The authors acknowledge the financial support received from the state budget by the Slovenian Research Agency (program no. P3-0003, project no. J3-6796). The research was conducted in the scope of the EBAM European Associated Laboratory (LEA). This manuscript is the result of the networking efforts of the COST Action TD1104. We wish to thank Alenka Seliskar, Mojca Juvan (Veterinary Faculty, Clinic for Surgery and Small Animals) and Jakob Konda (Institute of Oncology, Ljubljana, Ljubljana, Slovenia) for all of their valuable help.

이 프로토콜은 농림 식품 부장관의 윤리위원회의 승인과 가이드 라인을 준수했다. 이 프로토콜은 80 개 (20) 고양이에 확인되었다. 참고 : ECT 치료는 시스플라틴 또는 블레오 마이신 및 전기 펄스에 종양 결절의 노출 관리로 구성되어 있습니다. 1. 환자 선택 주 : 환자의 선택이 환자가이 치료의 혜택을 적합 여부를 확인하기 위해 개업을 할 수 있습니다. <ol><li> 환자의 역사 (재발의 연령, 품종, 성별, 동시 질병의 존재, 종양 유형, 시간이 종양의 진화, 이전 치료와 그 결과, 재발 및 속도에 대한 일반 데이터를 평가의 성공 여부에 대한 소유자의 기대 치료). </li><li> 환자의 신체 검사를 수행 <ol><li> m을 위해 상세하게 종양을 평가잠재적 침윤성 종양이 제시되면 넓은 마진 (의 크기에 대한 결정을 치료 : 아케 가능한 임상 적 감별 진단과 치료 영역을 결정하기 위해 조직 학적 평가를 위해 세포학 평가 가능한 조직 생검을위한 미세 바늘 흡 수행 , 1cm의 여유가 처리해야 종양, 예를 들어, ≤ 1cm 2R 비만 세포 종양의 동일한 유형의 다른 치료에 대한 권장 사항에 따라 처리 마진, R - 반경). </li><li> 치료 방법을 제조하기 위해, 결절의 개수 및 크기를 평가한다. </li></ol></li><li> 일반 검사 <ol><li> 질병의 준비를하고 확인하기 위해 전체 일반 검사를 구현 : <ol><li> 환자가 만성 감염의 병력이있는 경우 또는 (특정 지역의 역학에 따라) 처리를 배제 할 수있는 다른 동시 질환이없는 경우 혈액 학적 또는 coagulat을 변경할 수있는 질환을 면역이 매개이온 변경 (특정 테스트를 수행) 동물 환자 시스플라틴 감도가 있으면 깊은 진정제 및 / 또는 전신 마취의 시리즈를 견딜 수있는 경우 (표준 투여 량은 60-70 mg의 / m 인 2 체 표면적 / 21 라) 또는 블레오 마이신 또는 이미 400.000 IU / m 2를 초과 블레오 마이신의 누적 복용량을 받았다. </li></ol></li><li> 종양의 종류에 따라 가능한 전이를 확인하기 위해 진단 영상 기술 (복부의 흉부와 초음파 검사의 방사선)를 사용합니다. </li></ol></li></ol> 2. 실험실 분석 <ol><li> 혈액 <ol><li> 생화학 혈액 요소 질소의 패널 (BUN), 크레아티닌, 알라닌 - 아미노 전이 효소 (ALT), 알칼리 포스 파타 아제 (AF)를 결정하기 위해 고급 만성 신장 및 간 질환과 가능한 가장 자주 부신 생물 증후군을 제외 칼슘 분석 완전한 혈액을 수행 EF을 가질 수있다 임상 단계예후에에는 영향을. </li><li> 추가로 특정 혈액 분석을 수행합니다 <ol><li> 환자가 잠재적 응고 능력의 변화를 바꿀 수있는 약을 주어지면, 응고 프로파일을 확인한다. </li><li> 침습성 치료 (바늘 전극)을 사용하는 경우, 혈소판 수를 체크; 혈소판의 수&gt; 100이어야하거나 경우는 &lt;100, 응고 프로필 (PT, APTT, 피브리노겐은 D-이량) 정상이어야한다. </li><li> 종 양성 질환 및 환자의 임상 상태에 따라 특정한 경우에 총 단백질, 알부민, 형광체, 나트륨 (Na), 칼륨 (K), 염소 (CL) 및 리파제 농도를 확인한다. </li></ol></li></ol></li><li> 종양 (들) 조직 학적 분석 <ol><li> 세포진 검사의 진단 이전에 수행 된 경우 조직 학적 분석은 필요하지 않습니다. 조직 학적 등급 중요한 예후 인자 인 특정 유형의 종양의 경우 (예, 비만 세포 종양) 헤 마톡 실린 및 에오신 STA 수행ining 16. 참고 : 생검 (절개 또는 &quot;펀치&quot;)는 동일 방문 기간 중 ECT 전에 할 수있다. 어떤 경우에는, 종양의 유형을 진단하는 좋은 임상이다. 참고 : 경우 완전히 동물의 소유자가 필요에 철저한 토론과 설명을 평가 한 후. 임상 적 결과의 측면에서 ECT에서 예상 할 수있는 것을 ECT가 무엇 소유자에게 설명한다. 전신 마취 나 깊은 진정 작용, 치료의 총 기간, 치료 비용, 재발의 가능성에서 ECT 세션의 수 : 소유자와 치료 과정을 토론한다. 환자가 실제로받을 경우, ECT의 임상 시험에서 환자 포함의 경우 소유자의 서면 동의를 얻습니다. </li></ol></li></ol> 치료 물리 요법 3. 선택 참고 : 개는 시스플라틴 및 블레오 마이신을 사용 ECT의 경우에. 시스플라틴은 고양이에서 금기로 고양이 ECT를 들어, 만 블레오 마이신을 사용합니다. <ol><li&gt; 개별적으로 각각의 종양을 치료. 위치와 각 결절의 크기와 치료 프로토콜을 간략하게 설명하는 결절의 수를 결정합니다. </li><li> 화학식 V = ab²π / 6 ( &quot;a&quot;는 큰 종양 결절의 직경 &#39;B&#39; &quot;A&quot;에 수직 인 종양 결절의 직경) 또는 V = abcπ / 6 ( &quot;사용하여 종양 결절의 부피를 계산 A &quot;,&quot;B &quot;및&quot;C &quot;)은 종양 결절 세 직교하는 직경이다. </li></ol> 운영 양상 4. 선택 <ol><li> 전극의 선택 참고 : 전극 구성이 조직의 전기장 분포에 영향을 미치는 것처럼 최적의 전극 유형을 선택하는 것이 중요합니다. 전극의 두 가지 유형이 사용됩니다 : 판과 바늘 전극. 플레이트 전극 평행 스테인레스 강판이 : 전극 사이의 내측 거리는 종양의 크기 및 전기 펄스 발생기의 용량에 의존한다. 보통 거리 될전극을 트위닝은 6~8mm이다. 니들 전극은 행 (병렬 배열) 또는 육각형 형상으로 배치 될 수있다. 육각형 전극은 중앙 바늘과 원형 배열의 6 바늘을 보유하고 있습니다. 펄스는 원형 배열하고 중앙 하나 사이에 전극 사이에인가된다. 펄스는 전극의 각 쌍 사이에 양방향으로 적용됩니다. 종양 결절의 깊이에 따라 전극의 유형을 선택하고 치료 영역을 원하는 전체에 적절한 전기를 제공합니다. 특정 표적 조직에 따라 전극을 선택합니다. 일반적으로 전극의 두 가지 유형의 치료에 사용될 수있다. </li><li> 선택 및 시스플라틴 또는 블레오 마이신의 준비 참고 : ECT는 시스플라틴 또는 블레오 마이신 또는 블레오 마이신 및 전기 펄스에 종양 결절의 노출의 정맥 내 투여의 종양 내 투여로 구성되어 있습니다. <ol><li> 적절한 세포 증식 억제 및 투여 경로를 선택합니다. </li><li> CI를 녹이고1 ㎎ / ㎖의 농도로 증류수에 분말로서 수득 경우 splatin (CIS-diamminedichloroplatinum II), (달리 약학 준비된 용액이 사용될 수있다). 종양 내 시스플라틴을 제공합니다. </li><li> 3 ㎎ / ㎖의 농도로 생리 식염수에 용해시키고 블레오 종양 내 또는 정맥 내 준다. </li></ol></li><li> 마취 주 : 운영 양상에 따라 (표 1) 깊은 마취 또는 전신 마취가 사용될 수있다. <ol><li> 마취과의 미국 사회 &#39;(ASA) 때문에 가능 부신 생물 증후군의 종양 종류에 따라 신체 상태 분류에 따라 환자를 평가합니다. </li></ol></li><li> 깊은 진정 <ol><li> 메데 토미 (0.08 ㎎ / ㎏) 또는 강아지의 부토 르파 놀 주석산 (0.1 ㎎ / ㎏) 더블 조합 메데 토미 (0.025 ㎎ / ㎏)을 사용하거나 특정 병원에 깊은 진정을위한 표준 절차를 따르십시오. </li></ol></li><li> 전신 마취 <ol> &lt;리&gt; 아세 프로 마진 (0.02 ㎎ / ㎏)과 메타돈 (2 ㎎ / ㎏)와 Premedicate. </li><li> 서른 분 이후 티 오펜 탈 (5 ㎎ / ㎏) 또는 프로포폴 (/ kg 1 mg)을 함께 전신 마취를 유도한다. </li><li> 기관 내 튜브를 배치하고, T-조각 마취 회로를 통해 전달되는 산소의 이소 플루 란으로 마취를 유지한다. </li><li> 마취는 비 스테로이드 진통 약 (예를 들면, 카프로 펜 2-4 ㎎ / ㎏)의 단일 투여 량으로 10 ㎖ / kg / 시간 및 진통의 속도 하트만의 수용액으로 지지체 유체 처리 사용중. </li><li> 마취 동안 건조를 방지하기 위해 눈 연고를 사용합니다. 이 흉골 드러 누움 충분한 의식을 회복 할 때까지 처리 후, 환자를 감독. 약 2 ~ 4 시간 동안 병원에서 환자를 유지합니다. 참고 : 특정 병원에서 전신 마취에 대한 표준 절차도 따라 할 수있다. </li></ol></li><li> 작동 환경 참고 : 인사 운영이 훈련 ECT 사업자 (DVM), 마취 및 보조. <ol><li&gt; ECT 깊은 진정 작용하에 수행되는 모든 구급차 방이나 전신 마취가 허용되는 모든 수술 방을 사용합니다. </li><li> 진정 및 / 또는 전신 마취를 사용 마취의 절차에 따라 모든 필요한 장비. </li><li> ECT 절차를 재료 목록에있는 모든 필요한 자료를 참조하십시오. </li></ol></li><li> 운영자와 주변 직원 보호 참고 : 항 종양 약물에 대한 피부의 물방울 노출은 거의 심각한 문제가 발생하지 않습니다. 시스플라틴 및 블레오 마이신은 그대로 피부를 통해 흡수되지 않습니다. 시스플라틴은 자극의 원인이 될 수 있습니다. 회사 결절 또는 종양을 주입 할 때 시스플라틴 및 블레오 마이신 누설이 발생할 수 있습니다. 바늘 스틱 부상의 경우, 물이 풍부 씻어 표준 의료 행위에 따라 상처를 돌봐. <ol><li> 마스크와 장갑 운영자와 주변 조수를 보호합니다. 시스플라틴 또는 블레오 마이신 솔루션에 피부 노출 된 경우에는 즉시 물로하고 풍부하게 씻어. </li&gt; <li> (있는 경우), 항암제 사용에 대한 현지 규정을 준수 품질 보험 프로그램에 따라 바이오 안전성 조치를 설정합니다. </li></ol></li><li> 전기 충격 발전기 주 : 전기 펄스의 응용은 전기 펄스 발생기로 수행 될 수있다. 일반적으로, 상기 장치는 통합 된 소프트웨어와 미리 설계된 전기 펄스를 선택하기 위해 터치 스크린 인터페이스 구형파 펄스 발생기이다. 그것은 코드에 의해 상기 발전기에 장착 된 펄스 활성화 버튼 휴대용 전극 홀더를 구비한다. 전기 펄스의 전달은 풋 스위치에 의해 제어 될 수있다. 전기 펄스의 발생은 유럽 연합 (EU) 기준을 충족해야합니다 : 2006 / 95 / CE 전자기 호환성 및 준수해야한다 관한 2004년 12월 15일에서 특정 전압 한계 내에서 사용되는 전자 재료에 관한 2006년 12월 12일, 2004 / 108 / CE에서 FDA의 규정. </li><li> 전기 펄스의 적용 절차 참고 : 목전기 펄스의 전자 응용 프로그램은 시스플라틴 또는 블레오 마이신, 또는 블레오 마이신의 정맥 내 투여의 종양 관리를 다음과 같습니다. 종양 내 세포 증식 억제 관리 할 때 누설을 방지하기 위해 천천히 적용해야합니다. 정맥에 대한 관리 cytostatics은 약 30 초 동안 지속 루스에 적용되어야한다. 수성 겔은 피부와 전극 판 중 하나 또는 니들 사이의 양호한 접촉을 달성하기 위해, 이하 불균일 전기장 분포를 달성하기 위해 사용된다. 젤의 전도도는 0.5 내지 1 S / m (17, 18) 사이에 있어야한다. 사용 된 겔 전기 전도성은 0.5 S / m이었다. 상기 플레이트 전극은 종양이 그 사이에 포함되어있는 방식으로 배치되어야한다. 또한, 전기 펄스의인가가 수직 방향으로 두 번 수행해야 전계 나은 분포를 달성한다. 종양의 전극 간 거리보다 크면, 전극의인가 스타해야종양의 중심 방향으로 진행 (안전 마진을 포함) 종양의 마진에서 t. 바늘 전극의 경우에는주의가 모든 바늘의 전계의 적절한 분포를 달성하기 위하여 조직 내에 삽입되도록주의해야한다. 겔의 응용 프로그램은 필요하지 않습니다. 그렇지 않으면, 절차는 플레이트 전극의 경우와 동일하다. <ol><li> 전기 펄스의 응용 분야에서 피부 털을 뽑다 </li><li> 시스플라틴 또는 블레오 마이신을 관리 할 수 ​​있습니다. 세포 증식을 투여되면 정맥 8 분 전기 펄스 전송 시간 간격까지 기다리는 것은 20 분이다. 세포 증식 억제는 종양 내 투여되는 경우 즉시 전기 펄스의 응용 프로그램과 함께 시작 (주사 후 1 분 이내). </li><li> 전기 펄스를 적용하기 전에 면도 한 피부에 수성 젤을 적용합니다. </li><li> 판 전극이 펄스 매개 변수를 사용하십시오 : 전극에 펄스 지속 시간 100 마이크로 초, 진폭 거리 비율 1300 V /cm, 주파수 1 Hz에서 5 kHz에서. 이 수직 방향으로, 1 초 간격으로 네 개의 펄스의 두 열차에 8 단 극성 전기 펄스의 각 실행을 제공합니다. </li><li> 거리의 비율을 1000 V / cm, 주파수 1 또는 5 kHz의를 전극에 펄스 100 마이크로 초 지속 시간, 진폭 : 행 바늘 전극 용 펄스 매개 변수를 사용합니다. 유니 폴라 전기 펄스의 각 실행은 팔 펄스로 구성되어 있습니다. </li><li> 바늘 전극의 경우, 육각형 사용 펄스 파라미터 정렬 100 마이크로 초 펄스 지속 기간; 5 kHz의 주파수 및 펄스의 개수와 바늘의 수에 따라 상기 육각형 전극은 730 V의 고정 된 전압 (1040 V / cm 전극 사이의 거리가 7mm 인 경우)을 갖는다. 7 바늘의 경우 24 펄스이 적용됩니다 </li></ol></li><li> 오염 물질의 처리. <ol><li> 소각을위한 용기에 오염 된 모든 자료 (주사기, 바늘, 유리 병, 거즈, 장갑) 폐기하십시오. </li></ol></li></ol> 참고 : 각 방문에서, 종양 결절이 버니어 캘리퍼스와 촬영으로 측정된다. 이 방문 또한 가능 지역 및 전신 부작용을 평가하기 위해 작용한다. 치료에 대한 반응 &quot;은 고형 종양에 응답 평가 기준&quot;완전한 응답으로서 (RECIST) (19) (CR)의 기준에 기초하여 사주 후 채점 - 적어도 30 % - 결절, 부분 응답 (PR)의 소실을 기준 최소로 고려 대상 병변의 직경의 합이 적어도 20 % 증가 - 기준으로서 기준 합 직경, 진행성 질환 (PD)를 고려하여 목표 병변의 직경의 합을 감소 합이 연구되고, 안정적인 질병 (SD) - 어느 PR을받을 수있는 충분한 수축도 참조 작은 합 직경으로한다 PD 자격을하기에 충분한 증가. 모든 응답 정의는 최소 4 주 기간은 한때 필요반응의 각 유형 alifying. 관측 시간은 첫번째 치료 기간 및 환자의 최종 진단 일 간격으로 계산된다. 각 추적 검사 20 - 가능한 부작용은 수의학 협동 종양학 그룹 독성 규모 (CTCAE VCOG)에 따라 결정된다. <ol><li> 치료 후 약속 1 주일 예약합니다. 이주 치료 후 약속을 예약합니다. 사주 치료 후 약속을 예약합니다. 사주 후 한 달에 한 번 약속을 예약합니다. </li></ol>

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G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrochemotherapy+treatment+of+locally+advanced+and+metastatic+soft+tissue+sarcomas:+results+of+a+non-comparative+phase+II+study.">Electrochemotherapy treatment of locally advanced and metastatic soft tissue sarcomas: results of a non-comparative phase II study.</a> World J Surg. 38 (4), 813-822 (2014).</li><li>Soden, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+application+of+targeted+electrochemotherapy+using+novel+flexible+electrodes+and+low+dose+bleomycin+to+solid+tumours.">Successful application of targeted electrochemotherapy using novel flexible electrodes and low dose bleomycin to solid tumours.</a> Cancer Lett. 232 (2), 300-310 (2006).</li><li>Cemazar, M., Avgustin Ambrozic, J., Pavlin, D., Sersa, G., Poli, A., Krhac Levacic, A., Tesic, N., Lampreht Tratar, U., Rak, M., Tozon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+safety+of+electrochemotherapy+combined+with+peritumoral+IL-12+gene+electrotransfer+of+canine+mast+cell+tumours.">Efficacy and safety of electrochemotherapy combined with peritumoral IL-12 gene electrotransfer of canine mast cell tumours.</a> Vet Comp Oncol. , (2016).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Electrochemotherapy는 개, 고양이에 다른 기본 종양이나 전이에 대한 매우 효과적인 것으로 입증되었다. Electrochemotherapy는 단독 또는 다중 피부 또는 피하 종양 결절 또는 수술 보조제 치료로 치료 목적으로 사용될 수있다. 비만 세포종을 포함한 여러 개 종양에 대한 선택의 표준 치료는 종양의 외과 적 절제이다. 개에서의 비만 세포종의 치료에 ECT에 표준 치료로 수술을 비교하는 연구는 수술 완료 응답의 50 %에 ECT 수술에 동등한 처리 11 시연을 초래하면서 ECT 치료가 완료 응답의 70 %를 초래하는 것이 있었다. ECT의 뚜렷한 항 종양 효과를위한 두 가지 조건이 프로토콜 내에서 중요한 단계는 어느 충족되어야한다. 첫 번째 cytostatics 투여이다. 목표 조직에서의 약물의 존재 ECT 효율을 결정약물 그들을 죽이는 위해 균체 내에 존재할 필요가있다. 종양 내 약물을 주입 할 때, 잘 조직 보존의 부호 조직 미백이다. 또한 투여 후 용액의 일부 누출 종양 내 바늘 또는 상기 ECT 세션 동안 조직 괴사에서 제조 한 관통 구멍이 발생할 수있다. 따라서, 1 밀리그램 / cm 3 (시스플라틴) 또는 3000 UI / cm (3)에 도달 (블레오 마이신) 농도는 다음 이러한 경우 순전히 이론적 수 있지만, 목적은 표적 조직에서 가능한 해결책을 유지하려고하는 것이다. 또한, 전기 펄스가 용액 유지에 기여하는 vasoconstricting 효과를 얻기 위해서는 가능한 신속하게 적용되어야한다. 관리의 두 개의 서로 다른 노선들은 ECT를 사용할 수 있습니다 종양 및 정맥. 정맥 블레오 마이신과 종양 시스플라틴 또는 블레오 마이신 또는과 ECT의 항 종양 효과는 전자 업계 반면 21 대등하다시스플라틴의 정맥 응용 프로그램과 ctrochemotherapy 22 따라서 시스플라틴 만 종양 관리에 사용되는 덜 효과적이다. 시스플라틴 약물의 또 다른 중요한 특징은 시스플라틴은 고양이 23 맹독성으로 도시 된 바와 같이, 고양이에서의 사용이 금지되어있다. 환자가 하나 또는 몇 개의 노쥴이있는 경우, 다음 행 종양 권장된다. 결절의 수는 5 ~ 결절을 초과하는 경우, 정맥 경로를 권장합니다. 블레오 마이신이 높기 때문에 친수성 특성으로하지 않지만, 시스플라틴의 종양 내 주사, 심지어 전기 펄스의인가없이 일부 항 종양 효과를 갖는다. 따라서, 시스플라틴 종양 어플리케이션 개에서 가능하다면 원하는 약물 제이다. 이 때문에 ECT의 효과적인 항 종양 작용을 위해 충족되어야합니다 두 번째 조건의 중요하고 그것은 충분히 높은 전기장과 전체 종양의 범위이다. 세포의 증가를 얻기 위해서는막 permeabilization는 조직 내에 유도 전기장은 소정의 임계 값을 초과해야한다. 조직 내의 전계 분포 따라서 사용되는 전극 어떤 중요한, 전극에 따라 다르다. 병렬 플레이트 전극 배열 안전하게 작은 종양 표면 (24)에 사용될 수있다. 종양이 더 두껍고 더 큰 경우, 육각형 전극이 더 적합하다. 중요한 사실은 전기 펄스의인가가 전체 종양 영역 안전 마진을 포함하여 피복하도록 반복 될 수 있다는 것이다. 전기 펄스 혈관 잠금 원인 때문에, 애플리케이션은 그 중심을 향해, 종양의 에지에서 시작한다. 현재 기술의 한계 고질적 종양의 치료를 방지하는 전극의 이용이다. 그러나, 전극의 구성이 빠르게 개발되어 현재 전극 상이한 세트 F에 사용되는 기술적 특징은또는 특정 행정 긴 바늘 간 (25)에서 대장 종양의 전이에 대한 하나의 전극, 뼈 전이 7, 뇌종양 8 연부 조직 육종 (26), 대장에 대한 endoluminal 전극, 위 및 식도 종양 (27)와 확장 &#39;&#39;우산 &#39;&#39;형 전극 . ECT 일회성 처리에만 효과적 일 수 있지만, 고장 또는 일부 종양 반응의 경우는 개선 된 효능으로 여러 번 반복 될 수있다. ECT는 로컬 절제 치료입니다. 로컬 효과는 지방 종양 제어의 80 %까지 있지만, 치료의 또 다른 제한 사항입니다 원격 전이 7에 띄는 효과없이입니다. 따라서 전신적 반응을 달성하기 위해, ECT는 다른 치료와 결합 될 수있다. 최근에는 면역 molec 다른 의용 전기 적용, 즉 유전자 electrotransfer ECT와 함께 제안ULE의 인터루킨 12 (IL-12)의 항 종양 활성 알려져있다. ECT 및 IL-12 유전자 electrotransfer의 조합은 이미도 원격 전이의 재발을 방지 높은 전체 반응률 (28)와 부작용 및 좋은 지역 종양 안전한 결합 된 치료로 나타났다. 결론적 electrochemotherapy의 장점은 단순성 치료 세션 낮은 증식 억제 량과 사소한 부작용 짧은 기간이다. 또,이 외래에서 수행되고, 따라서, 환자는 병원에 머무를 필요가 없다. 오늘날 시장에 전기 펄스 발생기의 다른 가용성 신뢰성 손실없이 발전기의 가격 저하시켜 electrochemotherapy 더욱 저렴하게에도 선도 증가하고있다. 이 모든 동물 용 의약품이 치료의 폭 넓은 사용으로 이어질 것이다.

ECT 다른 전신적의 종양의 치료를위한 지방 절제 기술이다. 인해 약물의 종양 내 또는 정맥 내 주사 한 후에 종양 주변의 피부에 전기 펄스의 직접 전송에 의한 변경된 세포막 투과성 세포에서 증가 된 약물 축적의 결과, 약물 유발 세포 명으로부터 절제 결과. ECT의 주요 메커니즘은 세포막 electropermeabilization (일렉트로) -1,2-으로 증대 세포 내 약물 축적에 의한 세포 증식 억제 약물의 효과를 향상시킬 수있다. 블레오 마이신 및 시스플라틴, 가난한 막 투과성과 친수성 약물은 다음과 같습니다 전기 두 cytostatics의 증가 약물 흡수됩니다. 때문에 전기 펄스의 응용 프로그램의 사이트에 블레오 마이신 및 시스플라틴의 증가 된 세포 독성에, 낮은 약물 복용은 좋은 항 종양 효과에 필요하고 약물의 결과 없거나 최소한의 전신 부작용은 observ 없습니다 있습니다에디션 3. ECT의 또 다른 특징은 혈관 잠금 장치, 예.에 먼저 결과 종양 antivascular의 효과, 동작을 방해 혈관에서 두 번째 혈액 종양 내 흐름과 그 안에 cytostatics의 결과적으로 보존 및 감소 즉., 내피 세포를 직접 살해 작은 혈관의 이차 종양 세포 사멸 4-6 선도. ECT는 종양 주변에 흘리기 종양 항원에 의한 면역 반응을 이끌어 같이 ECT의 항 종양 효과의 메커니즘은 제 면역계의 활성화이다. 면역계의 참여는 암 (7)의 완전한 박멸 중요하다. ECT는 목표 응답 3의 80 %까지 전시로 ECT 이미 피부 및 피하 종양에 대한 표준 치료로 사용되는 인간의 종양에 큰 잠재력을 보여 주었다. 또한, ECT는 뇌 종양 전이 치료 여러 임상 연구에서 사용 <s&gt; 8 골 9 간 10입니다. 수의학 종양학 임상 연구는 이미 개 11, 12, 고양이 13 마리 (14) 피부 및 피하 종양을 치료하는 경우 최대 80 %의 ECT 치료 결과가 객관적 응답을 오래 지속 것을 증명하고있다. 항 종양 효과는 종양의 크기에 따라 달라집니다 더 큰 종양이 15 일보다 작은 2cm 3 응답보다 종양이. 또한, 개에서의 비만 세포종의 치료에 ECT와 수술을 비교하는 연구는 수술 완료 응답의 50 %에 ECT 수술에 동등한 처리 11 시연을 초래하면서 ECT 치료가 완료 응답의 70 %를 초래하는 것이 있었다. 소유자가 수술에 동의하거나하지 않는 경우 또한, ECT는 특히 이러한 경우에, 수술 적 치료에 고형 종양을 치료하기위한 다른 방법을 나타내는 종양에 주로 인해 분명 여백 소비세 어려운 경우 자신의위치 (예를 들어, 주요 혈관, 항문 지역 등의 머리 나 다리의 종양을, 침투). 본 연구의 목적은 안전하고 적절 개 및 고양이의 피부 및 피하 종양을 치료하기 위해, 전기 펄스의인가와 함께 시스플라틴 블레오 마이신의 사용에 대한 ECT주는 지침의 동작 절차를 정의하는 것이다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="747">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:233px;">Cisplatin Kobi</td>
			<td style="width:187px;">Fresenius Kobi Oncology, Hampshire, Great Britain</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:208px;">citostatic drug</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:233px;">Bleomycin PCH</td>
			<td style="width:187px;">Pharmachemie B.V., Haarlem, Dutch</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>citostatic drug</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:233px;">AquaUltra Basic</td>
			<td style="width:187px;">Ultragel, Budapest, Hungary</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:208px;">water based gel&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;">Electropulsator ELECTROvetS13&#160;</td>
			<td style="width:187px;">Leroy Betatech, Toulouse, France</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>square-wave pulse generator</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

operating procedures of the electrochemotherapy for treatment of tumor in dogs and cats

Electrochemotherapy (ECT)의 다른 전신적의 고형 종양을 치료하기 위해 사용되는 지역의 접근법이다. 그 메커니즘은 &quot;전기&quot;에 의해 세포막 permeabilization에 기초한다. 셀의 &quot;전기&quot;을 달성하기 위하여, 전기 펄스 발생기에 의해 생성되고 전극의 사용으로 표적 조직에 전달된다. 일렉트로 자신의 세포막을 통과 할 수있는 세포로, 세포 증식 억제 약물과 같은 분자를 도입하기 위해 사용되는 물리적 인 방법이다. electrochemotherapy에서, 현재, 시스플라틴 및 블레오 마이신은 임상 적으로 사용됩니다. Electrochemotherapy 항 종양 효과는 송곳니 비만 세포 100 %의 완전한 반응까지, 예를 들어보다 작은 2cm 3 달성되었다 종양 높다. 또한 electrochemotherapy가 작동 종양의 치료에 사용될 수있다. electrochemotherapy의 중요한 특성 중 하나는 한 번 치료만큼 효과적 일 수 있다는만. 그러나, 고장 부분 종양 반응의 경우는 동일하거나 향상된 효과로 수회 반복 될 수있다. Electrochemotherapy 이미 인간과 동물 종양의 다양한 전신적의 피부 및 피하 종양에 대한 표준 치료입니다. 또한, 뿌리 깊은 종양 electrochemotherapy을 이용한 여러 임상 연구가 온 것입니다.

이 사건은 강아지의 눈꺼풀에있는 비만 세포 종양를 제공합니다. 환자는 종양 내 주입 시스플라틴 및 플레이트 전극을 사용하여 8 개의 전기 펄스의인가로 처리 하였다. 종양의 크기가 5 mm였다. 때문에 종양의 위치 전신 마취의 민감한 부분에 사용되었다. 시스플라틴 종양 0.5 ㎖ (0.5 mg)의 크기에 따라 종양 내 주사 하였다. 하나 분간 주입 한 후, 전기 펄스는 8mm 플레이트 전극을 사용하여 적용 하였다. 전기 펄스의 단 하나의 실행이 적용되었다. 충분한 의식을 회복 할 때까지 치료 후 환자는 감독 하였다. 환자 2 시간 이후에 출시되었다. 일주 후 환자는 정기적 인 검진을 위해왔다. 종양이 궤양과 종양 주변이 약간 부어 있었다. 종양은 버니어 캘리퍼스 및 촬영에 의해 측정 하였다. 한 달 treatmen 후t 종양의 추가적인 증거는 언급되지 않았다. 상처가 폐쇄되고 탈모와 cicatrix는 치료 부위에 보였다. 개가 통증 징후를 보이지 않았다 처리 후, 눈꺼풀의 기능은 전체 치료 기간 동안 유지되었고, 처리 후의 미용 효과가 우수하다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/54760/54760fig1.jpg" /> 그림 1. Electrochemotherapy 처리. 처리 (A) 전에 개를 보여주는 그림, 일주 (B) 1 개월 (C) 3 개월 치료 (D) 후. 아래 눈꺼풀의 (A) 비만 세포 종양. 치료 이전에 5mm의 종양의 크기와 2.5 세 독일어 권투 선수 개. (B) 요법 후 종양 궤양 시작하고 전기 천공 영역을 둘러싸는 조직이 약간 팽윤되었다. 두 우리EKS 치료 후의 표면은 종양 부위에 형성된 (도시하지 않음)을 내렸다. (C) 종양의 증거는 언급되지 않았으며 탈모와 cicatrix가 종양 부위에서 관찰되었다 electrochemotherapy 후 한 달. (D) electrochemotherapy 총 재 상피화 후 3 개월이 종양의 사이트에서 발생했습니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54760/54760fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td></td><td colspan="2"> 운영 양상 (OM) </td></tr><tr><td> 번호, 볼륨 및 종양 결절의 위치 </td><td> 에이 </td><td> 비 </td></tr><tr><td> 1-3 결절 &lt;피부와 구강 종양 ㎤의 1 </td><td> √ </td><td></td></tr><tr><td> &gt; 3 결절, 모든 볼륨 피부와 구강 종양이 머리 </td><td></td><td> √ </tD&gt; </tr><tr><td> 임의의 수, 피부, 구강 종양 머리의 볼륨 </td><td></td><td> √ </td></tr></tbody></table> 운영 양상 표 1. 선택은 종양 결절의 크기 및 수를 기반으로 깊은 마취 = OM를했다.; 전신 마취 = OM B. <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> 종양의 화학 요법 약물 / 크기 </td><td> 종양 내 응용 프로그램 </td><td> 정맥 응용 프로그램 </td></tr><tr><td> 시스플라틴 투여 량 (1 ㎎ / ㎖) &lt;1cm 3 </td><td> 1 ㎖ (1 mg)을 / cm 3 종양 </td><td></td></tr><tr><td> 시스플라틴 투여 량 (1 ㎎ / ㎖)&gt; 1cm 3 </td><td> 0.5 ㎖ (0.5 mg)을 / 종양의 cm 3 </td><td></td></tr><tr><td> 블레오 도즈 (3000 IU / ㎖) &lt;1cm 3 </td><td> 0.5 ㎖ (1,500 IU) tumo의 / cm 3아르 자형 </td><td> 300 IU / kg </td></tr><tr><td> 블레오 도즈 (3000 IU / ㎖)&gt; 1cm 3 </td><td> 0.5-1 ㎖ (1,500-3,000 IU) / 종양의 cm 3 </td><td> 300 IU / kg </td></tr></tbody></table> 표 2 개에 투여 경로 및 종양 크기에 따라 cytostatics 적절한 주입량. <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> 종양의 화학 요법 약물 / 크기 </td><td> 종양 내 응용 프로그램 </td><td> 정맥 응용 프로그램 </td></tr><tr><td> 블레오 도즈 (3000 IU / ㎖) &lt;1cm 3 </td><td> 0.5 ㎖ (1,500 IU) 종양 / cm 3 </td><td> 300 IU / kg </td></tr><tr><td> 블레오 도즈 (3000 IU / ㎖)&gt; 1cm 3 </td><td> 0.5-1 ㎖ (1,500 - 3,000 IU) 종양 / cm 3 </td><td> 300 IU / kg </td></tr></tbody></table>표 3 고양이 종양의 크기에 따라 cytostatics의 적절한 주입량.

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Operating Procedures of the Electrochemotherapy for Treatment of Tumor in Dogs and Cats

Electrochemotherapy is the local treatment of solid tumors. The main mechanism is electroporation-mediated permeabilization of the tumor cells' membrane which enables increased internalization of cytostatics like bleomycin and cisplatin. Thus, antitumor effectiveness is potentiated at the site of the application of electric pulses to the tumors.

개와 고양이 종양의 치료에 대한 Electrochemotherapy의 운영 절차

Electrochemotherapy (ECT) is a local approach which is used for treating solid tumors of different histologies. Its mechanism is based on cell membrane ...

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Research

JoVE Journal

Cancer Research

26.3K 조회수.  University of Ljubljana. Electrochemotherapy is the local treatment of solid tumors. The main mechanism is electroporation-mediated permeabilization of the tumor cells' membrane which enables increased internalization of cytostatics like bleomycin and cisplatin. Thus, antitumor effectiveness is potentiated at the site of the application of electric pulses to the tumors. 

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The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the context of a whole organism. Sophisticated techniques to generate genetic mosaics facilitate induction of visually marked, genetically defined clones surrounded by normal tissue. The clones can be analyzed through diverse molecular, cellular and omics approaches. This study describes how to generate fluorescently labeled clonal tumors of varying malignancy in the eye/antennal imaginal discs (EAD) of Drosophila larvae using the Mosaic Analysis with a Repressible Cell Marker (MARCM) technique. It describes procedures how to recover the mosaic EAD and brain from the larvae and how to process them for simultaneous imaging of fluorescent transgenic reporters and antibody staining. To facilitate molecular characterization of the mosaic tissue, we describe a protocol for isolation of total RNA from the EAD. The dissection procedure is suitable to recover EAD and brains from any larval stage. The fixation and staining protocol for imaginal discs works with a number of transgenic reporters and antibodies that recognize Drosophila proteins. The protocol for RNA isolation can be applied to various larval organs, whole larvae, and adult flies. Total RNA can be used for profiling of gene expression changes using candidate or genome-wide approaches. Finally, we detail a method for quantifying invasiveness of the clonal tumors. Although this method has limited use, its underlying concept is broadly applicable to other quantitative studies where cognitive bias must be avoided.

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

This protocol demonstrates how to generate fluorescently marked, genetically defined clonal tumors in the Drosophila eye/antennal imaginal discs (EAD). It describes how to dissect the EAD and brain from the third instar larvae and how to process them to visualize and quantify gene expression changes and tumor invasiveness.

그만큼<em&gt; 초파리</em&gt; 가상적인 디스크 종양 모델 : 유전 모자이크를 사용하여 유전자 발현 및 종양 침윤의 시각화 및 정량화

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

연구

암 연구학

In Vivo EPR Assessment of pH, pO2, Redox Status, and Concentrations of Phosphate and Glutathione in the Tumor Microenvironment

This protocol demonstrates the capability of low-field electron paramagnetic resonance (EPR)-based techniques in combination with functional paramagnetic probes to provide quantitative information on the chemical tumor microenvironment (TME), including pO2, pH, redox status, concentrations of interstitial inorganic phosphate (Pi), and intracellular glutathione (GSH). In particular, an application of a recently developed soluble multifunctional trityl probe provides unsurpassed opportunity for in vivo concurrent measurements of pH, pO2 and Pi in Extracellular space (HOPE probe). The measurements of three parameters using a single probe allow for their correlation analyses independent of probe distribution and time of the measurements.

In Vivo EPR Assessment of pH, pO2, Redox Status, and Concentrations of Phosphate and Glutathione in the Tumor Microenvironment

Low-field (L-band, 1.2 GHz) electron paramagnetic resonance using soluble nitroxyl and trityl probes is demonstrated for assessment of physiologically important parameters in the tumor microenvironment in mouse models of breast cancer.

Vivo에서 PH, pO2, 산화 환 원 상태, 고 농도의 인산 염 및 종양 Microenvironment에 티의 EPR 평가

This protocol demonstrates the capability of low-field electron paramagnetic resonance (EPR)-based techniques in combination with functional paramagnetic ...

Enrichment and Characterization of the Tumor Immune and Non-immune Microenvironments in Established Subcutaneous Murine Tumors

The tumor immune microenvironment (TIME) has recently been recognized as a critical mediator of treatment response in solid tumors, especially for immunotherapies. Recent clinical advances in immunotherapy highlight the need for reproducible methods to accurately and thoroughly characterize the tumor and its associated immune infiltrate. Tumor enzymatic digestion and flow cytometric analysis allow broad characterization of numerous immune cell subsets and phenotypes; however, depth of analysis is often limited by fluorophore restrictions on panel design and the need to acquire large tumor samples to observe rare immune populations of interest. Thus, we have developed an effective and high throughput method for separating and enriching the tumor immune infiltrate from the non-immune tumor components. The described tumor digestion and centrifugal density-based separation technique allows separate characterization of tumor and tumor immune infiltrate fractions and preserves cellular viability, and thus, provides a broad characterization of the tumor immunologic state. This method was used to characterize the extensive spatial immune heterogeneity in solid tumors, which further demonstrates the need for consistent whole tumor immunologic profiling techniques. Overall, this method provides an effective and adaptable technique for the immunologic characterization of subcutaneous solid murine tumors; as such, this tool can be used to better characterize the tumoral immunologic features and in the preclinical evaluation of novel immunotherapeutic strategies.

Here we describe a method to separate and enrich components of the tumor immune and non-immune microenvironment in established subcutaneous tumors. This technique allows for the separate analysis of tumor immune infiltrate and non-immune tumor fractions which can permit comprehensive characterization of the tumor immune microenvironment.

농축 및 설립된 피하 Murine 종양에서 종양 면역 및 비 면역 Microenvironments의 특성

The tumor immune microenvironment (TIME) has recently been recognized as a critical mediator of treatment response in solid tumors, especially for ...

Evaluation of the Feasibility, Safety, and Accuracy of an Intraoperative High-intensity Focused Ultrasound Device for Treating Liver Metastases

Today, the only potentially curative option in patients with colorectal liver metastases is surgery. However, liver resection is feasible in less than 20% of patients. Surgery has been widely used in association with radiofrequency, cryotherapy, or microwaves to expand the number of treatments performed with a curative intent. Nevertheless, several limitations have been documented when using these techniques (i.e., a traumatic puncture of the parenchyma, a limited size of lesions, and an inability to monitor the treatment in real-time).High-intensity focused ultrasound (HIFU) technology can achieve precise ablations of biological tissues without incisions or radiation. Current HIFU devices are based on an extracorporeal approach with limited access to the liver. We have developed a HIFU device designed for intraoperative use. The use of a toroidal transducer enables an ablation rate (10 cm3&#183;min-1) higher than any other treatment and is independent of perfusion.
The feasibility, safety, and accuracy of intraoperative HIFU ablation were evaluated during an ablate-and-resect prospective study. This clinical phase I and IIa study was performed in patients undergoing hepatectomy for liver metastases. The HIFU treatment was performed on healthy tissue scheduled for resection.Liver metastases measuring less than 20 mm will be targeted during phase IIb (currently ongoing). This set-up allows the real-time evaluation of HIFU ablation while protecting participating patients from any adverse effects related to this new technique.
Fifteen patients were included in phase I&#8211;IIa and 30 HIFU ablations were safely created within 40 s and with a precision of 1&#8211;2 mm. The average dimensions of the HIFU ablations were 27.5 x 21.0 mm2, corresponding to a volume of approximately 7.5 cm3. The aim of the ongoing phase IIb is to ablate metastases of less than 20 mm in diameter with a 5 mm margin.

Here, we present an ablate-and-resect prospective study to evaluate the feasibility, safety, and accuracy of intraoperative high-intensity focused ultrasound ablation in patients undergoing hepatectomy for liver metastases.

간 전이 치료를 위한 초음파 장치 타당성, 안전, 그리고 자가 고 강도의 정확도의 평가 초점을 맞춘

Today, the only potentially curative option in patients with colorectal liver metastases is surgery. However, liver resection is feasible in less than 20% ...

Digital Polymerase Chain Reaction Assay for the Genetic Variation in a Sporadic Familial Adenomatous Polyposis Patient Using the Chip-in-a-tube Format

The quantitative analysis of human genetic variation is crucial for understanding the molecular characteristics of serious medical conditions, such as tumors. Because digital polymerase chain reactions (PCR) enable the precise quantification of DNA copy number variants, they are becoming an essential tool for detecting rare genetic variations, such as drug-resistant mutations. It is expected that molecular diagnoses using digital PCR (dPCR) will be available in clinical practice in the near future; thus, how to efficiently conduct dPCR with human genetic material is a hot topic. Here, we introduce a method to detect Adenomatous polyposis coli (APC) somatic mosaicism using dPCR with the chip-in-a-tube format, which allows eight dPCR reactions to be simultaneously conducted. Care should be taken when filling and sealing the reaction mixture on the chips. This article demonstrates how to avoid the over- and underestimation of positive partitions. Furthermore, we present a simple procedure for collecting the dPCR product from the partitions on the chips, which can then be used to confirm the specific amplification. We hope that this methods report will help promote the dPCR with the chip-in-a-tube method in genetic research.

Digital polymerase chain reaction (PCR) is a useful tool for the high-sensitivity detection of single nucleotide variants and DNA copy number variants. Here, we demonstrate key considerations for measuring rare variants in the human genome using digital PCR with the chip-in-a-tube format.

튜브에 칩 형식을 사용 하 여 산발적 인 가족 용 대 환자에 있는 유전 변이 대 한 디지털 중 합 효소 연쇄 반응 분석 결과

The quantitative analysis of human genetic variation is crucial for understanding the molecular characteristics of serious medical conditions, such as ...

The Clinical Application of Tumor Treating Fields Therapy in Glioblastoma

Glioblastoma is the most common and lethal form of brain cancer, with a median survival of 15 months after diagnosis and a 5 year survival rate of only 5% with current standard of care. Tumors often recur within 9 months following initial surgery, radiation and chemotherapy, at which point treatment options become limited. This highlights the pressing need for the development of better therapeutics to prolong survival and increase the quality of life for these patients.
Tumor Treating Fields (TTFields) therapy was developed to take advantage of the effect of low frequency alternating electrical fields on cells for cancer therapy. TTFields have been demonstrated to disrupt cells during mitosis and slow tumor growth. There is also growing evidence that they act through stimulating immune responses within exposed tumors. The advantages of TTFields therapy include its noninvasive approach and increased quality of life compared to other treatment modalities such as cytotoxic chemotherapies. The Food and Drug Administration approved TTFields therapy for the treatment of recurrent glioblastoma in 2011 and for newly diagnosed glioblastoma in 2015. We report on the effects of TTFields during mitosis, the results of electric fields modeling, and proper transducer array placement. Our protocol outlines the clinical application of TTFields on a patient post-surgery, using the second-generation device.

Glioblastoma is the most common and aggressive primary brain malignancy in adults, with most tumors recurring after initial treatment. Tumor Treating Fields (TTFields) therapy is the newest treatment modality for glioblastoma. Here, we describe the proper application of TTFields-transducer arrays on patients and discuss theory and aspects of treatment.

종양 세포종 필드 치료 치료의 임상 적용

Glioblastoma is the most common and lethal form of brain cancer, with a median survival of 15 months after diagnosis and a 5 year survival rate of only 5% ...

Intramucosal Inoculation of Squamous Cell Carcinoma Cells in Mice for Tumor Immune Profiling and Treatment Response Assessment

Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a debilitating and deadly disease with a high prevalence of recurrence and treatment failure. To develop better therapeutic strategies, understanding tumor microenvironmental factors that contribute to the treatment resistance is important. A major impediment to understanding disease mechanisms and improving therapy has been a lack of murine cell lines that resemble the aggressive and metastatic nature of human HNSCCs. Furthermore, a majority of murine models employ subcutaneous implantations of tumors which lack important physiological features of the head and neck region, including high vascular density, extensive lymphatic vasculature, and resident mucosal flora. The purpose of this study is to develop and characterize an orthotopic model of HNSCC. We employ two genetically distinct murine cell lines and established tumors in the buccal mucosa of mice. We optimize collagenase-based tumor digestion methods for the optimal recovery of single cells from established tumors. The data presented here show that mice develop highly vascularized tumors that metastasize to regional lymph nodes. Single-cell multiparametric mass cytometry analysis shows the presence of diverse immune populations with myeloid cells representing the majority of all immune cells. The model proposed in this study has applications in cancer biology, tumor immunology, and preclinical development of novel therapeutics. The resemblance of the orthotopic model to clinical features of human disease will provide a tool for enhanced translation and improved patient outcomes.

Here we present a reproducible method for developing an orthotopic murine model of head and neck squamous cell carcinoma. Tumors demonstrate clinically relevant histopathological features of the disease, including necrosis, poor differentiation, nodal metastases, and immune infiltration. Tumor-bearing mice develop clinically relevant symptoms including dysphagia, jaw displacement, and weight loss.

종양 면역 프로 파일링에 대 한 쥐 및 치료 반응 평가에 편평 세포 암 종 세포의 intramucosal 접종

Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a debilitating and deadly disease with a high prevalence of recurrence and treatment failure. To develop ...

Detection and Monitoring of Tumor Associated Circulating DNA in Patient Biofluids

Complications associated with upfront and repeat surgical tissue sampling present the need for minimally invasive platforms capable of molecular sub-classification and temporal monitoring of tumor response to therapy. Here, we describe our dPCR-based method for the detection of tumor somatic mutations in cell free DNA (cfDNA), readily available in&#160;patient biofluids. Although limited in the number of mutations that can be tested for in each assay, this method provides a high level of sensitivity and specificity. Monitoring of mutation abundance, as calculated by MAF, allows for the evaluation of tumor response to therapy, thereby providing a much-needed supplement to radiographic imaging.

Here, we present a protocol to detect tumor somatic mutations in circulating DNA present in patient biological fluids (biofluids). Our droplet digital polymerase chain reaction (dPCR)-based method enables quantification of the tumor mutation allelic frequency (MAF), facilitating a minimally invasive complement to diagnosis and temporal monitoring of tumor response.

환자 생체 유체에서 종양 관련 순환 DNA의 검출 및 모니터링

Complications associated with upfront and repeat surgical tissue sampling present the need for minimally invasive platforms capable of molecular ...

Perfusion and Inflation of the Mouse Lung for Tumor Histology

The ability to evaluate lung histology is critical for the fields of lung cancer research and cancer metastasis. It is equally important to perform necropsies rapidly and efficiently from studies without sacrificing the quality of the tissues procured. The goal of this protocol is to present a method to rapidly perfuse, inflate, and fix mouse lungs for downstream histological analysis. This method does not standardize lung inflation; thus, it does not require any special procedures or equipment and instead simply instills fixative directly through the trachea following perfusion through the heart. This allows for sufficient estimation of tumor size, histology, and scoring. This also allows for the collection of frozen tissue prior to lung tissue fixation. This method is limited in that it does not allow for later morphometric quantification of the lung; however, it is more than sufficient for lung tumor analysis from genetically engineered mouse models (GEMMs), syngeneic models, as well as xenograft tumor and metastasis studies.

The purpose of this method is to present a simple and efficient method for the perfusion, inflation, and fixation of mouse lungs for the examination of lung tumor pathology and evaluation of metastases to the lung.

종양 연고학을 위한 마우스 폐의 관류 및 인플레이션

The ability to evaluate lung histology is critical for the fields of lung cancer research and cancer metastasis. It is equally important to perform ...

Generation of Zebrafish Larval Xenografts and Tumor Behavior Analysis

Zebrafish larval xenografts are being widely used for cancer research to perform in vivo and real-time studies of human cancer. The possibility of rapidly visualizing the response to anti-cancer therapies (chemo, radiotherapy, and biologicals), angiogenesis and metastasis with single cell resolution, places the zebrafish xenograft model as a top choice to develop preclinical studies.

The zebrafish larval xenograft assay presents several experimental advantages compared to other models, but probably the most striking is the reduction of size scale and consequently time. This reduction of scale allows single cell imaging, the use of a relatively low number of human cells (compatible with biopsies), medium-high-throughput drug screenings, but most importantly enables a significant reduction of the time of the assay. All these advantages make the zebrafish xenograft assay extremely attractive for future personalized medicine applications.

Many zebrafish xenograft protocols have been developed with a wide diversity of human tumors; however, a general and standardized protocol to efficiently generate zebrafish larval xenografts is still lacking. Here we provide a step-by-step protocol, with tips to generate xenografts and guidelines for tumor behavior analysis, whole-mount immunofluorescence, and confocal imaging quantification.

Here, we provide a step-by-step protocol, with tips to generate xenografts and guidelines for tumor behavior analysis, whole-mount immunofluorescence, and confocal imaging quantification.

제브라피시 애벌레 제노이식 및 종양 행동 분석의 생성

Zebrafish larval xenografts are being widely used for cancer research to perform in vivo and real-time studies of human cancer. The possibility of rapidly ...