Para começar, coloque os frascos de buprenorfina diluídos em solução salina estéril a 0,9% e notexina, diluída em PBS, no gelo. Sob a configuração do cone do nariz, raspe os membros posteriores de um camundongo anestesiado com um aparador e, em seguida, transfira o mouse de volta para a caixa de indução. Prepare seringas de insulina com 15 microlitros de solução de notexina para GA e 10 microlitros de solução de notexina para injeções de TA.
Assim que o mouse for movido para a configuração do cone do nariz, desinfete o local da injeção com um pano de etanol. Insira a agulha com o chanfro voltado para baixo na barriga do músculo TA em um ângulo de 30 graus. Avance a agulha paralelamente à tíbia para alcançar o meio da barriga do TA e injete a solução de notexina lentamente por 10 segundos.
Para injetar a solução de notexina no GA, insira a agulha em um ângulo de 45 graus no meio da barriga da cabeça lateral do músculo GA e injete a solução. Vire o mouse e, usando uma seringa de insulina, injete buprenorfina por via subcutânea. Calcular o volume da solução de iododesoxiuridina necessário para cada ratinho utilizando esta equação.
Usando uma seringa de insulina, execute uma injeção intraperitoneal de solução de iododesoxiuridina no local da injeção esterilizada 8 a 12 horas antes da eutanásia.
