이 프로토콜은 큰 포유동물에서 림프계의 조사를 허용하므로 인간에서 글리파틱 시스템을 이해하는 데 더 가까워지게합니다. 이 기술에는 두 가지 장점이 있습니다. cisterna 마그나에 흔적의 도입은 뇌에 직접적인 손상을 방지, 이는 정맥 내 주사와는 대조적이다.
둘째, 이것은 캐니어의 즉각적인 시각화와 그것이 성공적이었는지 여부를 알 수있는 직접적인 접근 방식입니다. 돼지를 경향이 있는 위치에 놓는 것으로 시작합니다. 머리와 목의 뒷면을 만지시면 후두 문장, 첫 번째 흉부 척추의 척추 및 각 귀의 베이스를 찾아 표시합니다.
문장과 세로 축을 따라 척추 사이에 직선을 그립니다. 그런 다음 두개골의 기초를 따라, 각 귀의 바닥에 문장에서 두 줄을 그립니다. 동물의 꼬리를 조심스럽게 고정하고 반사신경이 깊은 수면에 있는지 확인하십시오.
먼저 21번 블레이드를 가진 메스를 사용하여 세로선을 따라 근육까지 진피 절개를 한 다음, 어깨를 따라 두 개의 수직 절개를 더 길게 10~15cm 길이로 확장합니다. 후두 문장에서 시작하여 라인을 따라 진피 절개를 각 귀의 밑면까지 만듭니다. 해부학 적 집게를 사용하여 후두 문장에서 형성 된 피부 모서리를 잡고 메스 블레이드를 근막 위로 가볍게 실행하여 피부를 기본 근육과 분리하십시오.
사다리꼴 근육의 일부를 시각화하기 위해 다섯 절개 각각을 따라 피부를 절제합니다. 메스를 사용하여 사다리꼴이 중간선에서 함께 오는 약 1센티미터 깊이의 세로 절개를 한 다음, 사다리꼴과 근본적인 반척추 카피티스 의 배를 분리하는 직선 및 곡선 수술 집게의 조합을 사용하여 근육의 세로 절단을 따라 무딘 해부를 수행합니다. 메스로 지속근육 섬유를 끊고 반척추기 카피티스 복합체가 눈에 띄게 될 때까지 무딘 해부를 계속 수행합니다.
두개골의 후방 측면을 따라 이동하고 사다리꼴과 반척추 카피티스 biventer 근육의 기원을 끊습니다. 두 근육을 세로로 분리하려면 외과 용 집게를 사용하여 반척추 경 카피티스 컴플렉스가 완전히 보일 때까지 무딘 해부를 수행하십시오. 그런 다음 자기 유지 리트랙터를 사용하여 사다리꼴과 반척추기 카피티스 biventer 근육을 철회하십시오.
메스를 사용하여 반척추키스 카피티스 복합체의 배가 중간선에 모이는 1센티미터 깊이의 경도 절개를 만듭니다. 아틀라스와 축이 모두 만져질 때까지 근육 배 사이의 세로 절단을 따라 작동하는 외과 용삼을 사용하여 무딘 해부를 수행하십시오. 두개골의 후방 측면을 따라 이동하여 반척추수미스 카피티스 복합 근육의 기원을 끊습니다.
메스와 무딘 해부를 사용하여 근육을 기본 척추와 세로로 분리한 다음 반척수비스 카피티스 복합 근육을 회수하기 위해 다른 자체 유지 리트랙터 세트를 사용합니다. 메스를 사용하여 아틀라스가 두개골 베이스를 만나는 부위에 남은 조직을 조심스럽게 제거합니다. 동물의 목에 한 쪽 팔을 놓고 아틀라스와 두개골의 정초에 한 손가락을 두른 다음, 동시에 머리를 올리고 손가락을 만지면서 목을 구부려 시스스테나 마그나를 드러냅니다.
한 사람이 동물의 머리와 목을 높이고 굴곡하도록 하고, 다른 한 명은 시스테나 마그나를 위해 심필을 하고 해부학적 위치를 기록합니다. 22 게이지 캐뉼라를 천천히 조심스럽게 시스테나 마그나(cisterna magna)에 비스듬히 비스듬히 기울어진 후 캐뉼라에서 바늘을 철회하고 자물쇠에 캡을 놓습니다. 수퍼 접착제와 캐뉼러가 조직에 들어가는 가속기를 바르는 것으로 시작한 다음 치과 시멘트를 적용하십시오.
시멘트가 굳어질 때까지 5분 간 기다립니다. 캐뉼라에서 캡을 조심스럽게 제거합니다. 10센티미터 연장을 사용하여 트레이서와 IV 라인 탭의 수컷 끝에 캐뉼라를 부착합니다.
손으로 또는 마이크로 주입 펌프를 사용하여 분당 100 마이크로 리터의 속도로 천천히 트레이서를 주입하십시오. IV 라인 탭을 제거하고 캡으로 교체합니다. 추적자가 캐뉼라 의 기지에서 맥동하는 것으로 보이는지 확인합니다.
그런 다음 모래 주머니를 동물의 목 아래에 놓고 약간의 굴곡을 유지합니다. 머리를 풀어 놓고 동물을 쉬는 경향이 있는 자세로 둡니다. 자기 유지 리트랙터를 해제하고 근육을 대체합니다.
수술 수건 클램프를 사용하여 근육을 통해 피부를 함께 가져옵니다. 먼저 거즈와 담요를 사용하여 수건 클램프와 절개를 덮어 열 손실을 제한하십시오. 추적자가 원하는 시간 동안 순환하도록 허용합니다.
뇌의 등대 표면의 스티치 거시적 이미지는 설시와 균열을 가로 질러 추적자의 분포 패턴에 대한 자세한 통찰력을 제공 할 수 있습니다. 뇌의 복부 및 측면 표면에서 유사한 이미지는 측두엽과 측면 균열의 추적자 분포에 대한 정보를 제공 할 수 있습니다. 스테레오스코코프를 사용하여 생성된 더 높은 배율의 뇌 표면의 이미지는 동맥을 따라 PVS의 추적자를 시각화하는 데 도움이 될 수 있습니다.
거시적 관상 동맥 뇌 섹션은 해마와 줄무늬와 같은 연고체 균열 및 피형 추적기 분포 및 구조에서 추적자 침투의 깊이에 대한 통찰력을 제공합니다. AQP4, 글리아 세동 산성 단백질 및 부드러운 근육 액틴에 대한 면역 조직화학 적 염색은 추적자가 PVS 내에서 국소화뿐만 아니라 뇌 완두종으로 이동한 것으로 나타났습니다. PVS의 외부 표면을 형성하는 성상세포 발 공정은 AQP4 및 글리아 세동 산성 단백질 염색을 사용하여 식별됩니다.
PVS의 내부 표면을 형성하는 내피 세포는 렉틴과 GLUT-1 얼룩을 사용하여 염색된다. SMA 염색은 동맥과 동맥을 식별하고 PVS 유입이 정상적인 림프절 기능의 기본 생리학을 구성하는 정맥 대신 동맥을 따라 발생한다는 것을 보여주기 위해 사용될 수 있습니다. 앞으로, 우리는 뇌졸중과 외상성 뇌 손상과 같은 신경 병리학의 맥락에서 큰 포유동물의 고해상도에서 글리파틱 시스템을 탐구하기를 희망합니다.
