transnuclear-mice-with-pre-defined-t-cell-receptor-specificities

Transnuclear Mice with Pre-defined T Cell Receptor Specificities Against <em>Toxoplasma gondii</em> Obtained Via SCNT

Lymphocytes, such as T cells, undergo genetic V(D)J recombination, to generate a receptor with a certain specificity1. Mice transgenic for a rearranged ...

Whitehead Institute for Biomedical Research

Microrna &#x4E30;&#x5BCC;&#x52A8;&#x7269;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x9884;&#x8BA1;&#x5728;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x65B9;&#x6848;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x7A81;&#x51FA;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x6709;&#x5173;&#x4E8E;&#x4E2A;&#x522B;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; Microrna &#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x77E5;&#x8BC6;&#x7684;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x529F;&#x80FD;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5728;&#x9AD3;&#x7CFB;&#x7279;&#x5B9A; microRNA-223 (miR-223&#xFF09; &#x4E0D;&#x5229;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7956;&#x6269;&#x6563;&#x548C;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;-223 &#xFF08;&#x4E5F;&#x79F0;&#x4E3A; Mirn223) &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5DF2;&#x5F15;&#x8D77;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x4E3B;&#x6269;&#x5927;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F66;&#x53A2;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; Mef2c&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x524D;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x662F;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;-223&#xFF0C;&#x548C; Mef2c&#xFF0C;&#x9057;&#x4F20;&#x6D88;&#x878D;&#x53D6;&#x6D88;&#x7956;&#x6269;&#x5F20;&#x5E76;&#x7EA0;&#x6B63;&#x5728;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9; 223 &#x7A7A;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9; 223 &#x662F;&#x524D;&#x623F;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x523A;&#x6FC0;&#x8FC7;&#x654F;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6740;&#x83CC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x6B64;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x591A;&#x52A8;&#xFF0C;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9; 223 &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5C0F;&#x9F20;&#x81EA;&#x53D1;&#x53D1;&#x5C55;&#x708E;&#x75C7;&#x80BA;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x548C;&#x5C55;&#x54C1;&#x540E;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x6311;&#x6218;&#x5938;&#x5F20;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7834;&#x574F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x5728;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9; 223 &#x4F5C;&#x4E3A; fine-tuner &#x7684;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x708E;&#x75C7;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

MicroRNA 223 &#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;

MicroRNAs are abundant in animal genomes and have been predicted to have important roles in a broad range of gene expression programmes. Despite this prominence, there is a dearth of functional knowledge regarding individual mammalian microRNAs. Using a loss-of-function allele in mice, we report here that the myeloid-specific microRNA-223 (miR-223) negatively regulates progenitor proliferation and granulocyte differentiation and activation. miR-223 (also called Mirn223) mutant mice have an expanded granulocytic compartment resulting from a cell-autonomous increase in the number of granulocyte progenitors. We show that Mef2c, a transcription factor that promotes myeloid progenitor proliferation, is a target of miR-223, and that genetic ablation of Mef2c suppresses progenitor expansion and corrects the neutrophilic phenotype in miR-223 null mice. In addition, granulocytes lacking miR-223 are hypermature, hypersensitive to activating stimuli and display increased fungicidal activity. As a consequence of this neutrophil hyperactivity, miR-223 mutant mice spontaneously develop inflammatory lung pathology and exhibit exaggerated tissue destruction after endotoxin challenge. Our data support a model in which miR-223 acts as a fine-tuner of granulocyte production and the inflammatory response.

Regulation of progenitor cell proliferation and granulocyte function by microRNA-223.

MicroARN sont abondants dans les g&eacute;nomes animaux et ont &eacute;t&eacute; pr&eacute;dits &agrave; jouer un r&ocirc;le important dans un large &eacute;ventail de programmes d&#39;expression de g&egrave;ne. Malgr&eacute; cette importance, il y a un manque de connaissance fonctionnelle en ce qui concerne les microARN mammif&egrave;res individuels. &Agrave; l&#39;aide d&#39;un all&egrave;le de la perte de fonction chez la souris, nous rapportons ici que les microARN my&eacute;lo&iuml;de sp&eacute;cifiques-223 (miR-223) r&eacute;gule n&eacute;gativement l&#39;activation et la prolif&eacute;ration et granulocytes la diff&eacute;renciation des prog&eacute;niteurs. miR-223 (&eacute;galement appel&eacute; Mirn223) de souris mutantes ont un compartiment granulocytaire &eacute;largi r&eacute;sultant d&#39;une augmentation de cellule autonome dans le nombre de g&eacute;niteurs de granulocytes. Nous montrons que le Mef2c, un facteur de transcription qui favorise la prolif&eacute;ration des prog&eacute;niteurs my&eacute;lo&iuml;des, est une cible de miR-223, et que l&#39;ablation g&eacute;n&eacute;tique du Mef2c supprime l&#39;expansion de l&#39;anc&ecirc;tre et corrige le ph&eacute;notype neutrophilique chez les souris null miR-223. En outre, les granulocytes manque miR-223 sont hypermature, hypersensible &agrave; l&#39;activation des stimuli et affichent l&#39;augmentation de l&#39;activit&eacute; fongicide. Par suite de cette hyperactivit&eacute; neutrophile, miR-223 souris mutantes spontan&eacute;ment d&eacute;veloppent la pathologie inflammatoire pulmonaire et pi&egrave;ce de destruction tissulaire exag&eacute;r&eacute; apr&egrave;s le d&eacute;fi de l&#39;endotoxine. Nos donn&eacute;es supportent un mod&egrave;le dans lequel miR-223 sert une fine de la production de granulocytes et de la r&eacute;ponse inflammatoire.

R&egrave;glement des prog&eacute;niteurs prolif&eacute;ration et granulocytes fonction des cellules par micro-ARN-223.

MicroRNAs sind reichlich in tierischen Genome und haben wichtige Rollen in einer Vielzahl von Gen-Ausdruck-Programme haben vorhergesagt worden. Trotz dieser Bekanntheit gibt es ein Mangel an funktionalen wissen &uuml;ber einzelne S&auml;ugetier-MicroRNAs. Verwenden ein Loss of Function-Allel, bei M&auml;usen, berichten wir hier, dass der myeloid-spezifische MicroRNA-223 (MiR-223) negativ Vorl&auml;uferzellen Proliferation und Granulozyten Differenzierung und Aktivierung regelt. MiR-223 (auch genannt Mirn223) mutierte M&auml;use haben eine erweiterte granulocytic Fach aus einer Zelle-autonome Zunahme der Zahl von Vorl&auml;uferzellen der Granulozyten. Wir zeigen, dass Mef2c, einen Transkriptionsfaktor, der myeloischen Vorl&auml;uferzellen Verbreitung, f&ouml;rdert ein Ziel von MiR-223 ist, und dieser genetischen Ablation der Mef2c unterdr&uuml;ckt Stammvater Ausbau und korrigiert die neutrophile Ph&auml;notyp in MiR-223 null M&auml;use. Dar&uuml;ber hinaus fehlt MiR-223 Granulozyten sind Hypermature, &uuml;berempfindlich auf Reize aktivieren und erh&ouml;hten pilzt&ouml;tende Aktivit&auml;t anzeigen. Als Folge dieser neutrophil Hyperaktivit&auml;t MiR-223 Mutante M&auml;use spontan entz&uuml;ndliche Lunge Pathologie zu entwickeln und zeigen eine &uuml;bertriebene Gewebezerst&ouml;rung nach Endotoxin-Challenge. Unsere Daten unterst&uuml;tzen ein Modell, in dem MiR-223 als eine Feinstimmers der Granulozyten-Produktion und die entz&uuml;ndliche Reaktion fungiert.

Regulierung der Vorl&auml;uferzellen Proliferation und Granulozyten Zellfunktionen durch MicroRNA-223.

MicroRNA &egrave; abbondanti nei genomi animali ed essere stata prevista ad per avere ruoli importanti in un&#39;ampia gamma di programmi di espressione genica. Nonostante questo rilievo, c&#39;&egrave; una carenza di conoscenze funzionali per quanto riguarda singoli microRNA nei mammiferi. Utilizzando un allele di perdita di funzione nei topi, riportiamo qui che la mieloide specifici microRNA-223 (miR-223) regola negativamente la attivazione e differenziazione di proliferazione e granulociti progenitore. topi mutanti miR-223 (anche denominato Mirn223) hanno un vano granulocitica espanso risultanti da un cellula autonomo aumento del numero di progenitori granulociti. Mostriamo che Mef2c, un fattore di trascrizione che promuove la proliferazione del progenitore mieloide, &egrave; una destinazione di miR-223, e che l&#39;ablazione genetica di Mef2c sopprime espansione progenitore e corregge il fenotipo neutrofila nei topi null miR-223. Inoltre, granulociti privo di miR-223 sono hypermature, ipersensibili a stimoli di attivazione e visualizzare aumentata attivit&agrave; fungicida. Come conseguenza di questa iperattivit&agrave; dei neutrofili, miR-223 topi mutanti spontaneamente sviluppano patologia infiammatoria polmonare ed esibiscono distruzione tissutale esagerato dopo la sfida di endotossine. I nostri dati supportano un modello in cui miR-223 agisce come un fine-tuner della produzione di granulociti e la risposta infiammatoria.

Regolamento del progenitor cell proliferazione e granulociti funzione di microRNA-223.

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; Rna &#x306F;&#x52D5;&#x7269;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3067;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x9686;&#x8D77;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; Rna &#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x77E5;&#x8B58;&#x306E;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x640D;&#x5931;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x6027;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; Rna-223 &#xFF08;&#x30DF;&#x30FC;&#x30EB;-223) &#x5426;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x9846;&#x7C92;&#x7403;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x5831;&#x544A;&#x66F8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DF;&#x30FC;&#x30EB;-223 (&#x307E;&#x305F;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B; Mirn223) &#x5909;&#x7570;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x9846;&#x7C92;&#x7403;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x81EA;&#x5F8B;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x3001;&#x62E1;&#x5F35;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50; Mef2c &#x30DF;&#x30FC;&#x30EB;-223 &#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; Mef2c &#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x62E1;&#x5927;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x3066;&#x30DF;&#x30FC;&#x30EB; 223 &#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x4FEE;&#x6B63;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30DF;&#x30FC;&#x30EB; 223 &#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x9846;&#x7C92;&#x7403;&#x904E;&#x719F;&#x3001;&#x523A;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x904E;&#x654F;&#x3055;&#x308C;&#x5897;&#x52A0;&#x6BBA;&#x83CC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x591A;&#x52D5;&#x6027;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30DF;&#x30FC;&#x30EB; 223 &#x5909;&#x7570;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306B;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x80BA;&#x306E;&#x75C5;&#x7406;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3001;&#x8A87;&#x5F35;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x7834;&#x58CA;&#x5F8C;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B8;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF; &#x30DF;&#x30FC;&#x30EB; 223 &#x304C;&#x9846;&#x7C92;&#x7403;&#x751F;&#x7523;&#x306E; fine-tuner &#x3068;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; Rna 223 &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x9846;&#x7C92;&#x7403;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3002;

MicroRNAs &#xB3D9;&#xBB3C; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD48D;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC608;&#xC0C1;. &#xC774; &#xB208;&#xC5D0;&#xC774; &#xB754;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; Micrornas&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC9C0;&#xC2DD;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC774; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC5EC;&#xAE30; &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xD2B9;&#xC815; microRNA-223 (&#xBBF8;&#xB974;-223) &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC870;&#xC0C1; &#xD655;&#xC0B0; &#xBC0F; granulocyte &#xBD84;&#xD654;&#xC640; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC870;&#xC808; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xB974;-223 (&#xB610;&#xD55C; &#xBD88;&#xB9AC; &#xC6B4;&#xB41C; Mirn223) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC950;&#xAC00; &#xD655;&#xC7A5; &#xB41C; granulocytic &#xAD6C;&#xD68D; granulocyte progenitors &#xC218; &#xC140; &#xC790;&#xCE58; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; Mef2c, &#xACE8;&#xC218;&#xC131; &#xC870;&#xC0C1; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xB294; &#xBBF8;&#xB974;-223, &#xB300;&#xC0C1; &#xBC0F; mef2c&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xC808;&#xC81C; &#xADF8; &#xC870;&#xC0C1; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xBBF8;&#xB974;-223 null &#xC950;&#xC5D0; neutrophilic &#xD615; &#xC218;&#xC815; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, granulocytes &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xBBF8;&#xB974;-223 hypermature, &#xACFC;&#xBBFC; &#xC790;&#xADF9;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC0B4; &#xADE0; &#xC81C;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC774; &#xD638; &#xACFC;&#xB2E4;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xBBF8;&#xB974;-223 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC950; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xD3D0; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xC120;&#xCC98;&#xB9AC; &#xB3C4;&#xC804; &#xD6C4; &#xACFC;&#xC7A5; &#xB41C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xD30C;&#xAD34;&#xB97C; &#xC804;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBBF8;&#xB974;-223 granulocyte &#xC0DD;&#xC0B0; fine-tuner &#xBC0F; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xBC18;&#xC751;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5ED;&#xD560; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

MicroRNA-223&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xACFC; granulocyte &#xAE30;&#xB2A5; &#xADDC;&#xC815;.

MicroRNAs son abundantes en los genomas animales y han sido prev&eacute; que tienen un papel importante en una amplia gama de programas de expresi&oacute;n g&eacute;nica. A pesar de esta importancia, hay una escasez de conocimientos funcionales sobre microRNAs mam&iacute;feros individuales. Usando un alelo de p&eacute;rdida de funci&oacute;n en ratones, Divulgamos aqu&iacute; que el mieloide espec&iacute;ficos microARN-223 (miR-223) regula negativamente la activaci&oacute;n y diferenciaci&oacute;n de proliferaci&oacute;n y granulocitos progenitor. ratones mutantes miR-223 (tambi&eacute;n llamado Mirn223) tienen un compartimiento granuloc&iacute;tico ampliado resultantes de un c&eacute;lula aut&oacute;nomo aumento en el n&uacute;mero de progenitores de granulocitos. Demostramos que Mef2c, un factor de transcripci&oacute;n que promueve la proliferaci&oacute;n de progenitoras mieloides, es un objetivo del miR-223, y que la ablaci&oacute;n gen&eacute;tica de Mef2c suprime la expansi&oacute;n de la progenitora y corrige el fenotipo neutrof&iacute;lico en ratones nulos miR-223. Adem&aacute;s, granulocitos falta miR-223 son hipermadura, hipersensible a la activaci&oacute;n de est&iacute;mulos y Mostrar mayor actividad fungicida. Como consecuencia de esta hiperactividad neutr&oacute;fila, miR-223 ratones mutantes espont&aacute;neamente desarrollan patolog&iacute;a pulmonar inflamatoria y exhiben la destrucci&oacute;n del tejido exagerado despu&eacute;s del desaf&iacute;o de endotoxina. Nuestros datos apoyan un modelo en el que el miR-223 act&uacute;a como un fine-tuner de la producci&oacute;n de granulocitos y la respuesta inflamatoria.

Regulaci&oacute;n de la funci&oacute;n de proliferaci&oacute;n y granulocitos de c&eacute;lulas progenitoras de microARN-223.

&#x6210;&#x529F;&#x7684;&#x9020;&#x8840;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;HSC&#xFF09; &#x79FB;&#x690D;&#x5E38;&#x5E38;&#x53D7;&#x5230;&#x7684;&#x661F;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x6570;&#x548C;&#x9700;&#x8981;&#x7A33;&#x5065;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6269;&#x5927;&#x661F;&#x6269;&#x589E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x663E;&#x793A;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7D20;&#x6837;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;Angptls&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E00;&#x7EC4;&#x5206;&#x79BB;&#x80CE;&#x513F;&#x809D; HSC &#x652F;&#x6301;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4EBA;&#x53E3;&#x589E;&#x957F;&#x56E0;&#x7D20;&#x6539;&#x5584;&#x661F;&#x4F53;&#x5916;&#x6269;&#x589E;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5C55;&#x793A;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x81F4;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x589E;&#x5F3A;&#x9F20;&#x6807;&#x661F;&#x4F53;&#x5916;&#x6269;&#x589E;&#xFF0C;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; 2 (IGFBP2)&#x3002;&#x6839;&#x636E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BBE;&#x7ACB;&#x4E86;&#x9F20;&#x6807;&#x661F;&#xFF0C;&#x542B;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x751F;&#x6210;&#x7D20;&#x3001; &#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; 1&#x3001; Angptl3 &#x548C; IGFBP2 &#x5B8C;&#x5168;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x65E0;&#x8840;&#x6E05;&#x57F9;&#x517B;&#x4F53;&#x7CFB;&#x3002;&#x6309;&#x7ADE;&#x4E89;&#x80B2;&#x5206;&#x6790;&#x8861;&#x91CF;&#xFF0C;&#x6709; 48-fold &#x589E;&#x52A0;&#x957F;&#x671F; repopulating &#x9F20;&#x6807;&#x661F;&#x6570;&#x5B57;&#x5728;&#x7ECF;&#x8FC7; 21 &#x5929;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x9996;&#x6B21;&#x5C55;&#x793A; IGFBP2 &#x523A;&#x6FC0;&#x6269;&#x5F20;&#x6216;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E5F;&#x8868;&#x660E;&#x67D0;&#x4E9B;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5408;&#x6210;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x523A;&#x6FC0; HSC &#x6269;&#x5F20;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x7BC7;&#x6587;&#x7AE0;&#x7684;&#x672B;&#x5C3E;&#x627E;&#x5230;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x5229;&#x76CA;&#x51B2;&#x7A81;&#x7684;&#x62AB;&#x9732;&#x3002;

&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; 2 &#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x81F4;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x9020;&#x8840;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x6269;&#x589E;&#x3002;

Successful hematopoietic stem cell (HSC) transplantation is often limited by the numbers of HSCs, and robust methods to expand HSCs ex vivo are needed. We previously showed that angiopoietin-like proteins (Angptls), a group of growth factors isolated from a fetal liver HSC-supportive cell population, improved ex vivo expansion of HSCs. Here, we demonstrate that insulin-like growth factor-binding protein 2 (IGFBP2), secreted by a tumorigenic cell line, also enhanced ex vivo expansion of mouse HSCs. On the basis of these findings, we established a completely defined, serum-free culture system for mouse HSCs, containing SCF, thrombopoietin, fibroblast growth factor 1, Angptl3, and IGFBP2. As measured by competitive repopulation analyses, there was a 48-fold increase in numbers of long-term repopulating mouse HSCs after 21 days of culture. This is the first demonstration that IGFBP2 stimulates expansion or proliferation of murine stem cells. Our finding also suggests that certain cancer cells synthesize proteins that can stimulate HSC expansion. Disclosure of potential conflicts of interest is found at the end of this article.

Insulin-like growth factor-binding protein 2 secreted by a tumorigenic cell line supports ex vivo expansion of mouse hematopoietic stem cells.

Transplantation de cellules souches h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tiques (CSH) r&eacute;ussie est souvent limit&eacute;e par le nombre de CSH, et d&#39;&eacute;largir les CSH ex vivo des m&eacute;thodes robustes sont n&eacute;cessaires. Pr&eacute;c&eacute;demment, nous ont montr&eacute; que les prot&eacute;ines angiopoietin-type (Angptls), un groupe de facteurs de croissance, isol&eacute; &agrave; partir d&#39;une population cellulaire HSC-soutien du foie foetale, am&eacute;liorait expansion ex vivo de CSH. Ici, nous d&eacute;montrons qu&#39;insulin-like growth factor-binding protein 2 (IGFBP2), s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e par une lign&eacute;e de cellules tumorig&egrave;nes, &eacute;galement am&eacute;lior&eacute;e expansion ex vivo de souris autorenouveler. Sur la base de ces constatations, nous avons mis en place un syst&egrave;me de culture sans s&eacute;rum, compl&egrave;tement d&eacute;finie pour souris autorenouveler, contenant du SCF, thrombopo&iuml;&eacute;tine, fibroblast growth factor 1, Angptl3 et IGFBP2. Telle que mesur&eacute;e par l&#39;analyse concurrentielle de repeuplement, il y avait une 48-fold augmentation du nombre de souris repopulation &agrave; long terme autorenouveler apr&egrave;s 21 jours de culture. Il s&#39;agit de la premi&egrave;re d&eacute;monstration que IGFBP2 stimule l&#39;expansion ou la prolif&eacute;ration des cellules souches de souris. Notre constatation sugg&egrave;re &eacute;galement que certaines cellules canc&eacute;reuses synth&eacute;tisent les prot&eacute;ines qui peuvent stimuler l&#39;expansion de HSC. Divulgation des conflits d&#39;int&eacute;r&ecirc;ts potentiels se trouve &agrave; la fin de cet article.

Insulin-like growth factor-binding protein 2 s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e par une lign&eacute;e de cellules tumorig&egrave;nes prend en charge l&#39;expansion ex vivo de cellules souches h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tiques de souris.

Transplantation erfolgreich h&auml;matopoetische Stammzellen (HSC) wird oft durch die Zahlen der HSCs begrenzt und Bedarf, robuste Methoden HSCs ex Vivo zu erweitern. Wir zeigten zuvor, dass ANGPTL1-&auml;hnliche Proteine (Angptls), eine Gruppe von Wachstumsfaktoren, die isoliert von einer fetalen Leber HSC-unterst&uuml;tzende Zellpopulation, ex Vivo Expansion HSCs verbessert. Hier zeigen wir, dass Insulin-&auml;hnliche Wachstumsfaktor-verbindliches Protein 2 (IGFBP2), abgesondert von einer tumorigenic Zelllinie, auch ex-Vivo-Ausbau der Maus HSCs verbessert. Auf der Grundlage dieser Feststellungen haben wir ein vollst&auml;ndig definierten, Serum-freie Kultursystem f&uuml;r die Maus HSCs, SCF, Thrombopoetin, Fibroblasten-Wachstumsfaktor 1, Angptl3 und IGFBP2 gegr&uuml;ndet. Gemessen an wettbewerbsf&auml;higen Wiederbelegung Analysen, gab eine 48-fold Erh&ouml;hung Zahlen langfristige repopulating Maus HSCs nach 21 Tagen der Kultur. Dies ist die erste Demonstration, dass IGFBP2 Expansion oder Verbreitung von murinen Stammzellen stimuliert. Unsere Feststellung zufolge auch bestimmte Krebszellen Proteine synthetisieren, die HSC-Erweiterung anregen k&ouml;nnen. Offenlegung von m&ouml;glichen Interessenkonflikten findet sich am Ende dieses Artikels.

Insulin-wie Wachstum Faktor-verbindliches Protein 2 abgesondert durch eine tumorigenic Zelllinie unterst&uuml;tzt ex-Vivo-Ausbau der Maus hematopoietic Stammzellen.

Trapianto di successo cellule staminali ematopoietiche (HSC) &egrave; spesso limitato dal numero di HSCs, e sono necessari metodi robusti per espandere HSCs ex vivo. Abbiamo precedentemente dimostrato che angiopoietin-come le proteine (Angptls), un gruppo di fattori di crescita isolati da una fetale epatica popolazione cellulare HSC-solidale, migliorato ex vivo espansione di HSCs. Qui, ci dimostrano che insulin-like growth factor-binding protein 2 (IGFBP2), secernuti da una linea genetica delle cellule, anche migliorata ex vivo espansione del mouse HSCs. Sulla base di questi risultati, abbiamo istituito un sistema di cultura completamente definita, serum-free per mouse HSCs, contenenti SCF, trombopoietina, fattore di crescita dei fibroblasti 1, Angptl3 e IGFBP2. Misurata mediante analisi competitiva di ripopolamento, c&#39;era un 48-fold aumento nei numeri del mouse ripopolante a lungo termine HSCs dopo 21 giorni di cultura. Questa &egrave; la prima dimostrazione che IGFBP2 stimola la proliferazione delle cellule staminali murine o espansione. La nostra ricerca suggerisce anche che alcune cellule tumorali sintetizzano le proteine che possono stimolare l&#39;espansione HSC. Divulgazione dei potenziali conflitti di interesse si trova alla fine di questo articolo.

Insulin-like growth factor-binding protein 2 secernuti da una linea genetica cellulare supporta ex vivo espansione di cellule staminali ematopoietiche del mouse.

&#x6210;&#x529F;&#x3057;&#x305F;&#x9020;&#x8840;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;HSC&#xFF09; &#x79FB;&#x690D;&#x306F;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070; HSCs&#x3001;&#x4EF6;&#x6570;&#x5236;&#x9650;&#x306F;&#x3001;ex vivo &#x306E; HSCs &#x306E;&#x5C55;&#x958B;&#x306B;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EE5;&#x524D; angiopoietin &#x69D8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (Angptls) &#x6210;&#x9577;&#x3059;&#x308B;&#x80CE;&#x5150;&#x809D; HSC &#x652F;&#x6301;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; HSCs ex vivo &#x62E1;&#x5927;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x3082; ex vivo &#x62E1;&#x5927;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E; HSCs &#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x304C;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x69D8;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 2 (IGFBP2) &#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;, &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; SCF&#x3001;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x30DC;&#x30DD;&#x30A8;&#x30C1;&#x30F3;, &#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; 1&#x3001;Angptl3&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; IGFBP2 &#x3092;&#x542B;&#x3080; HSCs &#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x7121;&#x6599;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7AF6;&#x4E89;&#x529B;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x30AB;&#x30BF;&#x30ED;&#x30B0;&#x3092;&#x518D;&#x4F5C;&#x6210;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;48-fold &#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x9577;&#x671F;&#x518D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E; HSCs &#x306E;&#x756A;&#x53F7;&#x3067; 21 &#x65E5;&#x9593;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;IGFBP2 &#x306B;&#x306F;&#x62E1;&#x5F35;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30C7;&#x30E2;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306E;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE; HSC &#x306E;&#x62E1;&#x5927;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x5408;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8A18;&#x4E8B;&#x306E;&#x7D42;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x5229;&#x76CA;&#x76F8;&#x53CD;&#x306E;&#x958B;&#x793A;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x69D8;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 2 ex &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x9020;&#x8840;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30F4;&#x30A3;&#x30F4;&#x30A9;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xC870; &#xD608; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (HSC)&#xB294; &#xC885;&#xC885; HSCs, &#xC22B;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558; &#xACE0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; ex vivo HSCs &#xD655;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; angiopoietin &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (Angptls), &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xB294; &#xD0DC;&#xC544; &#xAC04; HSC &#xC9C0;&#xC9C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; &#xADF8;&#xB8F9; ex vivo &#xD655;&#xC7A5; Hscs&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; tumorigenic &#xC140; &#xB77C;&#xC778;, ex vivo &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; HSCs &#xD655;&#xB300; &#xAC15;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84; &#xBE44;&#xB294; &#xADF8; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xAC19;&#xC740; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 2 (IGFBP2)&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xADFC;&#xAC70; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; HSCs, SCF, thrombopoietin, &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 1, Angptl3, &#xBC0F; IGFBP2 &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC644;&#xC804; &#xD558; &#xAC8C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C;, &#xD608; &#xCCAD; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBB38;&#xD654; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC124;&#xB9BD;. &#xACBD;&#xC7C1; repopulation &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE21;&#xC815; &#xB41C; &#xC7A5;&#xAE30; repopulating &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; Hscs&#xC758; &#xC22B;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB38;&#xD654;&#xC758; 21 &#xC77C; &#xD6C4;&#xC5D0; 48-fold &#xC99D;&#xAC00; &#xAC70;&#xAE30; &#xD588;&#xB2E4;. IGFBP2 &#xD655;&#xC7A5; &#xB610;&#xB294; murine &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB370;&#xBAA8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; HSC &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xC554;&#xC2DC; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xAD00;&#xC2EC;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCDA9;&#xB3CC;&#xC758; &#xACF5;&#xAC1C;&#xB294;&#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC758; &#xB05D;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C;&#xB2E4;.

Ex vivo &#xD655;&#xC7A5; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC870; &#xD608; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xAC19;&#xC740; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 2 tumorigenic &#xC140; &#xC120; &#xBD84; &#xBE44;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Trasplante exitoso de c&eacute;lulas madre hematopoy&eacute;ticas (HSC) es a menudo limitado por el n&uacute;mero de HSCs, y se necesitan m&eacute;todos robustos para ampliar HSCs ex vivo. Anteriormente mostramos que angiopoyetina-como prote&iacute;nas (Angptls), un grupo de factores de crecimiento aislado de una feto poblaci&oacute;n celular de HSC-apoyo hep&aacute;tica, mejoraban ex vivo expansi&oacute;n de HSCs. Aqu&iacute;, demostramos prote&iacute;na de uni&oacute;n a factor de crecimiento insulina-like 2 (IGFBP2), secretada por una l&iacute;nea de c&eacute;lulas tumor&iacute;geno, mejorada tambi&eacute;n ex vivo expansi&oacute;n del rat&oacute;n HSCs. Sobre la base de estos resultados, establecimos un sistema de cultivo completamente definido, sin suero de rat&oacute;n HSCs, SCF, trombopoyetina, factor de crecimiento fibrobl&aacute;stico 1, Angptl3 y IGFBP2. Seg&uacute;n lo medido por an&aacute;lisis competitivo de la repoblaci&oacute;n, hubo un 48-fold aumento en n&uacute;meros de rat&oacute;n a largo plazo de repoblamiento HSCs despu&eacute;s de 21 d&iacute;as de la cultura. Se trata de la primera demostraci&oacute;n que IGFBP2 estimula la expansi&oacute;n o la proliferaci&oacute;n de c&eacute;lulas murinas. Nuestro hallazgo sugiere tambi&eacute;n que ciertas c&eacute;lulas de c&aacute;ncer sintetizan prote&iacute;nas que pueden estimular la expansi&oacute;n de HSC. Divulgaci&oacute;n de potenciales conflictos de inter&eacute;s se encuentra al final de este art&iacute;culo.

Prote&iacute;na de uni&oacute;n a factor de crecimiento insulina-like 2 secretada por una l&iacute;nea celular tumor&iacute;geno apoya ex vivo expansi&oacute;n de c&eacute;lulas madre hematopoy&eacute;ticas de rat&oacute;n.

&#x5B64;&#x96CC;&#x751F;&#x6B96;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x8F6C;&#x79FB; &#xFF08;SCNT&#xFF09; &#x662F;&#x4E24;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x83B7;&#x5F97;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72; (ES) &#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x5206;&#x522B;&#x5339;&#x914D;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6350;&#x8D60;&#x8005;&#x6216;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6350;&#x52A9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5229;&#x7528;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x5355;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x591A;&#x6001;&#x6027; (SNP) &#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x8BC1;&#x660E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x7531; SCNT &#x751F;&#x6210;&#x533A;&#x522B;&#x5F00;&#x6765;&#x5B64;&#x96CC;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7B7E;&#x540D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD0;&#x7528;&#x5355;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x591A;&#x6001;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#x4EBA;&#x7C7B; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB; SCNT-&#x4F4F;&#x6237;&#x5F00;&#x652F;&#x7EDF;&#x8BA1;&#x8C03;&#x67E5;-1&#xFF0C;&#x5148;&#x524D;&#x81EA;&#x79F0;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x6D3E;&#x751F; SCNT&#xFF0C;&#x548C;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EE3;&#x8868;&#x4E86;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x5B64;&#x96CC; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x3002;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x5355;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x591A;&#x6001;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x624B;&#x6BB5;&#x6765;&#x9A8C;&#x8BC1; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x8D77;&#x6E90;&#x3002;

&#x91CD;&#x7EC4;&#x7B7E;&#x540D;&#x533A;&#x5206;&#x7531;&#x5B64;&#x96CC;&#x751F;&#x6B96;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x8F6C;&#x79FB;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Parthenogenesis and somatic cell nuclear transfer (SCNT) are two methods for deriving embryonic stem (ES) cells that are genetically matched to the oocyte donor or somatic cell donor, respectively. Using genome-wide single nucleotide polymorphism (SNP) analysis, we demonstrate distinct signatures of genetic recombination that distinguish parthenogenetic ES cells from those generated by SCNT. We applied SNP analysis to the human ES cell line SCNT-hES-1, previously claimed to have been derived by SCNT, and present evidence that it represents a human parthenogenetic ES cell line. Genome-wide SNP analysis represents a means to validate the genetic provenance of an ES cell line.

Recombination signatures distinguish embryonic stem cells derived by parthenogenesis and somatic cell nuclear transfer.

La parth&#xE9;nogen&#xE8;se et de la cellule transfert nucl&#xE9;aire somatique (SCNT) sont deux m&#xE9;thodes de calcul souches embryonnaires (ES) des cellules qui sont g&#xE9;n&#xE9;tiquement identiques &#xE0; la donneuse d&#x26;#39;ovocyte ou du donneur de cellules somatiques, respectivement. En utilisant l&#x26;#39;&#xE9;chelle du g&#xE9;nome single nucleotide polymorphism (SNP) l&#x26;#39;analyse, nous d&#xE9;montrons signatures distinctes de la recombinaison g&#xE9;n&#xE9;tique qui permettent de distinguer les cellules ES parth&#xE9;nog&#xE9;n&#xE9;tiques de ceux g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s par TNCS. Nous avons appliqu&#xE9; l&#x26;#39;analyse des SNP &#xE0; la lign&#xE9;e cellulaire humaine ES TNCS hES-1, pr&#xE9;c&#xE9;demment affirm&#xE9; avoir &#xE9;t&#xE9; tir&#xE9;s par TNCS, et pr&#xE9;senter des preuves qu&#x26;#39;il repr&#xE9;sente une ligne humaine parth&#xE9;nog&#xE9;n&#xE9;tique des cellules ES. L&#x26;#39;&#xE9;chelle du g&#xE9;nome analyse SNP repr&#xE9;sente un moyen de valider la provenance g&#xE9;n&#xE9;tique d&#x26;#39;une lign&#xE9;e cellulaire ES.

Signatures de recombinaison distinguer les cellules souches embryonnaires par parth&#xE9;nogen&#xE8;se et le transfert nucl&#xE9;aire de cellules somatiques

Parthenogenese und Kerntransfer somatischer Zellen (SCNT) sind zwei Methoden f&uuml;r die Ableitung von embryonalen (ES) Stammzellen, die genetisch die Eizelle Spender oder somatische Spender, bzw. verglichen werden. Mit genomweiten single Nucleotide Polymorphism (SNP) Analyse, zeigen wir unterschiedliche Signaturen der genetischen Rekombination, die die von SCNT parthenogenetic ES-Zellen unterscheiden. Wir haben SNP-Analyse auf die menschliche ES-Zelllinie SCNT-hES-1, zuvor behauptet, um durch SCNT und vorliegenden Beweise, dass es eine menschliche parthenogenetic ES-Zelllinie darstellt abgeleitet wurden angewendet. Genomweiten SNP-Analyse stellt ein Mittel, um die genetische Herkunft ein ES-Zelllinie zu &uuml;berpr&uuml;fen.

Rekombination Signaturen zu embryonalen Stammzellen durch Parthenogenese und somatischen unterscheiden.

La partenogenesi e trasferimento nucleare di cellule somatiche (SCNT) sono due metodi per derivare embryonic stem cells (ES) che geneticamente sono abbinati alla donatrice di ovociti o cellule somatiche donatore, rispettivamente. Utilizzando analisi di genome-wide single nucleotide polymorphism (SNP), dimostriamo distinte firme di ricombinazione genetica che distinguono le cellule ES da quelli generati da SCNT. Abbiamo applicato la linea di cellule ES umana SCNT-hES-1, in precedenza ha affermato di essere stato derivato da SCNT e le prove presenti, che rappresenta una linea di cellule ES nei umana analisi SNP. Genome-wide SNP analisi rappresenta un mezzo per convalidare la provenienza genetica di una linea di cellule ES.

Firme di ricombinazione di distinguere le cellule staminali embrionali derivate da partenogenesi e trasferimento nucleare di cellule somatiche.

&#x5358;&#x70BA;&#x751F;&#x6B96;&#x3068;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x79FB;&#x690D;&#xFF08;SCNT&#xFF09;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x3068;&#x7167;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;ES&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x3092;&#x5C0E;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30EF;&#x30A4;&#x30C9;&#x306A;&#x4E00;&#x5869;&#x57FA;&#x591A;&#x578B;&#xFF08;SNP&#xFF09;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;SCNT&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x70BA;&#x767A;&#x751F;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x500B;&#x5225;&#x306E;&#x7F72;&#x540D;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;SCNT&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5C0E;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x4E3B;&#x5F35;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x5358;&#x70BA;&#x767A;&#x751F;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;SCNT-HES-1&#x306E;SNP&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30EF;&#x30A4;&#x30C9;SNP&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x8D77;&#x6E90;&#x3092;&#x691C;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x624B;&#x6BB5;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x7F72;&#x540D;&#x306F;&#x5358;&#x70BA;&#x751F;&#x6B96;&#x3068;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x79FB;&#x690D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5C0E;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;

&#xB2E8;&#xC131; &#xBC0F; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xD575; &#xC774;&#xC2DD; (SCNT)&#xB97C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; (ES) &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; oocyte &#xAE30;&#xC99D; &#xB610;&#xB294; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790;&#xC5D0; &#xAC01;&#xAC01; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294;. &#xAC8C;&#xB188; &#xC804;&#xCCB4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC5FC;&#xAE30; &#xB2E4;&#xD615;&#xC131; (SNP) &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, SCNT&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; parthenogenetic ES &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAD6C;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC758; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xC11C;&#xBA85;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; SCNT-hES-1 &#xB144; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; SCNT, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; parthenogenetic ES &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC874;&#xC7AC; &#xC99D;&#xAC70;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC8FC;&#xC7A5;&#xC5D0; SNP &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC801;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC8C;&#xB188; &#xC804;&#xCCB4; SNP &#xBD84;&#xC11D; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCD9C;&#xCC98;&#xC758; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC11C;&#xBA85;&#xC744; &#xB2E8;&#xC131; &#xBC0F; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xD575; &#xC774;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAD6C;&#xBD84; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La partenog&#xE9;nesis y transferencia nuclear de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas (SCNT) son dos m&#xE9;todos para derivar madre embrionarias (ES) las c&#xE9;lulas que son gen&#xE9;ticamente compatibles con el donante de ovocitos o de los donantes de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas, respectivamente. Uso de todo el genoma polimorfismo de nucle&#xF3;tido &#xFA;nico (SNP) el an&#xE1;lisis, nos demuestran distintas firmas de la recombinaci&#xF3;n gen&#xE9;tica que distinguen a las c&#xE9;lulas madre embrionarias partenogen&#xE9;ticas de las generadas por SCNT. Se aplic&#xF3; el an&#xE1;lisis de SNP a la l&#xED;nea de c&#xE9;lulas ES humanas SCNT-HES-1, hab&#xED;a afirmado con anterioridad que se han derivado por SCNT, y presentar pruebas de que representa una madre embrionarias humanas partenogen&#xE9;tica l&#xED;nea celular. Todo el genoma, el an&#xE1;lisis de SNP representa un medio para validar la procedencia gen&#xE9;tica de una l&#xED;nea de c&#xE9;lulas ES.

Firmas de recombinaci&#xF3;n distinguir las c&#xE9;lulas madre embrionarias obtenidas por partenog&#xE9;nesis y transferencia nuclear de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas

&#x7EC6;&#x80DE;&#x878D;&#x5408;&#x5DF2;&#x88AB;&#x7528;&#x4E8E;&#x8BB8;&#x591A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7528;&#x9014;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4EE3;&#x7684;&#x6742;&#x4EA4;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x548C;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x3002;&#x878D;&#x5408;&#x4E00;&#x6B65;&#x662F;&#x542F;&#x52A8;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x6807;&#x51C6;&#x878D;&#x5408;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7A77;&#x4EBA;&#x548C;&#x968F;&#x673A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x63A5;&#x89E6;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6536;&#x76CA;&#x7387;&#x8F83;&#x4F4E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x5EA7;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x4EE5;&#x6355;&#x83B7;&#x5E76;&#x6B63;&#x786E;&#x914D;&#x5BF9;&#x6210;&#x5343;&#x4E0A;&#x4E07;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6B64;&#x8BBE;&#x5907;&#xFF0C;&#x914D;&#x5BF9;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5B9E;&#x73B0;&#x914D;&#x5BF9;&#x6548;&#x7387;&#x8FBE; 70%&#x3002;&#x8BE5;&#x8BBE;&#x5907;&#x662F;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5316;&#x5B66;&#x548C;&#x7535;&#x878D;&#x5408;&#x534F;&#x8BAE;&#x517C;&#x5BB9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x7535;&#x878D;&#x5408;&#x6BD4;&#x5316;&#x5B66;&#x878D;&#x5408;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x819C;&#x91CD;&#x7EC4;&#x6548;&#x7387;&#x8FBE; 89%&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x66F4;&#x9AD8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D6;&#x5F97;&#x4E86;&#x5927;&#x4E8E; 50%&#x6B63;&#x786E;&#x914D;&#x5BF9;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x878D;&#x5408;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x8BBE;&#x5907;&#xFF0C;5 &#x500D;&#x5927;&#x4E8E;&#x5546;&#x4E1A;&#x7535;&#x878D;&#x5408;&#x5BA4;&#x548C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6742;&#x79CD;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x3002;

&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x63A7;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x914D;&#x5BF9;&#x548C;&#x878D;&#x5408;&#x3002;

Cell fusion has been used for many different purposes, including generation of hybridomas and reprogramming of somatic cells. The fusion step is the key event in initiation of these procedures. Standard fusion techniques, however, provide poor and random cell contact, leading to low yields. We present here a microfluidic device to trap and properly pair thousands of cells. Using this device, we paired different cell types, including fibroblasts, mouse embryonic stem cells and myeloma cells, achieving pairing efficiencies up to 70%. The device is compatible with both chemical and electrical fusion protocols. We observed that electrical fusion was more efficient than chemical fusion, with membrane reorganization efficiencies of up to 89%. We achieved greater than 50% properly paired and fused cells over the entire device, fivefold greater than with a commercial electrofusion chamber and observed reprogramming in hybrids between mouse embryonic stem cells and mouse embryonic fibroblasts.

Microfluidic control of cell pairing and fusion.

La fusion cellulaire a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; &#xE0; de nombreuses fins diff&#xE9;rentes, notamment la production d&#x26;#39;hybridomes et la reprogrammation des cellules somatiques. L&#x26;#39;&#xE9;tape de fusion est l&#x26;#39;&#xE9;v&#xE9;nement cl&#xE9; dans l&#x26;#39;initiation de ces proc&#xE9;dures. Techniques de fusion standard, cependant, fournir un contact pauvre cellule et al&#xE9;atoire, conduisant &#xE0; des rendements faibles. Nous pr&#xE9;sentons ici un dispositif microfluidique pour pi&#xE9;ger et bien des milliers de paires de cellules. L&#x26;#39;utilisation de ce dispositif, nous jumel&#xE9; diff&#xE9;rents types cellulaires, y compris les fibroblastes, les cellules souches embryonnaires de souris et des cellules de my&#xE9;lome, accro&#xEE;tre l&#x26;#39;efficacit&#xE9; d&#x26;#39;appariement jusqu&#x26;#39;&#xE0; 70%. Le dispositif est compatible avec les produits chimiques et des protocoles de fusion &#xE9;lectriques. Nous avons observ&#xE9; que la fusion &#xE9;lectrique &#xE9;tait plus efficace que la fusion chimique, avec des rendements de r&#xE9;organisation de la membrane jusqu&#x26;#39;&#xE0; 89%. Nous avons r&#xE9;alis&#xE9; plus de 50% de cellules correctement appari&#xE9;s et fusionn&#xE9;es sur l&#x26;#39;ensemble du dispositif, cinq fois plus &#xE9;lev&#xE9; qu&#x26;#39;avec une chambre &#xE9;lectrofusion commercial et observ&#xE9; une reprogrammation chez les hybrides entre les cellules souches embryonnaires de souris et de fibroblastes embryonnaires de souris.

Contr&#xF4;le de la microfluidique couplage cellulaire et Fusion

Zellfusion wurde f&uuml;r viele verschiedene Zwecke, einschlie&szlig;lich der Erzeugung von Hybridomen und Neuprogrammierung der somatischen Zellen verwendet. Der Fusion-Schritt ist das Schl&uuml;sselereignis in der Einleitung dieser Verfahren. Norm Fusion-Verfahren, bieten jedoch Arm und zuf&auml;llige Zelle Kontakt, was zu niedrigen Ertr&auml;gen. Wir stellen Ihnen hier ein Microfluidic-Ger&auml;t zum Trapping und richtig paar Tausende von Zellen. Mit diesem Ger&auml;t, gepaart wir verschiedene Zelltypen, einschlie&szlig;lich Fibroblasten, M&auml;useder embryonalen Stammzellen und Myelomazellen, koppeln Wirkungsgrade bis zu 70 % zu erreichen. Das Ger&auml;t ist kompatibel mit beiden chemischen und elektrischen Fusion-Protokolle. Wir beobachteten, dass elektrische Fusion effizienter als chemische Fusion mit Membran Reorganisation Wirkungsgrade von bis zu 89 ist %. Wir erreicht mehr als 50 % richtig gepaart und Zellen &uuml;ber das gesamte Ger&auml;t, verf&uuml;nffacht gr&ouml;&szlig;er als mit einer kommerziellen Elektroschweiss-Kammer und beobachteten Umprogrammierung in Hybriden zwischen M&auml;useder embryonalen Stammzellen und M&auml;useembryonalen verschmolzen.

Mikrofluidische Kontrolle der Zelle Paarung und Fusion.

Fusione cellulare &egrave; stata usata per molti scopi diversi, tra cui la generazione di ibridomi e riprogrammazione di cellule somatiche. Il punto di fusione &egrave; l&#39;evento chiave nell&#39;iniziazione di queste procedure. Tecniche di fusione standard, tuttavia, forniscono contatto cell poveri e casuale, che conduce a basse rese. Vi presentiamo qui un dispositivo microfluidico per intrappolare e abbinare correttamente migliaia di cellule. Utilizzando questo dispositivo, abbiamo abbinato diversi tipi di cellule, tra cui i fibroblasti, cellule staminali embrionali di topo e cellule di mieloma, raggiungere efficienze accoppiamento fino al 70%. Il dispositivo &egrave; compatibile con entrambi i protocolli fusione chimiche ed elettriche. Abbiamo osservato che la fusione elettrica era pi&ugrave; efficiente fusione chimica, con efficienze riorganizzazione membrana fino all&#39;89%. Abbiamo ottenuto maggiore di 50% correttamente accoppiato e fuse cellule sopra l&#39;intero dispositivo, cinque volte maggiore con una camera commerciale Elettrosaldabile e osservato riprogrammazione in ibridi tra cellule staminali embrionali di topo e fibroblasti embrionali del mouse.

Controllo microfluidico cella abbinamento e fusion.

&#x7D30;&#x80DE;&#x878D;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C9;&#x30FC;&#x30DE;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x3068;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x76EE;&#x7684;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x878D;&#x5408;&#x624B;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x4F4E;&#x53CE;&#x7387;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3001;&#x8CA7;&#x3057;&#x3044;&#x4EBA;&#x3005;&#x3084;&#x3001;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x89E6;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x3057;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x6570;&#x5343;&#x4EBA;&#x3092;&#x30DA;&#x30A2;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x30DF;&#x30A8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30DE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x3001;70&#xFF05;&#x307E;&#x3067;&#x30DA;&#x30A2;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x3001;&#x30DA;&#x30A2;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3068;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17;&#x878D;&#x5408;&#x304C;&#x6700;&#x5927;89&#xFF05;&#x306E;&#x819C;&#x7D44;&#x7E54;&#x518D;&#x7DE8;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x5316;&#x3068;&#x5316;&#x5B66;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x9069;&#x5207;&#x306B;&#x30DA;&#x30A2;&#x3068;&#x878D;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;50&#xFF05;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x5546;&#x7528;&#x96FB;&#x6C17;&#x878D;&#x5408;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x4E94;&#x500D;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x96D1;&#x7A2E;&#x3067;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30DA;&#x30A2;&#x3068;Fusion&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x5236;&#x5FA1;

&#xC140; &#xD4E8;&#xC804; &#xBC0F; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC7AC;&#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; hybridomas&#xC758; &#xC138;&#xB300;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9CE;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978; &#xBAA9;&#xC801;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB294;&#xC774; &#xC808;&#xCC28;&#xC758; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0A4; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xD45C;&#xC900; &#xD4E8;&#xC804; &#xAE30;&#xBC95;, &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC775;&#xB960;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xAC00;&#xB09C; &#xD558; &#xACE0; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xC140; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; &#xC81C;&#xACF5;. &#xC120;&#xBB3C;&#xC774; &#xC5EC;&#xAE30; &#xD568;&#xC815; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC218;&#xCC9C; &#xAC1C;&#xC758; &#xC140; &#xC30D;&#xC744; &#xACB0;&#xD569; &#xC7A5;&#xCE58;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC30D; &#xD6A8;&#xC728;&#xC744; &#xCD5C;&#xB300; 70%&#xAE4C;&#xC9C0; &#xB2EC;&#xC131; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;, &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;, &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; myeloma &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xC30D;&#xC774; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xC7A5;&#xCE58;&#xB294; &#xBAA8;&#xB450; &#xD654;&#xD559; &#xBC0F; &#xC804;&#xAE30; &#xC735;&#xD569; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; &#xD638;&#xD658;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC804;&#xAE30; &#xD4E8;&#xC804; &#xB9C9; &#xAC1C;&#xD3B8; &#xCD5C;&#xB300; 89% &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; &#xD654;&#xD559; &#xC735;&#xD569; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 50% &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC9DD; &#xD558; &#xACE0; &#xC804;&#xCCB4; &#xC7A5;&#xCE58; &#xC694;&#xC18C;&#xAC00; &#xC0C1;&#xC5C5; electrofusion &#xCC54;&#xBC84;&#xC640; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD070; &#xBC0F; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;&#xC744; &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC735;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD070; &#xB2EC;&#xC131;.

&#xC140; &#xC30D; &#xBC0F; &#xC735;&#xD569;&#xC758; &#xBBF8;&#xC138; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La fusi&#xF3;n celular se ha utilizado para muchos fines diferentes, incluyendo la generaci&#xF3;n de hibridomas y reprogramaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas. El paso de la fusi&#xF3;n es el evento clave en la iniciaci&#xF3;n de estos procedimientos. Las t&#xE9;cnicas est&#xE1;ndar de fusi&#xF3;n, sin embargo, proporcionar un contacto pobre celda y al azar, dando lugar a rendimientos bajos. Presentamos aqu&#xED; un dispositivo de microfluidos para atrapar y adecuadamente miles de pares de c&#xE9;lulas. El uso de este dispositivo, emparejado diferentes tipos celulares, incluyendo fibroblastos, c&#xE9;lulas madre embrionarias de rat&#xF3;n y c&#xE9;lulas de mieloma, logrando eficiencias emparejamiento hasta el 70%. El dispositivo es compatible con los productos qu&#xED;micos y el&#xE9;ctricos protocolos de fusi&#xF3;n. Hemos observado que la fusi&#xF3;n el&#xE9;ctrica fue m&#xE1;s eficiente que la fusi&#xF3;n qu&#xED;mica, con eficiencias de reorganizaci&#xF3;n de la membrana de hasta un 89%. Hemos alcanzado mayor que 50% de c&#xE9;lulas correctamente emparejados y se fusionan sobre la totalidad del dispositivo, cinco veces mayor que con una c&#xE1;mara de electrofusi&#xF3;n comercial y observ&#xF3; la reprogramaci&#xF3;n de h&#xED;bridos entre las c&#xE9;lulas madre embrionarias de rat&#xF3;n y fibroblastos de embriones de rat&#xF3;n.

De control de microfluidos del emparejamiento de la c&#xE9;lula y la fusi&#xF3;n

&#x662F;&#x91CD;&#x65B0;&#x6392;&#x5217; &#xFF08;&#x901A;&#x4EA7;&#x6DA6;&#x76DB;) &#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x662F;&#x7814;&#x7A76; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x901A;&#x4EA7;&#x6DA6;&#x76DB;&#x88AB;&#x901A;&#x5E38;&#x9694;&#x79BB;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x957F;&#x671F;&#x57F9;&#x517B;&#x540E;&#x5F80;&#x5F80;&#x540E;&#x91CD;&#x590D;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x65E0;&#x53EF;&#x907F;&#x514D;&#x5730;&#x503E;&#x659C; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x968F;&#x673A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6574;&#x5408; TCR &#x963F;&#x5C14;&#x6CD5;&#x548C;&#x8D1D;&#x5854;&#x94FE;&#x548C;&#x4ECE; nonendogenous &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x8868;&#x793A;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x7F3A;&#x70B9;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x91CD;&#x7F16;&#x7A0B;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x8F6C;&#x79FB;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x4E0E;&#x9884;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x60C5;&#x51B5;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x751F;&#x6210;&#x8868;&#x8FBE; TCR &#x4ECE;&#x5176;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x7684;&#x8F68;&#x8FF9;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5F15;&#x5165;&#x57FA;&#x56E0;&#x6539;&#x9020;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7684;&#x6613;&#x7528;&#x6027;&#x548C;&#x901F;&#x5EA6;&#x4E0E;&#x54EA;&#x79CD; transnuclear &#x6A21;&#x578B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x83B7;&#x5F97;&#x5176;&#x4ED6;&#x75BE;&#x75C5;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x6784;&#x5EFA;&#x4E3A;&#x6709;&#x524D;&#x9014;&#x3002;

Transnuclear &#x5C0F;&#x9F20;&#x4E0E;&#x9884;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x7279;&#x70B9;&#x5BF9;&#x5F13;&#x5F62;&#x866B;&#x901A;&#x8FC7; SCNT &#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x3002;

Mice that are transgenic for rearranged antigen-specific T cell receptors (TCRs) are essential tools to study T cell development and function. Such TCRs are usually isolated from the relevant T cells after long-term culture, often after repeated antigen stimulation, which unavoidably skews the T cell population used. Random genomic integration of the TCR alpha and beta chain and expression from nonendogenous promoters represent additional drawbacks of transgenics. Using epigenetic reprogramming via somatic cell nuclear transfer, we demonstrated that T cells with predefined specificities against Toxoplasma gondii can be used to generate mouse models that express the TCR from their endogenous loci, without experimentally introduced genetic modification. The relative ease and speed with which such transnuclear models can be obtained holds promise for the construction of other disease models.

Transnuclear mice with predefined T cell receptor specificities against Toxoplasma gondii obtained via SCNT.

Les souris qui sont transg&#xE9;niques pour r&#xE9;arrang&#xE9;s sp&#xE9;cifiques de l&#x26;#39;antig&#xE8;ne r&#xE9;cepteurs des cellules T (TCR) sont des outils essentiels pour &#xE9;tudier le d&#xE9;veloppement des cellules T et la fonction. TCR Ces sont g&#xE9;n&#xE9;ralement isol&#xE9;s &#xE0; partir des cellules T pertinentes apr&#xE8;s culture &#xE0; long terme, souvent apr&#xE8;s une stimulation antig&#xE9;nique r&#xE9;p&#xE9;t&#xE9;e, ce qui fausse in&#xE9;vitablement la population de cellules T utilis&#xE9;. Al&#xE9;atoire int&#xE9;gration g&#xE9;nomique de l&#x26;#39;alpha du TCR et de la cha&#xEE;ne b&#xEA;ta et d&#x26;#39;expression des promoteurs nonendogenous repr&#xE9;sentent des inconv&#xE9;nients suppl&#xE9;mentaires de produits transg&#xE9;niques. Utilisation de la reprogrammation &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique par transfert nucl&#xE9;aire de cellule somatique, nous avons d&#xE9;montr&#xE9; que les cellules T avec des sp&#xE9;cificit&#xE9;s pr&#xE9;d&#xE9;finies contre Toxoplasma gondii peut &#xEA;tre utilis&#xE9; pour g&#xE9;n&#xE9;rer des mod&#xE8;les de souris qui expriment le TCR de leurs loci endog&#xE8;nes, sans modification g&#xE9;n&#xE9;tique introduite exp&#xE9;rimentalement. La relative facilit&#xE9; et la rapidit&#xE9; avec laquelle ces mod&#xE8;les peuvent &#xEA;tre obtenus Transnuclear est prometteur pour la construction de mod&#xE8;les &#xE0; d&#x26;#39;autres maladies.

Souris Transnuclear avec des sp&#xE9;cificit&#xE9;s T pr&#xE9;d&#xE9;finis r&#xE9;cepteurs cellulaires contre Toxoplasma gondii obtenu par TNCS

M&auml;use, die transgenen f&uuml;r Antigen-spezifische T-Zell-Rezeptoren (TCRs) neu angeordnet werden sind wichtige Instrumente, T-Zell-Entwicklung und Funktion zu studieren. Solche TCRs sind in der Regel isoliert aus den relevanten T-Zellen nach Langzeitkultur, oft nach wiederholten Antigen Stimulation, die unweigerlich der T-Zellpopulation verwendet neigt. Zuf&auml;llige genomischen Integration der TCR-Alpha und Beta-Kette und Ausdruck von nonendogenous Veranstalter stellen zus&auml;tzliche Nachteile von gentechnisch ver&auml;nderten Pflanzen. Mit epigenetischen Reprogrammierung &uuml;ber somatischen, zeigten wir, dass T-Zellen mit vordefinierten Besonderheiten gegen Toxoplasma Gondii Mausmodelle generieren, die die TCR aus ihrer endogenen Loci, ohne versuchsweise eingef&uuml;hrte genetische Ver&auml;nderungen Ausdr&uuml;cken verwendet werden k&ouml;nnen. Die relative Leichtigkeit und Geschwindigkeit, mit welcher solche Transnuclear Modelle bezogen werden k&ouml;nnen, vielversprechend f&uuml;r den Bau von anderen Krankheitsmodelle.

Transnuclear M&auml;use mit vordefinierten T-Zell-Rezeptor Besonderheiten gegen Toxoplasma Gondii &uuml;ber SCNT gewonnen.

Topi transgenici per la ridisposizione delle cellule T antigene-specifici recettori (TCRs) che sono strumenti indispensabili per studiare la funzione e lo sviluppo delle cellule T. Tali TCRs sono solitamente isolate dalle cellule T rilevanti dopo coltura a lungo termine, spesso dopo stimolazione ripetuta dell&#39;antigene, che inevitabilmente inclina la popolazione di cellule T utilizzata. Integrazione genomic casuale della catena alfa e beta TCR ed espressione da nonendogenous promotori rappresentano ulteriori svantaggi di transgenica. Utilizzo di riprogrammazione epigenetica tramite trasferimento nucleare di cellule somatiche, abbiamo dimostrato che le cellule T con specificit&agrave; predefinite contro Toxoplasma gondii possono essere utilizzate per generare modelli di mouse che esprimono TCR da loro loci endogeni, senza modificazione genetica introdotta sperimentalmente. La relativa facilit&agrave; e la velocit&agrave; con cui tale transnuclear possono essere ottenuti modelli mantiene la promessa per la costruzione di altri modelli di malattia.

Transnuclear topi con specificit&agrave; del recettore predefiniti delle cellule T contro Toxoplasma gondii ottenuto tramite SCNT.

&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TCR&#xFF09;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6B20;&#x304B;&#x305B;&#x306A;&#x3044;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;TCR&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306F;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x907F;&#x7684;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x6B6A;&#x3081;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x6297;&#x539F;&#x523A;&#x6FC0;&#x5F8C;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; nonendogenous&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;&#x306E;TCR&#x306E;&#x3B1;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3B2;&#x9396;&#x3068;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x6B20;&#x70B9;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x79FB;&#x690D;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x539F;&#x866B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x4E8B;&#x524D;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6539;&#x5909;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x304B;&#x3089;&#x306E;TCR&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3068;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x5BB9;&#x6613;&#x3055;&#x3068;&#x901F;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x69CB;&#x7BC9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x79D8;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

SCNT&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x30C8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x539F;&#x866B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x4E8B;&#x524D;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;T&#x7D30;&#x80DE;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;

&#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TCRs)&#xB97C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC815;&#xB82C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB294; T &#xC804;&#xC9C0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD544;&#xC218; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; Tcrs&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xAD00;&#xB828; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7A5;&#xAE30; &#xBB38;&#xD654; &#xD6C4; &#xC790;&#xC8FC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD53C;&#xD560; &#xAE30;&#xC6B8;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC18;&#xBCF5; &#xB41C; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC790;&#xADF9; &#xD6C4;. TCR &#xC54C;&#xD30C;&#xC640; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xCCB4;&#xC778; &#xBC0F; nonendogenous &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC784;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xD1B5;&#xD569; &#xC81C; &#xB2C9;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xB2E8;&#xC810;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xD575; &#xC774;&#xC2DD; &#xD1B5;&#xD574; epigenetic &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Toxoplasma gondii&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBBF8;&#xB9AC; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; T &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3C4;&#xC785;&#xB41C; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC791; &#xC5C6;&#xC774; &#xC0DD; loci&#xC758; TCR &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0C1;&#xB300;&#xC801; &#xC6A9;&#xC774;&#xC131;&#xACFC; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC640; &#xAC19;&#xC740; transnuclear &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB2E4;&#xB978; &#xC9C8;&#xD658; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xAC74;&#xC124;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC57D;&#xC18D;&#xC744; &#xBCF4;&#xC720; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;.

Transnuclear &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; Toxoplasma gondii SCNT &#xD1B5;&#xD574; &#xC5BB;&#xC744; &#xB300; &#xD55C; &#xBBF8;&#xB9AC; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; T &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;.

Los ratones transg&#xE9;nicos que son de reordenamiento de ant&#xED;genos espec&#xED;ficos de receptores de c&#xE9;lulas T (TCR) es una herramienta esencial para estudiar el desarrollo de c&#xE9;lulas T y la funci&#xF3;n. Tales TCRs suelen aislarse de las c&#xE9;lulas T pertinentes despu&#xE9;s de cultivo prolongado, a menudo despu&#xE9;s de la estimulaci&#xF3;n repetida ant&#xED;geno, que inevitablemente sesga la poblaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T utilizado. Integraci&#xF3;n al azar gen&#xF3;mico de la alfa del TCR y la cadena beta y la expresi&#xF3;n de los promotores nonendogenous representan inconvenientes adicionales de los transg&#xE9;nicos. Usando reprogramaci&#xF3;n epigen&#xE9;tica mediante transferencia nuclear de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas, hemos demostrado que las c&#xE9;lulas T con especificidades predefinidos contra Toxoplasma gondii puede ser utilizado para generar modelos de rat&#xF3;n que expresan el TCR de sus loci end&#xF3;genos, sin modificaci&#xF3;n gen&#xE9;tica introducida experimentalmente. La relativa facilidad y rapidez con que estos modelos transnuclear se puede obtener es una promesa para la construcci&#xF3;n de modelos de otras enfermedades.

Los ratones con las caracter&#xED;sticas predefinidas Transnuclear c&#xE9;lulas T del receptor contra el Toxoplasma gondii obtenido a trav&#xE9;s de la SCNT

&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#xFF0C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x662F;&#x4E25;&#x683C;&#x63A7;&#x5236;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4EA7;&#x751F;&#x5668;&#x5B98;&#x7684;&#x9884;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x4ECD;&#x7136;&#x77E5;&#x4E4B;&#x751A;&#x5C11;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5; Yap1&#xFF0C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x76AE;&#x80A4;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6CB3;&#x9A6C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6548;&#x5E94;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x589E;&#x76CA;&#x548C;&#x635F;&#x5931;-&#x7684;-&#x529F;&#x80FD;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A; Yap1 &#x662F;&#x8868;&#x76AE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6269;&#x5F20;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x5236;&#x5668;&#x3002;Yap1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6B64;&#x6548;&#x679C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0E;&#x8BBE;&#x4E3A;&#x53EA;&#x8BFB;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; &alpha;-&#x8FDE;&#x73AF;&#x7D20;&#x3001; &#x4EE5;&#x524D;&#x5377;&#x5165;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x9065;&#x611F;&#x5728;&#x76AE;&#x80A4;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5206;&#x5B50;&#x662F;&#x4E0A;&#x6E38;&#x7684;&#x8D1F;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x7684; Yap1&#x3002;&Alpha;-&#x94FE;&#x86CB;&#x767D;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282;&#x4E0E; 14-3-3 &#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x548C; PP2A &#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x63A7;&#x5236; Yap1 &#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x786E;&#x5B9A; Yap1 &#x4EE5;&#x53CA;&#x91CD;&#x8981;&#x6548;&#x5E94;&quot;&#x4EBA;&#x7FA4;&#x63A7;&#x5236;&quot;&#x5206;&#x5B50;&#x7535;&#x8DEF;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x76AE;&#x80A4;&#x7684;&#x8868;&#x76AE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

Yap1 &#x884C;&#x4E3A;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7684; &alpha;-&#x8FDE;&#x73AF;&#x7D20;&#x4EE5;&#x63A7;&#x5236;&#x8868;&#x76AE;&#x6269;&#x6563;&#x3002;

During development and regeneration, proliferation of tissue-specific stem cells is tightly controlled to produce organs of a predetermined size. The molecular determinants of this process remain poorly understood. Here, we investigate the function of Yap1, the transcriptional effector of the Hippo signaling pathway, in skin biology. Using gain- and loss-of-function studies, we show that Yap1 is a critical modulator of epidermal stem cell proliferation and tissue expansion. Yap1 mediates this effect through interaction with TEAD transcription factors. Additionally, our studies reveal that Î±-catenin, a molecule previously implicated in tumor suppression and cell density sensing in the skin, is an upstream negative regulator of Yap1. Î±-catenin controls Yap1 activity and phosphorylation by modulating its interaction with 14-3-3 and the PP2A phosphatase. Together, these data identify Yap1 as a determinant of the proliferative capacity of epidermal stem cells and as an important effector of a "crowd control" molecular circuitry in mammalian skin.

Yap1 acts downstream of Î±-catenin to control epidermal proliferation.

Pendant le d&eacute;veloppement et la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration, la prolif&eacute;ration des cellules souches de tissu-sp&eacute;cifique est &eacute;troitement contr&ocirc;l&eacute;e pour produire des organes d&#39;une taille pr&eacute;d&eacute;termin&eacute;e. Les d&eacute;terminants mol&eacute;culaires de ce processus restent mal compris. Ici, nous &eacute;tudions la fonction de Yap1, l&#39;effecteur transcriptionnelle de l&#39;hippopotame, signalisation, en biologie de la peau. &Agrave; l&#39;aide d&#39;&eacute;tudes de gain - et perte de fonction, nous montrons que Yap1 est un modulateur critique d&#39;expansion de tissus et de la prolif&eacute;ration des cellules souches &eacute;pidermiques. Yap1 m&eacute;die cet effet gr&acirc;ce &agrave; l&#39;interaction avec les facteurs de transcription DEAM. En outre, nos &eacute;tudes r&eacute;v&egrave;lent que le &alpha;-cat&eacute;nine, une mol&eacute;cule d&eacute;j&agrave; impliqu&eacute;s dans la suppression tumorale et la d&eacute;tection de la densit&eacute; cellulaire dans la peau, est un r&eacute;gulateur n&eacute;gatif en amont de Yap1. &Alpha;-cat&eacute;nine contr&ocirc;le l&#39;activit&eacute; Yap1 et phosphorylation en modulant son interaction avec 14-3-3 et la phosphatase PP2A. Ensemble, ces donn&eacute;es identifient Yap1 comme un d&eacute;terminant de la capacit&eacute; de prolif&eacute;ration des cellules souches &eacute;pidermiques et comme effecteur important d&#39;un circuit de &laquo; contr&ocirc;le de foule &raquo; mol&eacute;culaires dans la peau des mammif&egrave;res.

Yap1 actes en aval de le &alpha;-cat&eacute;nine pour contr&ocirc;ler la prolif&eacute;ration &eacute;pidermique.

W&auml;hrend Entwicklung und Regeneration ist Vermehrung von Gewebe-spezifischen Stammzellen streng kontrolliert, um Organe einer vorgegebenen Gr&ouml;&szlig;e zu produzieren. Die molekularen Determinanten dieses Prozesses bleiben weitgehend unverstanden. Hier untersuchen wir die Funktion des Yap1, die transkriptionelle Effektor die Hippo Signalisierung Pfades, in der Biologie der Haut. Verwendung von Gewinn und Verlust-of Function Studien zeigen wir, dass Yap1 kritische Modulator der epidermalen Stammzellen-Proliferation und Gewebe-Expansion ist. Yap1 vermittelt dieser Effekt durch die Interaktion mit TEAD Transkriptionsfaktoren. Dar&uuml;ber hinaus zeigen unsere Studien, dass &alpha;-Catenin, ein Molek&uuml;l, das zuvor im Tumor Unterdr&uuml;ckung und Zelle Dichte Sensorik in der Haut, impliziert ist eine vorgelagerte negativen Regulator der Yap1. &Alpha;-Catenin steuert Yap1 Aktivit&auml;t und Phosphorylierung durch Modulation der Interaktion mit 14-3-3 und PP2A-Phosphatase. Gemeinsam kennzeichnen diese Daten Yap1 als bestimmender Faktor der proliferativen Kapazit&auml;t des epidermalen Stammzellen und als ein wichtiger Effektor eine &quot;Crowd Control&quot; Molekulare Schaltung in S&auml;ugetier-Haut.

Yap1 Handlungen stromabw&auml;rts der &alpha;-Catenin epidermale Proliferation zu steuern.

Durante lo sviluppo e la rigenerazione, la proliferazione delle cellule staminali tessuto-specifiche &egrave; strettamente controllato per produrre organi di dimensioni predeterminato. I determinanti molecolari di questo processo rimangono scarsamente comprensibili. Qui, si indaga la funzione di Yap1, il effector transcriptional del Hippo signaling pathway, nella biologia della pelle. Mediante studi di guadagno - e perdita di funzione, mostriamo che Yap1 &egrave; un fondamentale modulatore di espansione di tessuto e proliferazione delle cellule staminali epidermiche. Yap1 media questo effetto attraverso l&#39;interazione con i fattori di trascrizione TEAD. Inoltre, i nostri studi rivelano che la &alpha;-catenina, una molecola in precedenza implicato nella soppressione del tumore e cellule densit&agrave; sensing nella pelle, &egrave; un regolatore negativo a Monte di Yap1. &Alpha;-catenina controlla attivit&agrave; Yap1 e fosforilazione modulando la sua interazione con il 14-3-3 e la fosfatasi PP2A. Insieme, questi dati identificano Yap1 come un fattore determinante della capacit&agrave; proliferativa delle cellule staminali epidermiche e come un importante effettore di una circuiteria molecolare &quot;crowd control&quot; nella cute dei mammiferi.

Yap1 atti a valle di &alpha;-Catenina per controllare la proliferazione epidermica.

&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3042;&#x3089;&#x304B;&#x3058;&#x3081;&#x6C7A;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x304C;&#x53B3;&#x3057;&#x304F;&#x7BA1;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;, &#x76AE;&#x819A;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AB;&#x30D0;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; Yap1 &#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5229;&#x5F97;&#x3068;&#x640D;&#x5931;-&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; Yap1 &#x8868;&#x76AE;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x62E1;&#x5927;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5909;&#x8ABF;&#x5668;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Yap1 &#x8AAD;&#x307F;&#x53D6;&#x308A;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x7814;&#x7A76; &alpha;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;, &#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x6291;&#x5236;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x76AE;&#x819A;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x304C;&#x3001;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306E;&#x8CA0;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50; Yap1 &#x306E;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&Alpha;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3; Yap1 &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316; PP2A &#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068; 14-3-3 &#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x8868;&#x76AE;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x884C;&#x5217;&#x5F0F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x76AE;&#x819A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x300C;&#x7FA4;&#x8846;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x300D;&#x5206;&#x5B50;&#x56DE;&#x8DEF;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066; Yap1 &#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8868;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B; &alpha;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E; Yap1 &#x884C;&#x70BA;&#x4E0B;&#x6D41;&#x3002;

&#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD00;&#xB828; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xBBF8;&#xB9AC; &#xACB0;&#xC815; &#xB41C; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xACB0;&#xC815; &#xC694;&#xC778; &#xB0A8;&#xC544; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC774;&#xD574;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; Yap1, &#xD53C;&#xBD80; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC2E0;&#xD638; &#xD558;&#xB294; &#xB9C8;&#xC758; transcriptional &#xC774;&#xD399;&#xD130;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB4DD; &#xBC0F; &#xC190;&#xC2E4;-&#xC758;-&#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Yap1 &#xC0C1;&#xD53C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xACFC; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xD655;&#xC7A5;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Yap1 TEAD &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC911;&#xC7AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &alpha;-catenin, &#xBD84;&#xC790; &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xD53C;&#xBD80;&#xC5D0; &#xBC00;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; yap1&#xB294; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xB124;&#xAC70;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB294; &#xACF5;&#xAC1C;. &Alpha;-catenin&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; 14-3-3 &#xBC0F; PP2A &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558; &#xC5EC; Yap1 &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xD53C;&#xBD80;&#xC5D0; &quot;&#xAD70;&#xC911; &#xD1B5;&#xC81C;&quot; &#xBD84;&#xC790; &#xD68C;&#xB85C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xBC0F; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD; &#xB2A5;&#xB825;&#xC758; &#xD589;&#xB82C;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; yap1&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD45C; &#xD53C; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &alpha;-catenin&#xC758; &#xD558;&#xB958; &#xD589;&#xC704; Yap1

Durante el desarrollo y regeneraci&oacute;n, proliferaci&oacute;n de c&eacute;lulas madre de tejidos espec&iacute;ficos es firmemente controlado para producir &oacute;rganos de un tama&ntilde;o predeterminado. Los determinantes moleculares de este proceso siguen siendo mal entendidos. Aqu&iacute;, investigamos la funci&oacute;n de Yap1, el efector transcripcional del hipop&oacute;tamo se&ntilde;alizaci&oacute;n v&iacute;a, en la biolog&iacute;a de la piel. Mediante estudios de ganancia y p&eacute;rdida de funci&oacute;n, demostramos que Yap1 es un modulador importante de expansi&oacute;n de tejido y la proliferaci&oacute;n de c&eacute;lulas epid&eacute;rmicas. Yap1 media este efecto a trav&eacute;s de la interacci&oacute;n con factores de transcripci&oacute;n TEAD. Adem&aacute;s, nuestros estudios revelan que la &alpha;-catenina, una mol&eacute;cula previamente implicado en la supresi&oacute;n tumoral y detecci&oacute;n de densidad celular en la piel, es un regulador negativo ascendente de Yap1. &Alpha;-catenina controla la actividad Yap1 y fosforilaci&oacute;n modulando su interacci&oacute;n con 14-3-3 y la fosfatasa PP2A. Juntos, estos datos identifican Yap1 como determinante de la capacidad proliferativa de las c&eacute;lulas madre epid&eacute;rmicas y como un importante generador de efectos de un circuito molecular &quot;control de masas&quot; en piel mam&iacute;fero.

Yap1 actos aguas abajo de la &alpha;-catenina para controlar la proliferaci&oacute;n epid&eacute;rmica.

&#x6CDB;&#x7D20;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x63A7;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x62A2;&#x5148;&#x53BB;&#x9664;&#x6CDB;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x57FA;&#x8D28;&#x4ECE;&#x3001; &#x6BD4;&#x4F7F;&#x7528;&#x6BD2;&#x6027;&#x8F83;&#x8F7B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x6CBB;&#x7597;&#x663E;&#x793A;&#x6240;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x6D3B;&#x8DC3;&#x3001; &#x7231;&#x6CFC;&#x65AF;&#x5766;-&#x5DF4;&#x5C14;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6E90;&#x6027; deubiquitylating &#x9176; (EBV &#x914D;&#x97F3;&#xFF09; &#x5757;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x964D;&#x89E3;&#x7684;&#x6E38;&#x79BB;&#x548C; ER &#x6D3E;&#x751F;&#x3002;&#x7EA0;&#x7F20;&#x86CB;&#x767D;&#x5728; ER &#x8154;&#x4E2D;&#x7684;&#x627F;&#x8BA4;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x6DB2;&#x548C;&#x9000;&#x5316;&#x7684;&#x8131;&#x4F4D;&#x901A;&#x5E38;&#x7D27;&#x5BC6;&#x8026;&#x5408;&#x4F46;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BA9;&#x7531; EBV &#x914D;&#x97F3;&#xFF1A; &#x6E90;&#x81EA; ER &#x7684;&#x7EA0;&#x7F20;&#x7CD6;&#x86CB;&#x767D;&#x79EF;&#x7D2F;&#x4E0E;&#x6E38;&#x79BB;&#x7684;&#x4F34;&#x4FA3;&#x4E00;&#x8D77;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E2D;&#x95F4;&#x7684; deglycosylated&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x5F3A;&#x8C03;&#x8131;&#x4F4D;&#x53CD;&#x5E94;&#x5B8C;&#x6210;&#x914D;&#x97F3;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x7684;&#x65B0;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;

&#x6CDB;&#x7D20;-&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x9176;&#x5C01;&#x9501;&#x3002;

Ubiquitin-dependent processes control much of cellular physiology. We show that expression of a highly active, Epstein-Barr virus-derived deubiquitylating enzyme (EBV-DUB) blocks proteasomal degradation of cytosolic and ER-derived proteins by preemptive removal of ubiquitin from proteasome substrates, a treatment less toxic than the use of proteasome inhibitors. Recognition of misfolded proteins in the ER lumen, their dislocation to the cytosol, and degradation are usually tightly coupled but can be uncoupled by the EBV-DUB: a misfolded glycoprotein that originates in the ER accumulates in association with cytosolic chaperones as a deglycosylated intermediate. Our data underscore the necessity of a DUB activity for completion of the dislocation reaction and provide a new means of inhibition of proteasomal proteolysis with reduced cytotoxicity.

Enzymatic blockade of the ubiquitin-proteasome pathway.

D&#xE9;pendante de l&#x26;#39;ubiquitine processus contr&#xF4;lent une grande partie de la physiologie cellulaire. Nous montrons que l&#x26;#39;expression d&#x26;#39;un tr&#xE8;s actif, le virus Epstein-Barr virus-enzyme d&#xE9;riv&#xE9;e deubiquitylating (EBV-DUB) blocs d&#xE9;gradation par le prot&#xE9;asome des prot&#xE9;ines cytosoliques et ER-d&#xE9;riv&#xE9; par le retrait pr&#xE9;ventif de l&#x26;#39;ubiquitine &#xE0; partir de substrats du prot&#xE9;asome, un traitement moins toxique que l&#x26;#39;utilisation du prot&#xE9;asome inhibiteurs. Reconnaissance des prot&#xE9;ines mal repli&#xE9;es dans la lumi&#xE8;re du RE, leur dislocation vers le cytosol, et la d&#xE9;gradation sont g&#xE9;n&#xE9;ralement &#xE9;troitement coupl&#xE9;, mais ne peut &#xEA;tre dissoci&#xE9;e par le EBV-DUB: une glycoprot&#xE9;ine mal repli&#xE9;e qui prend naissance dans la salle d&#x26;#39;urgence s&#x26;#39;accumule en association avec chaperons cytosoliques comme d&#xE9;glycosyl&#xE9;e interm&#xE9;diaire. Nos donn&#xE9;es soulignent la n&#xE9;cessit&#xE9; d&#x26;#39;une activit&#xE9; DUB pour l&#x26;#39;ach&#xE8;vement de la r&#xE9;action de dislocation et de fournir un nouveau moyen d&#x26;#39;inhibition de la prot&#xE9;olyse prot&#xE9;asome &#xE0; la cytotoxicit&#xE9; r&#xE9;duite.

Blocus enzymatique de la voie ubiquitine-prot&#xE9;asome

Ubiquitin-abh&auml;ngige Prozesse steuern viel von zellul&auml;ren Physiologie. Wir zeigen diesen Ausdruck einer hochaktiven, Epstein - Barr-Virus-abgeleitete Deubiquitylating Enzym (EBV-DUB) Bl&ouml;cke Proteasomal Abbau der Zytosolische und ER abgeleiteten Proteine durch pr&auml;ventive Entfernung von Ubiquitin aus Proteasom Substrate, eine Behandlung weniger toxisch als die Verwendung von Proteasom-Inhibitoren. Anerkennung von misfolded Proteine in das ER-Lumen, ihre Verrenkung im Zytosol und Abbau sind in der Regel eng gekoppelt aber von der EBV-DUB abgekuppelt werden kann: ein misfolded Glykoprotein, das in der Notaufnahme stammt sammelt sich in Verbindung mit Zytosolische Chaperone als eine fortgeschrittene Deglycosylated. Unsere Daten unterstreichen die Notwendigkeit einer DUB-Aktivit&auml;t f&uuml;r die Fertigstellung der Dislokation Reaktion und bieten ein neues Mittel zur Hemmung der Proteasomal Proteolyse reduzierte Zytotoxizit&auml;t.

Enzymatische Blockade des Ubiquitin-Proteasom-Signalweges.

Ubiquitina-dipendente processi di controllo gran parte della fisiologia cellulare. Mostriamo che espressione di una degradazione di proteosomale deubiquitylating altamente attivo, derivato dal virus di Epstein - Barr enzima (EBV-DUB) blocchi di proteine citosoliche ed ER-derivato dalla rimozione preventiva di ubiquitin da substrati del proteasoma, un trattamento meno tossici rispetto all&#39;uso di inibitori del proteasoma. Riconoscimento delle proteine malpiegate nel lume ER, loro dislocazione al citosol e degrado sono di solito strettamente collegate ma pu&ograve; essere disgiunto da EBV-DUB: una glicoproteina malpiegata che origina nel ER si accumula in associazione con chaperoni citosolici come un deglycosylated intermedio. I nostri dati sottolineano la necessit&agrave; di un&#39;attivit&agrave; DUB per il completamento della reazione di dislocazione e di forniranno un nuovo mezzo di inibizione della proteolisi proteosomale con ridotta citotossicit&agrave;.

Blocco enzimatico del pathway ubiquitina-proteasoma.

&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x6D3B;&#x6027;&#x3001;Epstein-Barr&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x8131;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#xFF08;EBV-DUB&#xFF09;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x57FA;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5148;&#x5236;&#x9664;&#x53BB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3068;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x89E3;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3088;&#x308A;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E;&#x4F4E;&#x3044;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3002;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x5185;&#x8154;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30BE;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x8EE2;&#x4F4D;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x89E3;&#x306B;&#x30DF;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x5BC6;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;EBV-DUB&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5207;&#x308A;&#x96E2;&#x3055;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;ER&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x30DF;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x3057;&#x305F;&#x7CD6;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30EB;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x4F4D;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x5B8C;&#x4E86;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;DUB&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x4F4E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x3067;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x624B;&#x6BB5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#xB7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x7CFB;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x906E;&#x65AD;

&#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xC885;&#xC18D; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;, &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB3C5;&#xC131;&#xC774; &#xC801;&#xC740; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC758; &#xC120;&#xC81C; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558; &#xC5EC; cytosolic &#xBC0F; &#xC751;&#xAE09;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xD65C;&#xC131;, &#xC5E1; &#xC2A4;&#xD0C0;&#xC778;-&#xBC14; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; deubiquitylating &#xD6A8;&#xC18C; (EBV DUB) &#xBE14;&#xB85D; proteasomal &#xC800;&#xD558;&#xC758; &#xD574;&#xB2F9; &#xC2DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC751;&#xAE09;&#xC2E4; &#xB8E8;&#xBA58; misfolded &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC778;&#xC2DD;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC804;&#xC704; cytosol, &#xC131;&#xB2A5; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xACB0;&#xD569; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; EBV DUB &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC218;: &#xC751;&#xAE09;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB798; misfolded &#xB2F9;&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; deglycosylated &#xC911;&#xAC04;&#xC73C;&#xB85C; cytosolic &#xBCF4;&#xD638;&#xC790;&#xC640; &#xD611;&#xD68C;&#xC5D0; &#xCD95;&#xC801;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC804;&#xC704; &#xBC18;&#xC751; &#xC644;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC7AC; &#xB179;&#xC74C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xD544;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD558; &#xACE0; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; proteasomal &#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC218;&#xB2E8;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;-&#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBD09;&#xC1C4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La ubiquitina que dependen de los procesos de control de gran parte de la fisiolog&#xED;a celular. Se demuestra que la expresi&#xF3;n de una gran actividad, virus Epstein-Barr las enzimas derivadas de deubiquitylating (EBV-DUB) bloquea la degradaci&#xF3;n del proteasoma de prote&#xED;nas citos&#xF3;licas y ER-derivada de la eliminaci&#xF3;n preventiva de la ubiquitina a partir de sustratos del proteasoma, un tratamiento menos t&#xF3;xico que el uso de proteasoma inhibidores. El reconocimiento de prote&#xED;nas mal plegadas en el lumen del RE, su dislocaci&#xF3;n al citosol y la degradaci&#xF3;n son generalmente bien acoplados, pero puede ser desacoplado por el VEB-DUB: una glicoprote&#xED;na mal plegada que se origina en la sala de emergencia se acumula en asociaci&#xF3;n con las chaperonas citos&#xF3;licas como desglucosilada intermedio. Nuestros datos ponen de relieve la necesidad de una actividad de DUB para la finalizaci&#xF3;n de la reacci&#xF3;n de desplazamiento y proporcionar un nuevo medio de la inhibici&#xF3;n de la prote&#xF3;lisis proteasomal con la citotoxicidad reducida.

El bloqueo enzim&#xE1;tico de la v&#xED;a de la ubiquitina-proteasoma

&#x7C7B;&#x4E8C; MHC &#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4E3A;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x7C7B;&#x4E8C; MHC &#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x5448;&#x53CA;&#x968F;&#x540E;&#x5F00;&#x59CB;&#x7684;&#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x6E38;&#x79BB;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178; (K225) &#x7684; &beta;-&#x94FE;&#x7C7B;&#x4E8C; MHC &#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x6CDB;&#x8868;&#x660E;&#x8981;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x6E38;&#x79BB;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x7559; &#xFF08;&#x6211;-A-&beta;-K225R &#x4E0E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;) &#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6807;&#x8BB0;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7248;&#x672C;&#x66FF;&#x6362;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; &beta;-&#x94FE;&#x8F68;&#x8FF9;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684; MHC II &#x7C7B;&#x800C;&#x6211;-A-&beta; &#x4E0E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x6C34;&#x5E73;&#x4F1A;&#x5347;&#x9AD8;&#x548C;&#x672A;&#x6210;&#x719F;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x663E;&#x793A;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762; MHC II &#x7C7B;&#x7684;&#x518D;&#x5206;&#x914D;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5982;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x5448;&#x6548;&#x7387;&#x4E0D;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x6211;-A-&beta;-K225R &#x4E0E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6F14;&#x793A;&#x6587;&#x7A3F;&#x7684;&#x9002;&#x5F53;&#x5177;&#x4F53; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x5375;&#x6E05;&#x86CB;&#x767D;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x6211;-A-&beta;-K225R &#x4E0E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x52A8;&#x7269;&#x6B63;&#x5E38; CD4 T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#xFF0C;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x4EA7;&#x751F;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#x5728;&#x54CD;&#x5E94;&#x6A21;&#x578B;&#x6297;&#x539F;&#x548C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x5728;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x8D29;&#x8FD0;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x6CDB; K225 &beta;-&#x94FE;&#x4E0D;&#x662F;&#x7C7B; MHC II &#x4EA7;&#x54C1;&#x6297;&#x539F;&#x6F14;&#x793A;&#x6587;&#x7A3F;&#x6216;&#x6297;&#x4F53;&#x751F;&#x4EA7;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;

&#x4E8C;&#x3001; MHC &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7C7B;&#x6CDB;&#x7D20;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x662F;&#x6F14;&#x793A;&#x6587;&#x7A3F;&#x6297;&#x539F;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x524D;&#x63D0;&#x3002;

Controlled localization of class II MHC molecules is essential for proper class II MHC-restricted antigen presentation and the subsequent initiation of an adaptive immune response. Ubiquitination of class II MHC molecules on cytosolic lysine (K225) of the Î²-chain has been shown to affect localization of the complex. We generated mice in which the endogenous Î²-chain locus is replaced with a GFP tagged mutant version that lacks the cytosolic lysine residue (I-A-Î²-K225R-EGFP). These mice have elevated levels of class II MHC as compared to I-A-Î²-EGFP mice, and immature bone marrow-derived dendritic cells show redistribution of class II MHC to the cell surface. Nonetheless, in these same cells efficiency of antigen presentation is unaffected in I-A-Î²-K225R-EGFP mice, as assayed for presentation of ovalbumin to appropriately specific T cells. The I-A-Î²-K225R-EGFP animals have normal CD4 T cell populations and are capable of generating antigen-specific antibody in response to model antigens and viral infection. We therefore conclude that in our experimental system modulation of trafficking by ubiquitination of residue K225 of the Î²-chain is not essential for the function of class II MHC products in antigen presentation or antibody production.

Ubiquitin-dependent control of class II MHC localization is dispensable for antigen presentation and antibody production.

Localisation contr&#xF4;l&#xE9;e des mol&#xE9;cules du CMH de classe II est essentiel pour la classe II bonne pr&#xE9;sentation antig&#xE8;ne du CMH-restreinte et l&#x26;#39;ouverture ult&#xE9;rieure d&#x26;#39;une r&#xE9;ponse immunitaire adaptative. L&#x26;#39;ubiquitination des mol&#xE9;cules du CMH de classe II sur cytosolique lysine (K225) de la &#x3B2;-cha&#xEE;ne a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9; qu&#x26;#39;elle affecte la localisation du complexe. Nous avons g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; des souris chez lesquelles le &#x3B2; endog&#xE8;ne de la cha&#xEE;ne locus est remplac&#xE9;e par une GFP &#xE9;tiquet&#xE9; version mutante qui n&#x26;#39;a pas le r&#xE9;sidu lysine cytosolique (IA-&#x3B2;-K225R-EGFP). Ces souris ont des niveaux &#xE9;lev&#xE9;s de CMH de classe II par rapport &#xE0; IA-&#x3B2;-EGFP souris, et immatures de moelle osseuse des cellules dendritiques d&#xE9;riv&#xE9;es montrent la redistribution des CMH de classe II &#xE0; la surface cellulaire. N&#xE9;anmoins, dans ces m&#xEA;me efficacit&#xE9; les cellules de pr&#xE9;sentation de l&#x26;#39;antig&#xE8;ne n&#x26;#39;est pas affect&#xE9; dans IA-&#x3B2;-K225R-EGFP souris, comme test&#xE9;s pour la pr&#xE9;sentation de l&#x26;#39;ovalbumine aux cellules T sp&#xE9;cifiques de mani&#xE8;re appropri&#xE9;e. Les animaux IA-&#x3B2;-K225R-EGFP ont normales populations CD4 des cellules T et sont capables de g&#xE9;n&#xE9;rer antig&#xE8;ne-anticorps sp&#xE9;cifique en r&#xE9;ponse &#xE0; des antig&#xE8;nes de mod&#xE8;le et l&#x26;#39;infection virale. Nous concluons donc que, dans notre syst&#xE8;me de modulation exp&#xE9;rimentale de la traite par ubiquitination de r&#xE9;sidus K225 de la &#x3B2;-cha&#xEE;ne n&#x26;#39;est pas essentielle pour la fonction des produits du CMH de classe II dans la pr&#xE9;sentation antig&#xE9;nique ou la production d&#x26;#39;anticorps.

D&#xE9;pendante de l&#x26;#39;ubiquitine de contr&#xF4;le de la classe II du CMH de localisation n&#x26;#39;est pas indispensable pour la pr&#xE9;sentation d&#x26;#39;antig&#xE8;nes et de la production d&#x26;#39;anticorps

Kontrollierte Lokalisierung von Klasse-II-MHC-Molek&uuml;le ist essentiell f&uuml;r die passenden Klasse II MHC-eingeschr&auml;nkte Antigen-Pr&auml;sentation und die nachfolgende Einleitung einer adaptiven Immunantwort. Ubiquitination der Klasse II MHC-Molek&uuml;le auf Zytosolische Lysin (K225) der &beta;-Kette hat sich gezeigt, zur Lokalisierung des Komplexes zu beeinflussen. Wir generierten M&auml;use, in denen der endogenen &beta;-Kette-Locus mit einer GFP markierte mutant Version ersetzt wird, die den Zytosolische Lysin R&uuml;ckstand (benutzt wird I-A-&beta;-K225R-EGFP) fehlt. Diese M&auml;use haben erh&ouml;hte Ebenen Klasse II MHC im Vergleich zu ich-A-&beta;-EGFP-M&auml;usen und unreife Knochenmark-abgeleitete dendritische Zellen zeigen Umverteilung der Klasse II MHC an der Zelloberfl&auml;che. Dennoch ist Effizienz der Antigen-Pr&auml;sentation in diesen gleichen Zellen in ich-A-&beta;-K225R-EGFP-M&auml;usen, unber&uuml;hrt, wie f&uuml;r die Pr&auml;sentation von Eieralbumin entsprechend spezifische T-Zellen normalisiert. Die ich-A-&beta;-K225R-EGFP-Tiere sind normale CD4 T-Zelle-Populationen und erzeugen von Antigen-spezifische Antik&ouml;rper als Reaktion auf Modell-Antigene und Virusinfektion. Wir schlie&szlig;en daher, dass in unserer Experimentalsystem Modulation des Menschenhandels durch Ubiquitination R&uuml;ckstand K225 der &beta;-Kette nicht notwendig f&uuml;r die Funktion der Klasse II MHC-Produkte in der Antigen-Pr&auml;sentation oder Antik&ouml;rper-Produktion.

Ubiquitin-abh&auml;ngige Kontrolle der Klasse II MHC-Lokalisierung ist Antigen-Pr&auml;sentation und Antik&ouml;rperproduktion entbehrlich.

Controllato la localizzazione delle molecole MHC di II classe &egrave; essenziale per la presentazione dell&#39;antigene II MHC-ristretta classe propria e la successiva apertura di una risposta immunitaria adattativa. Ubiquitination delle molecole MHC di II classe sulla lisina citosolico (K225) della &beta;-catena ha dimostrato di influenzare la localizzazione del complesso. Abbiamo generato topi in cui il locus della &beta;-catena endogena viene sostituito con una versione mutante tagged GFP che manca il residuo di lisina citosolico (I-A-&beta;-K225R-EGFP). Questi topi hanno elevati livelli di classe II MHC rispetto ai-A-&beta;-EGFP topi, e cellule dendritiche derivate da midollo osseo immature Visualizza ridistribuzione della classe II MHC sulla superficie cellulare. Comunque, in queste stesse cellule efficienza di presentazione dell&#39;antigene &egrave; affetto nei-A-&beta;-K225R-EGFP topi, come dosati per la presentazione di ovoalbumina opportunamente specifiche cellule T. Gli animali-A-&beta;-K225R-EGFP hanno popolazioni di cellule T CD4 normale e sono in grado di generare anticorpi antigene-specifici in risposta agli antigeni modello e infezione virale. Concludiamo quindi che nel nostro sistema sperimentale modulazione della tratta di ubiquitination dei residui K225 della &beta;-catena non &egrave; essenziale per la funzione dei prodotti MHC di II classe nella presentazione dell&#39;antigene o la produzione dell&#39;anticorpo.

Ubiquitina-dipendente dal controllo della localizzazione MHC di II classe &egrave; superfluo per la presentazione dell&#39;antigene e la produzione dell&#39;anticorpo.

&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;II MHC&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x5236;&#x5FA1;&#x306F;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;II MHC&#x62D8;&#x675F;&#x6027;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x793A;&#x3068;&#x9069;&#x5FDC;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; &#x3B2;&#x9396;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#xFF08;K225&#xFF09;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;II MHC&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x3B2;&#x9396;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#xFF08;IA-&#x3B2;-K225R-EGFP&#xFF09;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;GFP&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x304D;&#x306E;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x7F6E;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x3002; IA-&#x3B2;-EGFP&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;MHC&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;II&#x306E;&#x4E0A;&#x6607;&#x200B;&#x200B;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x672A;&#x719F;&#x306A;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7531;&#x6765;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x306B;MHC&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;II&#x306E;&#x518D;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9069;&#x5207;&#x306B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x30AA;&#x30DC;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x793A;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x540C;&#x3058;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x5316;&#x3067;&#x306F;&#x3001;IA-&#x3B2;-K225R-EGFP&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; IA-&#x3B2;-K225R-EGFP&#x52D5;&#x7269;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;CD4 T&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x6297;&#x539F;&#x3084;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3B2;&#x9396;&#x306E;&#x6B8B;&#x57FA;K225&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x306E;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x3067;&#x306F;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x793A;&#x3084;&#x6297;&#x4F53;&#x7523;&#x751F;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;II MHC&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;II MHC&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x5236;&#x5FA1;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x793A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6297;&#x4F53;&#x7523;&#x751F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II MHC &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xB294; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II MHC &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. Ubiquitination cytosolic lysine (K225) &beta;-&#xCCB4;&#xC778;&#xC5D0; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II MHC &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC918; &#xC654;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0DD;&#xC131; &#xC950; &#xC0DD; &beta;-&#xCCB4;&#xC778; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4; cytosolic lysine &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; (I-A-&beta;-K225R-EGFP) &#xBD80;&#xC871; GFP &#xD0DC;&#xADF8; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC84;&#xC804;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC14;&#xB01D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II MHC I-A-&beta;-EGFP &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC218;&#xC900; &#xB192;&#xC740; &#xACE0; &#xBBF8;&#xC219;&#xD55C; &#xACE8; &#xC218; &#xC720;&#xB798; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; II MHC &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xC758; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xADF8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0;,&#xC774; &#xAC19;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC81C;&#xC2DC;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC774; &#xC544;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB09C;-A-&beta;-K225R-EGFP &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294; ovalbumin &#xC801;&#xC808; &#xD558; &#xAC8C; &#xD2B9;&#xC815; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC758; &#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD84;&#xC11D;. &#xB09C;-A-&beta;-K225R-EGFP &#xB3D9;&#xBB3C;&#xACFC; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; CD4 T &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC751;&#xB2F5; &#xBAA8;&#xB378; &#xD56D; &#xC6D0; &#xBC0F; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC73C;&#xB85C; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; ubiquitination&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC758; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &beta; &#xC0AC;&#xC2AC;&#xC758; K225 &#xC5C6;&#xB2E4;&#xB294; &#xD544;&#xC218; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II MHC &#xD56D; &#xC6D0; &#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158; &#xB610;&#xB294; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xD488;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACB0;&#xB860;.

&#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II MHC &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC758; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xC885;&#xC18D; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC740; &#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158; &#xD56D; &#xC6D0; &#xBC0F; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xD544;&#xC218;.

La localizaci&#xF3;n controlado de clase II mol&#xE9;culas MHC de clase es esencial para la correcta presentaci&#xF3;n de ant&#xED;genos MHC II restringida y el posterior inicio de una respuesta inmune adaptativa. Ubiquitinaci&#xF3;n de clase II mol&#xE9;culas MHC sobre citos&#xF3;lica lisina (K225) de la &#x3B2;-cadena se ha demostrado que afecta a la localizaci&#xF3;n del complejo. Hemos generado ratones en los que se sustituye el end&#xF3;geno &#x3B2;-cadena locus con un GFP etiquetados versi&#xF3;n mutante que carece del residuo lisina citos&#xF3;lica (IA-&#x3B2;-K225R-EGFP). Estos ratones tienen niveles elevados de MHC de clase II, en comparaci&#xF3;n con IA-&#x3B2;-EGFP ratones, y inmaduras de m&#xE9;dula &#xF3;sea c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas muestran redistribuci&#xF3;n de MHC de clase II a la superficie celular. No obstante, en estas c&#xE9;lulas eficiencia misma de la presentaci&#xF3;n de ant&#xED;genos no se ve afectada en IA-&#x3B2;-K225R-EGFP ratones, como ensayadas para la presentaci&#xF3;n de la ovoalb&#xFA;mina de c&#xE9;lulas T espec&#xED;ficas apropiadamente. Los animales IA-&#x3B2;-K225R-EGFP tienen normales poblaciones de c&#xE9;lulas T CD4 y son capaces de generar ant&#xED;geno-anticuerpo espec&#xED;fico en respuesta a ant&#xED;genos del modelo y la infecci&#xF3;n viral. Por lo tanto, la conclusi&#xF3;n de que en nuestro sistema experimental de modulaci&#xF3;n de tr&#xE1;fico por ubiquitinaci&#xF3;n de residuo K225 de la &#x3B2;-cadena no es esencial para la funci&#xF3;n de la clase II MHC productos en la presentaci&#xF3;n de ant&#xED;genos o la producci&#xF3;n de anticuerpos.

La ubiquitina-dependiente de Control de MHC de clase II localizaci&#xF3;n es prescindible para la presentaci&#xF3;n de ant&#xED;genos y anticuerpos de Producci&#xF3;n

&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x56DB;&#x4E2A;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; Oct3/4&#x3001; Sox2&#x3001; Klf4 &#x548C; c-Myc &#x5F02;&#x4F4D;&#x8868;&#x8FBE;&#x6838;&#x91CD;&#x7F16;&#x7A0B;&#x7684;&#x6765;&#x81EA;&#x4E0D;&#x540C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A; postmitotic &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x662F;&#x5426;&#x6613;&#x53D7;&#x76F4;&#x63A5;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x4EA7;&#x540E;&#x7684;&#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x7EDD;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x662F; postmitotic&#xFF0C;&#x9002;&#x4E8E;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x91CD;&#x7F16;&#x7A0B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5F02;&#x4F4D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x5178;&#x578B;&#x7F16;&#x7A0B;&#x56E0;&#x7D20;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x4EA7;&#x540E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x9AD8;&#x6548;&#x91CD;&#x7F16;&#x7A0B;&#x662F;&#x53EA;&#x53D6;&#x5F97;&#x540E;&#x5F3A;&#x8FEB;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684; p53 &#x6291;&#x5236;&#x3002;&#x53E6;&#x5916;&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x5143;&#x7D20; 1 &#x6C89;&#x9ED8;&#x8F6C;&#x5F55;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x57FA;&#x56E0;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x6548;&#x7387;&#x4E0E;&#x7F16;&#x7A0B;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x7EC8;&#x672B;&#x5206;&#x5316;&#x4EA7;&#x540E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x80FD;&#x591F;&#x901A;&#x8FC7;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x91CD;&#x7F16;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x72B6;&#x6001;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x6CBF;&#x88AD;&#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6291;&#x5236;&#x6548;&#x7387;&#x66F4;&#x9AD8;&#x3002;

&#x91CD;&#x7F16;&#x7A0B;&#x4EA7;&#x540E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D8;&#x6210;&#x7531;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

Pluripotent cells can be derived from different types of somatic cells by nuclear reprogramming through the ectopic expression of four transcription factors, Oct3/4, Sox2, Klf4, and c-Myc. However, it is unclear whether postmitotic neurons are susceptible to direct reprogramming. Here, we show that postnatal cortical neurons, the vast majority of which are postmitotic, are amenable to epigenetic reprogramming. However, ectopic expression of the four canonical reprogramming factors is not sufficient to reprogram postnatal neurons. Efficient reprogramming was only achieved after forced cell proliferation by p53 suppression. Additionally, overexpression of repressor element-1 silencing transcription, a suppressor of neuronal gene activity, increased reprogramming efficiencies in combination with the reprogramming factors. Our findings indicate that terminally differentiated postnatal neurons are able to acquire the pluripotent state by direct epigenetic reprogramming, and this process is made more efficient through the suppression of lineage specific gene expression.

Reprogramming of postnatal neurons into induced pluripotent stem cells by defined factors.

Les cellules pluripotentes peuvent provenir de diff&#xE9;rents types de cellules somatiques par la reprogrammation nucl&#xE9;aire &#xE0; travers l&#x26;#39;expression ectopique de quatre facteurs de transcription, Oct3 / 4, Sox2, Klf4, et c-Myc. Toutefois, il n&#x26;#39;est pas clair si les neurones post-mitotiques sont susceptibles d&#x26;#39;orienter la reprogrammation. Ici, nous montrons que les neurones corticaux postnatales, la grande majorit&#xE9; qui sont, de post-mitotique se pr&#xEA;tent &#xE0; la reprogrammation &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique. Toutefois, l&#x26;#39;expression ectopique des quatre canoniques facteurs de reprogrammation n&#x26;#39;est pas suffisant pour reprogrammer les neurones post-natales. Reprogrammation efficace a &#xE9;t&#xE9; obtenu qu&#x26;#39;apr&#xE8;s la prolif&#xE9;ration cellulaire par la suppression forc&#xE9;e de p53. En outre, la surexpression de la transcription silence r&#xE9;presseur &#xE9;l&#xE9;ment-1, un suppresseur de l&#x26;#39;activit&#xE9; des g&#xE8;nes des neurones, augmentation de l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de reprogrammation en combinaison avec les facteurs de reprogrammation. Nos r&#xE9;sultats indiquent que les neurones diff&#xE9;renci&#xE9;s terminale postnatales sont en mesure d&#x26;#39;acqu&#xE9;rir l&#x26;#39;&#xE9;tat pluripotent par reprogrammation &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique directe, et ce processus est rendu plus efficace par la suppression de l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes lign&#xE9;e sp&#xE9;cifique.

Reprogrammation des neurones post-nataux en cellules souches pluripotentes induites par des facteurs d&#xE9;finis

Pluripotenten Zellen k&ouml;nnen abgeleitet werden, welche verschiedene Arten von K&ouml;rperzellen durch nukleare Neuprogrammierung durch die ektopische Expression von vier Transkriptionsfaktoren, mit Oct3/4, Sox2, Klf4 und c-Myc. Es ist jedoch unklar, ob postmitotischen Neuronen sind anf&auml;llig f&uuml;r direkte Reprogrammierung. Hier zeigen wir, dass postnatale kortikale Neuronen, die allermeisten davon postmitotischen sind, f&uuml;r die Parallelisierung auf epigenetischen Reprogrammierung sind. Ektopische Expression der vier kanonischen Neuprogrammierung Faktoren ist jedoch nicht ausreichend reprogram postnatale Neuronen. Eine effiziente Anpassung war nur nach der erzwungenen Zellproliferation durch p53 Unterdr&uuml;ckung erreicht. Dar&uuml;ber hinaus erh&ouml;ht eine &Uuml;berexpression von Hemmer Element-1 silencing Transkription, eine Schutzbeschaltung der neuronalen Genaktivit&auml;t, Neuprogrammierung Effizienz in Kombination mit der Neuprogrammierung Faktoren. Unsere Ergebnisse zeigen, dass unheilbar differenzierte postnatale Neuronen in der Lage sind, den pluripotenten Zustand von direkten epigenetischen Reprogrammierung zu erwerben, und dieser Proze&szlig; effizienter durch die Unterdr&uuml;ckung der Linie spezifische Genexpression erfolgt.

Eine Anpassung der postnatalen Neuronen in induzierte pluripotente Stammzellen durch definierte Faktoren.

Cellule pluripotenti possono essere derivate da diversi tipi di cellule somatiche di riprogrammazione nucleare mediante l&#39;espressione ectopica di quattro fattori di trascrizione, Oct3/4, Sox2, Klf4 e c-Myc. Tuttavia, non &egrave; chiaro se i neuroni postmitotic sono suscettibili di riprogrammazione diretta. Qui, ci mostrano che i neuroni corticali postnatali, la stragrande maggioranza dei quali sono postmitotic, sono suscettibili di riprogrammazione epigenetica. Tuttavia, espressione ectopica dei quattro fattori di riprogrammazione canonici non &egrave; sufficiente a riprogrammare i neuroni postnatali. Riprogrammazione efficiente &egrave; stato raggiunto solo dopo la proliferazione cellulare forzato dalla soppressione di p53. Inoltre, la sovraespressione di trascrizione silenziamento del elemento-1 del repressore, un soppressore dell&#39;attivit&agrave; del gene neuronale, aumentato riprogrammazione efficienze in combinazione con i fattori di riprogrammazione. I nostri risultati indicano che i neuroni postnatali terminalmente differenziati sono in grado di acquisire lo stato di pluripotent di riprogrammazione epigenetica diretto, e questo processo &egrave; reso pi&ugrave; efficiente attraverso la soppressione dell&#39;espressione del gene specifico lignaggio.

Riprogrammazione dei neuroni postnatali in cellule staminali pluripotenti indotte da fattori definiti.

&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;4&#x3064;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;Oct3 / 4&#x306E;&#x3001;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;KLF4&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;c-Myc&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6838;&#x521D;&#x671F;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x578B;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5206;&#x88C2;&#x7D42;&#x4E86;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x304C;&#x66F8;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x6307;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x51FA;&#x751F;&#x5F8C;&#x306E;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3001;&#x5206;&#x88C2;&#x305D;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x5927;&#x534A;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;4&#x3064;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x521D;&#x671F;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x51FA;&#x751F;&#x5F8C;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;p53&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F37;&#x5236;&#x7684;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x5F8C;&#x306B;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;-1&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x8EE2;&#x5199;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3001;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3067;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x4ECA;&#x56DE;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x51FA;&#x751F;&#x5F8C;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x76F4;&#x63A5;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x30EA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x7CFB;&#x7D71;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3088;&#x308A;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x751F;&#x5F8C;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;

&#xB9CC;&#xB2A5; &#xC138;&#xD3EC; &#xD575;&#xC758; 4 &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;, Oct3/4, Sox2, Klf4, &#xBC0F; c-Myc &#xC18C;&#xC131; &#xC2DD; &#xD1B5;&#xD574; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xD558; &#xC5EC; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xD615;&#xC5D0; &#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC544;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBA85;&#xD655; &#xC5EC;&#xBD80; postmitotic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC9C1;&#xC811; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;&#xC744; &#xC801;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC740; postmitotic, &#xCD9C;&#xC0DD; &#xD6C4; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; epigenetic &#xC7AC;&#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xC758;&#xBB34;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xC815;&#xADDC; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xC694;&#xC18C;&#xC758; &#xC18C;&#xC131; &#xC2DD; &#xC0B0; &#xD6C4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC7AC; &#xC124; &#xC815;&#xD560; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;&#xB9CC; p53 &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC15;&#xC81C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xD6C4; &#xB2EC;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC9C4;&#xC555; &#xC694;&#xC18C; 1 silencing &#xC804;&#xC0AC;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC5B5;&#xC555;&#xC758; overexpression &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xC694;&#xC18C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB9D0;&#xAE30; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC0B0; &#xD6C4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; pluripotent &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC9C1;&#xC811; epigenetic &#xC7AC;&#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D; &#xD558; &#xC5EC; &#xD68D;&#xB4DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xD608;&#xD1B5; &#xD2B9;&#xC815; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB354; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC815;&#xC758; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xC0B0; &#xD6C4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB798;&#xBC0D;.

Las c&#xE9;lulas pluripotenciales se pueden derivar de los diferentes tipos de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas por la reprogramaci&#xF3;n nuclear a trav&#xE9;s de la expresi&#xF3;n ect&#xF3;pica de cuatro factores de transcripci&#xF3;n, Oct3 / 4, Sox2, Klf4 y c-Myc. Sin embargo, no est&#xE1; claro si las neuronas postmit&#xF3;ticas son susceptibles a dirigir la reprogramaci&#xF3;n. En este sentido, muestran que despu&#xE9;s del parto las neuronas corticales, la gran mayor&#xED;a de los cuales son postmitotic, son susceptibles de reprogramaci&#xF3;n epigen&#xE9;tica. Sin embargo, la expresi&#xF3;n ect&#xF3;pica de los cuatro factores de reprogramaci&#xF3;n can&#xF3;nicos no es suficiente para reprogramar las neuronas despu&#xE9;s del parto. Reprogramaci&#xF3;n eficiente se obtiene solamente despu&#xE9;s de la proliferaci&#xF3;n celular forzada por la supresi&#xF3;n de p53. Adem&#xE1;s, la sobreexpresi&#xF3;n de la transcripci&#xF3;n represor silenciamiento elemento-1, un supresor de la actividad del gen neuronal, el aumento de la eficiencia de reprogramaci&#xF3;n en combinaci&#xF3;n con los factores de reprogramaci&#xF3;n. Nuestros hallazgos indican que las neuronas terminales diferenciadas postnatales son capaces de adquirir el estado pluripotente por la reprogramaci&#xF3;n epigen&#xE9;tica directo, y este proceso se hace m&#xE1;s eficiente a trav&#xE9;s de la supresi&#xF3;n de la expresi&#xF3;n de genes espec&#xED;ficos de linaje.

La reprogramaci&#xF3;n de las neuronas postnatales en c&#xE9;lulas madre pluripotentes inducidas por factores definidos

Microrna (Mirna) post-transcriptionally &#x89C4;&#x7BA1;&#x6210;&#x5343;&#x4E0A;&#x4E07;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x4E00;&#x4E9B;&#x76D1;&#x7BA1;&#x4EA4;&#x4E92;&#x5E2E;&#x52A9;&#x4FDD;&#x6301;&#x57FA;&#x5E95;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5176;&#x4ED6;&#x7684;&#x4EBA;&#x53EF;&#x80FD;&#x5728;&#x66F4;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x8BBE;&#x7F6E;&#xFF0C;&#x5982;&#x54CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5F3A;&#x8C03;&#x6709;&#x5173;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;-290-295 &#x7FA4;&#x96C6;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x7684;&#x7C73;&#x5C14;&#x7FA4;&#x96C6;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (mESCs) &#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8003;&#x8BD5;&#x76EE;&#x6807;&#x5217;&#x8868;&#x4E2D;&#x7684;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x4FE1;&#x606F;&#x5B66;&#x9884;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8868;&#x8FBE;&#x6570;&#x636E;&#x4E4B;&#x540E;&#x7C73;&#x5C14;&#x635F;&#x5931;&#x3001; &#x63ED;&#x793A;&#x5F3A;&#x70C8;&#x5BCC;&#x96C6;&#x51CB;&#x4EA1;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x76F4;&#x63A5;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E3A;&#xFF1A; &#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 2 &#x6700;&#x9AD8;&#x4FDD;&#x5B88;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x548C; Ei24&#xFF0C;p53 &#x8F6C;&#x5F55;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9884;&#x6D4B;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F; Mirna &#x7684; mESCs &#x66F4;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x542F;&#x52A8;&#x540E;&#x9057;&#x4F20;&#x6BD2;&#x6027;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E; gamma &#x5C04;&#x7EBF;&#x7167;&#x5C04;&#x6216;&#x963F;&#x9709;&#x7D20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x4E24;&#x4F4D;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x90E8;&#x5206;&#x6551;&#x51FA;&#x6B64; pro &#x51CB;&#x4EA1;&#x8868;&#x578B;&#xFF0C;&#x90A3;&#x6837;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7684;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;-290-295 &#x7FA4;&#x96C6;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x90FD;&#x6982;&#x62EC;&#x5728;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;-290-295 &#x5220;&#x9664;&#x7279;&#x5B9A;&#x884C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x786E;&#x8BA4;&#x5B83;&#x4EEC;&#x53CD;&#x6620;&#x7C73;&#x5C14;&#x751F;&#x7406;&#x5404;&#x7EA7;&#x804C;&#x80FD;&#x3002;&#x4E0E;&#x57FA;&#x5E95;&#x6CD5;&#x89C4;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;pro-survival &#x578B;&#x6240;&#x793A;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x7684;&#x538B;&#x529B;&#x598A;&#x5A20;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x5728; pro-oxidant &#x4EE3;&#x8C22;&#x56FD;&#x5BB6;&#x8BF1;&#x5BFC; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x3002;&#x540C;&#x6837;&#xFF0C;&#x6B64;&#x7FA4;&#x96C6;&#x53EF;&#x80FD;&#x8C03;&#x89E3;&#x5316;&#x7597;&#x836F;&#x7269;&#x8010;&#x836F;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5B83;&#x6210;&#x4E3A;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;-290-295 &#x7FA4;&#x96C6;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6F5C;&#x4F0F;&#x7684; pro-survival &#x51FD;&#x6570;&#x3002;

MicroRNAs (miRNAs) post-transcriptionally regulate the expression of thousands of distinct mRNAs. While some regulatory interactions help to maintain basal cellular functions, others are likely relevant in more specific settings, such as response to stress. Here we describe such a role for the mir-290-295 cluster, the dominant miRNA cluster in mouse embryonic stem cells (mESCs). Examination of a target list generated from bioinformatic prediction, as well as expression data following miRNA loss, revealed strong enrichment for apoptotic regulators, two of which we validated directly: Caspase 2, the most highly conserved mammalian caspase, and Ei24, a p53 transcriptional target. Consistent with these predictions, mESCs lacking miRNAs were more likely to initiate apoptosis following genotoxic exposure to gamma irradiation or doxorubicin. Knockdown of either candidate partially rescued this pro-apoptotic phenotype, as did transfection of members of the mir-290-295 cluster. These findings were recapitulated in a specific mir-290-295 deletion line, confirming that they reflect miRNA functions at physiological levels. In contrast to the basal regulatory roles previously identified, the pro-survival phenotype shown here may be most relevant to stressful gestations, where pro-oxidant metabolic states induce DNA damage. Similarly, this cluster may mediate chemotherapeutic resistance in a neoplastic context, making it a useful clinical target.

A latent pro-survival function for the mir-290-295 cluster in mouse embryonic stem cells.

Les microARN (miARN) post-transcriptionnelle de r&#xE9;guler l&#x26;#39;expression de milliers d&#x26;#39;ARNm distincts. Alors que certaines interactions r&#xE9;glementaires aident &#xE0; maintenir les fonctions cellulaires basales, d&#x26;#39;autres sont vraisemblablement pertinents dans des contextes plus sp&#xE9;cifiques, tels que la r&#xE9;ponse au stress. Nous d&#xE9;crivons ici un tel r&#xF4;le pour le cluster mir-290-295, le cluster miARN dominante dans les cellules souches embryonnaires de souris (mESCs). Examen d&#x26;#39;une liste g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;e cible de la pr&#xE9;diction bioinformatique, ainsi que des donn&#xE9;es d&#x26;#39;expression apr&#xE8;s la perte de miARN, a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; fort enrichissement pour les r&#xE9;gulateurs apoptotiques, dont deux nous avons valid&#xE9; directement: Caspase 2, la caspase plus hautement conserv&#xE9;e chez les mammif&#xE8;res, et Ei24, une cible transcriptionnelle de p53 . Conform&#xE9;ment &#xE0; ces pr&#xE9;visions, les miRNAs mESCs manquent &#xE9;taient plus susceptibles d&#x26;#39;initier l&#x26;#39;apoptose suite &#xE0; une exposition g&#xE9;notoxique &#xE0; l&#x26;#39;irradiation gamma ou la doxorubicine. Knockdown des deux candidats partiellement sauv&#xE9; ce ph&#xE9;notype pro-apoptotique, comme l&#x26;#39;a fait la transfection des membres de la grappe mir-290-295. Ces r&#xE9;sultats ont &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;capitul&#xE9;s dans une ligne sp&#xE9;cifique mir-290-295 suppression, confirmant qu&#x26;#39;ils correspondent &#xE0; des fonctions miRNA &#xE0; des niveaux physiologiques. Contrairement aux r&#xF4;les basales r&#xE9;glementaires identifi&#xE9;es pr&#xE9;c&#xE9;demment, le ph&#xE9;notype pro-survie illustr&#xE9; ici peut &#xEA;tre plus pertinente pour les grossesses stressantes, o&#xF9; les &#xE9;tats pro-oxydant m&#xE9;taboliques induisent dommages &#xE0; l&#x26;#39;ADN. De m&#xEA;me, ce groupe peut servir de m&#xE9;diateur r&#xE9;sistance chimioth&#xE9;rapeutique dans un contexte n&#xE9;oplasique, ce qui en fait une cible clinique utile.

Un latente Pro-survie Fonction pour la grappe des Mir-290-295 dans les cellules souches embryonnaires de souris

MicroRNAs (MiRNAs) Regeln post-transcriptionally den Ausdruck tausende unterschiedliche mRNAs. W&auml;hrend einige regulatorischen Interaktionen beitragen, um basale Zellfunktionen zu pflegen, andere sind wahrscheinlich in spezifischere Einstellungen, z. B. Stressbew&auml;ltigung relevant. Hier beschreiben wir eine Rolle f&uuml;r den Mir-290-295-Cluster, der dominante MiRNA-Cluster in M&auml;useder embryonalen Stammzellen (mESCs). Pr&uuml;fung von eine Zielliste aus Bioinformatic Vorhersage sowie Ausdruck Daten nach MiRNA Verlust generiert, zeigte starke Bereicherung f&uuml;r Apoptotic Regulatoren, von denen zwei wir direkt &uuml;berpr&uuml;ft: Caspase-2, die am h&ouml;chsten konserviert S&auml;ugetier-Caspase und Ei24, ein transcriptional p53-Ziel. In &Uuml;bereinstimmung mit dieser Vorhersagen, mESCs fehlt MiRNAs waren wahrscheinlicher, Apoptosis nach genotoxische Exposition gegen&uuml;ber Gammabestrahlung oder Doxorubicin zu initiieren. Niederschlag der beiden Kandidaten n&auml;mlich gerettet teilweise diese Pro-apoptotischen Ph&auml;notyp, wie Transfektion von Mitgliedern des Clusters Mir-290-295. Diese Erkenntnisse wurden abgewogen, in einer bestimmten Mir-290-295-L&ouml;schung-Linie, die best&auml;tigen, dass sie MiRNA-Funktionen auf physiologischer Ebene widerspiegeln. Im Gegensatz zu der basalen regulatorischen Rollen zuvor identifiziert, der pro-survival Ph&auml;notyp gezeigt, hier k&ouml;nnten die meisten induzieren relevant zu stressig Gestations, wo pro-oxidant metabolische Staaten DNA-Sch&auml;den. Ebenso kann dieser Cluster chemotherapeutischen Widerstand in einem neoplastische Kontext, so dass es ein n&uuml;tzliches Klinisches Ziel vermitteln.

Eine latente pro-survival-Funktion f&uuml;r den Mir-290-295-Cluster in M&auml;useder embryonalen Stammzellen.

MicroRNA (miRNAs) post-transcriptionally regola l&#39;espressione di migliaia dei mRNAs distinti. Mentre alcune interazioni regolamentazione contribuiscono a mantenere le funzioni cellulari basali, altri sono probabilmente pertinenti nelle impostazioni pi&ugrave; specifiche, come risposta allo stress. Qui descriviamo tale ruolo per il cluster mir-290-295, il cluster dominante miRNA nelle cellule staminali embrionali di topo (mESCs). Esame di un elenco di destinazione generati dalla previsione bioinformatic, nonch&eacute; dati di espressione dopo perdita di miRNA, rivelato forte arricchimento per i regolatori apoptotici, due dei quali abbiamo convalidati direttamente: Caspase 2, il pi&ugrave; altamente conservate caspase dei mammiferi ed Ei24, una destinazione di transcriptional p53. Coerente con queste previsioni, mESCs manca miRNAs erano pi&ugrave; probabili di avviare apoptosi in seguito genotossico dell&#39;esposizione a radiazioni gamma o doxorubicina. Atterramento di entrambi candidati parzialmente salvato questo fenotipo pro-apoptotici, come ha fatto la transfezione dei membri del cluster mir-290-295. Queste scoperte sono state ricapitolate in una linea specifica delezione mir-290-295, confermando che riflettono le funzioni di miRNA a livelli fisiologici. In contrasto con i ruoli normativi basali precedentemente identificati, il fenotipo pro-survival mostrato qui potrebbe essere pi&ugrave; pertinente a stressanti gestazioni, dove stati metabolici proossidanti inducono danni al DNA. Allo stesso modo, questo cluster pu&ograve; mediare chemioterapico resistenza in un contesto neoplastica, rendendolo un bersaglio clinico utile.

Una funzione pro-survival latente per il cluster mir-290-295 in cellule staminali embrionali di topo.

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;RNA&#xFF08;miRNA&#xFF09;&#x306F;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x306E;mRNA&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6570;&#x5343;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x5F53;&#x5C40;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x5E95;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3064;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x4ED6;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3067;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;miR-290&#x304B;&#x3089;295&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;mESCs&#xFF09;&#x3067;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306A;miRNA&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;2&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Ei24&#x3001;p5&#x200B;&#x200B;3&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6A19;&#x7684;&#xFF1A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30DE;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x4E88;&#x6E2C;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x691C;&#x67FB;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;miRNA&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x5F8C;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x304C;&#x76F4;&#x63A5;&#x691C;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3046;&#x3061;2&#x3064;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3001;miRNA&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;mESCs&#x306F;&#x3001;&#x30AC;&#x30F3;&#x30DE;&#x7DDA;&#x7167;&#x5C04;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30C9;&#x30AD;&#x30BD;&#x30EB;&#x30D3;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x6BD2;&#x6027;&#x66B4;&#x9732;&#x5F8C;&#x306B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x306A;&#x3069;&#x306E;miR-290&#x304B;&#x3089;295&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x304C;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;miRNA&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;miR-290&#x304B;&#x3089;295&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x884C;&#x306B;recapitulated&#x305F;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x57FA;&#x5E95;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x72B6;&#x614B;&#x306F;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x591A;&#x3044;&#x598A;&#x5A20;&#x3001;&#x5206;&#x5A29;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x81E8;&#x5E8A;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x4F5C;&#x6210;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7642;&#x6CD5;&#x8010;&#x6027;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DF;&#x30FC;&#x30EB;-290&#x304B;&#x3089;295&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x751F;&#x5B58;&#x95A2;&#x6570;

MicroRNAs (miRNAs) post-transcriptionally &#xBCC4;&#xAC1C; Mrnas&#xC758; &#xC218;&#xCC9C;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xADDC;&#xC81C;. &#xBC18;&#xBA74; &#xC77C;&#xBD80; &#xADDC;&#xC81C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xAE30;&#xC800; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774;, &#xB2E4;&#xB978; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xAC19;&#xC740; &#xC880; &#xB354; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC778; &#xC124;&#xC815;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBBF8;&#xB974;-290-295 &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (mESCs)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; miRNA &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xD5D8; &#xB300;&#xC0C1; &#xBAA9;&#xB85D;&#xC758; bioinformatic &#xC608;&#xCE21;&#xC5D0;&#xC11C; miRNA &#xC190;&#xC2E4; &#xD6C4; &#xC2DD; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC0DD;&#xC131;, apoptotic &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;, &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC9C1;&#xC811; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC15;&#xD55C; &#xB18D;&#xCD95; &#xACF5;&#xAC1C;: Caspase 2 &#xAC00;&#xC7A5; &#xACE0;&#xB3C4;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; caspase &#xBC0F; Ei24, p53 transcriptional &#xB300;&#xC0C1;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC608;&#xCE21; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C;, mESCs miRNAs &#xBD80;&#xC871; &#xB354; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; apoptosis &#xAC10;&#xB9C8; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xC870;&#xC0AC; &#xB610;&#xB294; &#xB3C5; &#xC18C; &#xB8E8;&#xBE44; genotoxic &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5B4;&#xB290; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xC758; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xBBF8;&#xB974;-290-295 &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC758; transfection &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;&#xC774; &#xD504;&#xB85C; apoptotic &#xD615;&#xC744; &#xAD6C;&#xCD9C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; miRNA &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC18;&#xC601; &#xD655;&#xC778; &#xD2B9;&#xC815; &#xBBF8;&#xB974;-290-295 &#xC0AD;&#xC81C; &#xC904;&#xC5D0; recapitulated &#xD588;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xC800; &#xADDC;&#xC81C; &#xC5ED;&#xD560; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC;, &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; pro-survival &#xD615; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; gestations&#xC640; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xC5B4;&#xB514; pro-oxidant &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC720;&#xBC1C; DNA &#xC190;&#xC0C1;. &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C;,&#xC774; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xB294; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xC784;&#xC0C1; &#xB300;&#xC0C1; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; &#xC885;&#xC591; &#xC57D; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD654;&#xD559;&#xC694;&#xBC95; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xC911;&#xC7AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBBF8;&#xB974;-290-295 &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC; &#xB41C; pro-survival &#xD568;&#xC218;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

MicroRNAs (miRNAs) post-transcripcional regulan la expresi&#xF3;n de miles de ARNm distintos. Mientras que algunas interacciones reguladoras ayudan a mantener las funciones celulares basales, otros probablemente sean aplicables en situaciones m&#xE1;s espec&#xED;ficas, como respuesta al estr&#xE9;s. Aqu&#xED; se describe como un papel para el cl&#xFA;ster de mir-290-295, el grupo dominante de miRNA de las c&#xE9;lulas madre embrionarias de rat&#xF3;n (mESCs). El examen de una lista de objetivos generados a partir de la predicci&#xF3;n bioinform&#xE1;tica, as&#xED; como los datos de expresi&#xF3;n tras la p&#xE9;rdida de miRNA, revel&#xF3; fuerte enriquecimiento de los reguladores de apoptosis, dos de las cuales validados directamente: caspasa 2, la caspasa m&#xE1;s altamente conservadas de mam&#xED;feros, y Ei24, un blanco transcripcional de p53 . De acuerdo con estas predicciones, que carecen de miRNAs mESCs eran m&#xE1;s propensos a iniciar la apoptosis tras la exposici&#xF3;n a la radiaci&#xF3;n gamma genot&#xF3;xico o doxorrubicina. Derribo de uno u otro candidato parcialmente rescatado este fenotipo pro-apopt&#xF3;tica, al igual que la transfecci&#xF3;n de los miembros del cl&#xFA;ster mir-290-295. Estos hallazgos se recapitula en una l&#xED;nea espec&#xED;fica mir-290-295 eliminaci&#xF3;n, lo que confirma que reflejan las funciones de miARN a niveles fisiol&#xF3;gicos. En contraste con los papeles reglamentarios basales previamente identificados, el fenotipo pro-supervivencia se muestra a continuaci&#xF3;n puede ser m&#xE1;s relevante para las gestaciones de estr&#xE9;s, donde los estados pro-oxidante metab&#xF3;licas inducen da&#xF1;o en el ADN. Del mismo modo, este grupo puede mediar la resistencia a quimioterapia en un contexto neopl&#xE1;sico, por lo que es un objetivo cl&#xED;nico &#xFA;til.

Un latente favor de la supervivencia de funci&#xF3;n para el Cluster de Mir-290-295 en las c&#xE9;lulas madre embrionarias de rat&#xF3;n

&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;-290 &#x901A;&#x8FC7;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;-295 (mir-290-295) &#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7279;&#x5B9A; microRNA (&#x7C73;&#x5C14;) &#x7FA4;&#x96C6;&#xFF0C;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x662F;&#x8868;&#x793A;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C;&#x80DA;&#x80CE;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;-290-295 &#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E2D;&#x626E;&#x6F14;&#x91CD;&#x8981;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x90E8;&#x5206;&#x6E17;&#x900F;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x80DA;&#x80CE;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7387;&#x6240;&#x793A;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5728;&#x672A;&#x4EA1;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;-290-295-&#x7F3A;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x5973;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x7537;&#x6027;&#x7684;&#x751F;&#x80B2;&#x80FD;&#x529B;&#x53D7;&#x5230;&#x635F;&#x5BB3;&#x3002;&#x6B64;&#x969C;&#x788D;&#x7684;&#x751F;&#x80B2;&#x7387;&#x6E90;&#x81EA;&#x8FC1;&#x79FB;&#x539F;&#x59CB;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x548C;&#x540C;&#x6837;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x7537;&#x6027;&#x548C;&#x5973;&#x6027;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x52A8;&#x7269;&#x3002;&#x7537;&#x6027; mir-290-295(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6269;&#x5C55;&#x589E;&#x751F;&#x6027;&#x5BFF;&#x547D;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E00;&#x521D;&#x59CB;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x4E2D;&#x6062;&#x590D;&#x8FC7;&#x6765;&#xFF0C;&#x80A5;&#x6C83;&#x3002;&#x5973;&#x6027; mir-290-295(-/-) &#x5C0F;&#x9F20;&#x662F;&#x65E0;&#x6CD5;&#x6062;&#x590D;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x80B2;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x5375;&#x5DE2;&#x65E9;&#x8870;&#x3002;

&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;-290-295 &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x90E8;&#x5206;&#x6E17;&#x900F;&#x7684;&#x6740;&#x4F24;&#x529B;&#x548C;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80DA;&#x80CE;&#x7578;&#x5F62;&#x3002;

Mir-290 through mir-295 (mir-290-295) is a mammalian-specific microRNA (miRNA) cluster that, in mice, is expressed specifically in early embryos and embryonic germ cells. Here, we show that mir-290-295 plays important roles in embryonic development as indicated by the partially penetrant lethality of mutant embryos. In addition, we show that in surviving mir-290-295-deficient embryos, female but not male fertility is compromised. This impairment in fertility arises from a defect in migrating primordial germ cells and occurs equally in male and female mutant animals. Male mir-290-295(-/-) mice, due to the extended proliferative lifespan of their germ cells, are able to recover from this initial germ cell loss and are fertile. Female mir-290-295(-/-) mice are unable to recover and are sterile, due to premature ovarian failure.

Mir-290-295 deficiency in mice results in partially penetrant embryonic lethality and germ cell defects.

Mir-290 par le biais mir-295 (mir-290-295) est un mammif&#xE8;re microARN sp&#xE9;cifiques (miRNA) cluster qui, chez la souris, est exprim&#xE9; sp&#xE9;cifiquement dans les embryons pr&#xE9;coces et les cellules germinales embryonnaires. Ici, nous montrons que miR-290-295 joue un r&#xF4;le important dans le d&#xE9;veloppement embryonnaire comme indiqu&#xE9; par la l&#xE9;talit&#xE9; partiellement p&#xE9;n&#xE9;trant d&#x26;#39;embryons mutants. En outre, nous montrons que dans survivant mir-290-295-d&#xE9;ficientes embryons, la fertilit&#xE9; des femelles, mais pas chez les m&#xE2;les est compromise. Cette d&#xE9;pr&#xE9;ciation de la f&#xE9;condit&#xE9; provient d&#x26;#39;un d&#xE9;faut dans la migration des cellules germinales primordiales et se produit aussi chez les m&#xE2;les et femelles mutantes. Homme mir-290-295 (- / -) chez la souris, en raison de la dur&#xE9;e de vie prolong&#xE9;e de prolif&#xE9;ration de leurs cellules germinales, sont capables de se remettre de cette perte de cellules germinales initiale et sont fertiles. Mir-290-295 Femme (- / -) souris sont incapables de r&#xE9;cup&#xE9;rer et sont st&#xE9;riles, en raison de l&#x26;#39;insuffisance ovarienne pr&#xE9;matur&#xE9;e.

Mir-290-295 &#x26;#39;insuffisance de Souris dans une l&#xE9;talit&#xE9; embryonnaire partiellement par ressuage et d&#xE9;fauts des cellules germinales

Mir-290 durch Mir-295 (Mir-290-295) ist ein S&auml;ugetier-spezifische MicroRNA (MiRNA)-Cluster, in M&auml;use, exprimierten speziell in fr&uuml;hen Embryonen und embryonalen Keimzellen. Hier zeigen wir, dass diese Mir-290-295 wichtige Rollen in der embryonalen Entwicklung spielt, wie durch die teilweise Eindringpr&uuml;fung Letalit&auml;t mutant Embryonen. Dar&uuml;ber hinaus zeigen wir, dass in Mir-290-295-defizienten Embryonen, weiblichen &Uuml;berlebenden aber nicht m&auml;nnliche Fruchtbarkeit beeintr&auml;chtigt. Diese Beeintr&auml;chtigung der Fruchtbarkeit entsteht durch einen Defekt in der Migration von primordialen Keimzellen und tritt ebenso bei m&auml;nnlichen und weiblichen mutierte Tiere. M&auml;nnlich mir-290-295(-/-) M&auml;use, aufgrund der erweiterten proliferative Lebensdauer ihrer Keimzellen, aus dieser anf&auml;nglichen Keimzellen Verlust wiederherstellen k&ouml;nnen und sind fruchtbar. Weibliche mir-290-295(-/-) M&auml;use werden nicht erstattet und sind steril, durch vorzeitige Ovarialinsuffizienz.

Mir-290-295-Mangel bei M&auml;usen f&uuml;hrt teilweise Eindringpr&uuml;fung embryonalen T&ouml;dlichkeit und Keimzellen Defekte.

Mir-290 attraverso mir-295 (mir-290-295) &egrave; un ammasso di mammiferi specifici microRNA (miRNA) che, nei topi, cellule germinali embrionali e specificamente espressa in primi embrioni. Qui, ci mostra che mir-290-295 svolge ruoli importanti nello sviluppo embrionale, come indicato dalla letalit&agrave; parzialmente penetranti di embrioni mutanti. Inoltre, che vi mostriamo in sopravvissuti embrioni mir-290-295-carenti, femminili ma fertilit&agrave; maschile non &egrave; compromessa. Questa svalutazione della fertilit&agrave; nasce da un difetto di migrazione cellule germinali primordiali e si verifica ugualmente in maschi e femminili animali mutanti. Topi maschi mir-290-295(-/-), dovuto la durata della vita estesa proliferativa delle loro cellule germinali, sono in grado di recuperare da questa perdita iniziale delle cellule germinali e sono fertili. Mir-290-295(-/-) femmina topi sono in grado di recuperare e sono sterili, a causa di insufficienza ovarica prematura.

Mir-290-295 deficit nei topi provoca parzialmente penetranti difetti embrionali delle cellule germinali e letalit&agrave;.

&#x30DF;&#x30FC;&#x30EB;-295&#xFF08;MIR-290-295&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x306E;miR-290&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x3068;&#x80DA;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x7279;&#x6709;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;RNA&#xFF08;miRNA&#xFF09;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x80DA;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3092;&#x6D78;&#x900F;&#x81F4;&#x6B7B;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x306E;miR-290&#x304B;&#x3089;295&#x306E;&#x6F14;&#x5287;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;miR-290&#x304B;&#x3089;295-&#x6B20;&#x640D;&#x80DA;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5973;&#x6027;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x7537;&#x6027;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x640D;&#x306A;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3002;&#x8868;&#x793A;&#x51FA;&#x751F;&#x7387;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x6E1B;&#x640D;&#x306F;&#x3001;&#x59CB;&#x539F;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x3001;&#x7537;&#x6027;&#x3068;&#x5973;&#x6027;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x3082;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7537;&#x6027;&#x306F;miR-290&#x304B;&#x3089;295&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x5897;&#x6B96;&#x5BFF;&#x547D;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x304B;&#x3089;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3068;&#x80A5;&#x6C83;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x5973;&#x6027;&#x306E;miR-290&#x304B;&#x3089;295&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3001;&#x65E9;&#x671F;&#x5375;&#x5DE3;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x7121;&#x83CC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x6D78;&#x900F;&#x80DA;&#x6027;&#x81F4;&#x6B7B;&#x3068;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;miR-290&#x304B;&#x3089;295&#x6B20;&#x4E4F;&#x75C7;

&#xBBF8;&#xB974;-295 (&#xBBF8;&#xB974;-290-295) &#xD1B5;&#xD574; &#xBBF8;&#xB974;-290 &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xAD00;&#xB828; microRNA (&#xBBF8;&#xB974;) &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC5D0; &#xC950;, &#xCD08;&#xAE30; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xBC30;&#xC544; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE68;&#xD22C; &#xCE58; &#xC0AC; &#xC728;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xB300;&#xB85C; &#xADF8; &#xBBF8;&#xB974;-290-295 &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBBF8;&#xB974; 290 295 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC5EC;&#xC131; &#xBC30;&#xC544; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB418;&#xC9C0; &#xB0A8;&#xC131; &#xBD88; &#xC784;&#xC740; &#xC190;&#xC0C1;. &#xBD88; &#xC784;&#xC5D0;&#xC774; &#xC7A5;&#xC560; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC6D0;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xACB0;&#xD568;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xB0A8;&#xC131;&#xACFC; &#xC5EC;&#xC131;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xB4F1; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD; &#xD655;&#xC7A5; &#xB41C; &#xC218;&#xBA85; &#xC778; &#xB0A8;&#xC131; mir-290-295(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xAC00; &#xCD08;&#xAE30; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC190;&#xC2E4; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBE44;&#xC625;&#xD55C;. &#xC5EC;&#xC131; mir-290-295(-/-) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC73C;&#xBA70; &#xC0B4; &#xADE0;, &#xC870;&#xAE30; &#xB09C;&#xC18C; &#xC2E4;&#xD328; &#xB54C;&#xBB38;.

&#xBBF8;&#xB974;-290-295 &#xACB0;&#xD54D; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE68;&#xD22C; &#xBC30;&#xC544; &#xCE58; &#xC0AC; &#xC728;&#xACFC; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xACB0;&#xD568; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mir-290 a trav&#xE9;s de mir-295 (mir-290-295) es un microARN mam&#xED;feros espec&#xED;fica (miRNA) el grupo que, en ratones, se expresa espec&#xED;ficamente en embriones y c&#xE9;lulas germinales embrionarias. Aqu&#xED;, mostramos que el miR-290-295 juega un papel importante en el desarrollo embrionario como se indica en la letalidad parcial penetrante de los embriones mutantes. Adem&#xE1;s, nos muestran que para sobrevivir a mir-290-295-deficientes embriones, la fertilidad femenina, pero hombre no se vea comprometida. Este deterioro de la fertilidad se deriva de un defecto en la migraci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas germinales primordiales y se presenta tanto en los animales mutantes masculinos y femeninos. Hombre mir-290-295 (- / -) ratones, debido a la prolongada vida &#xFA;til proliferativa de las c&#xE9;lulas germinales, sus son capaces de recuperarse de esta p&#xE9;rdida de c&#xE9;lulas germinales inicial y son f&#xE9;rtiles. Mir-290-295 femeninos (- / -) ratones no son capaces de recuperar y son est&#xE9;riles, debido a la insuficiencia ov&#xE1;rica prematura.

Oktay Kirak

Whitehead Institute for Biomedical Research

Transnuclear Mice with Pre-defined T Cell Receptor Specificities Against Toxoplasma gondii Obtained Via SCNT