Zmodyfikowana technika wywoływania zespołu policystycznych jajników u myszy

Nasze badania koncentrują się przede wszystkim na fizjologicznych i patologicznych mechanizmach związanych z zespołem policystycznych jajników. W szczególności badania te mają na celu opracowanie prostej i skutecznej techniki indukowania PCOS u myszy, aby lepiej symulować i badać fizjologiczne zasady PCOS, P-C-O-S. W 2023 roku zespół akademików opublikował badanie w obiegu, w którym zaproponowano nowy mechanizm polegający na przewlekłym zapaleniu w rozwoju choroby sercowo-naczyniowej wysokiego ryzyka u pacjentów z zespołem policystycznych jajników.

Nasz protokół oferuje oszczędzającą czas i elastyczną metodę skutecznego wywoływania PCOS u myszy, unikania wielokrotnego podawania leków i zmniejszania wpływu czynników nieeksperymentalnych. Nasze laboratorium skupi się na badaniu mechanizmu stojącego za rozwojowym podłożem choroby. Naszym celem jest odkrycie, w jaki sposób niekorzystne narażenie we wczesnym okresie życia przyczynia się do wystąpienia zaburzeń metabolicznych, sercowo-naczyniowych i neurologicznych w późniejszym życiu.

Na początek umieść mini pompki na czystym, sterylnym blacie. Kciukiem i palcem wskazującym delikatnie ściśnij nasadkę pasującą do korpusu pompki, a drugą ręką przytrzymaj korpus pompki. Użyj cienkiej rurki dołączonej do nasadki, aby kilkakrotnie szturchnąć port napełniania pompy.

Teraz weź igłę, która pasuje do pompy i jednomililitrowej strzykawki. Mocno przymocować igłę do strzykawki. Powoli wyciągnąć końcowy roztwór letrozolu do strzykawki.

Następnie ostrożnie ściśnij mini pompkę jedną ręką, aby stała pionowo. Drugą ręką włożyć jednomililitrową strzykawkę do dolnej części pompy. Powoli wstrzyknąć roztwór letrozolu do pompy.

Gdy pompa jest pełna, wyjąć strzykawkę. Ostrożnie włóż nasadkę do korpusu pompy i dokręć ją. Wytrzyj wszelkie rozlane płyny.

Z wylotem napełnionej pompy skierowanym na zewnątrz, zanurzyć pompę w sterylnym roztworze soli fizjologicznej w przygotowanej probówce wirówkowej. Zakryj rurkę i umieść ją na stojaku na tuby. Umieść rurki w termostacie o temperaturze 37 stopni Celsjusza na 48 godzin.

Aby rozpocząć, zabezpiecz znieczuloną mysz w pozycji leżącej na płycie operacyjnej. Użyj kleszczy, aby podnieść skórę w linii środkowej z tyłu szyi, faworyzując skórę po stronie bezwłosej. Za pomocą skalpela wykonaj bocznie nacięcie o długości 0,5 centymetra.

Następnie otwórz naskórek pod nacięciem i uzyskaj do niego dostęp za pomocą hemostatu, aby uwolnić skórę, robiąc miejsce na mini pompę. Następnie użyj sterylnych kleszczyków, aby wyjąć mini pompkę wypełnioną letrozolem z soli fizjologicznej z otwartym końcem pompy skierowanym w dół. Za pomocą kleszczy zaciśnij jedną stronę nacięcia skóry.

Następnie wepchnij pompę do przestrzeni podskórnej. Gdy pompka znajdzie się w środku, użyj palców, aby delikatnie ścisnąć pompę tak do wewnątrz, jak to możliwe. Następnie użyj szwów chirurgicznych 4-0, aby zszyć miejsce nacięcia.

Myszy leczone letnią mini pompą wykazywały znacznie podwyższony poziom testosteronu w surowicy w porównaniu do samic myszy kontrolnych. Analiza histologiczna jajników myszy wykazała, że leczone myszy miały znaczne zmniejszenie liczby ciałek żółtych. Wykazywały również znaczną rujową acykliczność i były cięższe niż myszy kontrolne.

U leczonych myszy rozwinęła się nietolerancja glukozy i miały większe zmiany w profilach lipidowych surowicy.