Um protocolo de estresse de imobilização crônica para induzir o comportamento semelhante à depressão em camundongos

Comece definindo a sala para acender em 200 lux usando um medidor lux digital. Coloque o mouse em uma gaiola separada pelo menos uma semana antes do teste, e coloque o mouse na sala de testes por pelo menos 30 minutos antes do experimento. Segure suavemente a cauda do mouse para evitar escorrante o mouse e, em seguida, coloque-o cuidadosamente em uma superfície áspera.

Cubra o conter com uma pequena toalha branca e, em seguida, coloque suavemente o mouse na abertura do conterrante, de modo que o mouse entre no conterrinosamente. Em seguida, coloque o fecho para conter o mouse o mais apertado possível, tomando cuidado para evitar danos ao corpo, como cauda, pés e testículos. Por fim, durante a exposição ao contidor, meça o peso corporal e a ingestão de alimentos a cada 48 horas.

Antes do teste, habituar os camundongos à presença de duas garrafas de bebida, uma contendo sacarose molar 0,1 e outra contendo água pura por 48 horas. Troque as posições das duas garrafas após 24 horas para reduzir qualquer confusão produzida por um viés lateral. No terceiro dia privar os ratos de água por 24 horas.

Então, no dia do experimento, exponha os ratos a duas garrafas de bebida por seis horas. Depois de três horas, troque a posição das garrafas de água. Registo o volume em mililitros de solução de sacarose e água consumida, e então calcule a afinidade do animal com a sacarose.

Por fim, calcule a preferência de sacarose como porcentagem do volume de consumo de sacarose sobre o consumo total de líquidos durante o teste. Comece trazendo o estresse de contenção crônica induzido camundongos para a sala de testes pelo menos 30 minutos antes de iniciar o teste de suspensão da cauda. Coloque a luz do quarto em condições fracas em 50 lux.

Em seguida, coloque a câmera a cerca de 40 centímetros do mouse. Suspenda o mouse firmemente da barra horizontal usando fita adesiva. Depois que o mouse estiver posicionado no meio da caixa de suspensão comece a gravar e observe as alterações comportamentais continuamente por seis minutos.

Se o mouse tentar subir sua cauda use uma vara ou rolha de escalada para evitar que ele faça isso. No final do experimento, mova o mouse para sua gaiola doméstica e remova cuidadosamente a fita de sua cauda. Finalmente, use o software de rastreamento de vídeo para analisar o tempo acumulado de períodos imóveis.

Os resultados indicam diminuição do peso corporal para o grupo CIS e significativamente menos ingestão de alimentos no quarto dia. Em comparação com os controles, mostrou-se uma diminuição para a preferência de sacarose no grupo CIS, enquanto houve um aumento significativo no tempo de imobilidade e corticosterona. Além disso, uma dieta suplementada de glutamina ameniza comportamentos depressivos como comportamentos, como mostrado para peso corporal, ingestão de alimentos, preferência de sacarose, imobilidade e corticosterona.