옥스포드 대학의 오픈 액세스 자금을 제공하는 웰컴 트러스트 (Wellcome Trust). 로버트 집사는 Wellcome 트러스트 부여 WT084655MA에 의해 자금 옥스포드 OXION 그룹의 구성원입니다.

1. 기구 모든 테스트 들어, 부드러운 패드 표면은 떨어져 모든 쥐를 완화하는 장치의 바닥에 배치됩니다. NB는이 장치의 어떤 부분을 모호하게하지 위해 도면에 표시되지 않습니다. 쥐의 수백의 테스트 기간 동안, 정상 및 돌연변이 모두, 우리는 일반적으로 30-50센티미터 높은 등의 기기에서 떨어지는로 인한 부상을 관찰 적이 없다. 또한, 각 시험 마우스 사이에 장비를 청소하고 소독해야합니다. 1.1 로타로드 거기에 시장에이 장치의 여러 상용 버전이 있지만, 일부는 모터 불균형을 (오히려 지구력 이상) 감지하는 적절한 속도로 가속하는 데 실패와 같은 단점이 있습니다. 또 다른 일반적인 오류는 막대 떨어 뜨리거나 뛰어 경향이 쥐의 결과로, 기초 위에서 충분히 높지 않을 것입니다. 그림 1의 로타로드는 디자인되었다옥스퍼드 약학 대학의 부서의 기술 섹션으로 저자. 막대 30cm 기기의 기초 위에 지원되는 직경 3cm이다. 표면은 생쥐 (그림 2) 효율적으로 그립 할 수 있도록, 세로 축을 따라 평행 한 능선의 일련의 깔쭉 깔쭉하게된다. NB 능선의 깊이는 중요한 내용이고 마우스는 좋은 그립을 얻을 수없는 경우 테스트가 매우 어렵게 될 것이다 반면에, 그립이 너무 좋은 경우 마우스를 수동적으로 잡고 막대의 주위에 &quot;수레 바퀴&quot;것입니다 그것합니다. &quot;아마추어 로타로드 메이커&quot;의 경우는 쥐에 대한 적절한 크기의 마디 나무 dowelling 상업적으로 사용할 수 있다는 것을 알고하는 것이 유용 할 수 있습니다, 그것은 물론 사용하기 전에 좋은 방수 코팅제로 치료해야합니다. 시작 속도는 4 회전, 20 회전 / 분에 가속 속도로 조정됩니다. 최대 속도는 40 RPM입니다. 두 막대를 떠나는 마우스를 방지 플랜지. 그들은 직경 30 센티미터 (이 있습니다아마)은 20cm로 줄일 수 있습니다. 그들의 분리는 6cm (최대)로 설정되어 있지만 그들은로드에 돌아 경향이 경우 하위 어른 생쥐 작은 조정해야 할 수도 있습니다. 1.2 배 가로 막대 (그림 3) 바는 황동으로 만들어진, 38cm 길이, 양쪽 끝에 나무 지원 기둥에 의해 벤치 표면 위 49cm를 개최 하였다. 열은 무거운 나무베이스에 고정되어 있습니다. 세 개의 막대 직경 사용할 수 : 2, 4, 6mm. 2mm 바는 우리가 사용하는 표준입니다, 그러나 많은 마우스는 이것에 최대 점수에 도달합니다. 따라서 큰 직경의 막대는 마우스이 너무 잘 잡을 수 없기 때문에, 테스트를 수정하는 시도에 포함되었습니다. 1.3 정적로드 다양한 두께 (35 ROD (1), 28, 22, 15, 9 (막대 5) mm 직경)의 다섯 나무 은못 또는 막대는 각 60cm가 긴 막대가 수평으로 돌출되도록 실험실 선반 G-클램프에 의해 고정되어 에 공간 (그림 4). 끝벤치 근처 막대의 마크에게 결승선을 나타 내기 위해 끝에서 10cm가 있습니다. 바닥에서 막대의 높이는 60 cm입니다. 짧고 덜 자세한 검사가 필요한 경우에만 최대, 최소 및 중간 막대를 사용하십시오. 반 Dellen 등. 14 생쥐에서 헌팅턴의 질병의 진행을 평가하는 단 하나의 막대를 사용했습니다. 1.4 병렬 바 직경 두 개의 평행 한 철근 길이 1 m와 4mm는 자신의 끝 (그림 5)에서 나무 지원 기둥에 의해 떨어져 30mm를 (자신 센터)에 고정되어 있습니다. 막대는 바닥에서 60cm입니다. 2. 순서 모든 테스트를 위해, 그들은 완전히 깨어 있도록하기 위해, 테스트를하기 전에 실험 실내 50-20 분에 마우스를 가져옵니다. 일반적으로 근육의 강도와 흥분의 정상 수준으로 복귀 복구 할 수 있도록하기 위해, 각각의 모터 테스트 후 홈 케이지에 반환하여 마우스를 놓습니다. &lt;/ P&gt; 2.1 로타로드 4 회전, 가속 속도 20 RPM / min의 시작 속도 로타로드를 설정합니다. 꼬리 마우스를 잡고, 그리고 회전 막대에 배치, 그것은 똑바로 숙박 앞으로 걸어 가지도록 회전 방향에서 멀리 직면. 이 마우스가 수평 아래 45 °의 각도로 막대쪽으로 가져 가면 할 수있는 가장 쉬운 방법입니다, 위에서 마우스를 낮추기 위해 시도하는 것은 그것의 뒷 다리를 확산하고 플랜지의 가장자리를 잡고 발생합니다. 거의 막대를 터치하면 빨리 쉽게 막대를 잡을 수 있도록 단지 앞으로 상사와 막대 위의 마우스를 놓습니다. (아마 더 쉽고 안정적​​) 기술은 얇은 (10 ~ 15 ㎜) 맞춤을 사용하는 것입니다. 한 손으로 마우스를 잡고, 긴 축에 평행 다보에 대한립니다. 다보는 그것을이 해제되면 로타로드 그립에 더 많은 시간을 제공하기 위해 30 °에 대한 마우스의 머리를 아래쪽으로 기울어있다. 일 사이에 마우스와 맞춤을 낮출E는 로타로드의 플랜지, 한 번 회전 막대에 막대를 잡고 앞으로 걸어 나갈 것이다, 이는 마우스에서 멀리 노크를 아래로 당깁니다. 10에서 초 막대에 마우스를 배치 한 후 (마우스가 앞으로 직면만큼 : 그렇지 않으면, 그것은 가속을 시작하기 전에 앞으로 얼굴을하지 때까지 기다려) 가속을 시작하고, 마우스가 탈락되는 속도를 확인합니다. 그것은 10 초 전에 떨어지면, 가을의 시간을 기록하고 10 초 지점 이후 처음으로 하락 속도를 기록, 총 세 번, 다시 시도하십시오. 그러나 기록해서는 안 실험자에 의해 가난한 게재로 인한 5 초 전에 떨어진다. 가을에 평균 속도 자료이며, 오히려 최대 속도를 사용하는 것보다,이 마우스는 성능을 지원할 것이라고 가정 실패한 실행하는 동안 수신 여분의 연습 수정합니다. 따라서 10 초 전에 떨어지는 마우스를 한 번 누른 다음 12 RPM까지 두 번째 점수 (4 +12) / 2 = 8 회전에 유지됩니다. 두 번 누른 다음 떨어지는 마우스10 RPM 점수 (4 +4 +10) / 3 = 6 회전을 위해에 머물고. 마우스가 10 그립에 실패하면 초 세 번 그것을 4 회전의 점수를 할당합니다. 한 가지 문제는 쥐들이 수동적으로 재주 라운드, 대부분의 결국 떨어져 있지만, 그래서 때로는 앞으로 걸어 중지하고 단단히 대신 막대를 잡을 것입니다. 따라서 최초의 역전이 발생하는 경우에도 속도를 유의하는 것이 유용 할 수 있습니다. 가능한 해결책은 큰 직경 이하의 뚜렷한 능선과 막대를 사용하는 수 있습니다. 2.2 수평 막대 마우스가 좁은 2mm 모음을 파악하는 데 가장 쉬운 방법을 발견하면,이 하나를 먼저 테스트하는 것이 좋습니다. 꼬리 마우스를 잡고, 장치의 앞 벤치에 배치, 20cm (이것은이 막대에 수직 정렬)에 대해 빠르게 뒤로 밀어, 급속 제기하고 함께 중앙 지점에서 수평 막대를 파악하자 그 forepaws 만, 동시에 stopclock을 시작, 꼬리를 놓습니다. 이 C효율적으로 달성하기 어려운, 꼬리가 갑자기 해제되면 일부 마우스 그립보다, 그들은 여전히​​ 지원 느끼면 그립에 실패 할 수 있습니다. 하나의 앞발이 열을 만지는 때까지 마우스를 막대의 끝 열 중 하나, 또는 시간에 도달하기 전에 기준 포인트는 바에서 가을이다. 최대 시험 시간 (마감 시간) 30 초입니다. 마우스가 제대로 처음 바를 파악하는 데 실패하고이 실험의 기술에 기인하는 것으로 나타나는 경우, 오히려 마우스보다, 다시 시도 (다른 하나 또는 두 개의 마우스를 테스트하는 동안 짧은 휴식 후)이 가을에 기록하지 않습니다. 마우스가 5 초 전에 하락이 분명히 실험에 의한 불량 게재로 인한없는 경우&gt; 5 초 점수를 얻기 위해 시도에서 세 번까지 반복합니다. &gt; 5 초 두 번째 시도에서 세 번째 재판을하지 않으면. 데이텀으로 최고 점수를보십시오. 만 반복 1&gt; 5 초 점수 자체를 지원하기 위해 실패하는 마우스. 트리플 바 버전을 사용하는 경우 첫 번째 2mm 줄에 마우스 점수 5 경우, 다른 하나 또는 두 개의 마우스를 테스트하는 동안, 그것은 그 짧은 휴식 기간 후, 두꺼운 막대 테스트 할 수 있습니다. 4, 6 개 mm 막대에 대한 채점 시스템은 2mm 줄과 동일하며, 최종 점수는 누적 합계입니다. 따라서 마우스가 2mm 줄에 점수 5 만 5 +3 = 8 13 초 점수를 후 4mm 바에서 떨어진다. 2.2.1 수평 막대를 채점 : 처음 두 간격은 마우스가 처음 그들이 떨어질 가능성이있는 작업을 마스터 한 번으로 마지막 두 미만 : 1-5 초 = 1 사이에 떨어지는 6-10 초 사이에 떨어지는 = 2 11-20 초 사이에 떨어지는 = 3 21-30 초 사이에 떨어지는 = 4 30 후 떨어지는 초 = 5 = 5 떨어지지 않고 바 지원에 하나 앞발을 배치 4, 6mm 막대의 선택적 사용과 같은 NB는 우리가 아직 광범위한없는 우리의 프로토콜에 새로운 추가그들과 함께 경험한다. 2.3 정적로드 넓은로드 (끝에서 코 끝 하나 머리의 길이가 이상적입니다)의 끝에서 마우스를 놓습니다. 오리엔테이션 시간 (선반으로 시작 위치에서 180 °를 동쪽을 향하게하는 데 걸리는 시간)와 소요 시간 (선반 끝 (막대 선반 끝에서 10 센티미터 마크 이상 코)로 여행하는 데 걸리는 시간 두 조치를 취할 것. 방향이 수직 체류 마우스에 의존, 그것은 거꾸로 돌고 막대 아래의 미약 한 경우, 임의로 (통계 목적) 120 초 최대 오리엔테이션 점수를 할당합니다. 그것은 작은 막대에 테스트하지 않습니다, 또한 전송 시간은 분명히 더 나은 거꾸로 매달려하는 동안 천이 하나 이상의 조정됩니다 수직 천이 마우스와 같은 최대 값이됩니다. , 오리엔테이션 후, 마우스로 떨어지거나 그것의에서 테스트하지 않는 최대 시험 시간 (임의로 120 초에서 설정)에 도달하면1MW보다 작은 PV 시스템로드. 통계 목적으로 떨어지는 할당 생쥐는 그들이 다시 좁은 막대에서 떨어질 거라고 생각 될 때, 특정 막대에 대한 이후의 사람에 대한 120이 할당됩니다. 마우스를 거꾸로 켜지면, 또한이 이벤트를 주목, 성공적인 대중 교통뿐만 아니라 방향을 위해 그것은 막대에 수직으로 유지해야합니다. 그렇지 않으면 최고 점수를 할당합니다. 이 막대 나 폭포의 끝에 도달 한 후 마우스를 제거하십시오. 하나의 막대에 테스트 한 후 다른 마우스를 테스트하는 동안 휴식을 홈 케이지에 마우스를 반환합니다. 그 다음 작은 크기의 막대에 배치하고 다시 같은 방법으로 테스트합니다. 마우스가 5 초 이상을 위해에 빠진 후로드를 떨어질 경우 테스트를 중지합니다. 그것은 초 교체하고 세 가지 시험의 최대 또 다른 시도를 (5 초 내에 떨어지는 실험에 의한 결함이 게재로 인해 수 등), 허용하고, 최상의 결과를 사용하여보다 5 떨어졌다합니다. 2.4 병렬 바 t에서 마우스를 놓습니다바의 그것의 종축에 수직과 두 개의 막대 그는 중앙, 두 앞발 하나의 줄에 있어야합니다, 다른 줄에 두 뒷다리 발. 점수는 정적로드에 대한 유사합니다. 그 이후에 최종 지원 중 하나에 도달 할 때까지 마우스가 90 시작 위치 °, 시간을 방향을 설정 할 때까지 걸리는 시간이 두 조치를 취할 것. 마우스를 거꾸로 켜지면, 또한이 이벤트를 기록합니다. 테스트 방향과 교통이 거꾸로 돌리지 않고 달성해야 정적로드는, 그렇지 않으면 최대 시간이 할당됩니다. 합리적으로 건강한 마우스보다 5 초에 빠지게하는 것은 드문, 이런 일이 일어날 않는 경우 아마도 가난한두기 때문이다. 따라서 결과를 버리고 마우스를 다시 테스트합니다.

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저자는 공개 할 관심 없음 충돌이 없습니다.

동작은 동작에 의해 매니페스트를 만들고, 행동은 신체의 조정 등의 모터 기술을 필요로합니다. 동물 행동의 역사에서 최초의 실험 중 하나는 콜린 스튜어트, 미국 11 클라크 대학에서 박사 학생에 의해 수행되었다. 그는 드럼에 넣어하여 쥐의 활동을 측정하고 설정 횟수를 계산. 이러한 초기 장치는 아마 로타로드에서 동물의 외부에 산책하는 반면 쥐, 드럼 내부의 쥐에 의해 주도 된의 움직임이었다 스튜어트 장치에 불구하고, 바퀴와 현재 사용 로타로드 테스트를 실행의 전신이었다 하는 회전 드럼 또는 막대 모터 구동됩니다. 던햄와 미야 (1957) 7에서 사용하는 원래의 막대 집합 속도를했지만, 요즘 가속 버전 (존스와 로버트 1968) 9 이용하실 수 있습니다. 설정 한 속도 로타로드의 단점은 가난한 조정과 일부 동물에서 떨어질 것입니다시작에 머물 않는 사람들을위한 반면에, 테스트는 곧보다는 자체 조정보다 지구력 측정을 시작합니다. 파라 메트릭 해석을 배제하기 위해 같은 데이터 포인트의 결과 바이 모달 분포는 충분히 이상 할 수 있습니다. 가속 로타로드를 사용하는 경우, 그것은 같은 10 초에 머물고으로 설정 기준이 달성 된 경우에만 가속화 경우 특히 데이터 분포는 가우스가 될 가능성이 높습니다. 이 모터의 피로 성능에 중요한 역할을하지 않도록 가속 속도는 조정될 수있다; 마우스 현저히 로타로드에 단지 2-3 분 시간이 지나면 피로 될 가능성이 있습니다. &quot;문자열 테스트&quot;1 &quot;, 옷걸이 테스트&quot;또는 가로 막대는 앞발 힘과 조화를 측정합니다. 인용 두 별명은 개발을 참조하십시오, 원래 문자열이 사용되었지만, 저자는 성능이 종종 옷걸이, 따라서 미래의 실험자은 금속 막대를 사용하여, 문자열이 얼마나 긴장에 아주 많이 의존 언급. 우리는 막대를 꽉 쥐는 쥐의 능력의 직경에 반비례 것을 발견하고, 표준으로 2mm 막대를 사용했습니다. 무게 테스트 ( &quot;마우스의 강도를 측정&quot;조브 프로토콜 참조) 주전자 모피 / 스케일 콜렉터의 매우 미세한 와이어가 강한 동물들이 자신의 체중보다 더 들어 올릴 수있는 그런 좋은 그립을 확보 할 수 있습니다. 시험의 감도를 향상 그러나, 큰 직경의 수평 막대를 사용하면 장점이 될 수 있으며, 단 2 밀리미터 바를 가장 일반적인 C57BL / 6 마​​우스는 천장의 성능에 도달합니다. 따라서 우리는 최근 3 바 장치를 채택, 그들은 지원하는 컬럼의 꼭대기를 잘라 노치에 맞로 막대를 쉽게 교환 할 수 있습니다. 그들은 단지 지원이 약간 (그림 3 참조) (장궁과 문자열 등) 함께 그려 노치에 맞로 바는 긴장 (특히 중요 2mm 바 딱딱한 만들려면)에서 개최됩니다. 정적로드 또는 빔이 자주 사용되었다조정을 측정 할 수 있지만 추가 동기는 항상로드를 통과하는 동물을 설득하기 위해 사용되었다. 그들은 같은 집에 케이지, 밝은 빛에서 피난처, 또는 음식 (그들은 배고픈 만들어진 경우) 등 원하는 목표에 도달 할 수있는 수평 빔을 협상. 그러나 시험의 유형을 조사하는 과정에서, 나는 쥐가 자발적으로 캔틸레버로드의 &quot;열기&quot;끝을 둘 때 돌아서, 그리고 그들은 지원 끝에 도달 할 때까지 그것을 통과 할 것을 발견했습니다. 이 기술은 지원 끝에 도달하려고하는 높은 막대의 끝 부분에 배치되는 것 마우스의 타고난 반응으로 훈련 (이전에 언급 한 테스트 변종 필요)에 대한 필요성을 제거합니다. 이, 물론, 동기 변화가 성능에 영향을 미칠 수있는 문제를 제거하지 않는 한 항상이 유형의 프로 시저와 가능성이다. 골판지 터널은 현재 많은 가정 케이지 환경 농축에 사용되지만 그 disad현재 상황에서 유리한 동물이 불가피 로타로드에 균형을하는 데 필요한 기술을 흉내 낸, 그들의 긴 축을 흔들 수있는 실린더 밸런싱 실시 될 것입니다. 따라서 가정 케이지 농축은 잠재적 행동 표현형을 마스크 할 수 있습니다, 예 농축가 14만큼 헌팅턴의 질병 표현형의 개량이다. 또한 동물들은 높은 정적 빔을 따라 걷는 경우와 같이,이 터널의 긴 축을 따라 걷는다. 그러므로 나는 높은 평행봉의 쌍을 지어 한 바 있고 다른 hindpaws, 그들은 이전에 발생하지 못했을 상황에 forepaws와 중간에 마우스를 두었다. 쥐 시험을 통과 똑바로 유지하면서 병렬 막대의 끝 지원에 도달했다. 다소 유사한 장치는 스크래피에 의한 모터 장애 13의 발전을 평가하기 위해 마우스 케이지에 배치 평행봉의 연속이었다. 우리는 지금 수백을 테스트 한옥스포드에서 모터 작동을 위해 마우스. 이러한 약리 대리인, 또는 인간에서 조직의 수동 전송 (플라즈마) 등 다양한 치료를 받았지만, 대부분의 유전자 동물을 수정했다. 어떤 동물은 더 많은 조정 작업, 기타 그 반대의 경우도 마찬가지보다 강도 저하되었다. 어떤 마우스보다 같은 정적로드 및 병렬 바, 다른 반대 정적 기판에보다 로타로드에 손상되었습니다. 다른 치료와 돌연변이 차동 생쥐의 운동 기능에 영향을 미칠 수있는 방법을 특성화하는 방법에 대해 설명 본 기사와 &quot;생쥐의 강도를 측정&quot;첨부 조브 프로토콜) 그래서. 외에도 로타로드에서 여기에 설명 된 장치는 간단 저렴하고 운동 능력을 테스트하는 전문되지 실험실에 특히 적합합니다. 미세 규모의 보행 분석, 좁은 통로 시스템은 잉크 목욕을 한 후 종이 걸어 마우스를 설득 같은 이전 방법보다 훨씬 더 복잡한 시스템이지만, expensiv입니다장치의 전자 조각. 이러한 테스트의 모든 근육의 분명 최소한의 정도가 마우스의 사지를 사용하여 간단하게 필요한 있지만, 오히려 강도보다 조정을 측정하도록 설계되어 있습니다. 강도 평가의 경우, 반전 화면 프로 10보다 등급 측정이 필요한 경우, 가중치 테스트 또는 자동화 (조브 프로토콜 &quot;생쥐의 측정 강도&quot;의 설명 참조) 해당하는 바 풀, 더 적합합니다, 또는. 예외는 성공적인 성능을 위해 힘과 조화를 모두 필요로하는 수평 막대 테스트입니다.

measuring motor coordination in mice

마우스는 점점 더 크게 선택 행동의 동물로 쥐를 교체, 행동 신경 과학에서 사용되고있다. 같은 감성이나인지 등의 행동 양상을 평가하기 전에, 그러나, 그것은 예를 들어, 돌연변이 또는 lesioned 마우스 모터 기능과 같은 평가를 할 수 있는지 여부를 확인하는 것이 중요합니다. 이러한 모리스 물 미로 같은 미로 작업을 필요로하는 강도와 조정,에 성능은 물론 오히려인지, 장애보다, 모터에 의해 마우스에서 손상 될 수 있으므로 선택적으로 전자에서 후자를 해부하는 것이 필수적입니다. NMDA 길항제 물 미로의 성능이 악영향을 위해 표시되었습니다에 의해 예를 들어, 감각 손상이 발생했습니다. 모터 조정은 전통적으로 동물이 그것의 긴 축에 대한 회전 수평 막대에 배치되는, 로타로드 검사로 마우스 및 쥐에서 평가되었으며, 동물 똑바로 유지하고 떨어지지을 전달 걸어해야합니다.두 세트 속도와 로타로드의 가속 버전을 사용할 수 있습니다. 다른 세 개의 시험은 고정 장치에이 글 (가로 막대, 정적로드 및 병렬 바) 모든 측정의 조정을 설명했다. 수평 막대는 특히 바로 앞 발에 쥐가 처음 그립 막대로 앞발의 적절한 성능을위한 힘이 필요합니다. 성인 쥐와 같은 정적로드 및 병렬 바 (개인 관찰)와 같은 시험에서 잘 수행하지 않습니다, 그들은 덜 쥐보다 조정이 나타납니다. 난 단지 그러나 수컷 쥐를 테스트해야하고, 남성의 마우스는 일반적으로 덜 잘 조율 여성보다 같습니다. , 라틴어 이름, 뮤스 musculus, 전적으로 적절한 것 쥐보다 무게 비율 : 마우스는 높은 강도를 가지고있는 것 같습니다. 로타로드는 발 고장 시험 12 패션쇼 (Noldus) 15 장치의 변화는 일반적으로 쥐 모터 조정을 평가하는 데 사용됩니다.

예상 결과 정적로드는 원래 함께 또는 자신의 홈 케이지 14 환경 농축하지 않고, 돌연변이 생쥐에서 헌팅턴의 질병의 진행 상황을 모니터링하는 데 사용되었다. 농축 프로그램은 극적으로, 신경 손상의 일반적인 기호를 걸쇠로 걸는 뒷발의 발병 지연 평행 한 막대에 모터 기능 장애의 발병을 지연. 스크래피에 감염된 생쥐는 적어도 주 19 8 (이전 테스트가 수행되지 않았습니다)에서 18 주에서 로타로드 테스트에서 16 주 후 주입의 수평 막대 성능 저하, 정적 봉을 보였다. KATP 채널의 subunit Kir6.2 KO 마우스는 고정 막대와 가로 막대에 장애가 있지만 로타로드 4 하였다. 해마 병변은 운동 능력 5의 측정에 영향을 미치지 않습니다,하지만 129S2/Sv 마우스는 C57BL / 로타로드 및 정적로드 3 6 변형에 상대적으로 손상되었다. C57BL/10 마우스는 C57BL / 6 쥐 6보다 더 모터의 성능을 가지고,하지만하지 129S2/Sv 마우스와 같은 정도. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/2609/2609fig1.jpg" /> 그림 1. 로타로드. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/2609/2609fig2.jpg" /> 그림 2. 로타로드의 마디로드의 세부 사항. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/2609/2609fig3.jpg" /> 그림 3. 트리플 수평 막대의 홈에서 개최 된 바는 기본 2mm 하나입니다;. 4 6mm 바있다 (이해를 돕기위한 목적으로 만) 그 아래에 압정으로 고정. 실제로, 한 번에 하나의 줄은 노치 지원으로 홈을 판다. <imG ALT = &quot;그림 4&quot;SRC = &quot;/ files/ftp_upload/2609/2609fig4.jpg&quot;/&gt; 그림 4. 정적로드를 통과하는 마우스. <img alt="그림 5" src="/files/ftp_upload/2609/2609fig5.jpg" /> 그림 5. 병렬 막대에 마우스. 패딩은 데모 용으로 만 생략되었습니다.

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Measuring Motor Coordination in Mice

프로토콜은 두도 설립 모터 조정 작업 가속화 로타로드 및 수평 막대, 최근 옥스퍼드에서 개발 된 두 개의 테스트, 정적로드 및 병렬 막대를 위해 제공됩니다. 이 테스트는 모터 잠재적으로 자신의 권리에 대한 관심의 손상뿐만 아니라, 행동의 다른 지역의 시험에서 가능한 변수 인를 검색 할 수 있습니다.

마우스에 모터 조정을 측정

Mice are increasingly being used in behavioral neuroscience, largely replacing rats as the behaviorist's animal of choice. Before aspects of behavior such ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

99.4K 조회수.  University of Oxford. 프로토콜은 두도 설립 모터 조정 작업 가속화 로타로드 및 수평 막대, 최근 옥스퍼드에서 개발 된 두 개의 테스트, 정적로드 및 병렬 막대를 위해 제공됩니다. 이 테스트는 모터 잠재적으로 자신의 권리에 대한 관심의 손상뿐만 아니라, 행동의 다른 지역의 시험에서 가능한 변수 인를 검색 할 수 있습니다.

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Assessment of Motor Balance and Coordination in Mice using the Balance Beam

Brain injury, genetic manipulations, and pharmacological treatments can result in alterations of motor skills in mice. Fine motor coordination and balance can be assessed by the beam walking assay. The goal of this test is for the mouse to stay upright and walk across an elevated narrow beam to a safe platform. This test takes place over 3 consecutive days: 2 days of training and 1 day of testing. Performance on the beam is quantified by measuring the time it takes for the mouse to traverse the beam and the number of paw slips that occur in the process. Here we report the protocol used in our laboratory, and representative results from a cohort of C57BL/6 mice. This task is particularly useful for detecting subtle deficits in motor skills and balance that may not be detected by other motor tests, such as the Rotarod.

Deficits in fine motor coordination can be assessed with the balance beam test. Performance on the beam is quantified by the speed at which the beam is traversed and the number of times the mouse slips on the beam.

마우스에 모터 밸런스 조정의 평가는 밸런스 빔을 사용하여

Brain injury, genetic manipulations, and pharmacological treatments can result in alterations of motor skills in mice.  Fine motor coordination and ...

연구

신경과학

Measuring Circadian and Acute Light Responses in Mice using Wheel Running Activity

Circadian rhythms are physiological functions that cycle over a period of approximately 24 hours (circadian- circa: approximate and diem: day)1, 2. They are responsible for timing our sleep/wake cycles and hormone secretion. Since this timing is not precisely 24-hours, it is synchronized to the solar day by light input. This is accomplished via photic input from the retina to the suprachiasmatic nucleus (SCN) which serves as the master pacemaker synchronizing peripheral clocks in other regions of the brain and peripheral tissues to the environmental light dark cycle3-7. The alignment of rhythms to this environmental light dark cycle organizes particular physiological events to the correct temporal niche, which is crucial for survival8. For example, mice sleep during the day and are active at night. This ability to consolidate activity to either the light or dark portion of the day is referred to as circadian photoentrainment and requires light input to the circadian clock9. Activity of mice at night is robust particularly in the presence of a running wheel. Measuring this behavior is a minimally invasive method that can be used to evaluate the functionality of the circadian system as well as light input to this system. Methods that will covered here are used to examine the circadian clock, light input to this system, as well as the direct influence of light on wheel running behavior.

This article will review methods that can be used to determine circadian function and light responsiveness in mice.

휠 실행 활동을 사용하여 마우스의 Circadian 및 급성 라이트 응답 측정

Circadian rhythms are physiological functions that cycle over a period of approximately 24 hours (circadian- circa: approximate and diem: day)1, 2.  They ...

Extracellularly Identifying Motor Neurons for a Muscle Motor Pool in Aplysia californica

In animals with large identified neurons (e.g. mollusks), analysis of motor pools is done using intracellular techniques1,2,3,4. Recently, we developed a technique to extracellularly stimulate and record individual neurons in Aplysia californica5. We now describe a protocol for using this technique to uniquely identify and characterize motor neurons within a motor pool.
This extracellular technique has advantages. First, extracellular electrodes can stimulate and record neurons through the sheath5, so it does not need to be removed. Thus, neurons will be healthier in extracellular experiments than in intracellular ones. Second, if ganglia are rotated by appropriate pinning of the sheath, extracellular electrodes can access neurons on both sides of the ganglion, which makes it easier and more efficient to identify multiple neurons in the same preparation. Third, extracellular electrodes do not need to penetrate cells, and thus can be easily moved back and forth among neurons, causing less damage to them. This is especially useful when one tries to record multiple neurons during repeating motor patterns that may only persist for minutes. Fourth, extracellular electrodes are more flexible than intracellular ones during muscle movements. Intracellular electrodes may pull out and damage neurons during muscle contractions. In contrast, since extracellular electrodes are gently pressed onto the sheath above neurons, they usually stay above the same neuron during muscle contractions, and thus can be used in more intact preparations.
To uniquely identify motor neurons for a motor pool (in particular, the I1/I3 muscle in Aplysia) using extracellular electrodes, one can use features that do not require intracellular measurements as criteria: soma size and location, axonal projection, and muscle innervation4,6,7. For the particular motor pool used to illustrate the technique, we recorded from buccal nerves 2 and 3 to measure axonal projections, and measured the contraction forces of the I1/I3 muscle to determine the pattern of muscle innervation for the individual motor neurons.
We demonstrate the complete process of first identifying motor neurons using muscle innervation, then characterizing their timing during motor patterns, creating a simplified diagnostic method for rapid identification. The simplified and more rapid diagnostic method is superior for more intact preparations, e.g. in the suspended buccal mass preparation8 or in vivo9. This process can also be applied in other motor pools10,11,12 in Aplysia or in other animal systems2,3,13,14.

Extracellularly Identifying Motor Neurons for a Muscle Motor Pool in Aplysia californica

In animals with large identified neurons (e.g. mollusks), analysis of motor pools is done using intracellular techniques1,2,3,4. Recently, we developed a technique to extracellularly stimulate and record individual neurons in Aplysia californica5. We now describe a protocol for using this technique to uniquely identify and characterize motor neurons within a motor pool.

Extracellularly의 근육 모터 풀에 모터 뉴런을 확인<em&gt; Aplysia californica</em

In animals with large  identified neurons (e.g. mollusks), analysis of motor pools is done using  intracellular techniques1,2,3,4. Recently,  we developed ...

Measuring Changes in Tactile Sensitivity in the Hind Paw of Mice Using an Electronic von Frey Apparatus

Measuring inflammation-induced changes in thresholds of hind paw withdrawal from mechanical pressure is a useful technique to assess changes in pain perception in rodents. Withdrawal thresholds can be measured first at baseline and then following drug, venom, injury, allergen,&#160;or otherwise evoked inflammation by applying an accurate force on very specific areas of the skin. An electronic von Frey apparatus allows precise assessment of mouse hind paw withdrawal thresholds that are not limited by the available filament sizes in contrast to classical von Frey measurements. The ease and rapidity of measurements allow for incorporation of assessment of tactile sensitivity outcomes in diverse models of rapid-onset inflammatory and neuropathic pain as multiple measurements can be taken within a short time period. Experimental measurements for individual rodent subjects can be internally controlled against individual baseline responses and exclusion criteria easily established to standardize baseline responses within and across experimental groups. Thus, measurements using an electronic von Frey apparatus represent a useful modification of the well-established classical von Frey filament-based assays for rodent mechanical allodynia that may also be applied to other nonhuman mammalian models.

Electronic von Frey measurements are an effective and improved alternative to classical von Frey filaments, as they allow rapid and precise measurement of changes in rodent mechanical withdrawal thresholds to continuously applied pressure stimuli before and after an inflammatory event.

Measuring inflammation-induced changes in thresholds of hind paw withdrawal from mechanical pressure is a useful technique to assess changes in pain ...

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

Presynaptic inhibition is one of the most powerful inhibitory mechanisms in the spinal cord. The underlying physiological mechanism is a depolarization of primary afferent fibers mediated by GABAergic axo-axonal synapses (primary afferent depolarization). The strength of primary afferent depolarization can be measured by recording of volume-conducted potentials at the dorsal root (dorsal root potentials, DRP). Pathological changes of presynaptic inhibition are crucial in the abnormal central processing of certain pain conditions and in some disorders of motor hyperexcitability. Here, we describe a method of recording DRP in vivo in mice. The preparation of spinal cord dorsal roots in the anesthetized animal and the recording procedure using suction electrodes are explained. This method allows measuring GABAergic DRP and thereby estimating spinal presynaptic inhibition in the living mouse. In combination with transgenic mouse models, DRP recording may serve as a powerful tool to investigate disease-associated spinal pathophysiology. In vivo recording has several advantages compared to ex vivo isolated spinal cord preparations, e.g. the possibility of simultaneous recording or manipulation of supraspinal networks and induction of DRP by stimulation of peripheral nerves.

Measuring Spinal Presynaptic Inhibition in Mice By Dorsal Root Potential Recording In Vivo

GABAergic presynaptic inhibition is a powerful inhibitory mechanism in the spinal cord important for motor and sensory signal integration in spinal cord networks. Underlying primary afferent depolarization can be measured by recording of dorsal root potentials (DRP). Here we demonstrate a method of in vivo recording of DRP in mice.

배근 잠재적 기록하여 생쥐의 척수 시냅스 억제를 측정<em&gt; 생체</em

Presynaptic inhibition is one of the most powerful inhibitory mechanisms in the spinal cord. The underlying physiological mechanism is a depolarization of ...

The Neuromuscular Junction: Measuring Synapse Size, Fragmentation and Changes in Synaptic Protein Density Using Confocal Fluorescence Microscopy

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. Structural changes at the NMJ can result in neurotransmission failure, resulting in weakness, atrophy and even death of the muscle fiber. Many studies have investigated how genetic modifications or disease can alter the structure of the mouse NMJ. Unfortunately, it can be difficult to directly compare findings from these studies because they often employed different parameters and analytical methods. Three protocols are described here. The first uses maximum intensity projection confocal images to measure the area of acetylcholine receptor (AChR)-rich postsynaptic membrane domains at the endplate and the area of synaptic vesicle staining in the overlying presynaptic nerve terminal. The second protocol compares the relative intensities of immunostaining for synaptic proteins in the postsynaptic membrane. The third protocol uses Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) to detect changes in the packing of postsynaptic AChRs at the endplate. The protocols have been developed and refined over a series of studies. Factors that influence the quality and consistency of results are discussed and normative data are provided for NMJs in healthy young adult mice.

The neuromuscular junction (NMJ) is altered in a variety of conditions that can sometimes culminate in synaptic failure. This report describes fluorescence microscope-based methods to quantify such structural changes.

신경 근육 접합 : 측정 시냅스 크기, 공 초점 형광 현미경을 사용하여 시냅스 단백질 농도의 분열 및 변경

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. ...

Polygraphic Recording Procedure for Measuring Sleep in Mice

Recording of the epidural electroencephalogram (EEG) and electromyogram (EMG) in small animals, like mice and rats, has been pivotal to study the homeodynamics and circuitry of sleep-wake regulation. In many laboratories, a cable-based sleep recording system is used to monitor the EEG and EMG in freely behaving mice in combination with computer software for automatic scoring of the vigilance states on the basis of power spectrum analysis of EEG data. A description of this system is detailed herein. Steel screws are implanted over the frontal cortical area and the parietal area of 1 hemisphere for monitoring EEG signals. In addition, EMG activity is monitored by the bilateral placement of wires in both neck muscles. Non-rapid eye movement (Non-REM; NREM) sleep is characterized by large, slow brain waves with delta activity below 4 Hz in the EEG, whereas a shift from low-frequency delta activity to a rapid low-voltage EEG in the theta range between 6 and 10 Hz can be observed at the transition from NREM to REM sleep. By contrast, wakefulness is identified by low- to moderate-voltage brain waves in the EEG trace and significant EMG activity.

The recording of electroencephalogram (EEG) and electromyogram (EMG) in freely behaving mice is a critical step to correlate behavior and physiology with sleep and wakefulness. The experimental protocol described herein provides a cable-based system for acquiring EEG and EMG recordings in mice.

Recording of the epidural electroencephalogram (EEG) and electromyogram (EMG) in small animals, like mice and rats, has been pivotal to study the ...

Retrograde Neuroanatomical Tracing of Phrenic Motor Neurons in Mice

Phrenic motor neurons are cervical motor neurons originating from C3 to C6 levels in most mammalian species. Axonal projections converge into phrenic nerves innervating the respiratory diaphragm. In spinal cord slices, phrenic motor neurons cannot be identified from other motor neurons on morphological or biochemical criteria. We provide the description of procedures for visualizing phrenic motor neuron cell bodies in mice, following intrapleural injections of cholera toxin subunit beta (CTB) conjugated to a fluorophore. This fluorescent neuroanatomical tracer has the ability to be caught up at the diaphragm neuromuscular junction, be carried retrogradely along the phrenic axons and reach the phrenic cell bodies. Two methodological approaches of intrapleural CTB delivery are compared: transdiaphragmatic versus transthoracic injections. Both approaches are successful and result in similar number of CTB-labeled phrenic motor neurons. In conclusion, these techniques can be applied to visualize or quantify the phrenic motor neurons in various experimental studies such as those focused on the diaphragm-phrenic circuitry.

Here, we describe a protocol for identifying phrenic motor neurons in mice after intrapleural delivery of fluorophore conjugated cholera toxin subunit beta. Two techniques are compared to inject the pleural cavity: transdiaphragmatic versus transthoracic approaches.

마우스에 인할지 모터 신경의 퇴행 성 신경 해부학 추적

Phrenic motor neurons are cervical motor neurons originating from C3 to C6 levels in most mammalian species. Axonal projections converge into phrenic ...

Evaluation of Hemisphere Lateralization with Bilateral Local Field Potential Recording in Secondary Motor Cortex of Mice

This article demonstrates complete, detailed procedures for both in vivo bilateral recording and analysis of local field potential (LFP) in the cortical areas of mice, which are useful for evaluating possible laterality deficits, as well as for assessing brain connectivity and coupling of neural network activities in rodents. The pathological mechanisms underlying Alzheimer&#39;s disease (AD), a common neurodegenerative disease, remain largely unknown. Altered brain laterality has been demonstrated in aging people, but whether or not abnormal lateralization is one of the early signs of AD has not been determined. To investigate this, we recorded bilateral LFPs in 3-5-month-old AD model mice, APP/PS1, together with littermate wild type (WT) controls. The LFPs of the left and right secondary motor cortex (M2), specifically in the gamma band, were more synchronized in APP/PS1 mice than in WT controls, suggesting a declined hemispheric asymmetry of bilateral M2 in this AD mouse model. Notably, the recording and data analysis processes are flexible and easy to carry out, and can also be applied to other brain pathways when conducting experiments that focus on neuronal circuits.

We present in vivo electrophysiological recording of the local field potential (LFP) in bilateral secondary motor cortex (M2) of mice, which can be applied to evaluate hemisphere lateralization. The study revealed altered levels of synchronization between the left and right M2 in APP/PS1 mice compared to WT controls.

마우스의 보조 모터 피질에서 양측 지역 필드 전위 기록을 가진 반구 측면화의 평가

This article demonstrates complete, detailed procedures for both in vivo bilateral recording and analysis of local field potential (LFP) in the cortical ...

3D Kinematic Analysis for the Functional Evaluation in the Rat Model of Sciatic Nerve Crush Injury

Compared to the Sciatic Functional Index (SFI), kinematic analysis is a more reliable and sensitive method for performing functional evaluations of sciatic nerve injury rodent models. In this protocol, we describe a novel kinematic analysis method that uses a three-dimensional (3D) motion capture apparatus for functional evaluations using a rat sciatic nerve crush injury model. First, the rat is familiarized with treadmill walking. Markers are then attached to the designated bone landmarks and the rat is made to walk on the treadmill at the desired speed. Meanwhile, the posterior limb movements of the rat are recorded using four cameras. Depending on the software used, marker tracings are created using both automatic and manual modes and the desired data are produced after subtle adjustments. This method of kinematic analysis, which uses a 3D motion capture apparatus, offers numerous advantages, including superior precision and accuracy. Many more parameters can be investigated during the comprehensive functional evaluations. This method has several shortcomings that require consideration: The system is expensive, can be complicated to operate, and may produce data deviations due to skin shifting. Nevertheless, kinematic analysis using a 3D motion capture apparatus is useful for performing functional anterior and posterior limb evaluations. In the future, this method may become increasingly useful for generating accurate assessments of various traumas and diseases.

We introduce a kinematic analysis method that uses a three-dimensional motion capture apparatus containing four cameras and data processing software for performing functional evaluations during fundamental research involving rodent models.

Sciatic 신경 호감 상해의 쥐 모형에 있는 기능 평가를 위한 3D 운동학 분석

Compared to the Sciatic Functional Index (SFI), kinematic analysis is a more reliable and sensitive method for performing functional evaluations of ...