이 기술은 반구 측량화를 위한 지역 간 전기 생리학의 몇몇 기본적인 속성, 연결, 방향성 및 결합을 검토하기 위하여 이용될 수 있습니다. 전기 생리학적 측정은 동물, 신경 활동에서 평가하는 민감하고 효과적인 방법입니다. 이 프로토콜은 전기 신호의 동기화에 더 나은 방법을 제공합니다.
알츠하이머 병 병 발생에 가능한 변경 된 뇌 측면화의 기본 메커니즘의 이해, 알 츠 하이 머 병을 위한 잠재적인 바이오 마커에 새로운 통찰력을 제공할 수 있습니다. 수술 전에, 마우스의 마취의 깊이를 확인, 집게와 꼬리 또는 발가락 핀치를 수행하여. 다음으로, 마우스를 스테레오탁스 장치에 배치하고 머리를 고정시하십시오.
양눈에 연고를 바르면 촉촉하게 유지하십시오. 그런 다음 머리를 면도하고 부위를 살균합니다. 면도 영역 의 중간에 12 ~ 15 밀리미터의 작은 절개를합니다.
집게를 사용하여 두피를 미드라인에서 부드럽게 당깁니다. 그 후 피부를 부드럽게 분리하고 잔류 조직을 제거합니다. 과산화수소 코팅 면 봉오리를 사용하여 두개골을 청소하십시오.
스테레오 현미경하에서, 두개골의 왼쪽과 오른쪽 양쪽에 1 ~ 1.5 밀리미터 반경의 두 개의 작은 구멍을 드릴, M2 영역에 기록 미세 전조의 삽입을 허용. 텅스텐 바늘로 듀라 마터를 조심스럽게 제거하십시오. 그런 다음 0.5 개의 어금니 나트륨염화로 채워진 두 개의 별도의 기록 마이크로 전극을 기계 마이크로 조작기로 60도 각도로 구멍에 삽입하십시오.
LFP 레코딩의 경우 왼쪽 및 오른쪽 유리 전극을 M2 좌표로 천천히 낮춥습니다. 품질 관리를 위해 차동 증폭기사용으로 각 전극의 저항성을 테스트합니다. 다음으로, 레코딩 프로세스를 0.1 hertz 하이 패스와 1000 헤르츠 로우 패스로 설정하여 1000배 증폭됩니다.
디지털화된 원시 LFP 데이터를 최소 60초 동안 안정된 상태로 수집하고, 마우스가 초당 2회 호흡시 마취하에 고르게 호흡합니다. 기록 후, 천천히 뇌에서 전극을 올립니다. 분석 소프트웨어를 사용하여 데이터를 저장하고 오프라인으로 분석합니다.
상호 상관 관계 분석을 수행하려면 분석 소프트웨어에서 분석을 클릭한 다음 파형 상관 관계를 클릭하고 데이터를 가져옵니다. 다음으로, 하나의 파형 채널 신호를 첫 번째 채널로 할당하고 다른 하나는 참조로 지정합니다. 너비를 두 개로 설정하고 간격띄우기는 하나로 설정합니다.
그런 다음 시작 시간과 종료 시간을 선택하여 두 LFP의 지속 시간을 100초로 설정합니다. 그런 다음 프로세스 버튼을 눌러 상호 상관 관계 분석을 수행합니다. 파일을 클릭한 다음 내보낸 다음 결과 팝업 차트에 해당하는 상관 관계 간 결과를 텍스트 형식으로 저장합니다.
그런 다음 0 plus 및 마이너스 01초에서 범위에 있는 시간 지연시 상관 관계 값을 제거한 다음 나머지 상호 상관 관계 데이터를 처리합니다. 일관성 분석을 수행하려면 분석 소프트웨어에서 데이터를 실행합니다. 다음으로 두 LFP 신호를 첫 번째 및 두 번째 파형 채널로 정렬한 다음 블록 크기 값을 4096으로 설정합니다.
블록 크기는 실제 변환에 사용되는 데이터 포인트 수를 의미합니다. 블록 크기가 클수록 주파수 해상도가 향상됩니다. 점선을 수동으로 이동하여 두 채널의 신호시 정확도가 동일한 기간으로 설정되도록 합니다.
추가 영역 버튼을 눌러 영역을 로드하고 일관성 분석을 수행합니다. 그런 다음 파일을 클릭하고 저장하여 결과 팝업 차트에 해당하는 일관성 결과를 텍스트 형식으로 저장합니다. 초기 알츠하이머 병리학이 반구 측량의 용량을 손상시키는지 확인하기 위해 세포 외 LFP는 APP / PS1 마우스 및 야생 유형 제어의 왼쪽 및 오른쪽 M2에 기록되었으며 교차 상관 관계를 분석했습니다.
야생형 마우스에서, 결과는 양수 시간 지연시 좌우 LFP 사이의 평균 상관관계가 부정적인 시간 지연시와 크게 다르다는 것을 보여주었으며, 야생형 대조군의 M2 영역에서 반구형 비대칭의 존재를 암시한다. 이에 비해 APP/PS1 마우스의 왼쪽 및 오른쪽 LFP는 시간 영역에서 더 높은 동기화된 것으로 나타났으며, 이는 왼쪽과 오른쪽 M2 사이의 비대칭 감소를 시사합니다. 감마 진동은 LFP로부터 필터링된 다음 일관성 분석을 수행하여 감마 주파수 범위에서 전기 신호의 유사성을 측정했다. 그 결과 APP/PS1 마우스에서 왼쪽과 오른쪽 M2 사이의 감마 일관성이 야생형 마우스보다 현저히 높았으며, 이는 더 높은 동기화를 나타내고, 결과적으로 APP/PS1 마우스에서 왼쪽과 오른쪽 M2 사이의 측면화를 감소시키는 것으로 나타났다.
우레탄은 독성과 발암성이므로, 취급시 안전 규정을 준수하시기 바랍니다. 안정적인 LfP가 기록되도록 하기 위해 매시간 마취의 깊이를 테스트하는 것이 매우 중요합니다. 기록 및 분석 프로세스는 다른 뇌 경로에 적용 될 수있다, 특히 자유롭게 움직이는 동물에서 멀티 채널 녹화를위한 시스템이없는 실험실.
