세르코스포린-포토카탈루즈 [4+1]- 및 [4+2]-온화한 조건하에서 아졸케네스의 탄화

이 프로토콜은 미생물 발효를 통해 자궁 경막포린의 생합성에 사용될 수 있으며, 이는 녹색 및 온화한 조건에서 질소 함유 이종주기를 합성하는 데 사용될 수 있다. 이 기술의 장점은 미생물 발효 방법과 유기 합성 공정 사이의 다리로 사용될 수 있다는 것입니다. 질소 함유 이종주기는 생체 활동이 있는 많은 천연 제품에 중요한 골격일 뿐만 아니라 많은 농약 및 약물에 대한 합성 전구체입니다.

필립 Icyishaka와 절차를 시연 하는 얀 장 될 것입니다., 내 실험실에서 기술자. 알파-헤일로-N-아실-히드라존 제제의 경우 케톤 10밀리머와 벤조일 하이드라진 10밀리미터를 플라스크에 넣습니다. 플라스크에 메탄올 20밀리리터를 넣고 플라스크에 스티어 바와 고무 스토퍼를 장착합니다.

250마이크로리터의 염산을 혼합물에 천천히 주입하고 실온에서 플라스크를 공기 중으로 배양합니다. 1 시간 후, 여과에 의해 반응 후 침전물을 수집하고 아세톤으로 제품을 씻어. 그런 다음 침전물을 진공으로 건조시키고 NMR에 의해 제품을 식별합니다.

자궁 경부를 준비하기 위해 S-7 배지 1 리터로 3 리터 쉐이크 플라스크를 충전하고 자궁 경유 생성 변형을 쉐이크 플라스크에 접종하십시오. 분당 135회전, 2주 동안 섭씨 25도의 빛 조건에서 혼합물을 배양한다. 인큐베이션의 끝에서, 진공 펌프를 사용하여 발효 국물을 진공 여과로 받치고, 3개의 50밀리리터 부피로 펠릿과 상체를 별도로 추출한다.

냉동고 건조기에서 건조를 위해 펠릿을 수집하고 유기 단계를 결합합니다. 유기 상판을 물로 2~3회 세척하고 용액을 진공 상태에서 농축합니다. 잔류물을 분석 메탄올로 재해석하고 18마이크로미터의 유기 미세 여과 막을 통해 제품을 필터링합니다.

그런 다음 세바덱스 LH-20 컬럼으로 자궁 경내포린을 정화하고 표준 프로토콜에 따라 HPLC에 의해 제품을 식별합니다. 1, 2, 3-티아디아졸을 준비하기 위해 알파-헤일로-N-아실-히드라존의 전체 부피, 자궁포린 1밀리그램, 테트부산화물 27밀리그램, 39밀리그램의 칼륨 티오시아네이트를 10mm 슈렌크 튜브에 넣고 고무를 교반한다. 굴에 건조 아세토나이트 2밀리리터를 주입하기 전에 슐렌크 튜브를 산소로 세 번 제거합니다.

튜브를 바닥에서 16시간 동안 5와트, 파란색 LED로 피사체를 한 후 포화 나트륨 염화나트륨 용액 15밀리리터로 4회 세척합니다. 마지막 세척 후, 수성 상을 결합하고, 에틸 아세테이트의 4 개의 15 밀리리터 볼륨과 수성 위상을 다시 추출합니다. 유기 상을 결합하고, 무수성 나트륨 황산염과 건조.

진공 증발기로 용매를 제거합니다. 얇은 층 크로마토그래피로 제품을 정화하려면 실리카 플레이트에 직선으로 그려서 용존 제품을 라인에 추가합니다. 실리카 플레이트를 크로마토그래피 실린더에 10 대 1 PE로 EA에 넣습니다. 그 후, DCM에서 실리카를 용해.

여과에 의해 제품에서 실리카를 제거하고 회전 증발기로 DCM을 건조시십시오. 그런 다음 표준 프로토콜에 따라 NMR에 의해 화합물을 식별합니다. 1, 4, 5, 6-테트라하이드로피리다진을 준비하려면 알파-헤일로-N-아실-히드라존, 2.7 밀리그램의 자궁포린, 195밀리그램의 세슘 카보네이트를 고무 스톱퍼와 교반 바를 갖춘 10밀리리터 슐렌크 튜브에 넣습니다.

슐렌크 튜브를 질소로 세 번 제거하고 물에 아세토나이트 2밀리리터를 튜브에 주입합니다. 슐렌크 튜브를 바닥에서 16시간 동안 5와트, 파란색 LED로, 세척당 포화 나트륨 15밀리리터가 있는 4개의 세척이 가능합니다. 수성 상과 결합하고, 에틸 아세테이트의 4 개의 15 밀리리터 볼륨과 수성 위상을 다시 추출합니다.

유기 상을 결합하고, 무수성 나트륨 황산염과 건조. 진공 증발기로 용매를 제거합니다. 얇은 층 크로마토그래피로 제품을 정화하려면 실리카 플레이트에 직선으로 그려서 용존 제품을 라인에 추가합니다.

실리카 플레이트를 크로마토그래피 실린더에 10 대 1 PE로 EA에 넣습니다. 그 후, DCM에서 실리카를 용해. 여과로 제품에서 실리카를 제거하고 회전 증발기로 DCM을 건조시십시오. 그런 다음 표준 프로토콜에 따라 NMR에 의해 화합물을 식별합니다.

이러한 대표적인 결과는 알파-헤일로-N-아킬-히드라존의 cercosporin-catalyzed 광촉매 반응에 의해 4-아리알-1, 2, 3-티아디아졸 및 1, 4, 5, 6 테트라하이드로피리다진을 편리하게 합성할 수 있는 방법을 보여줍니다. 4-aryl-1, 2, 3-thiadiazoles 획득 절차는 페닐 링에서 전자 기증 및 전자 수용 그룹을 모두 베어링 기판에 적합하며, 원하는 제품을 적당한 수율로 제공합니다. 항상 반응의 두 가지 범주에 대한 질소와 산소를 사용하는 것을 기억한다.