Gostaríamos de agradecer a Chantal Lau para o conselho em avaliar a ingestão de leite, Klaus Miczek para aconselhamento sobre o uso de estresse social, e Sheryl Goodman feedback sobre a relevância clínica de estresse social crônico. O desenvolvimento deste protocolo foi apoiado pelo NICHD K99/R00 HDO59943 para BCN.

Adultos Sprague Dawley fêmeas são criados em nossa unidade de animal, ninhadas são abatidos para 8-10 filhotes com uma relação mesmo sexo, e os cuidados maternos e testes de agressão é feito na gaiola ratos. Os sujeitos experimentais permanecer na mesma sala com o estudo. Uma polegada separadores elevados gaiola feita de vidro acrílico são colocados na gaiola no dia 20 ou 21 de gestação. Estes dividir a jaula em quatro quadrantes para evitar filhotes de rastejar de volta para a represa, quando colocado na gaiola. Comportamento materno típico está confirmado para todas as barragens no dia do nascimento (dia 1 de lactação), através da observação directa de recuperação filhote, higiene, enfermagem e auto preparação. Machos intrusos são menores ou do mesmo tamanho Sprague Dawley machos, e as fêmeas nunca são apresentados com o mesmo homem duas vezes. Cuidados maternos e agressão maternal é o vídeo gravado na manhã do dia 2, 9 e 16 da lactação, conforme descrito abaixo: <ol><li> Remover o lixo da represa, pesar machos e fêmeas separately e coloque todo lixo em uma gaiola realização limpo por 60 min. </li><li> No final da 60 min separação, pesar machos e filhotes fêmeas separadamente antes de substituir lixo na gaiola da barragem, dividindo os filhotes o mais uniformemente possível entre os três quadrantes não ninho da gaiola. Iniciar a gravação de vídeo antes da reintrodução para garantir que todos recuperação cachorro é gravada. </li><li> Vídeo registro dos cuidados maternos para 30 min. Permitir barragens para interagir com seus filhotes por mais 90 min. 120 min (30 min de gravação + adicional de 90 min) após a colocação de filhotes na gaiola da barragem, pesá-los novamente para determinar a ingestão de leite durante o período de duas horas. Um filhote de cachorro é sacrificado em cada ninhada em dias de testes comportamentais após o período de amamentação min 120 para extrair uma amostra de leite do estômago. A finalidade da recolha do leite dos filhotes é avaliar os níveis de hormônios e outros fatores que podem mediar os efeitos comportamentais e / ou fisiologia do estresse social crônico em prole. </li&gt; <li> Voltar filhotes de barragem após a pesagem, e introduzir um novo intruso macho menor ou tamanho similar para a gaiola por 30 min para testar a agressão maternal. Iniciar a gravação de vídeo durante a introdução para assegurar que todas as agressões é gravado. Para os indivíduos de controle, o macho é removido após a gravação de 30 min. Para assuntos estresse crônico sociais, os machos são deixados para outra 30 min. Nos dias de ensaio não-comportamentais durante o período de 2-16 dias, os novos machos de intrusão são colocados em gaiolas de sujeitos CSS durante uma hora sem gravação de vídeo. As exposições são parados stress social ocorre se a lesão, os animais lesionados e são tratados e removidos do estudo. </li><li> Um frasco com 0,02% de sacarina é adicionado ao da gaiola barragem de 3:00 nos dias 2, 9 e 16, alternando entre o lado direito e esquerdo. Tanto a água pura e garrafas sacarina são pesados ​​em três horas, em seguida, novamente em 8:00 na manhã seguinte para determinar a preferência sacarina. </li><li> Filhotes são desmamados no dia 23, e as barragens dere eutanásia nesta altura para se obter amostras de plasma basal e extrair o cérebro para análise da expressão do gene de fisiologicamente e comportamentalmente núcleos alvo relevante. </li></ol> Maternal Behavior Scoring Os comportamentos de agressão cuidados maternos descritos nas Tabelas 1 e 2 são marcados a partir dos vídeos usando o software de análise comportamental Odlog. Chaves são atribuídos a cada comportamento, ea tecla é pressionada enquanto cada comportamento está sendo realizada para registrar a duração desse comportamento. Freqüências são a soma dos traços-chave para cada comportamento. Este programa cria um arquivo de dados completo de tempo carimbado cinco caixas de segundo e uma tabela resumo com o total das freqüências e durações para os comportamentos definidos sobre a gravação de 30 min. Tanto a agressão maternal e cuidados maternos são marcados para os vídeos agressão maternal, como as represas que responder maternalmente para os filhotes, enquanto o macho intruso está na gaiola. </p&gt; Logo após a colocação dos filhotes na gaiola, a barragem irá recuperar cada filhote individualmente volta para o ninho. Recuperação completa é marcado, uma vez que todos os filhotes estão no ninho. Embora a recuperação completa é normalmente só marcou uma vez, às vezes pode ser marcou duas vezes se a barragem muda toda a ninhada para um novo local, após uma recuperação completa inicial. Comportamento de nidificação é marcado sempre que o material de nidificação é manipulado pela barragem com a boca ou patas. Preparação Pup inclui lamber ou manipulação da pele do filhote pela barragem com suas patas. Scoring Enfermagem é iniciada depois que a represa tem sido uma postura agachada estacionária ou de enfermagem propenso por 10 segundos. Isso é para dar tempo para que os filhotes para começar a mamar. Cuidados maternos total é a duração combinada de assentamento, preparação filhote, e de enfermagem, mas pode ser restrito a preparação e de enfermagem para se concentrar no comportamento cachorro-dirigida. Auto aliciamento é definido como a manipulação de própria pele da barragem com a boca ou patas. Atividade é marcado duranteção de qualquer atividade locomotora não associados com os comportamentos previamente definidos. Agressão materna consiste em atacar, morder, chutar, e fixando. Atacar é definido como o boxe ou luta do intruso masculino. Mordendo é marcado quando a barragem usa seus dentes no intruso, e pinagem é registrado quando a barragem detém o macho para baixo com seus membros ou do corpo. Agressão total é a soma de atacar, morder, chutar, e fixando. Estatística Comportamentos maternos, a ingestão de leite, e de preferência a sacarina do controle e barragens CSS foram comparados em cada dia de lactação com testes t unicaudal para avaliar os efeitos da CSS em dias individuais. Dados de crescimento nos dias 2, 9 e 16 da lactação, foram comparados com os testes t uni-caudal no peso (em gramas) no dia 2 ou o crescimento percentual em relação ao dia 2 (dia 9 ou 16 de peso / dia 2 x peso 100). Os níveis de expressão de mRNA oxt foram normalizados contra três combinados housekgenes eeping, b-actina, hipoxantina fosforibosiltransferase (HPRT), e gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH). Níveis relativos de expressão de mRNA oxt foram comparados com o t-testes individuais em cada peptídeo ou do receptor, para cada região do cérebro. Todos os resultados gráficos são apresentados como grupo significa + SEM, eo nível de significância estatística foi de p ≤ 0,05.

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Os autores não competindo interesses financeiros.

Os dados obtidos a partir do paradigma CSS é mais provável que seja consistente e repetível num ambiente de investigação do comportamento estável. Argumenta-se que a habitação e criação de animais de laboratório é um componente que precisa de ser mais cuidadosamente considerado em qualquer tipo de estudo, especialmente estudos comportamentais. Habitação e criação de práticas que possam introduzir confunde incluem: começando com fêmeas prenhes enviados do fornecedor, movendo-se entre as barragens quartos diárias para o teste comportamental, a variação no tempo do dia de testes comportamentais, a exposição excessiva de barragens para novas visões, sons e odores , não usar gaiola para testes comportamentais, a falta de material de nidificação ou inconsistente, e os pobres cuidados com os animais de rotina (por exemplo, a exposição a roupa molhada e suja). Além disso, a inclusão de outros testes comportamentais durante a lactação (por exemplo, teste de natação forçada ou labirinto em cruz elevado) podem introduzir confunde. No entanto, o uso de um ambiente novo ou outra gaiolaestressor agudo pode ser útil para revelar diferenças comportamentais não aparentes com o teste de gaiola devido às interações potenciais entre estresse crônico, o estresse agudo e comportamento. O protocolo atualmente descrito é eficaz com ratos Sprague Dawley, mas as modificações do protocolo pode ser necessário para outras cepas e espécies. Por exemplo, os filhotes devem ser protegidos por uma barreira de altamente agressivos longas Evans machos para prevenir lesões. Práticas críticos para a administração social stress incluem o uso de machos menores ou de tamanho similar e tendo a primeira interacção de um macho com um intruso altamente agressivo 2 barragem dia para garantir derrota e comportamento submisso consistentemente nos machos. Se os machos não atacar uma maca, eles devem ser removidos a partir do estudo, uma vez que é provável que eles vão atacar ninhadas subsequentes. Uma opção para reduzir a probabilidade dos homens excessivamente agressivos é tê-los derrotado por um macho maior antes do começo da rudy. Para a pontuação comportamental, a gravação e análise de freqüência e duração da maioria dos comportamentos é necessário fornecer uma visão completa do comportamento, bem como a utilização de intervalos de gravação menor ou verificações aleatórias pode resultar na recolha de dados suficientes para testar exaustivamente a hipóteses. Formação sólida e consistente de marcadores pode ser realizada com o uso previamente marcados vídeos comportamentais. A principal aplicação do modelo CSS é o teste de tratamentos actuais e novos medicamentos para a depressão pós-parto e ansiedade. Um uso adicional deste modelo é o de investigar os efeitos das práticas e procedimentos sobre os cuidados maternos, como a cesariana, parto induzido, e vários horários lactação comuns. Outras investigações de possíveis efeitos do estresse sobre a lactação será valiosa, dada a falta de estudos sobre este tema. Enquanto amostras de leite provenientes das barragens seria útil, a necessidade de anestesia e oxt exógenana coleta das amostras apresenta vários confunde comportamentais e fisiológicas, assim que os estudos sobre os efeitos do estresse sobre a lactação pode não ser propício para a análise comportamental simultânea. O potencial para estudos transgeracionais com o modelo CSS é grande, e estas investigações podem também incluir diversos tratamentos de estresse da prole adulta para investigar possíveis interações entre estresse precoce e mais tarde a exposição stress. A importância do modelo CSS e centros de testes comportamentais associados sobre a pertinência etológicas e de translação. Postula-se que a falta de eficácia dos tratamentos actuais para a depressão e ansiedade é devido a uma falta de sobreposição etológicas entre os estudos em animais e humanos. Os modelos animais de depressão e ansiedade muitas vezes dependem de estressores físicos robustos ou estirpes altamente selecionados que podem explicar a constatação de que tratamentos antidepressivos atuais são mais eficazes com depressão grave. Ph<html> ysical estressores como a restrição e a exposição a uma grande variedade de factores de stress não randomizados simular experiências humanas mais comuns. A justificativa para a exposição randomizado usado em paradigmas de estresse crônico moderado é impedir aclimatação. Esta é uma preocupação importante, mas a situação ideal pode ser a utilização de um protocolo que os animais não se aclimatar a que mais se assemelha a etiologia da depressão e ansiedade em seres humanos, tais como o stress social. Além de promover o uso de factores de stress mais etológicas, outra vantagem do modelo CSS é o uso de uma medida relevante da anedonia, comportamento maternal. Este é um comportamento mediado recompensa robusto que medeia diretamente os efeitos adversos da depressão em mães de filhos. A incorporação combinada de factores de stress e as medidas etológicas de anedonia na depressão e ansiedade investigação será especialmente benéfico na identificação de medidas preventivas e de tratamentos seguros e eficazes. &quot;&gt; O stress social tem sido utilizado com sucesso em machos e fêmeas nulíparas durante vários anos, ea expansão do trabalho em fêmeas materna é susceptível de produzir uma grande quantidade de novos dados para a depressão pós-parto, bem como o estresse precoce distúrbios associados em ambos os machos e fêmeas. Postula-se que o aumento do uso de modelos animais etológicas em depressão e ansiedade investigação vai levar a tratamentos mais eficazes, devido à coleta de dados comportamentais que é ethologically e translação relevante, menos variável e mais repetitivo.

A etiologia dos transtornos de humor, incluindo depressão pós-parto, muitas vezes envolve a exposição a 1,2 estresse crônico. Embora a depressão em mães tem efeitos negativos sobre os dois pais 3 e desenvolvimento psicológico da prole 4, a grande maioria dos estudos sobre a depressão e ansiedade foco em animais machos e seres humanos. Embora existam alguns modelos animais de comportamento materno alterado usando o estresse crônico, a maioria tem componentes fisiológicos significativos que não podem pertencer a estressores psicossociais crônicas comumente experimentadas por seres humanos ou se concentrar principalmente no período pré-parto. Estresse por contenção crônica durante a gravidez em ratos aumenta o cuidado maternal e ansiedade e diminui a agressão maternal em alguns estudos 5, mas diminui os cuidados maternos nos outros seis. Estresse por contenção é um estressor físico potente 7, e alguns relatos são inconsistentes com o cuidado maternal atenuada observado em mot humanodela com depressão pós-parto 4. Ultramild estresse pré-natal não afeta o cuidado filhote, mas não reduzir a agressão maternal 8. Paradigmas de stress Ultramild utilizar uma variedade de factores de stress randomizados (tais como 30 graus de inclinação da gaiola, ciclo de luz invertido, o confinamento, iluminação durante a noite, e gaiola suja) ao longo de vários dias, e o efeito dos componentes individuais é frequentemente pouco claro. É provável que alguns estressores utilizados na ultramild paradigmas de estresse, tais como ciclo de luz invertido e iluminação durante a noite afetam diretamente os cuidados maternos independente de quaisquer efeitos do estresse, como o cuidado materno em ratos tem um ritmo circadiano. A exposição a cama molhado é uma tensão térmica significativa para os filhotes, e pode resultar em mortalidade de crias em menos de 24 horas em pequenas ninhadas (observações pessoais). Estudos recentes roedores têm se concentrado no uso de fatores de estresse ethologically relevantes, tais como estresse social crônico (CSS), no estudo dos efeitos do estresse sobre offscomportamento e transtornos do humor 9-13 Pring. Em um esforço para desenvolver um modelo etológicas para a depressão pós-parto, reduzir o componente fisiológico do estressor utilizado, e gerar resultados comportamentais e fisiológicas consistentes, o nosso laboratório tem-se centrado na utilização de social stress. Enquanto derrota social, crónica é efectivamente utilizada como um modelo para a depressão induzida pelo stress social, nos roedores machos 14, isto não é um modelo comportamental ecologicamente relevante para muitas roedores maternos se invasores machos são usados, como uma única derrota social de um roedor materno geralmente resulta em canibalismo da ninhada pelo intruso masculino. No entanto, a exposição aguda a um romance intruso masculino, sem derrota social da represa, provoca fortes respostas comportamentais e endócrinas de estresse em fêmeas lactantes, 15-18. Há também evidências de que o estresse crônico durante a lactação, incluindo a exposição a um intruso masculino, prejudica diretamente a produção de leite 19,20, o que pode impactar o crescimento filhote.Estes resultados em ratos maternos são suportados por estudos em fêmeas virgens, onde a instabilidade social crônica (variando isolamento e aglomeração) aumenta a atividade do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal 11,21, altera a regulação da temperatura corporal, reduz a sacarose e ingestão de alimentos, e tem sido proposto como um modelo animal para a depressão feminina 11. Auto-grooming, uma medida de ansiedade 22,23 também é sensível a manipulações estresse social 24,25. Estresse social crônico (CSS) durante a lactação pode atrapalhar o comportamento maternal e atenuar o crescimento da barragem e descendentes. A apresentação diária de um romance intruso macho durante a amamentação diminui os cuidados maternos, aumenta a agressão maternal em direção a um novo intruso masculino e auto-grooming, e inibe o crescimento tanto da barragem e sua prole 10. Estes efeitos indicam que o CSS é um modelo ethologically relevantes e eficazes para os transtornos de humor que envolvemdeficiências na assistência materno, anedonia, ansiedade elevada e crescimento prole atenuada, como a depressão pós-parto. Tanto o cuidado materno e os dados indicam que os filhos CSS pode ter efeitos duradouros sobre as futuras gerações e as pesquisas sobre os efeitos do estresse crônico sobre o comportamento maternal suportam a hipótese de que os efeitos do estresse crônico sobre o comportamento maternal são hormonalmente mediadas (Murgatroyd e Nephew 2012 ). Além disso, dados recentes da prole fêmea adulta de barragens estressados ​​apóia a hipótese de que a CSS como uma forma de estresse precoce provoca alterações no centro de ocitocina (oxt) e prolactina (PRL), que estão associados com o comportamento de enfermagem ineficiente 12. O modelo CSS complementa outros modelos eficazes de estresse interrupções induzidas no comportamento materno, como a limitação material de nidificação 26,27 e separação materna 28,29. Aspectos originais do modelo CSS é que ela é ethologically relevantes em ambos os roedores e humanos,tem um componente fisiológico relativamente menor, e pode ser combinado com o stress semelhantes noutras fases da vida (derrota, instabilidade social crónica sociais). Os principais objetivos no desenvolvimento do paradigma CSS fosse usar um estressor ethologically e clinicamente relevante, induzir anedonia (medida pelo cuidado maternal e preferência sacarina), aumentar as medidas comportamentais de ansiedade e prejudicar o desenvolvimento fisiológico, comportamental e endócrino ou filhote. O objetivo do modelo é para testar tratamentos e práticas para a depressão pós-parto e ansiedade atuais e romance.

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td>Material Name </td>
 <td>Company </td>
 <td>Catalogue Number </td>
 <td>Comments </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>ODlog video analysis </td>
 <td>Macropod software </td>
 <td>Version 2.7.2 </td>
 <td>Available for PC or Mac </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Video recorder </td>
 <td>Sony </td>
 <td>HDR-CX130 </td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

using chronic social stress to model postpartum depression in lactating rodents

A exposição ao estresse crônico é um indicador confiável de transtornos depressivos e estresse social é um estressor comum ethologically relevante tanto em animais e seres humanos. No entanto, muitos modelos animais de depressão foram desenvolvidos nos machos e não são aplicáveis ​​ou eficazes em estudos de fêmeas pós-parto. Estudos recentes têm relatado efeitos significativos de estresse social crônico durante a lactação, um estressor ethologically relevante e eficaz, sobre o comportamento maternal, crescimento e comportamento neuroendocrinologia. Este manuscrito irá descrever este paradigma estresse social crônico com a exposição repetida de uma barragem lactantes para um romance intruso masculino, ea avaliação dos efeitos comportamentais, fisiológicos e neuroendócrinos deste modelo. Estresse social crônico (CSS) é um modelo valioso para estudar os efeitos do estresse sobre o comportamento e fisiologia da barragem, bem como seus filhos e as futuras gerações. A exposição das crias ao CSS também pode ser usado como um inícioestresse da vida que tem efeitos a longo prazo sobre o comportamento, fisiologia e neuroendocrinologia.

Expor uma represa em lactação a CSS deprime a duração da preparação filhote e cuidado materno total durante a gravação de vídeo de 30 min no dia 9 de lactação (sobrinho e Pontes 2011, Figura 2). No dia 16 de lactação, agressividade e auto-grooming, uma medida de ansiedade, são aumentados (sobrinho e Pontes 2011, Figura 3). A ingestão de leite pelos filhotes de CSS barragens é de 40% menos do que as barragens de controle nos dias 9 e 16 de lactação (Figura 4), ​​e do crescimento das crias é atenuado em ambos os dias (sobrinho e Pontes 2011, Figura 5). Preferência sacarina é menor no dia 16 nas fêmeas tratadas CSS (Figura 6). No adulto crias fêmeas F1 de CSS fêmeas tratadas, ingestão de leite (Figura 7) e preferência sacarina (Figura 8) estão deprimidas nos dias 2 e 16. A expressão do gene oxitocina no núcleo supra-óptico é mais baixa nestas barragens (Figura 9 </strong&gt;), e resultados semelhantes foram relatados no núcleo paraventricular central da amígdala, e medial da amígdala (Murgatroyd e Sobrinho, 2012). <table border="1"><tbody><tr><td> COMPORTAMENTO </td><td> DESCRIÇÃO </td></tr><tr><td> Recuperação </td><td> Realização de filhotes de volta ao ninho </td></tr><tr><td> Recuperação completa </td><td> Tempo necessário para recuperar todos os 8 filhotes </td></tr><tr><td> Nidificação </td><td> Manipulação de cama na área ninho com a boca ou patas </td></tr><tr><td> Grooming Pup </td><td> Lamber ou manipulação da pele do cachorro com as patas </td></tr><tr><td> Enfermagem </td><td> Quando a represa está em uma postura agachada ou de enfermagem propenso </td></tr><tr><td> Cuidado materno total </td><td> Duração totalção de nidificação, Grooming Pup e Enfermagem </td></tr><tr><td> Auto Grooming </td><td> Manipulação de barragens própria pele com a boca ou patas </td></tr><tr><td> Atividade </td><td> Qualquer atividade locomotora não associada a comportamentos acima </td></tr></tbody></table> Tabela 1. Cuidado materno. <table border="1"><tbody><tr><td> COMPORTAMENTO </td><td> DESCRIÇÃO </td></tr><tr><td> Atacante </td><td> Boxe ou luta de intruso masculino </td></tr><tr><td> Cortante </td><td> Uso de dentes para atacar intruso masculino </td></tr><tr><td> Chutar </td><td> Uso de pés para atacar intruso masculino, semelhante a um coelho chutando </td></tr><tr><td> Fixando </td><td> Feminino materno segurando homem baixo com membros ou no corpo </td></tr><tr><td> AAgressão tal </td><td> Soma das durações de atacar, morder, chutar, e Fixando </td></tr></tbody></table> Tabela 2. Agressão Maternal. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig1.jpg" alt="Figura 1" /> Figura 1. Calendário do protocolo de estresse social crônico. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig2.jpg" alt="Figura 2" /> Figura 2. Estresse social crônico diminui os cuidados maternos no dia 9 de lactação. Expor uma represa em lactação para um romance intruso macho para uma hora por dia durante 7 dias diminuiu o tempo gasto preparação filhote e cuidado materno total, que inclui preparação filhote, enfermagem e comportamentos de nidificação durante 30 maternal gravação de vídeo comportamento min (sobrinho e Pontes, 2011). * Indica uma diferença significativa entre o controle e estresse grupos, p &lt;0,05, de n = 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig3.jpg" alt="Figura 3" /> Figura 3. Estresse social crônico aumenta a agressão maternal e ansiedade no dia 16 da lactação. Expor uma represa em lactação para um romance intruso macho para uma hora por dia durante 14 dias aumentou a duração (A) e freqüência (B) de agressão e de auto-preparação e diminuição locomotor atividade ao longo de um min maternal gravação de vídeo 30 agressões (sobrinho e Pontes, 2011). * Indica uma diferença significativa entre os grupos de controle e estresse, p &lt;0,05, n = 9-10 de. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig4.jpg" alt="Figura 4" /> Figura 4. Estresse social crônico diminui a ingestão de leite pela prole. Ingestão de leite total por 8-10 ninhadas de filhotes em um intervalo de duas horas de enfermagem foi reduzidoem barragens estressados ​​nos dias 9 e 16 de lactação. * Indica uma diferença significativa entre os grupos de controle e estresse, p &lt;0,05, n = 12-14 de. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig5.jpg" alt="Figura 5" /> Figura 5. Estresse social crônico atenua o crescimento das crias, nos dias 9 e 16 de lactação. Expor barragens de estresse social crônico por 15 dias durante a lactação resulta em crescimento filhote atenuada (sobrinho e Bridges 2011). * Indica uma diferença significativa entre os grupos de controle e estresse, p &lt;0,05, n = 9-10 de. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig6.jpg" alt="Figura 6" /> Figura 6. Estresse social crônico induz a diminuição da ingestão de sacarina em lactação dia 16. Quinze dias de estresse social diminui a ingestão de sacarina percentual em relação à água durante um período de 17 horas. * Indica uma diferen significativarença entre os grupos de controle e estresse, p &lt;0,05, n = de 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig7.jpg" alt="Figura 7" /> Figura 7. Vida estresse social crônico precoce diminui a ingestão de leite pela prole de matrizes F1. Ingestão total de leite pela prole de matrizes F1 (ninhadas de filhotes 8-10) ao longo de um intervalo de duas horas de enfermagem foi reduzido nos dias 2 e 16 de lactação. * Indica uma diferença significativa entre os grupos de controle e estresse, p &lt;0,05, n = 12-14 de. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig8.jpg" alt="Figura 8" /> Figura 8. Vida estresse social crônico cedo induz diminuição da ingestão de sacarina em dias de lactação 2 e 16. Quinze dias de estresse social diminui a ingestão de sacarina percentual em relação à água durante um período de 17 horas. * Indica uma diferença significativa entre o controle e estressegrupos, p &lt;0,05, n = 12-14 da. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig9.jpg" alt="Figura 9" /> Figura 9. Crônica início da vida estresse social diminui a expressão do mRNA de ocitocina no núcleo supraoptic. Prole fêmea adulta de mães expostas ao estresse social crônico têm atenuado a atividade central de oxitocina, que está associada com a eficiência de enfermagem diminuiu (Murgatroyd e Sobrinho, 2012). Os níveis de expressão de mRNA oxt foram normalizados contra três genes housekeeping combinadas, b-actina, hipoxantina fosforibosiltransferase (HPRT), e gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH). * Indica uma diferença significativa entre os grupos de esforço de controlo e p &lt;0,05, de n = 16-18.

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Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

Este artigo descreve o uso de residente intruso estresse social crônico como um paradigma ethologically relevantes para a depressão pós-parto modelo e ansiedade em roedores lactantes.

Usando Social Stress Crônico ao Modelo depressão pós-parto em lactação Roedores

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

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Research

JoVE Journal

Behavior

24.5K visualizações.  Tufts University Cummings School of Veterinary Medicine. Este artigo descreve o uso de residente intruso estresse social crônico como um paradigma ethologically relevantes para a depressão pós-parto modelo e ansiedade em roedores lactantes.

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A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of depression is essential. Because there are several types of depression, various animal models are needed for a deeper understanding of the disorder. Previously, a mouse model of subchronic and mild social defeat stress (sCSDS) using a modified chronic social defeat stress (CSDS) paradigm was established. In the paradigm, to reduce physical injuries from aggressors, the duration of physical contact between the aggressor and a subordinate was reduced compared to in the original CSDS paradigm. sCSDS mice showed increased body weight gain, food intake, and water intake during the stress period, and their social behaviors were suppressed after the stress period. In terms of the face validity of the stress-induced overeating and overdrinking following the increased body weight gain, the sCSDS mice may show some features related to atypical depression in humans. Thus, a mouse model of sCSDS may be useful for studying the pathogenic mechanisms underlying depression. This protocol will help establish the sCSDS mouse model, especially for studying the mechanisms underlying stress-induced weight gain and polydipsia- and hyperphagia-like symptoms.

Here, methods for developing a mouse model of subchronic and mild social defeat stress are described and used to investigate the pathogenic features of depression including hyperphagia- and polydipsia-like symptoms following increased body weight.

Um modelo de mouse subcrónica e Mild Derrota social Estresse para Compreender déficits comportamentais e fisiológicas induzida por estresse

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of ...

Comportamento

Quantifying Social Motivation in Mice Using Operant Conditioning

In this protocol, social motivation is measured in mice through a pair of operant conditioning paradigms. To conduct the experiments, two-chambered shuttle boxes were equipped with two operant levers (left and right) and a food receptacle in one chamber, which was then divided from the second chamber by an automated guillotine door covered by a wire grid. Different stimulus mice, rotated across testing days, served as a social stimulus behind the wire grid, and were only visible following the opening of the guillotine door. Test mice were trained to lever press in order to open the door and gain access to the stimulus partner for 15 sec. The number of lever presses required to obtain the social reward progressively increased on a fixed schedule of 3. Testing sessions ended after test mice stopped lever pressing for 5 consecutive minutes. The last reinforced ratio or breakpoint can be used as a quantitative measure of social motivation. For the second paradigm, test mice were trained to discriminate between left and right lever presses in order to obtain either a food reward or the social reward. Mice were rewarded for every 3 presses of each respective lever. The number of food and social rewards can be compared as a measurement of the value placed upon each reward. The ratio of each reward type can also be compared between mouse strains and the change in this ratio can be monitored within testing sessions to measure satiation with a given reward type. Both of these operant conditioning paradigms are highly useful for the quantification of social motivation in mouse models of autism and other disorders of social behavior.

This article describes a new protocol for the quantitative measurement of social motivation in mice using operant conditioning for a social reward. The protocol is useful for the measurement of social motivation in mouse models of autism and other disorders of social behavior.

Quantificar motivação social em ratos usando Condicionamento Operante

In this protocol, social motivation is measured in mice through a pair of operant conditioning paradigms. To conduct the experiments, two-chambered ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations supportive behavior of other people as well as positive social relationships can act as powerful resources to cope with stress. In order to study the interplay between these variables, this protocol describes two effective experimental manipulations of social relationships and supportive behavior in the laboratory. In the present article, these two manipulations are implemented in the Trier Social Stress Test (TSST)&#8212;a standard stress induction paradigm in which participants are subjected to a simulated job interview. More precisely, we propose (a) a manipulation of the relationship between different protagonists in the TSST by making a shared social identity salient and (b) a manipulation of the behavior of the TSST-selection committee, which acts either supportively or unsupportively. These two experimental manipulations are designed in a modular fashion and can be applied independently of each other but can also be combined. Moreover, these two manipulations can also be integrated into other stress protocols and into other standardized social interactions such as trust games, negotiation tasks, or other group tasks.

Previous research on the social dimension of stress has focused on two important variables: social identity and social support. This protocol introduces an effective experimental manipulation of these two social variables and describes their implementation in a standard stress induction paradigm (Trier Social Stress Test).

A Dimensão Social do Stress: Manipulações experimentais de apoio social e de identidade social no Trier Social Stress Teste

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression have been reported, the unpredictable chronic mild stress (UCMS) protocol is an established translationally-relevant model for inducing behavioral symptoms commonly associated with clinical depression, such as anhedonia, altered grooming behavior, and learned helplessness in rodents. The UCMS protocol also induces physiological (e.g., hypercortisolemia, hypertension) and neurological (e.g., anhedonia, learned helplessness) changes that are clinically associated with depression. Importantly, UCMS-induced depressive symptoms can be ameliorated through chronic, but not acute, treatment with common SSRIs. As such, the UCMS protocol offers many advantages over acute stress protocols or protocols that utilize more extreme stressors. Our protocol involves randomized, daily exposures to 7 distinct stressors: damp bedding, removal of bedding, cage tilt, alteration of light/dark cycles, social stresses, shallow water bath, and predator sounds/smells. By subjecting rodents 3-4 hr daily to these mild stressors for 8 weeks, we demonstrate both significant behavioral changes and poor health outcomes to the cardiovascular system. This approach allows for in-depth interrogation of the neurological, behavioral, and physiological alterations associated with chronic stress-induced depression, as well as for testing of new potential therapeutic agents or intervention strategies.

The unpredictable chronic mild stress (UCMS) protocol is a validated method for studying behavioral and physiological changes associated with chronic stress and depressive symptoms. Eight weeks of imposition of the UCMS protocol induces behavioral changes and poor health outcomes in rodents of either gender.

Uma crônica Protocolo de estresse leve Imprevisível para sintomas depressivos Instigando, mudanças de comportamento e resultados negativos de saúde em Roedores

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression ...

Examining Recall Memory in Infancy and Early Childhood Using the Elicited Imitation Paradigm

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is commonly assessed using verbal report paradigms in adults, studying the development of this ability in preverbal infants and children proved challenging. Over the past 30 years, researchers have developed a non-verbal means of assessing recall memory known as the elicited or deferred imitation paradigm. In one variant of the procedure, participants are presented with novel three-dimensional stimuli for a brief baseline period before a researcher demonstrates a series of actions that culminate in an end- or goal-state. The participant is allowed to imitate the demonstrated actions immediately, after a delay, or both. Recall performance is then compared to baseline or to performance on novel control sequences presented at the same session; memory can be assessed for the individual target actions and the order in which they were completed. This procedure is an accepted analogue to the verbal report techniques used with adults, and it has served to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood. In addition, the elicited or deferred imitation procedure has been modified and adapted to answer questions relevant to other aspects of cognitive functioning. The broad utility and application of imitation paradigms is discussed, along with limitations of the approach and directions for future research.

The elicited imitation procedure was established to examine the development of recall memory in infancy and early childhood. This procedure has been widely used to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood.

Examinando Chamada de Memória na infância e primeira infância Usando o provocou Imitação Paradigm

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by many patients prompts the need to develop new therapeutic alternatives and to better understand the etiology of the disorder. Pre-clinical models with translational merits are rudimentary for this task. Here we present a protocol for the unpredictable chronic mild stress (UCMS) method in mice. In this protocol, adolescent mice are chronically exposed to interchanging unpredictable mild stressors. Resembling the pathogenesis of depression in humans, stress exposure during the sensitive period of mice adolescence instigates a depressive-like phenotype evident in adulthood. UCMS can be used for screenings of antidepressants on the variety of depressive-like behaviors and neuromolecular indices. Among the more prominent tests to assess depressive-like behavior in rodents is the sucrose preference test (SPT), which reflects anhedonia (core symptom of depression). The SPT will also be presented in this protocol. The ability of UCMS to induce anhedonia, instigate long-term behavioral deficits and enable reversal of these deficits via chronic (but not acute) treatment with antidepressants strengthens the protocol&#39;s validity compared to other animal protocols for inducing depressive-like behaviors.

Here we present the unpredictable chronic mild stress protocol in mice. This protocol induces a long-term depressive-like phenotype and enables to assess the efficacy of putative antidepressants in reversing the behavioral and neuromolecular depressive-like deficits.

O protocolo de estresse suave crônico imprevisível para induzir Anhedonia em ratos

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Enactive Phenomenological Approach to the Trier Social Stress Test: A Mixed Methods Point of View

The single Trier Social Stress Test (TSST) and the TSST for groups (TSST-G) are the most used protocols to experimentally induce psychosocial stress. These tests are based on uncontrollability and social-evaluative threat, inducing psychological and physiological consequences (e.g., anxiety, emotional states, salivary cortisol increases). Many quantitative experimental studies have investigated these stress inducers and these consequences. But, as far as we know, this study is the first to provide a qualitative analysis to access the participants' voices so as to understand the dynamics of their experience throughout the TSST and the TSST-G. This paper outlines a mixed methods approach to the TSST. This approach can help to maximize the information that can be gained from the TSST, which researchers often use without looking more closely at what is qualitatively happening psychologically for participants during the stressor itself. In this way, this protocol is an example of mixed methods, showing the added value of using the enactive phenomenological approach to analyze experimental protocols more deeply. This kind of mixed methods is helpful to access the experience, to understand the actor's point of view, and to analyze in-depth the dynamics of cognitive processes like intentions, perceptions, enacted knowledge, and emotion. The discussion section shows the different uses of a mixed methods protocol, exploiting the enactive phenomenological approach to analyze a protocol or to give a cross vision of the same research subject. This section deals with different existing applications, pointing out some critical steps in this mixed methods approach.

Here, we present an original mixed method combining a quantitative and a qualitative approach to examine accurately participants&#39; experiences during the Trier Social Stress Test and the Trier Social Stress Test for groups.

Enactive abordagem fenomenológica para o teste de Stress Social Trier: ponto de vista métodos mistos

The single Trier Social Stress Test (TSST) and the TSST for groups (TSST-G) are the most used protocols to experimentally induce psychosocial stress. ...

Using Facial Electromyography to Assess Facial Muscle Reactions to Experienced and Observed Affective Touch in Humans

"Affective" touch is believed to be processed in a manner distinct from discriminatory touch and to involve activation of C-tactile (CT) afferent fibers. Touch that optimally activates CT fibers is consistently rated as hedonically pleasant. Patient groups with impaired social-emotional functioning also show disordered affective touch ratings. However, relying on self-reported ratings of touch has many limitations, including recall bias and communication barriers. Here, we describe a methodological approach to study affective responses to touch via facial electromyography (EMG) that circumvents the reliance on self-report ratings. Facial EMG is an objective, quantitative, and non-invasive method to measure facial muscle activity indicative of affective responses. Responses can be assessed across healthy and patient populations without the need for verbal communication. Here, we provide two separate datasets demonstrating that CT-optimal and non-optimal touch elicit distinct facial muscle reactions. Moreover, facial EMG responses are consistent across stimulus modalities, e.g. tactile (experienced touch) and visual (observed touch). Finally, the temporal resolution of facial EMG can detect responses on timescales that supersede that of verbal reporting. Together, our data suggest that facial EMG is a suitable methodology for use in affective tactile research that can be used to supplement, or in some cases, supplant, existing measures.

We describe a protocol to assess facial muscle activity in response to experienced and observed tactile stimulation using facial electromyography.

Usando eletromiografia Facial para avaliar as reações do músculo Facial toque afetivo experientes e observados em seres humanos

"Affective" touch is believed to be processed in a manner distinct from discriminatory touch and to involve activation of C-tactile (CT) afferent fibers. ...

A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, therapeutic treatments for depression or research on depression is scarce. Thus, in the present paper, we propose a mouse model of depression induced by movement restriction. Chronic mild stress (CMS) is a well-known technique to induce depressive-like behavior. However, it necessitates a complex procedure consisting of a combination of various mild stresses. In contrast, chronic immobilization stress (CIS) is a readily accessible chronic stress model, modified from a restraint model that induces depressive behavior by restricting movement using a restrainer for a certain period. To evaluate the depressive-like behaviors, the sucrose preference test (SPT), the tail suspension test (TST), and the ELISA assay to measure stress marker corticosterone levels are combined in the present experiment. The described protocols illustrate the induction of CIS and evaluation of the changes in behavior and physiological factors for the validation of depression.

This article provides a simplified and standardized protocol for induction of depressive-like behavior in chronically immobilized mice by using a restrainer. In addition, behavior and physiological techniques to verify induction of depression are explained.

Um protocolo de estresse de imobilização crônica para induzir o comportamento semelhante à depressão em camundongos

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, ...

A System for Tracking the Dynamics of Social Preference Behavior in Small Rodents

Exploring the neurobiological mechanisms of social behavior requires behavioral tests that can be applied to animal models in an unbiased and observer-independent manner. Since the beginning of the millennium, the three-chamber test has been widely used as a standard paradigm to evaluate sociability (social preference) and social novelty preference in small rodents. However, this test suffers from multiple limitations, including its dependence on spatial navigation and negligence of behavioral dynamics. Presented and validated here is a novel experimental system that offers an alternative to the three-chamber test, while also solving some of its caveats. The system requires a simple and affordable experimental apparatus and publicly available open-source analysis system, which automatically measures and analyzes multiple behavioral parameters at individual and population levels. It allows detailed analysis of the behavioral dynamics of small rodents during any social discrimination test. We demonstrate the efficiency of the system in analyzing the dynamics of social behavior during the social preference and social novelty preference tests as performed by adult male mice and rats. Moreover, we validate the ability of the system to reveal modified dynamics of social behavior in rodents following manipulations such as whisker trimming. Thus, the system allows for rigorous investigation of social behavior and dynamics in small rodent models and supports more accurate comparisons between strains, conditions, and treatments.

Described here is a novel automated experimental system that offers an alternative to the three-chamber test and also solves several caveats. This system supplies multiple behavioral parameters that enable rigorous analysis of small rodent behavioral dynamics during the social preference and social novelty preference tests.