Midline Laparotomy Surgery in Donor Mice for Orthotopic Liver Transplantation

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September 22nd, 2023

DOI :

10.3791/200621-v

September 22nd, 2023

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Qiang Zeng¹, Doug A. Gouchoe²^,³, Mahboubeh Nabavinia⁴, Yong Gyu Lee², Xi Wang², Terri A. Shaffer⁵, Mitchel R. Stacy⁴^,⁵^,⁶, Blake R. Peterson⁷^,⁸, Bryan A. Whitson²^,⁹, Christopher Breuer¹^,⁴, Sylvester M. Black¹^,¹⁰

¹Department of Surgery, Nationwide Children’s Hospital, ²COPPER Laboratory, The Ohio State University, ³88th Surgical Operation Operations Squadron, WPAFB, ⁴Center for Regenerative Medicine, The Research Institute at Nationwide Children’s Hospital, ⁵Division of Vascular Diseases and Surgery, The Ohio State University College of Medicine, ⁶Interdisciplinary Biophysics Graduate Program, The Ohio State University, ⁷Division of Medicinal Chemistry and Pharmacognosy, The Ohio State University College of Pharmacy, ⁸The Ohio State University Comprehensive Cancer Center, ⁹Division of Cardiac Surgery, Department of Surgery, The Ohio State Wexner Medical Center, ¹⁰Division of Transplantation, Department of Surgery, The Ohio State Wexner Medical Center

Transcrição

Para começar, coloque o camundongo doador anestesiado sob o microscópio de alta potência. Usando uma tesoura, realizar uma laparotomia mediana desde o processo xifoide até a síntese púbica. Em seguida, faça uma incisão transversal abaixo das costelas para criar um padrão semelhante a uma cruz.

Depois de retrair o processo xifoide, eviscerar os intestinos e colocá-los na esponja de gaze úmida no lado esquerdo da cavidade abdominal. Para mobilizar o fígado, separe-o de todos os seus anexos ligamentares. Uma vez exposta a artéria hepática ou PHA adequada, usando pinças curvas, esqueletize-a.

Após a ligadura do PHA, disseque todo o comprimento do ducto biliar comum, ou CBD. Insira o stent do ducto biliar no CBD e fixe-o com uma sutura de náilon de 10 O e, em seguida, ligue o aspecto distal do CBD. Com uma compressa de gaze úmida, retrair o lobo hepático direito em direção ao xifoide e expor a veia cava inferior, ou VCI.

Mobilizar a veia cava inferior infra-hepática, ou IHIVC, para longe do retroperitônio e cauterizar a veia adrenal direita. Uma vez dissecadas e ligadas a artéria e a veia renais direitas, corte-se ambas e os anexos ligamentares restantes. Após a remoção do rim direito, injetar 0,5 mililitros de solução fria de histidina triptofano cetoglutarato com 100 unidades de heparina através da veia porta, ou PV. Após um minuto da injeção, cortar a veia porta superior às veias esplênica e mesentérica superior.

Para perfundir o fígado, injete lentamente uma solução fria de preservação de cetoglutarato de histidina triptofano no IHIVC até que o líquido proveniente do PV esteja claro. Coloque uma micropinça ou sutura fina no IHIVC logo superior à veia renal direita e corte logo inferiormente à pinça. Uma vez que o CBD é cortado distalmente ao stent, identifique e ligue o ducto cístico com uma sutura de náilon 10-O.

Com pinças, segure a cúpula da vesícula biliar e, usando tesoura de mola, corte o ducto cístico acima da sutura para completar a colecistectomia. Retrair o fígado inferiormente para expor a veia cava inferior supra-hepática, ou SHIVC, e cortá-lo, preservando um comprimento adequado para a anastomose nos camundongos receptores. Depois de remover os anexos ligamentares adicionais.

Coloque o fígado em soro fisiológico gelado.

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