바깥 쪽 슬리브는 유연한 튜브가 노출 남겨두고 체포된다. 주입이 완료되면, 바늘은 캐뉼라 주입 기관을 백업 세포 역류를 방지하기 위해 추가 1 분에 장소에 남아 있습니다. 케어가 약간 microdrive laterality 또는 rostro - caudally 중 하나를 조정하여 표면 vasculature을 피하기 위해 이루어집니다. 침투 사이트의 일부 출혈이 발생할 수 있습니다. 이러한 출혈이 발생하는 경우, 마이크로 패티는 출혈이 주사 부위에 배치되어 있으며 흡입은 캐뉼라 penetr의 피를 등심하도록 적용됩니다ation 사이트 및 코드를 축적되지 않도록합니다. 이 안정적으로 응고하는 혈액 할 수 있습니다. 직접 압력이 그대로 소작을 피할 수 있습니다. 바늘 제거 후, ​​stereotaxic 장치는 척추의 등 표면에 보이는 혈관을 피하기 위해 필요한 2 또는 4 mm 또는로 구분하여 rostro - 꼬리 축을 따라 다음 대상 사이트로 이전합니다. 주어진 연구에서 제안으로이 과정은 많은 시간을 반복하고 있습니다. 8. 플로팅 정맥 좁은 직경의 사용자 지정 주입 캐뉼라는 주사에 사용됩니다. 캐뉼라는 가변 길이의 30 게이지 유연한 silastic 튜브에 연결 고정 길이의 30 게이지 바늘 beveled로 구성되어 있습니다. 말단부는 microinjector 펌프에 부착되어있는 해밀턴 luer 자물쇠가 장착되어 있습니다. 근위 silastic 튜브는 24 게이지 경질의 외부 캐뉼라 내 ensheathed되는 주입 바늘 플랜지의 근위 끝 석. 이 플랜지 두 석외부 캐뉼라하고 주사 바늘에 대한 깊이 정류장 역할을합니다. 각각의 주입 들어, 치료 중지의 적절한 볼륨으로 주입하는 분 당 5 μl의 비율로 미리 교정 MINJ-PD microINJECTOR 펌프 (Tritech 연구, 주식회사, 로스 앤젤레스, CA)를 사용하여. 9. 폐쇄 모든 주사이 완료되면 척추 데릭은 부드럽게 제거하고 절개은 네 층으로 폐쇄됩니다. 경질은 방수 방식으로, 4.0 Nurolon 스티치를 사용하여 문을 닫습니다. 0 Vicryl의 봉합이 깊은 근육 층에 사용됩니다. 근막은 다음 방수 방식도 0 Vicryl의 봉합과 함께 폐쇄됩니다. 피부 층은 드디어 실행 스티치와 함께, 2.0 Vicryl으로 문을 닫습니다. 피부 폐쇄는 3-0 나일론 봉합사를 사용하여 완료됩니다. 10. 복구 및 통증 관리 동물은 2 시간 다음 마취 복구를 위해 extubated하고 모니터링합니다. 다음, 동물은 개별 C으로 전송됩니다연령과 식품 소비, 깨끗하게 함, 그리고 방뇨 최소 하루에 한 번씩 모니터. 통증 관리를 들어, transdermal 펜타 패치 (75 mcg)는 수술 진통제 3 일 동안 동물의 뒷면에 잘라 있습니다. 또한, Buprenorphine는 (0.05 밀리그램 / kg, BID, IM)는 최대 사후 operatively 3 일에 제공 될 수 있습니다. 11. 결과 및 대표 성과 임상과 행동 관찰은 연구 설계에 따라 엔드 포인트까지 수술 전에 수행 한 후 일 1 일까지 7 일에 녹화하고 주 단위로되어 있습니다. 행동 데이터는 이전 6에 설명 된대로 신경 병적 상태를 평가하기 위해 수집됩니다. 감각 기능은 전면과 두 다리의 발끝에 기계적 자극에 탈퇴 응답의 유무에 의해 평가된다. -; 1 - 두 다리에 지각 tonus, 약간의 m 마비, 아니 운동 0 : 모터 기능은 Tarlov 점수 (표 1) 다음ovement, 2 - 두 다리의 운동 만 앉거나 서서 할 수없는, 3 - 서서하지만 ataxic 짧은 기간 동안 도보로하는 능력, 4 - 전체 복구, 정상적인 운동 기능. 절차의 안전은 미리 수술 기본으로 돌아가려면 동물의 능력에 의해 결정됩니다. 과도 신경 결손은 주로 동물의 품종과 절차에 따라 몇 가지 변화 (주사 수, 다른 매개 변수들)과 수술 일 1과 7 사이에 해결됩니다. 영구 병적는 동물 IACUC 기본 끝점 (그림 2)에 도달 때까지 해결되지 않는 지속적인 신경 결손에 의해 정의됩니다.

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	<li>Usvald, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+dosing+regimen+and+reproducibility+of+intraspinal+grafting+of+human+spinal+stem+cells+in+immunosuppressed+minipigs.">Analysis of dosing regimen and reproducibility of intraspinal grafting of human spinal stem cells in immunosuppressed minipigs.</a> Cell Transplant. 19, 1103-1122 (2010).</li><li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+spinal+cord+therapeutics+delivery:+stabilized+platform+and+microelectrode+recording+guidance+validation.">Targeted spinal cord therapeutics delivery: stabilized platform and microelectrode recording guidance validation.</a> Stereotact. Funct. Neurosurg. 86, 67-74 (2008).</li><li>Federici, T., Riley, J., Park, J., Bain, M., Boulis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+safety+validation+of+a+stabilized+viral+vector+direct+injection+approach+to+the+cervical+spinal+cord.">Preclinical safety validation of a stabilized viral vector direct injection approach to the cervical spinal cord.</a> Clin. Transl. Sci. 2, 165-167 (2009).</li><li>Riley, J. P., Raore, B., Taub, J. S., Federici, T., Boulis, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platform+and+Cannula+Design+Improvements+for+Spinal+Cord+Therapeutics+Delivery.">Platform and Cannula Design Improvements for Spinal Cord Therapeutics Delivery.</a> Neurosurgery. 69, 147-154 (2011).</li><li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cervical+spinal+cord+therapeutics+delivery:+preclinical+safety+validation+of+a+stabilized+microinjection+platform.">Cervical spinal cord therapeutics delivery: preclinical safety validation of a stabilized microinjection platform.</a> Neurosurgery. 65, 754-761 (2009).</li><li>Raore, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cervical+multilevel+intraspinal+stem+cell+therapy:+assessment+of+surgical+risks+in+Gottingen+minipigs.">Cervical multilevel intraspinal stem cell therapy: assessment of surgical risks in Gottingen minipigs.</a> Spine. 36, 164-171 (2011).</li><li>Boulis, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+stem+cell+therapy+for+amyotrophic+lateral+sclerosis.">Translational stem cell therapy for amyotrophic lateral sclerosis.</a> Nat. Rev. Neurol. , (2011).</li><li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraspinal+Stem+Cell+Transplantation+in+ALS:+A+Phase+I+Safety+Trial,+Technical+Note+&#38;+Interim+Safety+Outcomes.">Intraspinal Stem Cell Transplantation in ALS: A Phase I Safety Trial, Technical Note &#38; Interim Safety Outcomes.</a> Neurosurgery. 71 (2), 405-416 (2012).</li><li>Boulis, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lumbar+intraspinal+injection+of+neural+stem+cells+in+patients+with+ALS:+results+of+a+Phase+I+trial+in+12+patients.">Lumbar intraspinal injection of neural stem cells in patients with ALS: results of a Phase I trial in 12 patients.</a> Stem Cells. 30 (6), 1144-1151 (2012).</li></ol>

박사 Boulis는 인간 척추의 안전하고 정확한 주사를 사용하려면 장치의 발명가이다. Neuralstem, Inc는이 기술에 대한 독점적 인 사용권을 구입했다. 박사 Boulis이 요금의 invento의 점유율을받은이 기술의 배포에 대한 로열티 지불에 대한 권리가 있습니다. 다른 저자 공개는 아무 상관이 없습니다.

인간 7-9에 설명 된 기술을 계속 진행하기 위해 승인에도 불구하고, 중요한 질문은 성공 척추 요법에 대한 순서로 답변을 할 수 남아 있습니다. intraparenchymal 주사로 척추 허용의 엄격한 이해, 퇴행성 demyelinating 및 외상성 척추 질환에 대한 치료를 개발하는 실험의 계획 및 실행을 사용하도록 설정해야합니다. 현재 대형 포유류의 척추가 과도하고 영구적 인 질병없이 용인 할 수있는 ?...

<table border="1"><tbody><tr><td> 장비의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 코멘트 (선택 사항) </td></tr><tr><td> 척추 데릭 </td><td> Neuralstem 주식회사 </td><td></td><td> Neuralstem, Inc는이 기술에 독점적 인 라이센스를 구입 한 </td></tr><tr><td> MINJ-PD Microinjector 펌프 </td><td> Tritech 연구 주식회사 </td><td></td><td> 이 특정 응용 프로그램에 대한 사용자 정의 </td></tr><tr><td> 플로팅 정맥 </td><td> Neuralstem 주식회사 </td><td></td><td> 이 특정 응용 프로그램에 대한 사용자 정의 디자인 </td></tr></tbody></table>

surgical technique for spinal cord delivery of therapies: demonstration of procedure in gottingen minipigs

이것은 척추에 (유전자 및 세포) 요법의 제공을위한 수술 기법 및 장치의 조합의 소형 시각적 설명입니다. 기술은 동물에서 증명되는 동안 절차는 FDA가 승인 한 현재 ALS 환자의 척수 코드에 줄기 세포 이식에 사용되는 것입니다. FDA가 높은 특징을 쥐 모델에서 치료 효과에 대한 증명 원리 데이터를 인식하지만, 큰 동물의 사용은 수술의 결합, 장치 및 인간의 사용에 대한 최종 치료의 안전을 확인을위한 중요 간주됩니다 . 크기, 해부학, 그리고 돼지의 척추와 척추의 일반적인 문제는 더 나은 모델 인간을로 인정 받고 있습니다. 또한, 노출 및 조작 척수를뿐만 아니라 돼지에 상처를 폐쇄의 수술 과정은 인간의 거의 구분할 수 있습니다. 우리는 건강한 돼지 모델 criti를 나타냅니다 생각절차 안전 연구에 칼 첫 걸음.

<table border="1"><tbody><tr><td colspan="2"> Tarlov 평가 점수 </td></tr><tr><td> 0 </td><td> 마비, 아니 운동 </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 두 다리에 지각 tonus, 약간의 운동 </td></tr><tr><td> 이 </td><td> 두 다리의 운동 만 앉거나 서서 할 수 없습니다 </td></tr><tr><td> 3 </td><td> 하지만 ataxic 짧은 기간 동안을 서서 걸어 할 수있는 능력 </td></tr><tr><td> 4 </td><td> 완전한 복구, 정상적인 운?...

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Surgical Technique for Spinal Cord Delivery of Therapies: Demonstration of Procedure in Gottingen Minipigs

척수로 (유전자 및 세포) 요법의 전달에 사용되는 수술 기술과 장치의 짧은 영상 설명입니다. 이 기술은 동물에 보여하지만, 완전히 번역 현재 인간 응용 프로그램에 사용되는입니다.

치료의 척추 배달을위한 수술 기법 : 괴팅겐 Minipigs의 절차의 데모

This is a  compact visual description of a combination of surgical technique and device  for the  delivery of (gene and cell) therapies into the spinal ...

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15.2K 조회수.  Emory University. 척수로 (유전자 및 세포) 요법의 전달에 사용되는 수술 기술과 장치의 짧은 영상 설명입니다. 이 기술은 동물에 보여하지만, 완전히 번역 현재 인간 응용 프로그램에 사용되는입니다.

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Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory testing in rat SCI models is needed. However, until recently, no single testing approach had been validated for SCI so that standardized methods have not been implemented across labs. Additionally, available testing methods could not be implemented acutely or when severe motor impairments existed, preventing studies of the development of SCI-induced allodynia3. Here we present two validated sensory testing methods using von Frey Hair (VFH) monofilaments which quantify changes in tactile sensory thresholds after SCI4-5. One test is the well-established Up-Down test which demonstrates high sensitivity and specificity across different SCI severities when tested chronically5. The other test is a newly-developed dorsal VFH test that can be applied acutely after SCI when allodynia develops, prior to motor recovery4-5. Each VFH monofilament applies a calibrated force when touched to the skin of the hind paw until it bends. In the up-down method, alternating VFHs of higher or lower forces are used on the plantar L5 dermatome to delineate flexor withdrawal thresholds. Successively higher forces are applied until withdrawal occurs then lower force VFHs are used until withdrawal ceases. The tactile threshold reflects the force required to elicit withdrawal in 50% of the stimuli. For the new test, each VFH is applied to the dorsal L5 dermatome of the paw while the rat is supported by the examiner. The VFH stimulation occurs in ascending order of force until at least 2 of 3 applications at a given force produces paw withdrawal. Tactile sensory threshold is the lowest force to elicit withdrawal 66% of the time. Acclimation, testing and scoring procedures are described. Aberrant trials that require a retest and typical trials are defined. Animal use was approved by Ohio State University Animal Care and Use Committee.

We describe two tactile sensory testing methods for acute or chronic periods of spinal cord injury in rats. These validated procedures can detect the development and maintenance of allodynia-like sensations.

쥐의 척수를 다친 후에 급성 및 만성 촉각 감각 테스트

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory ...

연구

의학

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is described to obtain a consistent model of severe SCI. Use of a stereotactic frame and computer controlled impactor allows for creation of reproducible injury. Hypothermia and urinary tract infection pose significant challenges in the post-operative period. Careful monitoring of animals with daily weight recording and bladder expression allows for early detection of post-operative complications. The functional results of this contusion model are equivalent to transection models. The contusion model can be utilized to evaluate the efficacy of both neuroprotective and neuroregenerative approaches.

A contusion model of severe spinal cord injury is described. Detailed pre-operative, operative and post-operative steps are described to obtain a consistent model.

쥐에 심각한 척수 손상의 타박상 모델

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI). Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, social, and economical effects are staggering. Therefore, further research into the effects of TBI and effective treatments is necessary. The controlled cortical impact (CCI) model induces traumatic brain injuries ranging from mild to severe. This method uses a rigid impactor to deliver mechanical energy to an intact dura exposed following a craniectomy. Impact is made under precise parameters at a set velocity to achieve a pre-determined deformation depth. Although other TBI models, such as weight drop and fluid percussion, exist, CCI is more accurate, easier to control, and most importantly, produces traumatic brain injuries similar to those seen in humans. However, no TBI model is currently able to reproduce pathological changes identical to those seen in human patients. The CCI model allows investigation into the short-term and long-term effects of TBI, such as neuronal death, memory deficits, and cerebral edema, as well as potential therapeutic treatments for TBI.

Traumatic brain injuries (TBIs) remain a serious health problem. Using the controlled cortical impact surgery model, research on the effects of TBI and possible treatment methods may be performed.

외상성 뇌 손상에 대한 제어 피질 충격 모델

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

A Radio-telemetric System to Monitor Cardiovascular Function in Rats with Spinal Cord Transection and Embryonic Neural Stem Cell Grafts

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter connected to a radio transmitter into the femoral artery of rats that underwent a T4 spinal cord transection with or without grafting of embryonic brainstem-derived neural stem cells expressing green fluorescent protein. Compared to other methods such as cannula insertion or tail-cuff, telemetry is advantageous to continuously monitor blood pressure and heart rate in freely moving animals. It is also capable of long term multiple data acquisitions. In spinal cord injured rats, basal cardiovascular data under unrestrained condition and autonomic dysreflexia in response to colorectal distension were successfully recorded. In addition, cardiovascular parameters before and after SCI can be compared in the same rat if a transmitter is implanted before a spinal cord transection. One limitation of the described telemetry procedure is that implantation in the femoral artery may influence the blood supply to the ipsilateral hindlimb.

We present a protocol for using a radio-telemetric system to record cardiovascular parameters in T4 spinal cord transected rats eight weeks after embryonic brainstem neural stem cell grafting into the lesion site. Telemetry is an advanced technique to accurately evaluate cardiovascular function in conscious freely moving spinal cord injured rats.

무선 원격 측정 시스템은 척수 절개 및 배아 신경 세포 이식 줄기와 흰쥐의 심장 혈관 기능을 모니터링 할 수

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last decades. For clarification of the underlying mechanisms and the development of new therapeutic strategies, the availability of valid animal models are mandatory. Since we need new insights into pathomechanisms of cardiovascular diseases under in vivo conditions to combat myocardial infarction, the validity of the animal model is a crucial aspect. However, protection of animals are highly relevant in this context. Therefore, we establish a minimally invasive and simple model of myocardial infarction in mice, which assures a high reproducibility and survival rate of animals. Thus, this models fulfils the requirements of the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction) for animal experiments and assure the scientific information needed for further developing of therapeutical strategies for cardiovascular diseases.

A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

쥐 심근 경색을 유도 최소 침습 수술

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Calibrated Forceps Model of Spinal Cord Compression Injury

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The calibrated forceps model of compression injury is a convenient, low cost, and very reproducible animal model for SCI. We used a pair of modified forceps in accordance with the method published by Plemel et al. (2008) to laterally compress the spinal cord to a distance of 0.35 mm. In this video, we will demonstrate a dorsal laminectomy to expose the spinal cord, followed by compression of the spinal cord with the modified forceps. In the video, we will also address issues related to the care of paraplegic laboratory animals. This injury model produces mice that exhibit impairment in sensation, as well as impaired hindlimb locomotor function. Furthermore, this method of injury produces consistent aberrations in the pathology of the SCI, as determined by immunohistochemical methods. After watching this video, viewers should be able to determine the necessary supplies and methods for producing SCI of various severities in the mouse for studies on SCI and/or treatments designed to mitigate impairment after injury.

Spinal cord injury models should be highly reproducible. We demonstrate that the calibrated forceps compression model of spinal cord injury is an easy to use surgical method for generating reproducible injuries to the murine spinal cord.

척수 압축 부상의 보정 집게 모델

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The ...

Contrast Enhanced Ultrasound Imaging for Assessment of Spinal Cord Blood Flow in Experimental Spinal Cord Injury

Reduced spinal cord blood flow (SCBF) (i.e., ischemia) plays a key role in traumatic spinal cord injury (SCI) pathophysiology and is accordingly an important target for neuroprotective therapies. Although several techniques have been described to assess SCBF, they all have significant limitations. To overcome the latter, we propose the use of real-time contrast enhanced ultrasound imaging (CEU). Here we describe the application of this technique in a rat contusion model of SCI. A jugular catheter is first implanted for the repeated injection of contrast agent, a sodium chloride solution of sulphur hexafluoride encapsulated microbubbles. The spine is then stabilized with a custom-made 3D-frame and the spinal cord dura mater is exposed by a laminectomy at ThIX-ThXII. The ultrasound probe is then positioned at the posterior aspect of the dura mater (coated with ultrasound gel). To assess baseline SCBF, a single intravenous injection (400 &#181;l) of contrast agent is applied to record its passage through the intact spinal cord microvasculature. A weight-drop device is subsequently used to generate a reproducible experimental contusion model of SCI. Contrast agent is re-injected 15 min following the injury to assess post-SCI SCBF changes. CEU allows for real time and in-vivo assessment of SCBF changes following SCI. In the uninjured animal, ultrasound imaging showed uneven blood flow along the intact spinal cord. Furthermore, 15 min post-SCI, there was critical ischemia at the level of the epicenter while SCBF remained preserved in the more remote intact areas. In the regions adjacent to the epicenter (both rostral and caudal), SCBF was significantly reduced. This corresponds to the previously described &#8220;ischemic penumbra zone&#8221;. This tool is of major interest for assessing the effects of therapies aimed at limiting ischemia and the resulting tissue necrosis subsequent to SCI.

Contrast Enhanced Ultrasound imaging is a reliable in-vivo tool for quantifying spinal cord blood flow in an experimental rat spinal cord injury model. This paper contains a comprehensive protocol for application of this technique in association with a contusion model of thoracic spinal cord injury.

실험 척수 부상에서 척수 혈액 흐름의 평가를위한 향상된 초음파 이미징 대비

Reduced spinal cord blood flow (SCBF) (i.e., ischemia) plays a key role in traumatic spinal cord injury (SCI) pathophysiology and is accordingly an ...

The Mouse Round-window Approach for Ototoxic Agent Delivery: A Rapid and Reliable Technique for Inducing Cochlear Cell Degeneration

Investigators have utilized a wide array of animal models and investigative techniques to study the mammalian auditory system. Much of the basic research involving the cochlea and its associated neural pathways entails exposure of model cochleae to a variety of ototoxic agents. This allows investigators to study the effects of targeted damage to cochlear structures, and in some cases, the self-repair or regeneration of those structures. Various techniques exist for delivery of ototoxic agents to the cochlea. When selecting a particular technique, investigators must consider a number of factors, including the induction of inadvertent systemic toxicity, the amount of cochlear damage produced by the surgical procedure itself, the type of lesion desired, animal survivability, and reproducibility/reliability of results. Currently established techniques include parenteral injection, intra-peritoneal injection, trans-tympanic injection, endolymphatic sac injection, and cochleostomy with perilymphatic perfusion. Each of these methods has been successfully utilized and is well described in the literature; yet, each has various shortcomings. Here, we present a technique for topical application of ototoxic agents directly to the round window niche. This technique is non-invasive to inner ear structures, produces rapid onset of reliably targeted lesions, avoids systemic toxicity, and allows for an intra-animal control (the contra-lateral ear). Results stemming from this approach have helped deeper understanding of auditory pathophysiology, cochlear cell degeneration, and regenerative capacity in response to an acute injury. Future investigations may use this method to conduct interventional studies involving gene therapy and stem cell transplantation to combat hearing loss.

Various methods exist for introducing ototoxic agents to the cochleae of animal models. Presented is a surgical protocol for delivery of ototoxic agents to the round window niche. The procedure is reliable, creates targeted intra-cochlear lesions, and avoids mechanical damage to the microarchitecture. Examination of cochlear self-repair/regeneration is possible.

인공 와우 세포 변성을 유도하기위한 신속하고 신뢰할 수있는 기술 : Ototoxic 에이전트 배달을 위해 마우스 라운드 창 접근

Investigators have utilized a wide array of animal models and investigative techniques to study the mammalian auditory system. Much of the basic research ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal cord. A major current area of research is focused on the mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous or induced functional recovery following SCI. Spontaneous functional recovery is reported to be greater early in life, raising interesting questions about how adaptive plasticity changes as the spinal cord develops. To facilitate investigation of this dynamic, we have developed a SCI model in the neonatal mouse. The model has relevance for pediatric SCI, which is too little studied. Because neural plasticity in the adult involves some of the same mechanisms as neural plasticity in early life1, this model may potentially have some relevance also for adult SCI. Here we describe the entire procedure for generating a reproducible spinal cord compression (SCC) injury in the neonatal mouse as early as postnatal (P) day 1. SCC is achieved by performing a laminectomy at a given spinal level (here described at thoracic levels 9-11) and then using a modified Yasargil aneurysm mini-clip to rapidly compress and decompress the spinal cord. As previously described, the injured neonatal mice can be tested for behavioral deficits or sacrificed for ex vivo physiological analysis of synaptic connectivity using electrophysiological and high-throughput optical recording techniques1. Earlier and ongoing studies using behavioral and physiological assessment have demonstrated a dramatic, acute impairment of hindlimb motility followed by a complete functional recovery within 2 weeks, and the first evidence of changes in functional circuitry at the level of identified descending synaptic connections1.

This article describes a method for generating a reproducible spinal cord compression injury (SCI) in the neonatal mouse. The model provides an advantageous platform for studying mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous functional recovery.

신생아 마우스 척수 압축 부상 모델

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via recanalization of the coronary artery is the most effective strategy for reducing the size of ischemic myocardium. The coronary microvasculature cannot be visualized and imaged&#160;in vivo, but there are several invasive and noninvasive techniques that can be used to assess parameters which depend directly on coronary microvascular function. The endothelial function after ischemia reperfusion can be assessed also at the level of the coronary circulation via the coronary flow reserve (CFR).&#160;In this study, peak velocity of left anterior descending (LAD) coronary arteries was measured in rats in vivo via Transthoracic Doppler Echocardiography during resting and stress challenge (induced by Dobutamine). A normal heart can increase its coronary blood flow up to four times above the resting values during stress induction. Following ischemia reperfusion, we found a significantly diminished CFR, which can be used as a marker of coronary microvascular dysfunction. CFR has opened a window on the importance of microvascular dysfunction and has been shown to predict cardiovascular risk independent of whether the severe obstructive disease is present.

Coronary flow reserve (CFR), is defined as the ratio of maximal coronary blood flow to the resting coronary blood flow. We present a protocol for evaluating CFR in rats via ultrasound, which offers the opportunity to predict cardiovascular risk factors in the absence of obstructive coronary disease.

쥐의 심근 허혈 재관류 후 관상 동맥 흐름 예비의 평가

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...